鑒定待測(cè)品種是否為中棉所63的方法及其專用引物組的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種鑒定待測(cè)品種是否為中棉所63的方法及其專用引物組。本發(fā)明提供的方法，包括如下步驟：以待測(cè)棉花的基因組DNA為模板，分別采用CIR62、CS62、NAU1070、NAU1102、NAU1186、NAU2026、NAU2173、NAU2277、NAU2343、NAU1196、NAU1085、NAU1255、NAU1369、NAU1233、NAU1269、NAU2272、NAU1187、NAU1375、CS51、NAU1028、NAU2342、NAU868、HAU1300、NAU6094、DPL0238、NAU1362、NAU859、HAU2786、CGR6410和NAU0478引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，如果PCR擴(kuò)增產(chǎn)物滿足標(biāo)準(zhǔn)1)至30)中的28條以上，待測(cè)棉花為中棉所63。本發(fā)明可應(yīng)用于監(jiān)控制種的質(zhì)量，保證銷售的中棉所63種子的質(zhì)量，同時(shí)打擊假冒的中棉所63種子。
【專利說明】鑒定待測(cè)品種是否為中棉所63的方法及其專用引物組
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于生物【技術(shù)領(lǐng)域】，具體涉及一種鑒定待測(cè)品種是否為中棉所63的方法及其專用引物組。
【背景技術(shù)】
[0002]棉花的雜種優(yōu)勢(shì)明顯，雜交棉品種已應(yīng)用多年，增產(chǎn)效果明顯，已得到大面積的推廣應(yīng)用。目前棉花的雜交制種仍以人工制種為主，不育系制種還沒有得到推廣，隨著用工成本的不斷上漲，雜交制種成本越來越高，種子質(zhì)量越來越差，市場(chǎng)上銷售的雜交棉種子做假嚴(yán)重，有F2替代Fl，有常規(guī)棉替代Fl，有母本摻雜等現(xiàn)象，使雜交種在推廣中達(dá)不到應(yīng)有的增產(chǎn)效果，影響雜交棉的推廣效果。常規(guī)的田間鑒定時(shí)間長(zhǎng)，會(huì)影響當(dāng)年的種子銷售，而且在海南加代鑒定時(shí)由于受環(huán)境影響，鑒定效果也不很理想。
[0003]中棉所63為中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所育成的轉(zhuǎn)基因抗蟲雜交棉，于2004-2005年參加長(zhǎng)江流域國家棉花品種區(qū)域試驗(yàn)，35點(diǎn)次匯總結(jié)果如下:平均子棉產(chǎn)量3567.30kg/公頃，比對(duì)照種(湘雜棉2號(hào)Fl)增產(chǎn)10.1 平均皮棉產(chǎn)量1478.55kg/公頃，比對(duì)照種增產(chǎn)10.0%，居第I位，增產(chǎn)極顯著；霜前皮棉產(chǎn)量1310.40kg/公頃，比對(duì)照種增產(chǎn)10.2 %。2006年長(zhǎng)江流域棉區(qū)10個(gè)點(diǎn)生產(chǎn)試驗(yàn)結(jié)果:子棉、皮棉產(chǎn)量分別為3876.0Okg/公頃、1585.50kg/公頃，分別比對(duì)照種(湘雜棉8號(hào)Fl)增產(chǎn)0.4%和增產(chǎn)2.3%。纖維品質(zhì)農(nóng)業(yè)部棉花品質(zhì)監(jiān)督檢驗(yàn)測(cè)試中心檢測(cè)，2004—2005年長(zhǎng)江流域區(qū)域試驗(yàn)35點(diǎn)次棉樣匯總(HVICC校準(zhǔn)值):上半部平均長(zhǎng)度30.0mm,斷裂比強(qiáng)度29.lcN/tex,麥克隆值4.8，斷裂伸長(zhǎng)率7.0%，反射率76.1 %，黃度深度8.2，整齊度指數(shù)84.2%，紡紗均勻性指數(shù)139。 [0004]2007年中棉所63通過了國家審定，2012年長(zhǎng)江流域累計(jì)推廣種植55萬畝。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005]本發(fā)明的目的是提供一種鑒定待測(cè)品種是否為中棉所63的方法及其專用引物組。
[0006]本發(fā)明提供了一種鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的方法，包括如下步驟:
[0007]以待測(cè)棉花的基因組DNA為模板，分別采用CIR62引物對(duì)、CS62引物對(duì)、NAU1070引物對(duì)、NAU1102引物對(duì)、NAU1186引物對(duì)、NAU2026引物對(duì)、NAU2173引物對(duì)、NAU2277引物對(duì)、NAU2343引物對(duì)、NAUl 196引物對(duì)、NAU1085引物對(duì)、NAU1255引物對(duì)、NAU1369引物對(duì)、NAU1233引物對(duì)、NAU1269引物對(duì)、NAU2272引物對(duì)、NAU1187引物對(duì)、NAU1375引物對(duì)、CS51引物對(duì)、NAU1028引物對(duì)、NAU2342引物對(duì)、NAU868引物對(duì)、HAU1300引物對(duì)、NAU6094引物對(duì)、DPL0238引物對(duì)、NAU1362引物對(duì)、NAU859引物對(duì)、HAU2786引物對(duì)、CGR6410引物對(duì)和NAU0478引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，如果PCR擴(kuò)增產(chǎn)物滿足標(biāo)準(zhǔn)I)至標(biāo)準(zhǔn)30)中的28條以上，待測(cè)棉花為中棉所63或待測(cè)棉花為候選的中棉所63 ；
[0008]所述CIR62引物對(duì)由序列表的序列I所示的單鏈DNA分子和序列表的序列2所示的單鏈DNA分子組成；所述CS62引物對(duì)由序列表的序列3所示的單鏈DNA分子和序列表的序列4所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1070引物對(duì)由序列表的序列5所示的單鏈DNA分子和序列表的序列6所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1102引物對(duì)由序列表的序列7所示的單鏈DNA分子和序列表的序列8所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1186引物對(duì)由序列表的序列9所不的單鏈DNA分子和序列表的序列10所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU2026引物對(duì)由序列表的序列11所示的單鏈DNA分子和序列表的序列12所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2173引物對(duì)由序列表的序列13所示的單鏈DNA分子和序列表的序列14所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2277引物對(duì)由序列表的序列15所示的單鏈DNA分子和序列表的序列16所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2343引物對(duì)由序列表的序列17所示的單鏈DNA分子和序列表的序列18所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1196引物對(duì)由序列表的序列19所不的單鏈DNA分子和序列表的序列20所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU1085引物對(duì)由序列表的序列21所不的單鏈DNA分子和序列表的序列22所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU1255引物對(duì)由序列表的序列23所示的單鏈DNA分子和序列表的序列24所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1369引物對(duì)由序列表的序列25所示的單鏈DNA分子和序列表的序列26所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1233引物對(duì)由序列表的序列27所示的單鏈DNA分子和序列表的序列28所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1269引物對(duì)由序列表的序列29所不的單鏈DNA分子和序列表的序列30所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU2272引物對(duì)由序列表的序列31所示的單鏈DNA分子和序列表的序列32所示的單鏈DNA分子組成；所述NAUl 187引物對(duì)由序列表的序列33所示的單鏈DNA分子和序列表的序列34所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1375引物對(duì)由序列表的序列35所示的單鏈DNA分子和序列表的序列36所示的單鏈DNA分子組成；所述CS51引物對(duì)由序列表的序列37所示的單鏈DNA分子和序列表的序列38所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1028引物對(duì)由序列表的序列39所示的單鏈DNA分子和序列表的序列40所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2342引物對(duì)由序列表的序列41所示的單鏈DNA分子和序列表的序列42所示的單鏈DNA分子組成；所 述NAU868引物對(duì)由序列表的序列43所示的單鏈DNA分子和序列表的序列44所示的單鏈DNA分子組成；所述HAU1300引物對(duì)由序列表的序列45所示的單鏈DNA分子和序列表的序列46所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU6094引物對(duì)由序列表的序列47所示的單鏈DNA分子和序列表的序列48所示的單鏈DNA分子組成；所述DPL0238引物對(duì)由序列表的序列49所示的單鏈DNA分子和序列表的序列50所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1362引物對(duì)由序列表的序列51所示的單鏈DNA分子和序列表的序列52所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU859引物對(duì)由序列表的序列53所示的單鏈DNA分子和序列表的序列54所示的單鏈DNA分子組成；所述HAU2786引物對(duì)由序列表的序列55所示的單鏈DNA分子和序列表的序列56所示的單鏈DNA分子組成；所述CGR6410引物對(duì)由序列表的序列57所示的單鏈DNA分子和序列表的序列58所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU0478引物對(duì)由序列表的序列59所示的單鏈DNA分子和序列表的序列60所示的單鏈DNA分子組成；
[0009] 標(biāo)準(zhǔn)I):采用所述CIR062引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)2):采用所述CS62引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在500bp和400bp之間具有2條帶、在150_250bp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)3):采用所述NAU1070引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶；標(biāo)準(zhǔn)4):采用所述NAU1102引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)5):采用所述NAU1186引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)6):采用所述NAU2026引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在400bp和300bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)7):采用所述NAU2173引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)8):采用所述NAU2277引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有I條帶、在150bp和IOObp之間具有I條帶；標(biāo)準(zhǔn)9):采用所述NAU2343引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp和300bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)10):采用所述NAU1196引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp和250bp之間具有4條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)11):采用所述NAU1085引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)12):采用所述NAU1255引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)13):采用所述NAU1369引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)14):采用所述NAU1233引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在300bp和250bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)15):采用所述NAU1269引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在150bp以下具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)16):采用所述NAU2272引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶；標(biāo)準(zhǔn)17):采用所述NAU1187引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)18):采用所述NAU1375引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)19):采用所述CS51引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)20):采用所述NAU1028引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)21):采用所述NAU2342引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在300bp和250bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)22):采用所述NAU868引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有上I條帶；標(biāo)準(zhǔn)23):采用所述HAU1300引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有4條帶、在250bp和200bp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)24):采用所述NAU6094引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有4條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)25):采用所述DPL0238引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有4條帶、在500bp和400bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)26):采用所述NA U1362引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)27):采用所述NAU859引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在400bp和300bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)28):采用所述HAU2786引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在400bp和300bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)29):采用所述CGR6410引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在300bp和150bp之間具有5條帶、在150bp和IOObp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)30):采用所述NAU0478引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和150bp之間具有4條帶、在150bp和IOObp之間具有3條帶。
[0010]上述帶型具體均為主帶帶型。
[0011]所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序具體可為:94°C預(yù)變性3min ;94°C變性30s、56°C退火45s、72°C延伸 45s，共 30 個(gè)循環(huán)；94°C變性 lmin、56°C退火 45s、72°C延伸 2min ;4°C保存。
[0012]所述待測(cè)棉花具體可為中植棉2號(hào)、瑞雜816、邯8266或中棉所63。
[0013]本發(fā)明還保護(hù)用于鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的引物組(引物組甲)，由所述CIR62引物對(duì)、所述CS62引物對(duì)、所述NAU1070引物對(duì)、所述NAUl 102引物對(duì)、所述NAUl 186引物對(duì)、所述NAU2026引物對(duì)、所述NAU2173引物對(duì)、所述NAU2277引物對(duì)、所述NAU2343引物對(duì)、所述NAUl 196引物對(duì)、所述NAU1085引物對(duì)、所述NAU1255引物對(duì)、所述NAU1369引物對(duì)、所述NAU1233引物對(duì)、所述NAU1269引物對(duì)、所述NAU2272引物對(duì)、所述NAUl 187引物對(duì)、所述NAU1375引物對(duì)、所述CS51引物對(duì)、所述NAU1028引物對(duì)、所述NAU2342引物對(duì)、所述NAU868引物對(duì)、所述HAU1300引物對(duì)、所述NAU6094引物對(duì)、所述DPL0238引物對(duì)、所述NAU1362引物對(duì)、所述NAU859引物對(duì)、所述HAU2786引物對(duì)、所述CGR6410引物對(duì)和所述NAU0478引物對(duì)組成。所述待測(cè)棉花具體可為中植棉2號(hào)、瑞雜816、邯8266或中棉所63。
[0014]本發(fā)明還保護(hù)所述引物組甲在制備用于鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的試劑盒中的應(yīng)用。所述待測(cè)棉花具體可為中植棉2號(hào)、瑞雜816、邯8266或中棉所63。
[0015]本發(fā)明還保護(hù)一 種用于鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的試劑盒，含有所述引物組甲。所述待測(cè)棉花具體可為中植棉2號(hào)、瑞雜816、邯8266或中棉所63。
[0016]本發(fā)明還保護(hù)一種檢測(cè)一批待測(cè)種子的純度的方法，包括如下步驟:
[0017]從待測(cè)種子中隨機(jī)抽取具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的待測(cè)樣本，以待測(cè)樣本的種仁的基因組DNA為模板，分別采用所述CIR62引物對(duì)、所述CS62引物對(duì)、所述NAU1070引物對(duì)、所述NAUl 186引物對(duì)、所述NAU2026引物對(duì)、所述NAU2173引物對(duì)、所述NAU2277引物對(duì)、所述NAU2343引物對(duì)、所述NAU1085引物對(duì)、所述NAU1255引物對(duì)、所述NAU1369引物對(duì)、所述NAU1233引物對(duì)、所述NAU1269引物對(duì)、所述NAU2272引物對(duì)、所述NAUl 187引物對(duì)、所述NAU1375引物對(duì)、所述CS51引物對(duì)、所述NAU1028引物對(duì)、所述NAU2342引物對(duì)和所述NAU868引物對(duì)組進(jìn)行PCR擴(kuò)增，如果PCR擴(kuò)增產(chǎn)物滿足標(biāo)準(zhǔn)(I)至標(biāo)準(zhǔn)(20)中的18條以上，待測(cè)種子為中棉所63，判斷為中棉所63的種子數(shù)量占待測(cè)樣本總數(shù)的百分比為待測(cè)種子的純度；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子；
[0018]標(biāo)準(zhǔn)(I):采用所述CIR062引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(2):采用所述CS62引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在500bp和400bp之間具有2條帶、在150_250bp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)(3):采用所述NAU1070引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶；標(biāo)準(zhǔn)(4):采用所述NAU1186引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(5):采用所述NAU2026引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在400bp和300bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)(6):采用所述NAU2173引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有3條帶；標(biāo)準(zhǔn)(7):采用所述NAU2277引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有I條帶、在150bp和IOObp之間具有I條帶；標(biāo)準(zhǔn)(8):采用所述NAU2343引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp和300bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(9):采用所述NAU1085引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(10):采用所述NAU1255引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(11):采用所述NAU1369引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(12):采用所述NAU1233引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在300bp和250bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(13):采用所述NAU1269引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在150bp以下具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(14):采用所述NAU2272引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶；標(biāo)準(zhǔn)(15):采用所述NAU1187引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(16):采用所述NAU1375引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(17):采用所述CS51引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(18):采用所述NAU1028引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(19):采用所述NAU2342引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在300bp和250bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶；標(biāo)準(zhǔn)(20):采用所述NAU868引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有上I條帶。
[0019]上述帶型具體均為主帶帶型。
[0020]所述PCR擴(kuò)增的反應(yīng)程序具體可為:94°C預(yù)變性3min ;94°C變性30s、56°C退火45s、72°C延伸 45s，共 30 個(gè)循環(huán)；94°C變性 lmin、56°C退火 45s、72°C延伸 2min ;4°C保存。
[0021]本發(fā)明還保護(hù)一種用于檢測(cè)一批待測(cè)種子的純度的引物組(引物組乙)，由所述CIR62引物對(duì)、所述CS62引物對(duì)、所述NAU1070引物對(duì)、所述NAU1186引物對(duì)、所述NAU2026引物對(duì)、所述NAU2173引物對(duì)、所述NAU2277引物對(duì)、所述NAU2343引物對(duì)、所述NAU1085引物對(duì)、所述NAU1255弓丨物對(duì)、所述NAU1369引物對(duì)、所述NAU1233弓丨物對(duì)、所述NAU1269弓丨物對(duì)、所述NAU2272引物對(duì)、所述NAU1187引物對(duì)、所述NAU1375引物對(duì)、所述CS51引物對(duì)、所述NAU1028引物對(duì)、所述NAU2342引物對(duì)和所述NAU868引物對(duì)組成；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子。
[0022]本發(fā)明還保護(hù)所述引物組乙在制備用于鑒定一批待測(cè)種子的純度的試劑盒中的應(yīng)用；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子。
[0023]本發(fā)明還保護(hù)一種鑒定一批待測(cè)種子的純度的試劑盒，含有所述引物組乙；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子。 [0024]本發(fā)明中應(yīng)用SSR分子標(biāo)記室內(nèi)鑒定棉花品種的真實(shí)性和純度，圖譜清晰、鑒定速度快，且不受環(huán)境的影響，能快速鑒定種子的真實(shí)性及純度，正確快速判斷種子能否應(yīng)用，能否收購加工。本發(fā)明可應(yīng)用于監(jiān)控制種的質(zhì)量，保證銷售的中棉所63種子的質(zhì)量，同時(shí)打擊假冒的中棉所63種子，保護(hù)育種人的知識(shí)產(chǎn)權(quán)，保護(hù)品種權(quán)，保護(hù)棉農(nóng)的利益?！緦＠綀D】
【附圖說明】
[0025]圖1至圖30為實(shí)施例1的結(jié)果。
[0026]圖31為實(shí)施例2的結(jié)果。
[0027]圖32至圖51為實(shí)施例3的結(jié)果。
【具體實(shí)施方式】
[0028]以下的實(shí)施例便于更好地理解本發(fā)明，但并不限定本發(fā)明。下述實(shí)施例中的實(shí)驗(yàn)方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法。下述實(shí)施例中所用的試驗(yàn)材料，如無特殊說明，均為自常規(guī)生化試劑商店購買得到的。
[0029]實(shí)施例1、中棉所63的DNA指紋圖譜的構(gòu)建
[0030]一、SSR引物對(duì)的篩選
[0031]經(jīng)過大量的棉花SSR引物篩選，發(fā)現(xiàn)30個(gè)SSR引物對(duì)(核苷酸序列見表1)可以用于制作中棉所63的DNA指紋圖譜。
[0032]表130個(gè)引物對(duì)的核苷酸序列
[0033]
【權(quán)利要求】
1.一種鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的方法，包括如下步驟: 以待測(cè)棉花的基因組DNA為模板，分別采用CIR62引物對(duì)、CS62引物對(duì)、NAU1070引物對(duì)、NAUl 102引物對(duì)、NAUl 186引物對(duì)、NAU2026引物對(duì)、NAU2173引物對(duì)、NAU2277引物對(duì)、NAU2343引物對(duì)、NAUl 196引物對(duì)、NAU1085引物對(duì)、NAU1255引物對(duì)、NAU1369引物對(duì)、NAU1233引物對(duì)、NAU1269引物對(duì)、NAU2272引物對(duì)、NAU1187引物對(duì)、NAU1375引物對(duì)、CS51引物對(duì)、NAU1028引物對(duì)、NAU2342引物對(duì)、NAU868引物對(duì)、HAU1300引物對(duì)、NAU6094引物對(duì)、DPL0238引物對(duì)、NAU1362引物對(duì)、NAU859引物對(duì)、HAU2786引物對(duì)、CGR6410引物對(duì)和NAU0478引物對(duì)進(jìn)行PCR擴(kuò)增，如果PCR擴(kuò)增產(chǎn)物滿足標(biāo)準(zhǔn)I)至標(biāo)準(zhǔn)30)中的28條以上，待測(cè)棉花為中棉所63或待測(cè)棉花為候選的中棉所63 ； 所述CIR62引物對(duì)由序列表的序列I所不的單鏈DNA分子和序列表的序列2所不的單鏈DNA分子組成；所述CS62引物對(duì)由序列表的序列3所示的單鏈DNA分子和序列表的序列4所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1070引物對(duì)由序列表的序列5所示的單鏈DNA分子和序列表的序列6所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1102引物對(duì)由序列表的序列7所示的單鏈DNA分子和序列表的序列8所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1186引物對(duì)由序列表的序列9所不的單鏈DNA分子和序列表的序列10所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU2026引物對(duì)由序列表的序列11所示的單鏈DNA分子和序列表的序列12所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2173引物對(duì)由序列表的序列13所示的單鏈DNA分子和序列表的序列14所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2277引物對(duì)由序列表的序列15所示的單鏈DNA分子和序列表的序列16所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2343引物對(duì)由序列表的序列17所示的單鏈DNA分子和序列表的序列18所示的單鏈DNA分子組成；所述嫩仍196引物對(duì)由序列表的序列19所示的單鏈DNA分 子和序列表的序列20所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1085引物對(duì)由序列表的序列21所示的單鏈DNA分子和序列表的序列22所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1255引物對(duì)由序列表的序列23所示的單鏈DNA分子和序列表的序列24所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1369引物對(duì)由序列表的序列25所示的單鏈DNA分子和序列表的序列26所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1233引物對(duì)由序列表的序列27所示的單鏈DNA分子和序列表的序列28所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1269引物對(duì)由序列表的序列29所示的單鏈DNA分子和序列表的序列30所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2272引物對(duì)由序列表的序列31所示的單鏈DNA分子和序列表的序列32所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1187引物對(duì)由序列表的序列33所不的單鏈DNA分子和序列表的序列34所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU1375引物對(duì)由序列表的序列35所示的單鏈DNA分子和序列表的序列36所示的單鏈DNA分子組成；所述CS51引物對(duì)由序列表的序列37所示的單鏈DNA分子和序列表的序列38所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1028引物對(duì)由序列表的序列39所示的單鏈DNA分子和序列表的序列40所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2342引物對(duì)由序列表的序列41所示的單鏈DNA分子和序列表的序列42所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU868引物對(duì)由序列表的序列43所不的單鏈DNA分子和序列表的序列44所不的單鏈DNA分子組成；所述HAU1300引物對(duì)由序列表的序列45所示的單鏈DNA分子和序列表的序列46所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU6094引物對(duì)由序列表的序列47所示的單鏈DNA分子和序列表的序列48所示的單鏈DNA分子組成；所述DPL0238引物對(duì)由序列表的序列49所不的單鏈DNA分子和序列表的序列50所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU1362引物對(duì)由序列表的序列51所示的單鏈DNA分子和序列表的序列52所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU859引物對(duì)由序列表的序列53所示的單鏈DNA分子和序列表的序列54所示的單鏈DNA分子組成；所述HAU2786引物對(duì)由序列表的序列55所示的單鏈DNA分子和序列表的序列56所示的單鏈DNA分子組成；所述CGR6410引物對(duì)由序列表的序列57所示的單鏈DNA分子和序列表的序列58所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU0478引物對(duì)由序列表的序列59所示的單鏈DNA分子和序列表的序列60所示的單鏈DNA分子組成； 標(biāo)準(zhǔn)I):采用所述CIR062引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)2):采用所述CS62引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在500bp和400bp之間具有2條帶、在150-250bp之間具有3條帶； 標(biāo)準(zhǔn)3):采用所述NAU1070引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶； 標(biāo)準(zhǔn)4):采用所述NAU1102引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)5):采用所述NAU1186引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)6):采用所述NAU2026引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在400bp和300bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有3條帶； 標(biāo)準(zhǔn)7):采用所述NAU2173引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有3條帶; 標(biāo)準(zhǔn)8):采用所述NAU2277引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有I條帶、在150bp和IOObp之間具有I條帶； 標(biāo)準(zhǔn)9):采用所述NAU2343引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp和300bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)10):采用所述NAU1196引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp和250bp之間具有4條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)11):采用所述NAU1085引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)12):采用所述NAU1255引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)13):采用所述NAU1369引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)14):采用所述NAU1233引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在300bp和250bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)15):采用所述NAU1269引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在150bp以下具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)16):采用所述NAU2272引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶； 標(biāo)準(zhǔn)17):采用所述NAU1187引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)18):采用所述NAU1375引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)19):采用所述CS51引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)20):采用所述NAU1028引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)21):采用所述NAU2342引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在300bp和250bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)22):采用所述NAU868引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有上I條帶； 標(biāo)準(zhǔn)23):采用所述HAU1300引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有4條帶、在250bp和200bp之間具有3條帶； 標(biāo)準(zhǔn)24):采用所述NAU6094引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有4條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)25):采用所述DPL0238引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有4條帶、在500bp和400bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)26):采用所述NAU1362引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)27):采用所述NAU859引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在400bp和300bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)28):采用所述HAU2786引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在400bp和300bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)29):采用所述CGR6410引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在300bp和150bp之間具有5條帶、在150bp和IOObp之間具有3條帶； 標(biāo)準(zhǔn)30):采用所述NAU0478引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和150bp之間具有4條帶、在150bp和IOObp之間具有3條帶。
2.用于鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的引物組，由權(quán)利要求1中的所述CIR62引物對(duì)、所述CS62引物對(duì)、所述NAU1070引物對(duì)、所述NAU1102引物對(duì)、所述NAU1186引物對(duì)、所述NAU2026引物對(duì)、所述NAU2173引物對(duì)、所述NAU2277引物對(duì)、所述NAU2343引物對(duì)、所述NAU1196引物對(duì)、所述NAU1085引物對(duì)、所述NAU1255引物對(duì)、所述NAU1369引物對(duì)、所述NAU1233引物對(duì)、所述NAU1269引物對(duì)、所述NAU2272引物對(duì)、所述NAUl 187引物對(duì)、所述NAU1375引物對(duì)、所述CS51引物對(duì)、所述NAU1028引物對(duì)、所述NAU2342引物對(duì)、所述NAU868引物對(duì)、所述HAU1300引物對(duì)、所述NAU6094引物對(duì)、所述DPL0238引物對(duì)、所述NAU1362引物對(duì)、所述NAU859引物對(duì)、所述HAU2786引物對(duì)、所述CGR6410引物對(duì)和所述NAU0478引物對(duì)組成。
3.權(quán)利要求2所述引物組在制備用于鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的試劑盒中的應(yīng)用。
4.一種用于鑒定或輔助鑒定待測(cè)棉花是否為中棉所63的試劑盒，含有權(quán)利要求2所述引物組。
5.檢測(cè)一批待測(cè)種子的純度的方法，包括如下步驟: 從待測(cè)種子中隨機(jī)抽取具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的待測(cè)樣本，以待測(cè)樣本的種仁的基因組DNA為模板，分別采用CIR62引物對(duì)、CS62引物對(duì)、NAU1070引物對(duì)、NAUl 186引物對(duì)、NAU2026引物對(duì)、NAU2173引物對(duì)、NAU2277引物對(duì)、NAU2343引物對(duì)、NAU1085引物對(duì)、NAU1255引物對(duì)、NAU1369引物對(duì)、NAU1233引物對(duì)、NAU1269引物對(duì)、NAU2272引物對(duì)、NAUl 187引物對(duì)、NAU1375引物對(duì)、CS51引物對(duì)、NAU1028引物對(duì)、NAU2342引物對(duì)和NAU868引物對(duì)組進(jìn)行PCR擴(kuò)增，如果PCR擴(kuò)增產(chǎn)物滿足標(biāo)準(zhǔn)(I)至標(biāo)準(zhǔn)(20)中的18條以上，待測(cè)種子為中棉所.63，判斷為中棉所63的種子數(shù)量占待測(cè)樣本總數(shù)的百分比為待測(cè)種子的純度；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子； 所述CIR62引物對(duì)由序列表的序列I所不的單鏈DNA分子和序列表的序列2所不的單鏈DNA分子組成；所述CS62引物對(duì)由序列表的序列3所示的單鏈DNA分子和序列表的序列4所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1070引物對(duì)由序列表的序列5所示的單鏈DNA分子和序列表的序列6所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1186引物對(duì)由序列表的序列9所示的單鏈DNA分子和序列表的序列10所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2026引物對(duì)由序列表的序列11所示的單鏈DNA分子和序列表的序列12所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2173引物對(duì)由序列表的序列13所示的單鏈DNA分子和序列表的序列14所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2277引物對(duì)由序列表的序列15所示的單鏈DNA分子和序列表的序列16所示的單鏈DNA分子組成 ；所述NAU2343引物對(duì)由序列表的序列17所示的單鏈DNA分子和序列表的序列18所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1085引物對(duì)由序列表的序列21所示的單鏈DNA分子和序列表的序列22所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1255引物對(duì)由序列表的序列23所示的單鏈DNA分子和序列表的序列24所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1369引物對(duì)由序列表的序列25所示的單鏈DNA分子和序列表的序列26所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1233引物對(duì)由序列表的序列27所不的單鏈DNA分子和序列表的序列28所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU1269引物對(duì)由序列表的序列29所不的單鏈DNA分子和序列表的序列30所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2272引物對(duì)由序列表的序列31所示的單鏈DNA分子和序列表的序列32所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1187引物對(duì)由序列表的序列33所示的單鏈DNA分子和序列表的序列34所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU1375引物對(duì)由序列表的序列35所示的單鏈DNA分子和序列表的序列36所示的單鏈DNA分子組成；所述CS51引物對(duì)由序列表的序列37所不的單鏈DNA分子和序列表的序列38所不的單鏈DNA分子組成；所述NAU1028引物對(duì)由序列表的序列39所示的單鏈DNA分子和序列表的序列40所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU2342引物對(duì)由序列表的序列41所示的單鏈DNA分子和序列表的序列42所示的單鏈DNA分子組成；所述NAU868引物對(duì)由序列表的序列43所不的單鏈DNA分子和序列表的序列44所不的單鏈DNA分子組成； 標(biāo)準(zhǔn)(I):采用所述CIR062引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(2):采用所述CS62引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在500bp和400bp之間具有2條帶、在150-250bp之間具有3條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(3):采用所述NAU1070引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(4):采用所述NAU1186引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(5):采用所述NAU2026引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在400bp和300bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有3條帶； 標(biāo)準(zhǔn)出):采用所 述NAU2173引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有3條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(7):采用所述NAU2277引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在250bp和200bp之間具有I條帶、在150bp和IOObp之間具有I條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(8):采用所述NAU2343引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp和300bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(9):采用所述NAU1085引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(10):采用所述NAU1255引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(11):采用所述NAU1369引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在400bp以上具有5條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(12):采用所述NAU1233引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:大于500bp具有2條帶、在300bp和250bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(13):采用所述NAU1269引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在150bp以下具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(14):采用所述NAU2272引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有I條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(15):采用所述NAU1187引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(16):采用所述NAU1375引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(17):采用所述CS51引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(18):采用所述NAU1028引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有2條帶、在250bp和200bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(19):采用所述NAU2342引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp和400bp之間具有I條帶、在300bp和250bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有2條帶； 標(biāo)準(zhǔn)(20):采用所述NAU868引物對(duì)時(shí)，滿足如下帶型:在500bp以上具有I條帶、在500bp和400bp之間具有I條帶、在250bp和200bp之間具有I條帶、在200bp和150bp之間具有上I條帶。
6.用于檢測(cè)一批待測(cè)種子的純度的引物組，由權(quán)利要求5中的所述CIR62引物對(duì)、所述CS62引物對(duì)、所述NAU1070引物對(duì)、所述NAUl 186引物對(duì)、所述NAU2026引物對(duì)、所述NAU2173引物對(duì)、所述NAU2277引物對(duì)、所述NAU2343引物對(duì)、所述NAU1085引物對(duì)、所述NAU1255引物對(duì)、所述NAU1369引物對(duì)、所述NAU1233引物對(duì)、所述NAU1269引物對(duì)、所述NAU2272引物對(duì)、所述NAUl 187引物對(duì)、所述NAU1375引物對(duì)、所述CS51引物對(duì)、所述NAU1028引物對(duì)、所述NAU2342引物對(duì)和所述NAU868引物對(duì)組成；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子。
7.權(quán)利要求6所述引物組在制備用于鑒定一批待測(cè)種子的純度的試劑盒中的應(yīng)用；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子。
8.一種鑒定一批待測(cè)種子的純度的試劑盒，含有權(quán)利要求6所述引物組；所述待測(cè)種子為由制種公司或制種農(nóng)戶提供標(biāo)識(shí)為中棉所63的種子。
【文檔編號(hào)】C12N15/11GK104004845SQ201410245213
【公開日】2014年8月27日 申請(qǐng)日期:2014年6月4日 優(yōu)先權(quán)日:2014年6月4日
【發(fā)明者】付小瓊, 葉武威, 楊付新, 黃殿成 申請(qǐng)人:中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院棉花研究所