一種滅活人凝血因子ⅷ中細(xì)小病毒b19的方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種對(duì)人凝血因子Ⅷ中細(xì)小病毒B19滅活的方法，其特征在于對(duì)離心分離出的上清液加入蕓香素，并進(jìn)行紫外短波輻射，其中蕓香素的加入量為2～20ug/kg，紫外照射劑量為200～350J/m2。本發(fā)明可以提供一種對(duì)病毒B19滅活效果好，同時(shí)對(duì)凝血因子Ⅷ活性影響較小的方法。
【專利說(shuō)明】—種滅活人凝血因子WI中細(xì)小病毒BI 9的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種滅活人凝血因子珊中細(xì)小病毒B19的方法，屬于病毒滅活領(lǐng)域?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]細(xì)小病毒B19是已知唯一對(duì)人類致病的細(xì)小病毒，病毒無(wú)包膜，耐熱，直徑約18-20nm,基因組為單鏈線狀DNA分子，約5.5Kb，并且對(duì)熱滅活有抵抗性。B19病毒有普遍易感性，晚冬和早春是感染高峰，幾乎成世界范圍分布。侵犯人體代謝較活躍的組織器官，如骨髓、紅細(xì)胞、肝脾、心肌，感染后宿主細(xì)胞內(nèi)可出現(xiàn)病毒包涵體。在臨床上主要表現(xiàn)為:孕婦感染后對(duì)胚胎致死、兒童造血系統(tǒng)疾病、關(guān)節(jié)疾病等。人凝血因子VDI屬于血液制品，盡管采取了諸如獻(xiàn)血員篩選、對(duì)捐獻(xiàn)的血液和混合血漿進(jìn)行檢測(cè)、生產(chǎn)工藝病毒滅活或去除等步驟確保最終產(chǎn)品的病毒安全性等措施，但是現(xiàn)行的病毒滅活方法對(duì)于非脂包膜病毒，尤其是人細(xì)小病毒B19效果都不理想。國(guó)外B19病毒污染人凝血因子VDI比例為86.18%，國(guó)內(nèi)約為36%。目前用于凝血因子類血制品的病毒滅活方法主要是干熱法，此法對(duì)細(xì)小病毒效果不佳，而且對(duì)制品活性影響較大。還有利用短波紫外滅活人細(xì)小病毒B19，研究人員發(fā)現(xiàn)很多因素影響UVC的效果。最重要的因素是不斷流動(dòng)形成均勻的薄膜。由于蛋白溶液至少吸收部分UVC光能，因此為保證UVC光完全穿透，形成均勻的薄膜對(duì)大多數(shù)蛋白質(zhì)溶液是必要的，它能保證UVC光完全穿透。但UVC光還會(huì)損壞蛋白質(zhì)，例如用UVC光照射血漿中制備的白蛋白比用未經(jīng)照射的血漿制備的白蛋白穩(wěn)定性差。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本法的目的是提供一種滅活病毒B19效果好，對(duì)凝血因子VDI活性影響較小的方法。
·[0004]一種滅活人凝血因子VDI中細(xì)小病毒B19的方法，包括以下步驟:
①將新鮮血漿進(jìn)行一次沉淀，從血漿中沉淀出凝血因子珊；
②將一次沉淀進(jìn)行懸浮；
③將懸浮液進(jìn)行離心分離出上清液并進(jìn)行病毒滅活；
其中:在步驟③分離的上清液中加入蕓香素，并進(jìn)行紫外短波輻射。
[0005]一種滅活人凝血因子VDI中細(xì)小病毒B19的方法，其特征在于所述的蕓香素的加入量為2~20ug/kg。
[0006]一種滅活人凝血因子VDI中細(xì)小病毒B19的方法，其特征在于所述的紫外照射劑量為 200 ~350J/m2。
【具體實(shí)施方式】
[0007]以下通過(guò)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)說(shuō)明該發(fā)明對(duì)滅活人凝血因子VDI中細(xì)小病毒B19的有益效果。
[0008]1、紫外照射劑量對(duì)細(xì)小病毒B19滴度影響:
【權(quán)利要求】
1.一種滅活人凝血因子VDI中細(xì)小病毒B19的方法，包括以下步驟: ①將新鮮血漿進(jìn)行一次沉淀，從血漿中沉淀出凝血因子珊； ②將步驟①中的一次沉淀進(jìn)行懸??； ③將步驟②中的懸浮液進(jìn)行離心分離出上清液并進(jìn)行病毒滅活； 其特征在于:在步驟③分離的上清液中加入蕓香素，并進(jìn)行紫外短波輻射。
2.如權(quán)利要求1所述的一種滅活人凝血因子VDI中細(xì)小病毒B19的方法，其特征在于所述的蕓香素的加入量為2~20ug/kg。
3.如權(quán)利要求1所述的一種滅活人凝血因子VDI中細(xì)小病毒B19的方法，其特征在于所述的紫外照射劑量為200~`350J/m2。
【文檔編號(hào)】C12N7/04GK103865891SQ201410045549
【公開日】2014年6月18日 申請(qǐng)日期:2014年2月8日 優(yōu)先權(quán)日:2014年2月8日
【發(fā)明者】呂獻(xiàn)忠, 蘇峰 申請(qǐng)人:新疆德源生物工程有限公司