專利名稱：樟芝子實體與破壁靈芝孢子粉的組合物及其在免疫調(diào)節(jié)中的應用的制作方法
樟芝子實體與破壁靈芝孢子粉的組合物及其在免疫調(diào)節(jié)中的應用技術(shù)領域
本發(fā)明屬于食品醫(yī)藥技術(shù)領域，具體涉及一種含有樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉的組合物，以及所述組合物在制備免疫調(diào)節(jié)用藥物或保健食品中的應用。
背景技術(shù)：
幾十年來，我國國民經(jīng)濟以前所未有的速度發(fā)展，社會生活已經(jīng)并繼續(xù)發(fā)生著深刻的變化。在經(jīng)濟高速發(fā)展、生活條件顯著改善的社會條件下，身體健康逐漸成為全社會關(guān)注的焦點。一些與健康相關(guān)的影響因素受到廣泛關(guān)注:例如，隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展，社會生活節(jié)奏迅速加快，公民教育水平和知識技能顯著提升，社會競爭由此加?。欢捎谏钏降奶岣?、健康意識普及以及醫(yī)藥技術(shù)的發(fā)展，人口老齡化的趨勢也隨之出現(xiàn)。與競爭壓力相關(guān)聯(lián)的“亞健康”狀態(tài)及其與人口老齡化趨勢相關(guān)聯(lián)的老年健康已經(jīng)成為健康保健醫(yī)療的重要議題。
免疫系統(tǒng)是機體防衛(wèi)病原體入侵的有效武器，它能發(fā)現(xiàn)并清除異物、外來病原微生物等引起內(nèi)環(huán)境波動。免疫系統(tǒng)功能失調(diào)會影響人體健康。免疫功能低下的人易受病原體侵害、感染；免疫系統(tǒng)自我穩(wěn)定能力異常，可引發(fā)自身免疫疾??；免疫監(jiān)視功能降低，則易發(fā)某些慢性疾病以及腫瘤。
“亞健康”以及老年性健康問題均與免疫功能降低密切相關(guān)。所謂“亞健康”狀態(tài)是介于健康與疾病之間的機體功能低下的一種健康狀態(tài)，西方國家稱之為第三狀態(tài)。處于“亞健康”狀態(tài)的人群多伴有免疫功能降低。亞健康狀態(tài)具有很高的發(fā)生率，社會競爭加劇和生活壓力增加是亞健康的重要誘因。除了運動、心理調(diào)節(jié)外，健康/功能飲食是改善亞健康人群的健康狀態(tài)、預防疾病發(fā)生的重要途徑之一。
在現(xiàn)代醫(yī)學中，隨著感染性疾病等急性病癥的診療措施日漸成熟，慢性疾病成為影響人類身體健康的危險因素，這些疾病重在預防，預防醫(yī)學由此成為重要的醫(yī)學分支。中醫(yī)藥傳統(tǒng)醫(yī)學素有預防疾病的傳承，所謂“上工不治已病治未病”就是強調(diào)高明的醫(yī)生不在于治療已發(fā)疾病而在于預防疾病發(fā)生，其中，食療保健是預防疾病的重要途徑之一，由食療發(fā)展而來的保健功能食品已經(jīng)成為廣為接受的調(diào)節(jié)身體狀態(tài)的保健手段。
靈芝(Ganoderma Lucidum)又稱“仙草”、“長生草”、“靈草”，在我國是享有盛譽和具有悠久藥用歷史的補益類藥食兩用品種`。古人認為靈芝是一種神藥仙草，《神農(nóng)本草經(jīng)》將其列為上品，《本草綱目》記載靈芝“甘溫無毒” “益精氣，堅筋骨，好顏色，療虛勞”?，F(xiàn)代研究則將靈芝的補益作用主要歸結(jié)為免疫調(diào)節(jié)活性。靈芝孢子是靈芝的精華，如子實體一樣，其富含大量生物活性物質(zhì)，其多種功效成分含量高于子實體。資料顯示靈芝孢子粉具有廣泛的醫(yī)用功效，例如，心血管保護、肝損傷保護、調(diào)節(jié)血糖、調(diào)節(jié)免疫功能等，其中以免疫調(diào)節(jié)活性的研究資料最為豐富，且與靈芝補益作用的傳統(tǒng)認識相一致(張偉，等.中西醫(yī)結(jié)合學報.2004; 2 (6):463-465 ;陳亞非，陳金顯.中國食品添加劑，2002; (4):36-41 ;林志彬，王鵬云.北京大學學報(醫(yī)學版).2006; 138 (5): 541-547)。
樟芝(Antrodia camphorata)別名牛樟芝、牛樟燕,是臺灣地區(qū)習用的珍稀藥食兩用真菌。資料顯示，樟芝療效流傳甚久，早期臺灣原住民發(fā)現(xiàn)生長于牛樟樹上的樟芝由解毒護肝和強健體魄的作用?，F(xiàn)代研究資料顯示，樟芝具有解毒保肝、消除腫瘤、補腎強心、增強免疫等作用，其中仍以免疫調(diào)節(jié)作用的相關(guān)研究較為深入和系統(tǒng)，并且，一般認為其護肝、抗腫瘤等功效作用源于其免疫調(diào)節(jié)活性或與免疫調(diào)節(jié)活性密切相關(guān)(陳菲，等.中藥材.2011;34(11):1804-1807 ;浦躍武，等.中國醫(yī)院藥學雜志.2004; 24 (7): 430-432 ；Madamanchi GeethangiIi and Yew-Min Tzeng.Evidence-Based Complementaryand Alternative Medicine.2011，2011:1-17;Huang CC,et al.Evidence-BasedComplementary and Alternative Medicine.2012;2012:1-9.X靈芝和樟芝均為具有補益功效的藥食兩用真菌，前者是傳統(tǒng)中醫(yī)藥學上傳承數(shù)千年、被稱之“神藥仙草”、可以“補氣安神”、“益精氣、堅筋骨”的經(jīng)典品種，后者則為臺灣地區(qū)習用、被稱之“藥中之王”、可以“解毒保肝、補腎強心”的地方品種?，F(xiàn)代研究表明，靈芝和樟芝均具有抗氧化、護肝抗毒、調(diào)節(jié)代謝、抗癌抗炎等功效活性，而其“調(diào)節(jié)免疫”功效活性則是研究深入、特點明確，能夠體現(xiàn)補益功效的典型功效特點。而功效成分研究表明，靈芝和樟芝均含有豐富的功效和營養(yǎng)成分，其中與免疫調(diào)節(jié)活性相關(guān)的功效成分均主要包括多糖類和三職類(Madamanchi Geethangili and Yew-Min Tzeng.Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine.2011, 2011:1-17;HuangCC, et al.Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine.2012;2012:1-9)。鑒于靈芝和樟芝同屬具有“補益作用”的“藥食兩用”真菌，現(xiàn)代研究顯示其活性成分類型以及功效活性相近而又存在差異，根據(jù)傳統(tǒng)中醫(yī)藥組方原則，“相須”、“相使”理論，“性能功效相似的藥物配合應用，可增強其原有功效”，所謂“當用相須、相使者良”《神農(nóng)本草經(jīng)》，“有相須者，二藥相宜，可兼而用之”《本草蒙筌》，“相須者，同類不可離也《本草綱目》”(姚崢燕.實用中醫(yī)內(nèi)科雜志.2006;20(1):95;胡小勤.中華中醫(yī)藥雜志.2012; 27 (7): 1896-1898)。本發(fā)明以破壁靈芝孢子粉和樟芝子實體組方，其目的在于通過相須用藥的“相加”與“互補”性，增強其“補益”功效。目前，國內(nèi)已獲準上市的以靈芝孢子粉為主要原料并且以免疫調(diào)節(jié)為功效的保健食品已達幾十種，其中不少產(chǎn)品已經(jīng)產(chǎn)生良好的社會和經(jīng)濟效益。這些產(chǎn)品均以單味靈芝孢子粉或破壁靈芝孢子粉組方。樟芝類食品和保健食品主要生產(chǎn)和行銷于我國港澳臺地區(qū)，并且擁有廣泛和重要的影響力；大陸地區(qū)盡管有不少單位開展了樟芝人工培養(yǎng)研究和實踐，并且開展了一定的功效學及安全性實驗研究。然而，迄今尚無以靈芝和樟芝共同組方的公開研究報告或相關(guān)產(chǎn)品上市的報道。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)中尚無以靈芝和樟芝共同組方的報道，基于靈芝和樟芝具有廣泛的影響力和認可度，本發(fā)明的目的旨在以破壁靈芝孢子粉與樟芝子實體組方，利用其“相須”和“協(xié)同”功效研發(fā)保健食品，提供一種含有樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉的組合物，以及所述組合物在制備免疫調(diào)節(jié)用藥物或保健食品中的應用。本發(fā)明組方新穎、特點明確，有利于獲得公眾認可和接受。
為了實現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案:
本發(fā)明首先提供一種含有樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉組合物，所述組合物可含有藥學上或食品學上可接受的輔料。
所述組合物中破壁靈芝孢子粉與樟芝子實體粉，以質(zhì)量比計，兩者的比例范圍為1:1 至 4:1。
本發(fā)明所述破壁靈芝孢子粉為擔子菌綱多孔菌科(Polyporaceae)靈芝屬(Ganodelma)真菌赤芝(G.1ucidum)和/或紫芝(G.sinense)的孢子經(jīng)破壁處理獲得的破壁孢子粉末。未破壁的靈芝孢子具有堅硬皮殼，直接食用不易消化吸收，與之相比，破壁孢子粉所含營養(yǎng)活性成分則更容易被消化吸收。本發(fā)明中，所述破壁靈芝孢子粉是指破壁率不低于90%的靈芝孢子粉(NY/T1677-2008，中華人民共和國農(nóng)業(yè)行業(yè)標準，破壁靈芝孢子粉破壁率的測定)。
本發(fā)明所述樟芝子實體粉是指野生和/或椴木栽培的樟芝生物子實體經(jīng)粉碎加工獲得的粉末狀物質(zhì)。樟芝又稱牛樟芝，為擔子菌綱多孔菌科薄孔菌屬(Antrodia)的樟芝(Antrodia camphorata)。野生樟芝較稀少。目前，液體發(fā)酵以及固體培養(yǎng)基培養(yǎng)獲得的樟芝菌絲體的三萜類活性成分含量較低，因此并不適合用于本發(fā)明所述組合物的制備。椴木栽培獲得的樟芝子實體含有近似于野生樟芝的三萜類和多糖類活性成分，因此可選擇用于本發(fā)明所述的具有免疫調(diào)節(jié)活性的組合物。本發(fā)明組合物中，采用粉碎粒度細至40目以上的樟芝子實體粉制備所述藥用和/或食用組合物。
本發(fā)明所述組合物的質(zhì)量控制指標為總?cè)坪涂偠嗵?，在所述破壁靈芝孢子粉、樟芝子實體粉以及破壁靈芝孢子粉樟芝子實體粉混合物中，以質(zhì) 量計，其中總?cè)坪涂偠嗵呛烤謩e不低于1.0%。
本發(fā)明所述組合物中，其所述破壁靈芝孢子粉、樟芝子實體粉以及破壁靈芝孢子粉一樟芝子實體粉混合物的性狀為粉末狀，其粉碎粒度為不低于40目，優(yōu)選的粉碎粒度是不低于60目。
所述組合物中樟芝子實體來源于樟科樹木的椴木栽培。
所述組合物中樟芝子實體來源于牛樟樹(Cinnamomum kanehirai)的鍛木栽培。栽培方法為業(yè)內(nèi)技術(shù)人員所熟知,一般地,經(jīng)母種菌種培養(yǎng)、接種、培養(yǎng)、采收等工藝過程。
本發(fā)明所述組合物具有確切的調(diào)節(jié)免疫活性，因此具有明確的藥用或保健價值。本發(fā)明組合物可以選擇胃腸給藥劑型，優(yōu)選為固體口服劑型，例如片劑、膠囊劑、錠劑、沖劑、袋泡劑等，其制劑制備可以按照本領域內(nèi)熟知的技術(shù)方法進行。
因此，本發(fā)明提供一種保健食品用或藥用組合物，所述組合物包括本發(fā)明所述組合物以及醫(yī)藥或食品行業(yè)可接受的輔料。本發(fā)明所述組合物具有強效的免疫調(diào)節(jié)活性，因此可以用于不同程度的免疫性疾病的保健和預防。因此，本發(fā)明可提供所述組合物在治療和預防免疫性疾病的藥物或保健食品制備中的應用。
現(xiàn)代藥理學中，對于物質(zhì)基礎不同的功效物質(zhì)，藥理學效應相近、藥理學機制有所差異是產(chǎn)生“協(xié)同作用”功效的基本條件，靈芝和樟芝的功效成分(主要包括結(jié)構(gòu)近似而又有不同的“多糖類”和“三萜類”)和功效活性(“免疫調(diào)節(jié)”活性)符合產(chǎn)生協(xié)同功效作用的機制特點。
本發(fā)明研究發(fā)現(xiàn)，含有本發(fā)明所述樟芝子實體的組合物給小鼠灌胃30天后，小鼠的半數(shù)溶血值HC5tl呈現(xiàn)不同程度的升高，與同期正常對照組相比，具有顯著性差異(p〈0.001);并且藥效呈劑量性增加；提示它們具有確切的補體免疫調(diào)節(jié)作用。本發(fā)明還發(fā)現(xiàn)，含有本發(fā)明所述樟芝子實體的組合物能夠顯著地促進刀豆球蛋白(ConA)誘導的小鼠脾臟內(nèi)的T淋巴細胞增殖與轉(zhuǎn)化，提示它們具有較好的細胞免疫調(diào)節(jié)作用。同時，本發(fā)明驚奇的發(fā)現(xiàn)，以樟芝子實體和破壁靈芝孢子粉兩者組合配方，由于同時具有補體免疫調(diào)節(jié)和細胞免疫調(diào)節(jié)作用，可以協(xié)同實現(xiàn)“調(diào)節(jié)免疫功能”的醫(yī)用或保健功效。適當比例的破壁靈芝孢子粉和樟芝子實體粉配伍可產(chǎn)生顯著的協(xié)同調(diào)節(jié)免疫作用:與單用等劑量的破壁靈芝孢子粉或樟芝子實體粉相比，適當比例使用的破壁靈芝孢子粉或樟芝子實體粉不僅可以顯示增強的免疫調(diào)節(jié)活性，而且顯示出更全面的調(diào)節(jié)體液免疫和細胞免疫的活性。
具體實施例方式
以下實施例用于詳細說明本發(fā)明內(nèi)容，而對本發(fā)明范圍不構(gòu)成任何限制。實施例1樟芝子實體粉的制備:選取Φ20 40cm牛樟木材，將其裁截成長度約20 30cm的鍛木。將鍛木裝袋后，在滅菌柜中120 122°C溫度下滅菌14h。在培養(yǎng)室中，將樟芝(Antrodia camphorata)母種無菌接種于原種培養(yǎng)瓶,培養(yǎng)基為洋菜培養(yǎng)基，在溫度為25 29°C、濕度為75% 85%下培養(yǎng)7 10天。然后，將原種無菌接種于栽培種培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)基為洋菜培養(yǎng)基，在溫度為25 29°C、濕度為75% 85%下培養(yǎng)7 10天，獲得栽培種；將栽培種無菌接種于牛樟椴木。接種部位為椴木表面。接種量按3-5mm的菌球200-300粒植在椴木上。已接種樟芝菌種的椴木轉(zhuǎn)移至已滅菌處理的樟芝培養(yǎng)室內(nèi)，以空間間距50 70cm排列于多層培養(yǎng)架。樟芝培養(yǎng)條件:溫度25 29°C ;濕度75% 85% ;光照強度與周期:暗培養(yǎng)；培養(yǎng)周期:半年以上。環(huán)境控制與養(yǎng)殖管理:定期給培養(yǎng)室消毒，發(fā)現(xiàn)有感染雜菌的椴木及時清理出培養(yǎng)室，觀察培養(yǎng)室的溫度、濕度有無異常，是否需要調(diào)節(jié)。樟芝子實體采收時機:半年以上，子實體有一定的厚度。采收方法:用采收工具將牛樟芝從鍛木上刮取下來。采收的樟芝子實體經(jīng)干燥(電熱恒溫干燥箱40 50°C烘干)、振動式粉碎(SQW—6A型三清微粉機)，過60目篩，即得到樟芝子實體粉。實施例2樟芝子實體與破壁靈芝孢子粉組合物的制備:2.1 材料按照實施例1提供的方法制備得到的樟芝子實體粉；破壁靈芝孢子粉為市售破壁孢子粉。2.2 方法2.2.1組合物的制備精密稱取破壁靈芝孢子粉三份，其質(zhì)量分別為1.00g、2.0Og和4.0Og ;另精密稱取樟芝子實體粉三份，其質(zhì)量均為1.0Og。將破壁靈芝孢子粉三份分別于另三份樟芝子實體粉混合均勻，得到三個組方的破壁靈芝孢子粉與樟芝子實體組合物。以質(zhì)量比計，破壁靈芝孢子粉與樟芝子實體粉的比例分別為:1: 1、2:1、4:1，記為LZ-1，LZ-2，LZ-4。并按照以下方法測這三個組合中的總多糖和總?cè)坪俊?.2.2組合物中總多糖含量檢測方法選擇:本發(fā)明所述組合物中的總多糖含量檢測方法參考《中國藥典》2010版一部，通過實驗研究確認采用硫酸蒽酮法檢測。檢測步驟:本發(fā)明所述組合物中的總多糖含量檢測步驟包括:樣品處理:精密稱取所述組合物2.0g，精密稱定，置圓底燒瓶中，加水90ml，至水浴中加熱回流提取4小時，過濾，濾液轉(zhuǎn)移至IOOml量瓶中，加水至刻度，搖勻，精密量取10ml，加入乙醇150ml，搖勻，4°C放置12小時，取出，離心，棄去上清液，沉淀加水溶解，轉(zhuǎn)移至50ml量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。標準曲線繪制:精密稱取葡萄糖對照品約IOmg,置IOOml量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取0.0,0.2,0.4,0.6,0.8，1.0, 1.2，1.4ml，置15ml試管中，準確補充水至2.0ml，分別精密加入硫酸蒽酮溶液6ml，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻，置沸水浴中加熱15分鐘，取出，放入冰浴中冷卻15分鐘，取出，放置室溫。照紫外一可見分光光度法(中國藥典2010年版一部附錄V A)在625nm波長處以O號管溶液為參比，Icm比色皿測定吸光度值。以葡萄糖濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線。2.2.3組合物中總?cè)坪繖z測方法選擇:本 發(fā)明所述組合物中的總?cè)坪繖z測方法參考《保健食品檢驗與技術(shù)規(guī)范》中保健食品中總皂甙的測定和DB44/T496-2008靈芝中三萜類物質(zhì)的測定方法并通過實驗研究確認采用香草醒一冰醋酸法檢測。檢測步驟:本發(fā)明所述組合物中的總?cè)坪繖z測步驟包括:樣品處理:精密稱取所述組合物0.2g，置圓底燒瓶中，加30ml三氯甲烷，置60°C水浴回流提取2小時，常壓過濾，濾渣加30ml三氯甲烷再提取I小時，常壓過濾，合并濾液，常壓水浴蒸干。加入無水乙醇40ml，70°C水浴加熱，并搖動至其完全溶解。冷卻至室溫后用無水乙醇定容至50ml，作為皂苷測定溶液。標準曲線繪制:精密稱取齊墩果酸對照品約IOmg,置50ml量瓶中，加無水乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密量取0.0,0.2,0.4,0.6,0.8，1.0, 1.2，1.4ml，置15ml試管中，水浴蒸干，分別加入0.2ml5%香草醛-冰醋酸溶液，溶解后，再加入0.8ml高氯酸溶液，混勻，至60°C水浴保持15分鐘，取出，冰浴放置5分鐘，自來水至室溫，分別加入5.0ml冰醋酸，在旋轉(zhuǎn)混勻器上混勻，照紫外-可見分光光度法(中國藥典2010年版一部附錄V A)，在545nm波長處以O號管溶液為參比，Icm比色皿測定吸光度值。以齊墩果酸濃度為橫坐標，吸光度值為縱坐標，繪制標準曲線。2.3 結(jié)果按照上述方法中繪制的標準曲線計算所述三種組合物中的總多糖和總?cè)坪恳姳鞩。結(jié)果顯示，所述組合物中總多糖和總?cè)坪康木坏陀?.0%。表I三種組合物中的總多糖和總?cè)坪?br> 權(quán)利要求
1.一種食用或藥用組合物，由樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉的混合物以及藥學或食品學上接受的輔料組成。
2.如權(quán)利要求1所述的組合物，其特征在于，所述樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉的混合物中，破壁靈芝孢子粉與樟芝子實體粉以質(zhì)量比例計為1:1至4:1。
3.如權(quán)利要求1或2所述的組合物，其特征在于，所述樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉的混合物中，其總?cè)坪坎坏陀?.0%，總多糖含量不低于1.0%。
4.如權(quán)利要求1或2所述的組合物，其特征在于，所述樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉的混合物中樟芝子實體粉和破壁靈芝孢子粉的粒度均不低于40目。
5.如權(quán)利要求1或2所述的組合物，其特征在于，所述組合物中樟芝子實體為野生牛樟芝子實體或者是采用樟科椴木栽培獲得的牛樟芝子實體。
6.如權(quán)利要求1或2所述的組合物，其特征在于，所述組合物中樟芝子實體粉是牛樟樹椴木栽培獲得的牛 樟芝子實體經(jīng)粉碎加工制得的粉末狀物質(zhì)。
7.如權(quán)利要求1所述的組合物，其含有有效免疫調(diào)節(jié)劑量的樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉，以及醫(yī)藥用或保健食品用賦形劑。
8.如權(quán)利要求1或7所述的組合物，其特征在于，所述藥物組合物的劑型為固體制劑。
9.權(quán)利要求1-8任一項所述的組合物在制備調(diào)節(jié)免疫的保健食品或藥物中的應用。
10.以權(quán)利要求1所述的組合物為有效成分的免疫調(diào)節(jié)劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有樟芝子實體與靈芝孢子粉的組合物。該組合物由樟芝子實體粉與破壁靈芝孢子粉的混合物以及藥學或食品學上接受的輔料組成。組合物中靈芝孢子粉與樟芝子實體，以質(zhì)量比計，兩者的比例范圍為1:1至4:1，質(zhì)量控制指標為總?cè)坪涂偠嗵?，以質(zhì)量比例計，其中總?cè)坪涂偠嗵呛烤坏陀?.0%，可制備成固體制劑等。本發(fā)明的組合物具有確切的體液免疫調(diào)節(jié)和細胞免疫調(diào)節(jié)作用，可用于免疫類疾病的防治和保健。
文檔編號A23L1/28GK103169737SQ201310088358
公開日2013年6月26日 申請日期2013年3月19日 優(yōu)先權(quán)日2013年3月19日
發(fā)明者陳永得, 吳明一 申請人:佛山市順德區(qū)今日景藝生物科技有限公司