專利名稱：一種半成品培養(yǎng)基及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)基，具體涉及一種半成品培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術(shù)：
一直以來，培養(yǎng)基是微生物檢測行業(yè)中不可缺少的一個重要檢測產(chǎn)品，應(yīng)用于較多的領(lǐng)域，如醫(yī)院、疾控中心、血站、藥檢所、衛(wèi)生檢測部門、生物制藥、食品廠、化妝品廠、餐飲等所有的涉及到微生物檢測的行業(yè)，是一個關(guān)系人民身心健康的產(chǎn)品，本產(chǎn)品的逐步發(fā)展，有效的促進(jìn)微生物行業(yè)檢測的發(fā)展，使產(chǎn)品檢測更加方便、快捷、檢測結(jié)果更加接近真 實值，為人類的健康保駕護(hù)航！
至今，培養(yǎng)基主要經(jīng)歷了三個階段的發(fā)展，第一階段即最原始的階段，通過購買各種生物化學(xué)原料，按照一定的配方和工藝進(jìn)行復(fù)雜的生產(chǎn)加工、檢驗，最終成為可以使用的產(chǎn)品，中間過程繁多，而且每一工藝環(huán)節(jié)均存在影響最終產(chǎn)品品質(zhì)的多個因素，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定性很差，使用不方便；第二階段即干粉培養(yǎng)基，減少了第一階段的原料采購、稱量環(huán)節(jié)，企業(yè)將其加工成半成品，客戶可以稱量一次(原來配料需稱多次)加入水中，繼續(xù)前面工藝流程中的滅菌工藝(含)及以后的各工藝，操作仍然麻煩，并且影響產(chǎn)品品質(zhì)的因素雖有減少，但仍然很多，提供給客戶使用的產(chǎn)品仍然存在較大的風(fēng)險；第三階段即一次性的成品培養(yǎng)基，企業(yè)將全部的工藝流程節(jié)省為客戶節(jié)省，即提供給客戶的是一個完全可以直接使用的產(chǎn)品，這樣，客戶不需要任何加工即可使用，產(chǎn)品質(zhì)量幾乎完全由生產(chǎn)企業(yè)決定，生產(chǎn)企業(yè)比較好的話，品質(zhì)穩(wěn)定、使用方便、風(fēng)險最小，是一個理想的產(chǎn)品，但是由于產(chǎn)品成本高、貯存(低溫貯存)體積大，占用很多的冷藏資源、產(chǎn)品不完全密封存在事后污染的可能、還有就是不能完全適用于現(xiàn)有的國家法律法規(guī)，即存在適用范圍的片面性，不能滿足全部客戶的需要，給部分客戶的工作帶來不便。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，本發(fā)明的目的是提供一種半成品培養(yǎng)基及其制備方法，以實現(xiàn)提供了方便、可靠的品質(zhì)的同時，解決了上面產(chǎn)品的缺點。技術(shù)方案為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下
一種半成品培養(yǎng)基，所述的半成品培養(yǎng)基為不需滅菌即可直接使用的包裝體積大于使用時體積的的半成品培養(yǎng)基。所述的包裝體積為200mL、250ml、500mL 或 1000mL。所述的包裝體積為IL以上。所述的半成品培養(yǎng)基包括營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)、甘露醇氯化鈉瓊脂(甘露醇高鹽瓊脂)、卵黃氯化鈉基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基、沙門、志賀菌屬瓊脂(SS瓊脂)、麥康凱瓊脂(MAC瓊脂)、伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB瓊脂)、中國藍(lán)瓊脂、玫瑰紅鈉瓊月旨、膽硫乳瓊脂(DHL瓊脂)、HE瓊脂、改良馬丁瓊脂、改良沙保羅瓊脂、沙保羅瓊脂、M-H瓊月旨、孟加拉紅(虎紅)瓊脂、LB瓊脂、乳酸菌瓊脂(MRS瓊脂)、溴化十六烷基三甲銨瓊脂、平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基。一種制備半成品培養(yǎng)基的方法，包括以下步驟
(1)按配方取各原料，攪拌混合均勻，調(diào)節(jié)PH；
(2)滅菌;
(3)冷卻，分裝，抽樣檢測；產(chǎn)品包裝，冷藏。本發(fā)明的半成品培養(yǎng)基，主要是介于背景技術(shù)中的第二與第三階段的產(chǎn)品，暫稱之為第四階段(未按發(fā)展順序編號)，該半成品培養(yǎng)基為不進(jìn)行最后的最終產(chǎn)品的分裝的培養(yǎng)基，即只分裝成一個相對合適的適用體積，供客戶保存、使用?？蛻羰褂脮r，不用滅菌、只需用水浴加熱、微波爐加熱等其它加熱方式將本品加熱融化或不加熱后，冷卻到適宜的溫度進(jìn)行分裝到無菌培養(yǎng)皿或其它容器中即可成為可以使用的最終產(chǎn)品。有益效果與現(xiàn)有的技術(shù)相比，本發(fā)明半成品培養(yǎng)基的優(yōu)點包括
(I)產(chǎn)品成本低，僅與干粉培養(yǎng)基價格持平，比成品培養(yǎng)基優(yōu)惠許多。(2)品質(zhì)穩(wěn)定可靠，從制備工藝到產(chǎn)品檢測，均由專業(yè)技術(shù)人才，充分保證了產(chǎn)品的質(zhì)量可靠、穩(wěn)定性；
(3)使用方便、高效，只需由大體積分裝成小體積就可以直接使用，非常方便，極大的提高了檢測人員的工作效率，從而為企業(yè)節(jié)約了原料、用人成本；
(4)貯存方便，無浪費冷藏資源，成品培養(yǎng)基在儲存時，有約占產(chǎn)品總體積的70%為多余空間，致使貯藏時，浪費了大量的冷藏資源，而本發(fā)明的半成品培養(yǎng)基，可以節(jié)約約70%的冷藏空間，極大的節(jié)省了成本和資源；
(5)無污染，采用瓶裝密封包裝，只要外包裝不破損，本品幾乎不會被污染，極大的降低了檢測事故的發(fā)生；
(6)產(chǎn)品適用范圍廣，能滿足客戶的使用需要，完全適合于國家現(xiàn)行法律法規(guī)，極大的使檢測方法、原理合法化，確保了檢測結(jié)果的法律效力。
具體實施例方式下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。實施例I
營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，配方為3g牛肉粉、IOg蛋白胨、15g瓊脂、5g氯化鈉、IL純水。配制IL營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 3±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成本品相應(yīng)規(guī)格的體積的產(chǎn)品(如200mL、250ml、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。 將制備的培養(yǎng)基熱融后分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌，生長良好，有黃色色素；大腸埃希菌，生長良好，透明菌落；銅綠假單胞菌，生長良好，有藍(lán)綠色色素。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將本品放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，在超凈工作臺上無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例2
胰蛋白胨大豆瓊脂(TSA)，配方為17g胰酪蛋白胨、3g大豆蛋白胨、2. 5g葡萄糖、2. 5g磷酸氫二鉀、15g瓊脂、5g氯化鈉、IL純水。配制IL胰蛋白胨大豆瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 3±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌，生長良好，有黃色色素；大腸埃希菌，生長良好，透明菌落；銅綠假單胞菌，生長良好，有藍(lán)綠色色素。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將本品放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，在超凈工作臺上無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例3
甘露醇氯化鈉瓊脂(甘露醇高鹽瓊脂)，配方為75g氯化鈉、IOg甘露醇、Ig牛肉粉、IOg蛋白胨、0. 5%酚紅溶液5mL、18g瓊脂、IL純水。配制IL甘露醇氯化鈉瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 5±0. 1，加入瓊脂。控溫121° C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌，生長良好，黃色菌落；表皮葡萄球菌，生長良好，紅色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。
制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，在超凈工作臺上無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例4
卵黃氯化鈉基礎(chǔ)培養(yǎng)基，配方為40g氯化鈉、8g蛋白胨、2. 4g牛肉浸粉、15g瓊脂、IL純水。配制IL卵黃氯化鈉基礎(chǔ)培養(yǎng)基，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 7±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，加入153mL 10%氯化鈉卵黃液，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取金黃色葡萄球菌標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌，生長良好，有乳濁環(huán)。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，在超凈工作臺上加入10%氯化鈉卵黃液,無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中,冷卻后即可使用。實施例5
血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基，配方為3g牛肉粉、IOg蛋白胨、15g瓊脂、5g氯化鈉、IL純水。配制IL血瓊脂礎(chǔ)培養(yǎng)基，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 3±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，加入50mL脫纖維綿羊血，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、表皮葡萄球菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌，生長良好，完全溶血；肺炎鏈球菌，生長良好，不完全溶血；表皮葡萄球菌生長良好，不溶血。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，在超凈工作臺上加入綿羊血，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例6 沙門、志賀菌屬瓊脂(SS瓊脂)，配方為10g乳糖、8. 5g枸櫞酸鈉、8. 5g硫代硫酸鈉、Ig枸櫞酸鐵銨、8. 5g豬膽鹽、5g牛肉粉、5g際胨、5mL0. 5%中性紅溶液、0. 33mL0. 1%煌綠溶液、15g瓊脂、IL純水。配制ILSS瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、中性紅溶液、煌綠溶液外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 0±0. 1，加入瓊脂、中性紅溶液、煌綠溶液?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取鼠傷寒沙門菌、福氏志賀菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24^48h后，得實驗結(jié)果為鼠傷寒沙門菌，生長良好，無色菌落，有黑色中心；福氏志賀菌，生長良好，無色半透明菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例7
麥康凱瓊脂(MAC瓊脂)，配方為5g氯化鈉、IOg乳糖、5g豬膽鹽、20g蛋白胨、3mLl%中性紅溶液、15g瓊脂、IL純水。配制ILMAC瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、中性紅溶液外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7.4±0. 1，加入瓊脂、中性紅溶液。控溫121°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50-55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取大腸埃希菌、鼠傷寒沙門菌、福氏志賀菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為大腸埃希菌，生長良好，粉紅色菌落；鼠傷寒沙門菌，生長良好，無色菌落；福氏志賀菌，生長良好，無色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例8
伊紅美藍(lán)瓊脂(EMB瓊脂)，配方為5g氯化鈉、IOg乳糖、3g牛肉粉、IOg蛋白胨、20mL2%伊紅溶液、IOmLO. 5%美藍(lán)溶液、15g瓊脂、IL純水。配制ILEMB瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 5±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取大腸埃希菌、鼠傷寒沙門菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為大腸埃希菌，生長良好，紫紅色菌落，有金屬光澤；鼠傷寒沙門菌，生長良好，灰白色半透明菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中,之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24^48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例9
中國藍(lán)瓊脂，配方為10g蛋白胨、5g氯化鈉、3g牛肉粉、IOg乳糖、0. 05g中國藍(lán)、0. I玫紅酸、15g瓊脂、IL純水。配制IL中國藍(lán)瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 5±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取大腸埃希菌、鼠傷寒沙門菌、福氏志賀菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為大腸埃希菌，生長良好，藍(lán)色菌落；鼠傷寒沙門菌，生長良好，無色或淡紅色菌落；福氏志賀菌，生長良好，無色或淡紅色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例10 玫瑰紅鈉瓊脂，配方為5g蛋白胨、IOg葡萄糖、0. 5g硫酸鎂、Ig磷酸二氫鉀、ImLl. 33%玫瑰紅鈉溶液、15g瓊脂、IL純水。配制IL玫瑰紅鈉瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為6. 4±0. 2，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C,分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取黑曲霉、白色念珠菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，28°C培養(yǎng)48-72h后，得實驗結(jié)果為黑曲霉，生長良好，白色菌落，有黑色孢子；白色念珠菌，生長良好，粉色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，28°C培養(yǎng)48_72h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例11
膽硫乳瓊脂(DHL瓊脂)，配方為10g乳糖、IOg蔗糖、Ig去氧膽酸鈉、2. 3g硫代硫酸鈉、Ig檸檬酸鈉、20g蛋白胨、3g牛肉粉、Ig檸檬酸鐵銨、6mL0. 5%中性紅溶液、15g瓊脂、IL純水。配制ILDHL瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、中性紅外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 4±0. 1，加入瓊脂、中性紅溶液?？販?15°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C,分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取鼠傷寒沙門菌、福氏志賀菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為鼠傷寒沙門菌，生長良好，有黑色中心；福氏志賀菌，良好，半透明菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例12
HE瓊脂，配方為12g乳糖、12g蔗糖、2g水楊素、9g豬膽鹽、5g氯化鈉、5g硫代硫酸鈉、
I.5g檸檬酸鐵銨、12g蛋白胨、3g酵母粉、20mL0. 5%酸性復(fù)紅溶液、16mL0. 4%溴麝香草酚藍(lán)溶液、15g瓊脂、IL純水。配制ILHE瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、酸性復(fù)紅、溴麝香草酚藍(lán)、檸檬酸鐵銨外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)PH為7. 6±0. 1，加入瓊脂、酸性復(fù)紅、溴麝香草酚藍(lán)，檸檬酸鐵銨單獨溶解、滅菌?？販?15°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C，將兩部分混合后分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C,分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取大腸埃希菌、鼠傷寒沙門菌、福氏志賀菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為大腸埃希菌，生長良好，橘紅色菌落；鼠傷寒沙門菌，生長良好，藍(lán)綠色菌落，有黑色中心；福氏志賀菌，生長良好，無色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例13
改良馬丁瓊脂，配方為0. 5g硫酸鎂、Ig磷酸氫二鉀、5g氯化鈉、2g酵母粉、5g蛋白胨、20g葡萄糖、15g瓊脂、IL純水。配制IL改良馬丁瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為6. 3±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。
將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取黑曲霉、白色念珠菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，28°C培養(yǎng)48-72h后，得實驗結(jié)果為黑曲霉，生長良好，白色菌落，有黑色孢子；白色念珠菌，生長良好，粉色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，28°C培養(yǎng)48_72h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即 可使用。實施例14
改良沙保羅瓊脂，配方為20g葡萄糖、IOg蛋白胨、0. Ig氯霉素、15g瓊脂、IL純水。配制IL改良沙保羅瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、氯霉素外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為5. 6±0. 2，加入瓊脂、氯霉素?？販?15°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C,分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取黑曲霉、白色念珠菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，28°C培養(yǎng)48-72h后，得實驗結(jié)果為黑曲霉，生長良好，白色菌落，有黑色孢子；白色念珠菌，生長良好，粉色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，28°C培養(yǎng)48_72h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例15
沙保羅瓊脂，配方為40g葡萄糖、IOg蛋白胨、0. Ig氯霉素、15g瓊脂、IL純水。配制IL沙保羅瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、氯霉素外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為6. 1±0. 1，加入瓊脂、氯霉素?？販?15°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50-55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取黑曲霉、白色念珠菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，28°C培養(yǎng)48-72h后，得實驗結(jié)果為黑曲霉，生長良好，白色菌落，有黑色孢子；白色念珠菌，生長良好，粉色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，28°C培養(yǎng)48_72h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量> 接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例16
M-H瓊脂，配方為3g氯化鈉、6g蛋白胨、17. 5g水解酪蛋白、1.5g可溶性淀粉、4g牛肉粉、15g瓊脂、IL純水。配制ILM-H瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 3±0. 1，加入瓊脂。控溫121°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C,分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌,生長良好,有黃色色素；大腸埃希菌，生長良好，透明菌落；銅綠假單胞菌，生長良好，有藍(lán)綠色色素。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例17
孟加拉紅(虎紅)瓊脂，配方為10g葡萄糖、5g蛋白胨、0. 5g硫酸鎂、Ig磷酸二氫鉀、0. 05g虎紅、0. Ig氯霉素、15g瓊脂、IL純水。配制IL虎紅瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、氯霉素、虎紅外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為6. 0±0. 2，加入瓊脂、氯霉素、虎紅?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50-55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取黑曲霉、白色念珠菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，28°C培養(yǎng)48-72h后，得實驗結(jié)果為黑曲霉，生長良好，白色菌落，有黑色孢子；白色念珠菌，生長良好，粉色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，28°C培養(yǎng)48_72h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例18
LB瓊脂,配方為10g氯化鈉、Ig葡萄糖、IOg胰蛋白胨、5g酵母粉、15g瓊脂、IL純水。配制IL LB瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 0±0. 1，加入瓊脂。控溫121°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌,生長良好,有黃色色素；大腸埃希菌，生長良好，透明菌落；銅綠假單胞菌，生長良好，有藍(lán)綠色色素。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。
制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例19
乳酸菌瓊脂(MRS瓊脂)，配方為10g蛋白胨、IOg牛肉粉、5g酵母粉、20g葡萄糖、Ig吐溫80、2g磷酸氫二鉀、5g醋酸鈉、2g枸櫞酸三銨、0. 2g硫酸鎂、0. 05g硫酸錳、15g瓊脂、IL純水。配制ILMRS瓊脂，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為6. 4±0. 2，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取保加利亞乳桿菌、嗜熱乳酸鏈球菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為保加利亞乳桿菌，生長良好；嗜熱乳酸鏈球菌，生長良好。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例20
溴化十六燒基三甲銨瓊脂，配方為5g牛肉粉、IOg蛋白胨、5g氯化鈉、0. 3g溴化十六燒 基三甲銨、15g瓊脂、IL純水。配制IL溴化十六烷基三甲銨瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、溴化十六烷基三甲銨外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)PH為7. 6±0. 1，加入瓊脂，溴化十六烷基三甲銨單獨溶解、滅菌?？販?15°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C，將兩部分混合后進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35 °C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為銅綠假單胞菌，生長良好，有藍(lán)綠色色素。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例21
平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，配方為5g胰蛋白胨、2.5g酵母浸膏、Ig葡萄糖、15g瓊脂、IL純水。配制IL平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 3±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、1000mL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的培養(yǎng)基熱融后分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌，生長良好，有黃色色素；大腸埃希菌，生長良好，透明菌落；銅綠假單胞菌，生長良好，有藍(lán)綠色色素。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈100cfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，在超凈工作臺上無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中，冷卻后即可使用。實施例22
營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，配方為3g牛肉粉、IOg蛋白胨、5g氯化鈉、IL純水。配制IL營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，按照上述配方取除瓊脂外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為7. 3±0. 1，加入瓊脂?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成本品相應(yīng)規(guī)格的體積的產(chǎn)品(如200mL、250ml、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。將制備的本品分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法分別取金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行加液接種，之后放入培養(yǎng)箱，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為金黃色葡萄球菌，生長良好，本品渾濁；大腸埃希菌，生長良好，本品渾濁；銅綠假單胞菌，生長良好，本品渾濁。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的3種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，350C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果。制備的培養(yǎng)基使用方法將本品取出，在超凈工作臺上無菌分裝到無菌試管中，即可使用。實施例23
玫瑰紅鈉瓊脂，配方為10g葡萄糖、5g蛋白胨、0. 5g硫酸鎂、Ig磷酸二氫鉀、13. 3mg玫瑰紅鈉、0. Ig氯霉素、15g瓊脂、IL純水。配制IL玫瑰紅鈉瓊脂，按照上述配方取除瓊脂、氯霉素、玫瑰紅鈉外各經(jīng)質(zhì)量檢測并合格的原料，采用機(jī)器攪拌進(jìn)行充分溶解，用PH計進(jìn)行產(chǎn)品檢測，確保維持微生物的良好生長環(huán)境，調(diào)節(jié)pH為6. 2±0. 2，加入瓊脂、氯霉素、玫瑰紅鈉?？販?21°C滅菌，滅菌15min。冷卻到50_55°C進(jìn)行分裝；分裝成所需體積的產(chǎn)品(如200mL、250mL、500mL、IOOOmL等)，包裝產(chǎn)品，成為最終產(chǎn)品；按照產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行各項的質(zhì)量檢測，確保產(chǎn)品質(zhì)量。其中，整個制備過程中均需確保無雜質(zhì)、異物進(jìn)入產(chǎn)品、各原料不能相互交叉污染、且容器具清洗潔凈。 將制備的培養(yǎng)基熱融后冷卻到50_55°C，分裝成成品，隨機(jī)抽樣進(jìn)行無菌、質(zhì)控菌和靈敏度(合稱生長試驗)檢測。無菌檢測方法為取制備的培養(yǎng)基放入培養(yǎng)箱中，35°C培養(yǎng)24 48h后，得實驗結(jié)果為無細(xì)菌生長。質(zhì)控菌的檢測方法取黑曲霉、白色念珠菌的標(biāo)準(zhǔn)菌株，在超凈工作臺上對制備的培養(yǎng)基進(jìn)行劃線接種，之后放入培養(yǎng)箱，28°C培養(yǎng)48-72h后，得實驗結(jié)果為黑曲霉，生長良好，白色菌落，有黑色孢子；白色念珠菌，生長良好，粉色菌落。靈敏度的檢測方法取預(yù)先定好濃度(〈lOOcfu/mL)的2種菌株(同質(zhì)控菌)的標(biāo)準(zhǔn)菌液分別滴加0. 5^1. OmL于成品中，之后放入培養(yǎng)箱中，28°C培養(yǎng)48_72h后，得實驗結(jié)果，生長現(xiàn)象同上述質(zhì)控結(jié)果，生長數(shù)量>接種數(shù)量的70%。制備的培養(yǎng)基使用方法將培養(yǎng)基放入水浴鍋或微波爐內(nèi)進(jìn)行加熱融化后取出，無菌分裝到無菌培養(yǎng)皿中， 冷卻后即可使用。
權(quán)利要求
1.一種半成品培養(yǎng)基，其特征在于所述的半成品培養(yǎng)基為不需滅菌即可直接使用的包裝體積大于使用時體積的的半成品培養(yǎng)基。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的半成品培養(yǎng)基，其特征在于所述的包裝體積為200mL、250ml、500mL 或 1000mL。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的半成品培養(yǎng)基，其特征在于所述的包裝體 積為IL以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的半成品培養(yǎng)基，其特征在于所述的半成品培養(yǎng)基包括:營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、胰蛋白胨大豆瓊脂、甘露醇氯化鈉瓊脂、卵黃氯化鈉基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血瓊脂基礎(chǔ)培養(yǎng)基、沙門、志賀菌屬瓊脂、麥康凱瓊脂、伊紅美藍(lán)瓊脂、中國藍(lán)瓊脂、玫瑰紅鈉瓊脂、膽硫乳瓊脂、瓊脂、改良馬丁瓊脂、改良沙保羅瓊脂、沙保羅瓊脂、M-H瓊脂、孟加拉紅瓊脂、LB瓊脂、乳酸菌瓊脂、溴化十六烷基三甲銨瓊脂、平板計數(shù)瓊脂培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯、玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基。
5.一種制備權(quán)利要求I所述的半成品培養(yǎng)基的方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)按配方取各原料，攪拌混合均勻，調(diào)節(jié)PH； (2)滅菌; (3)冷卻，分裝，抽樣檢測；產(chǎn)品包裝，冷藏。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種半成品培養(yǎng)基及其制備方法，所述的半成品培養(yǎng)基為不需滅菌即可直接使用的包裝體積大于使用時體積的半成品培養(yǎng)基。制備方法包括(1)按配方取各原料，攪拌混合均勻，調(diào)節(jié)pH；(2)滅菌；(3)冷卻，分裝，抽樣檢測；產(chǎn)品包裝，冷藏。本發(fā)明半成品培養(yǎng)基的優(yōu)點包括產(chǎn)品成本低，品質(zhì)穩(wěn)定可靠，使用方便、高效，貯存方便，無浪費冷藏資源，無污染，產(chǎn)品適用范圍廣，能滿足客戶的使用需要。
文檔編號C12N1/00GK102634457SQ20121013008
公開日2012年8月15日 申請日期2012年4月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月28日
發(fā)明者徐長欣 申請人:徐長欣