專利名稱：一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)l-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的生產(chǎn)，尤其是涉及一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法。
背景技術(shù)：
在生物體內(nèi)，L-鳥(niǎo)氨酸主要參與尿酸循環(huán)，對(duì)于體內(nèi)氨態(tài)氮的排出有重要作用。 L-鳥(niǎo)氨酸可作為原料藥外，還可作為食品和保健品的添加劑。近年來(lái)，L-鳥(niǎo)氨酸在食品工業(yè)和醫(yī)藥工業(yè)上的應(yīng)用日益廣泛。由于L-鳥(niǎo)氨酸鹽類在體內(nèi)經(jīng)氧化酶等轉(zhuǎn)化最后轉(zhuǎn)變呈L-鳥(niǎo)氨酸，容易被身體吸收，所以L-鳥(niǎo)氨酸一般都做成L-鳥(niǎo)氨酸鹽類。近年來(lái)美國(guó)有關(guān)方面研究發(fā)現(xiàn)，氨基酸的硝酸鹽更有利于氨基酸在體內(nèi)的吸收，因此將L-鳥(niǎo)氨酸制作成呢個(gè)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽服用， 將更容易在體內(nèi)轉(zhuǎn)化成L-鳥(niǎo)氨酸，被身體吸收，其使用時(shí)劑量會(huì)更小，吸收好，組織分布更廣。但是目前世界上還沒(méi)有見(jiàn)能工業(yè)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽產(chǎn)品的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的就是提供一種成本低、高質(zhì)量、高收率的、可工業(yè)化生產(chǎn)的酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法。本發(fā)明的目的可以通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂，用碳酸鉀溶液浸泡6_18h、過(guò)濾，濾干后加入碳酸鉀溶液和溴化鉀溶液，于冰浴中反應(yīng)5-60min，采用冷碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7_10，再加入精氨酸酶溶液，于1-10°C反應(yīng)12-4 ，再依次用碳酸氫鈉、氯化鈉、去離子水洗滌，最后用飽和食鹽水浸泡0. 5-3h，再洗凈即制得固定化酶，保存于水中；所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為1 (0.3-1.4) (0.1-1.4) (0. 001-0 01)；(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比 1 (1-3) (0.002-0.008)混合，溶于去離子水中，采用硝酸調(diào)節(jié)pH值至5-6，在30-50°C 下，攪拌反應(yīng)6-10h，過(guò)濾；(3) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化在步驟(2)過(guò)濾得到的濾液中加入活性炭，用硝酸調(diào)節(jié)pH值至2-5. 5，于40_90°C 下攪拌反應(yīng)5-30min后，過(guò)濾，將濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入乙醇，攪拌 0. 5-池，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，過(guò)濾、干燥即得產(chǎn)品。步驟(1)所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為 1 (0. 35-0. 55) (0. 4-1) (0. 008-0. 01)。
步驟⑴所述的碳酸鉀溶液的摩爾濃度為1-5M，溴化鉀是質(zhì)量濃度為l_4g/ml的溶液，所述的精氨酸酶是質(zhì)量濃度為l_4g/l的溶液，所述的冷碳酸氫鈉溶液的摩爾濃度為 0.05-2M。步驟(1)所述的洗滌是依次利用0. 05-0. 3M的碳酸氫鈉溶液，0. 5_4M的氯化鈉溶液和去離子水各洗滌2-5次，每次用量為100-400ml。步驟(1)所述的飽和食鹽水的加入量以能浸沒(méi)固定化酶為準(zhǔn)。步驟⑵所述的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比 1 (1.4-1.6) (0.004-0.006)。步驟⑵所述的硝酸的加入量根據(jù)pH值確定。步驟⑵所述的攪拌反應(yīng)的攪拌速度為60_200rpm。所述的步驟(3)中活性炭的加入量為l_6g/100ml濾液。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有生產(chǎn)成本低、生產(chǎn)條件溫和、轉(zhuǎn)化體系中雜質(zhì)較少、 工藝步驟簡(jiǎn)單、生產(chǎn)操作安全等優(yōu)點(diǎn)，采用本發(fā)明生產(chǎn)的L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽純度高，產(chǎn)量高， 每升溶液中含有100g-130g的L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽。精氨酸的轉(zhuǎn)化率可達(dá)到95%以上。L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽是重要的醫(yī)藥工業(yè)基礎(chǔ)原料，是細(xì)胞中重要的代謝產(chǎn)物，對(duì)于生物體內(nèi)液態(tài)氨的排除有重要的調(diào)節(jié)作用。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。實(shí)施例1一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，該方法包括如下步驟1、固定化酶的制法(1)原料用量三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂50g精氨酸酶400mg飽和食鹽水以能浸沒(méi)固酶為準(zhǔn)(2)操作過(guò)程將三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂50g，用2M碳酸鉀溶液浸泡12h，過(guò)濾。濾干后，加入 100ml2M碳酸鉀溶液，于冰浴下加入IOml溴化鉀(2g/ml)于冰浴下反應(yīng)15分鐘，用冷0. IM 碳酸氫鈉洗至PH = 8. 5，加入精氨酸酶溶液100ml (約400mg) 4°C反應(yīng)Mh。依次用0. IM碳酸氫鈉、IM氯化鈉、去離子水洗滌3次，每次200ml。用飽和食鹽水浸泡固化酶1小時(shí)，洗凈至檢測(cè)不出氯離子，保存于水中，備用。2、L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備備料精氨酸80g
濕固酶50g
純水160g
乙酸錳0.3g
硝酸根據(jù)pH確定用量在上述條件下，將步驟(1)中制得的固定化酶(濕固酶)50g與精氨酸80g、乙酸錳0. 3g混合，溶于160g純水中，采用硝酸調(diào)節(jié)pH值至5. 0 5. 5，在40_42°C下，攪拌反應(yīng) 10小時(shí)；精氨酸轉(zhuǎn)化率達(dá)到95 98%。每升反應(yīng)液中含約130g L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽。反應(yīng)結(jié)束后，過(guò)濾，濾餅(固相酶)保存于水中，下次備用。3、L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化在步驟⑵反應(yīng)結(jié)束過(guò)濾后的濾液中加入3g活性炭，硝酸調(diào)節(jié)pH = 3.1，70°C保溫?cái)嚢?0分鐘，過(guò)濾，濾液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入200ml乙醇，攪拌1小時(shí)，析出的L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽經(jīng)過(guò)濾，洗滌干燥，得65gL-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，收率81. 25% (w/w)。實(shí)施例2(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂40g，用摩爾濃度為IM的碳酸鉀溶液浸泡他后過(guò)濾，濾干后，加入摩爾濃度為IM的碳酸鉀溶液10ml，質(zhì)量濃度為lg/ml的溴化鉀溶液5ml于冰浴條件下反應(yīng)5min，用摩爾濃度為0. 05M的碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至7，再加入質(zhì)量濃度為lg/Ι的精氨酸酶溶液50ml，于IV反應(yīng)12h，依次用摩爾濃度為0. 05M的碳酸氫鈉溶液100ml、0. 5M的氯化鈉溶液100ml、去離子水IOOml洗滌2次，最后用飽和食鹽水浸泡 0.證，洗凈即制得固定化酶，保存于水中；(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 1.4 0.004混合溶于IOOml去離子水中，利用硝酸調(diào)節(jié)溶液pH值至5. 0-5. 5，在30°C，攪拌速度60rpm的條件下，攪拌反應(yīng)10h，得到混合液；(3)產(chǎn)物提取和精制將步驟O)中制得的反應(yīng)液進(jìn)行過(guò)濾，向?yàn)V液中加入Ig活性炭，控制溶液pH = 4. 5，反應(yīng)溫度40°C，攪拌5min后過(guò)濾，濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入120ml乙醇，繼續(xù)攪拌0. 5h，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，經(jīng)過(guò)濾，干燥后得到62g，L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽收率 77. 5% (w/w)。實(shí)施例3(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂50g，用摩爾濃度為2M碳酸鉀溶液浸泡1 后過(guò)濾， 濾干后，加入摩爾濃度為2M的碳酸鉀溶液100ml，質(zhì)量濃度為2g/ml的溴化鉀溶液IOml于冰浴條件下反應(yīng)15min，用摩爾濃度為0. IM的碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至8. 5，再加入質(zhì)量濃度為4g/L的精氨酸酶溶液100ml，于4V反應(yīng)Mh，依次用摩爾濃度為0. IM的碳酸氫鈉溶液200ml、摩爾濃度為IM的氯化鈉溶液200ml、去離子水200ml洗滌3次，最后用飽和食鹽水浸泡lh，洗凈即制得固定化酶，保存于水中；(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 1.4 0.008混合溶于120ml去離子水中，利用硝酸調(diào)節(jié)溶液pH值至7. 5，在40°C，攪拌速度60rpm的條件下， 反應(yīng)他，得到混合液；(3) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化將步驟⑵中制得的混合液進(jìn)行過(guò)濾，向?yàn)V液中加入2g活性炭，控制溶液pH = 2， 反應(yīng)溫度50°C，攪拌IOmin后過(guò)濾，濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入150ml乙醇， 繼續(xù)攪拌1.證，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，經(jīng)過(guò)濾，干燥后得到60g，L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽收率75% (w/w)ο實(shí)施例4(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂60g，用摩爾濃度為5M碳酸鉀溶液浸泡1 后過(guò)濾， 濾干后，加入摩爾濃度為4M的碳酸鉀溶液150ml，質(zhì)量濃度為4g/ml的溴化鉀溶液20ml于冰浴條件下反應(yīng)40min，用摩爾濃度為2M的碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)溶液pH值至10，再加入質(zhì)量濃度為2g/l的精氨酸酶溶液200ml，于8°C反應(yīng)48h，依次用摩爾濃度為0. 3M的碳酸氫鈉溶液400ml、摩爾濃度為4M的氯化鈉溶液400ml、去離子水400ml洗滌5次，最后用飽和食鹽水浸泡池，洗凈即制得固定化酶，保存于水中；(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 1.4 0.02混合溶于200ml去離子水中，利用硝酸調(diào)節(jié)溶液pH值至5. 5，在50°C，攪拌速度60rpm的條件下， 攪拌反應(yīng)他，得到混合液；(3) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化將步驟⑵中制得的混合液進(jìn)行過(guò)濾，向?yàn)V液中加入6g活性炭，控制溶液pH = 6，反應(yīng)溫度90°C，攪拌30min后過(guò)濾，濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入500ml乙醇，繼續(xù)攪拌3h，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，經(jīng)過(guò)濾，干燥后得到57g，L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽收率 71. 25% (w/w)。實(shí)施例5一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，該方法包括如下步驟(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂，用摩爾濃度為IM碳酸鉀溶液浸泡18h、過(guò)濾，濾干后加入摩爾濃度為IM碳酸鉀溶液和質(zhì)量濃度為lg/ml溴化鉀溶液，于冰浴中反應(yīng)60min， 采用摩爾濃度為0. 05M冷碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7，再加入質(zhì)量濃度為lg/Ι的精氨酸酶溶液，于1°C反應(yīng)48h，再依次用0. 05M碳酸氫鈉100ml、0. 5M氯化鈉100ml、去離子水洗滌100ml，最后用飽和食鹽水浸泡0.證，飽和食鹽水的加入量以能浸沒(méi)固定化酶為準(zhǔn)，再洗凈至檢測(cè)不出氯離子即制得固定化酶，保存于水中；所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為1 0.3 0. 1 0.001 ；(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 1 0.002混合，溶于去離子水中，采用硝酸調(diào)節(jié)PH值至5，在30°C下，攪拌反應(yīng)10h，攪拌速度為60rpm，過(guò)濾；(3) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化在步驟( 過(guò)濾得到的濾液中加入活性炭，活性炭的加入量為lg/100ml濾液，用硝酸調(diào)節(jié)PH值至2，于40°C下攪拌反應(yīng)30min后，過(guò)濾，將濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入乙醇，攪拌0.證，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，過(guò)濾、干燥即得產(chǎn)品。實(shí)施例6一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，該方法包括如下步驟(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂，用摩爾濃度為5M碳酸鉀溶液浸泡18h、過(guò)濾，濾干后加入摩爾濃度為5M碳酸鉀溶液和質(zhì)量濃度為4g/ml溴化鉀溶液，于冰浴中反應(yīng)60min，采用摩爾濃度為2M冷碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至10，再加入質(zhì)量濃度為4g/l的精氨酸酶溶液，于10°C反應(yīng)48h，再依次用0. 3M碳酸氫鈉400ml、4M氯化鈉400ml、去離子水洗滌400ml， 最后用飽和食鹽水浸泡池，飽和食鹽水的加入量以能浸沒(méi)固定化酶為準(zhǔn)，再洗凈至檢測(cè)不出氯離子即制得固定化酶，保存于水中；所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為1 1.4 1.4 0.01 ；(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 3 0.008混合，溶于去離子水中，采用硝酸調(diào)節(jié)PH值至6，在50°C下，攪拌反應(yīng)他，攪拌速度為200rpm，過(guò)濾；(3) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化在步驟( 過(guò)濾得到的濾液中加入活性炭，活性炭的加入量為6g/100ml濾液，用硝酸調(diào)節(jié)PH值至5. 5，于90°C下攪拌反應(yīng)5min后，過(guò)濾，將濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入乙醇，攪拌池，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，過(guò)濾、干燥即得產(chǎn)品。實(shí)施例7一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，該方法包括如下步驟(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂，用摩爾濃度為2M碳酸鉀溶液浸泡10h、過(guò)濾，濾干后加入摩爾濃度為2M碳酸鉀溶液和質(zhì)量濃度為2g/ml溴化鉀溶液，于冰浴中反應(yīng)20min，采用摩爾濃度為0. IM冷碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至80，再加入質(zhì)量濃度為2g/l的精氨酸酶溶液，于5°C反應(yīng)Mh，再依次用0. IM碳酸氫鈉200ml、IM氯化鈉200ml、去離子水洗滌200ml， 最后用飽和食鹽水浸泡lh，飽和食鹽水的加入量以能浸沒(méi)固定化酶為準(zhǔn)，再洗凈至檢測(cè)不出氯離子即制得固定化酶，保存于水中；所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為1 0.35 0.4 0.008;(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 1.4 0.004混合， 溶于去離子水中，采用硝酸調(diào)節(jié)pH值至5，在30°C下，攪拌反應(yīng)6h，攪拌速度為80rpm，過(guò)濾；(3) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化在步驟( 過(guò)濾得到的濾液中加入活性炭，活性炭的加入量為3g/100ml濾液，用硝酸調(diào)節(jié)PH值至3，于50°C下攪拌反應(yīng)IOmin后，過(guò)濾，將濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入乙醇，攪拌lh，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，過(guò)濾、干燥即得產(chǎn)品。實(shí)施例8一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，該方法包括如下步驟(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂，用摩爾濃度為3M碳酸鉀溶液浸泡12h、過(guò)濾，濾干后加入摩爾濃度為3M碳酸鉀溶液和質(zhì)量濃度為3g/ml溴化鉀溶液，于冰浴中反應(yīng)30min， 采用摩爾濃度為IM冷碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至9，再加入質(zhì)量濃度為3g/l的精氨酸酶溶液，于3°C反應(yīng)36h，再依次用0. 2M碳酸氫鈉300ml、2M氯化鈉300ml、去離子水洗滌300ml， 最后用飽和食鹽水浸泡池，飽和食鹽水的加入量以能浸沒(méi)固定化酶為準(zhǔn)，再洗凈至檢測(cè)不出氯離子即制得固定化酶，保存于水中；所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為1 0.55 1 0.01 ；(2) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 1.6 0.006混合， 溶于去離子水中，采用硝酸調(diào)節(jié)pH值至5，在50°C下，攪拌反應(yīng)10h，攪拌速度為200rpm，過(guò)濾；(3) L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化在步驟( 過(guò)濾得到的濾液中加入活性炭，活性炭的加入量為5g/100ml濾液，用硝酸調(diào)節(jié)PH值至5.5，于90°C下攪拌反應(yīng)30min后，過(guò)濾，將濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入乙醇，攪拌池，析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，過(guò)濾、干燥即得產(chǎn)品。
權(quán)利要求
1.一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，該方法包括如下步驟(1)固定化酶的制備取三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂，用碳酸鉀溶液浸泡6-18h、過(guò)濾，濾干后加入碳酸鉀溶液和溴化鉀溶液，于冰浴中反應(yīng)5-60min，采用冷碳酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)pH值至7_10，再加入精氨酸酶溶液，于1-10°C反應(yīng)12-48h，再依次用碳酸氫鈉、氯化鈉、去離子水洗滌，最后用飽和食鹽水浸泡0. 5-3h，再洗凈即制得固定化酶，保存于水中；所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為1 (0.3-1.4) (0.1-1.4) (0. 001-0.01) (2)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備將步驟(1)中制得的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 (1-3) (0. 002-0. 008) 混合，溶于去離子水中，采用硝酸調(diào)節(jié)PH值至5-6，在30-50°C下，攪拌反應(yīng)6_10h，過(guò)濾；(3)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化在步驟(2)過(guò)濾得到的濾液中加入活性炭，用硝酸調(diào)節(jié)pH值至2-5. 5，于40-90°C下攪拌反應(yīng)5-30min后，過(guò)濾，將濾出液濃縮至有結(jié)晶析出，停止?jié)饪s，加入乙醇，攪拌0. 5_3h， 析出L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽，過(guò)濾、干燥即得產(chǎn)品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，步驟 (1)所述的三乙醇胺陰離子苯乙烯樹(shù)脂與碳酸鉀、溴化鉀、精氨酸酶的質(zhì)量比為1 (0.35-0. 55) (0. 4-1) (0. 008-0. 01)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，步驟 (1)所述的碳酸鉀溶液的摩爾濃度為1-5M，溴化鉀是質(zhì)量濃度為l-4g/ml的溶液，所述的精氨酸酶是質(zhì)量濃度為l_4g/l的溶液，所述的冷碳酸氫鈉溶液的摩爾濃度為0. 05-2M。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，步驟 (1)所述的洗滌是依次利用0. 05-0. 3M的碳酸氫鈉溶液，0. 5-4M的氯化鈉溶液和去離子水各洗滌2-5次，每次用量為100-400ml。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，步驟(1)所述的飽和食鹽水的加入量以能浸沒(méi)固定化酶為準(zhǔn)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，步驟(2)所述的固定化酶與精氨酸、乙酸錳按質(zhì)量比1 (1.4-1.6) (0.004-0.006)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，步驟 (2)所述的硝酸的加入量根據(jù)pH值確定。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，步驟 (2)所述的攪拌反應(yīng)的攪拌速度為60-200rpm。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，其特征在于，所述的步驟(3)中活性炭的加入量為l_6g/100ml濾液。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的方法，該方法包括如下步驟(1)固定化酶的制備；(2)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的制備；(3)L-鳥(niǎo)氨酸硝酸鹽的分離純化。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有成本低、收率高、產(chǎn)品質(zhì)量高、可工業(yè)化生產(chǎn)等優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C12P13/10GK102277395SQ20111022485
公開(kāi)日2011年12月14日 申請(qǐng)日期2011年8月5日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月5日
發(fā)明者蘇建勇, 鄭南華, 陳雷 申請(qǐng)人:上海漢飛生化科技有限公司