專利名稱：一種含嗜酸乳桿菌和中藥的組合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種含嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，該組合物可作為保健品或藥品， 適于長期食用，主要用于防治抗生素相關(guān)腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群、保護腸粘膜和增強免疫力。
背景技術(shù)：
抗生素相關(guān)腹瀉(antibiotic-associated diarrhea, AAD)是抗生素治療最常見 的不良反應(yīng)。接受抗生素治療者5% 25%會發(fā)生抗生素相關(guān)腹瀉。隨著抗生素應(yīng)用的日 益廣泛，AAD病例逐年增多。此種腸源性感染僅以常規(guī)抗生素治療不但難以治愈，而且可能 引發(fā)更進一步的菌群失調(diào)，導(dǎo)致病情惡化和蔓延，嚴重者可發(fā)展至菌血癥，甚至死亡。AAD的 發(fā)病致病機理尚不明確，但這種腹瀉與腸道菌群在數(shù)量和種類上的變化直接相關(guān)。腸道菌 群是構(gòu)筑腸道粘膜屏障的主要組成部分，在維持腸道功能及機體的健康方面發(fā)揮著重要的 生理意義。在大量應(yīng)用廣譜抗生素、嚴重燒傷、外科急重癥或腸炎等慢性疾病時，由正常菌 群所組成的防御機制會遭到嚴重破壞，導(dǎo)致腸道菌群失調(diào)，腸道屏障功能損害，腸腔中的大 量細菌及其內(nèi)毒素由腸系膜淋巴結(jié)進入內(nèi)臟器官及體循環(huán)，引起菌血癥、膿毒血癥等重癥 感染。微生態(tài)制劑作為一種有效的抗生素替代品，通過“以菌治菌”的原理，改善腸道微 生態(tài)平衡，對急慢性腹瀉和抗生素引起的腸道菌群失調(diào)有一定的預(yù)防和治療作用。正常情 況下，腸道含有大約30屬500種細菌，主要由厭氧菌、兼性厭氧菌和需氧菌組成。這些菌 種在種類及數(shù)量上的相對恒定是維持腸道細菌微生態(tài)平衡的基礎(chǔ)，同時也影響著人體的免 疫、營養(yǎng)、代謝等功能。益生菌(probiotie)是指能夠促進腸道內(nèi)菌群生態(tài)平衡，對宿主起 有益作用的活菌制劑。目前應(yīng)用較多是雙歧桿菌和乳酸桿菌。益生元(prebiotie)指選擇 性促進宿主腸道原有的一種或幾種有益細菌(益生菌)生長繁殖，而不被宿主消化的物質(zhì)。 低聚異麥芽糖(IMO)是近年來備受關(guān)注的一種新型益生元，由α — 1，6糖苷鍵結(jié)合異麥芽 糖、潘糖和異麥芽三糖組成。由于人體內(nèi)不具有分解α — 1，6糖苷鍵的酶，所以不被人體 直接吸收利用，因此可以直接到達腸道，被雙歧桿菌、乳酸桿菌所利用，刺激其增殖，而腸內(nèi) 有害菌則很難利用它們。合生元可以理解為是益生菌和益生元的混合物，但其功效并不僅 僅是益生菌和益生元的作用之和，益生元的加入可以促進益生菌在腸道的定植和存活，起 到“定植佐劑”的作用，使益生菌能夠更好的發(fā)揮生理作用，進一步加強了對宿主健康的調(diào) 節(jié)作用。有研究顯示益生菌制劑可以調(diào)節(jié)腸道菌群失調(diào)、維持腸道正常生理功能；可促進燙 傷大鼠、急性肝損傷大鼠受損腸粘膜屏障修復(fù)，有效防治腸道菌群或內(nèi)毒素易位。一個高質(zhì) 量的益生菌制品在菌株的選擇上應(yīng)滿足以下基本要求1.是人體正常菌群成員或是能調(diào) 節(jié)體內(nèi)正常菌群平衡，對人體無毒無害的外來菌；2.具有較強的細胞粘附性；3.能夠耐受 強酸、高膽鹽環(huán)境；4.能保持穩(wěn)定的活菌狀態(tài)，適用于大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)的菌種。嗜酸乳桿菌是乳酸桿菌的一種，是腸道主要益生菌，能幫助腸道抵御疾病并維持 腸道正常功能，是重要的健康促進因子，既能抑制外來有害菌的生長，又能促進腸道內(nèi)有益 菌群的生長繁殖，有利于維持腸道內(nèi)微生態(tài)平衡。嗜酸乳桿菌活菌對腸粘膜細胞有強大的粘附作用，能有效定植于腸壁，阻止致病菌對腸粘膜細胞的侵襲。其代謝產(chǎn)物具有廣譜抗菌 活性，對引起腹瀉的多種致病菌均有抑制作用，對嬰幼兒和成人腹瀉有良好療效。筆者通過大量試驗篩選了一株具有較強耐酸、耐膽鹽，并有較好粘附性的嗜酸乳 桿菌Lacidophilus 1. 1878，并通過試驗證實，該菌株聯(lián)合低聚異麥芽糖等益生元制成的腸 溶膠囊，可以耐受胃酸的侵襲，直接抵達腸道，嗜酸乳桿菌在腸壁定植，抑制有害菌的增長， 低聚異麥芽糖等益生元選擇性促進雙歧桿菌、乳桿菌等有益菌的增殖，長期服用可以有效 調(diào)節(jié)腸道微生態(tài)環(huán)境，對腸道菌群和腸粘膜屏障具有良好的調(diào)節(jié)和保護作用，有效預(yù)防抗 生素相關(guān)腹瀉的發(fā)生。目前國內(nèi)尚無相關(guān)文獻及專利報道。益生菌與中藥聯(lián)合應(yīng)用是益生菌的發(fā)展方向，將多功能益生菌與多功能藥食同源 中草藥復(fù)配組合，研制具有中藥和益生菌雙重作用的益生菌中藥組合物，不僅具有天然、多 營養(yǎng)、多功能等特性，而且健康、安全、適用人群廣。經(jīng)常食用，對增強機體免疫力，預(yù)防常見 疾病的發(fā)生，提高身體健康有重要作用。對進一步開發(fā)和有效利用我國豐富的中藥資源，研 制具有我國自主知識產(chǎn)權(quán)的系列特色功能性食品、乳品、藥品或微生態(tài)調(diào)節(jié)劑，具有重要而 深遠的理論和實踐意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于嗜酸乳桿菌(L acidophilus 1. 1878)在防治抗生素相關(guān)腹瀉 方面的應(yīng)用，以及用于調(diào)節(jié)人體腸道菌群和保護腸粘膜方面的應(yīng)用。本發(fā)明的另一目的在于提供一種含益生菌和中草藥的組合物，尤其是嗜酸乳桿菌 和中草藥的組合物。該組合物不含任何人工合成色素、激素、甜味素、鮮味素和防腐劑，不含 任何違禁藥物，安全無毒。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)的一種嗜酸乳桿菌(L acidophilus 1. 1878)菌株；所述菌株是由中國科學院微生 物所菌種庫提供，經(jīng)試驗驗證是一株耐酸、耐膽鹽，具有較高粘附性的益生菌。一種含嗜酸乳桿菌(L acidophilus 1. 1878)和中草藥的組合物，其特征在于采用 嗜酸乳桿菌、中草藥、低聚糖、輔料組成復(fù)合配方。所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的 合物，其特征在于按照重量百分比計，該組合 物中嗜酸乳桿菌用量范圍為1_20%，益生元用量范圍為15-30%，中藥用量范圍為1-10%， 其余為食品輔料。所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于嗜酸乳桿菌為L acidophilus 1. 1878。所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于該組合物中益生元包括低聚 異麥芽糖，低聚果糖，大豆低聚糖中的一種或多種。所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于該組合物中中藥包括山楂6 份、茯苓9份、白術(shù)6份、甘草6份。所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于該組合物中輔料包括脫脂奶 粉、乳糖、山梨醇、谷氨酸鈉中的一種或多種。所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，在防治抗 素相關(guān)腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群、 保護腸粘膜方面的保健品或藥物方面的應(yīng)用。

圖1各組小腸粘膜形態(tài)學改變(HE染色，X 100)A 正常對照組粘膜無充血、水腫，上皮完好，絨毛形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，排列規(guī)整；B:模 型組粘膜糜爛，局部上皮細胞壞死、脫落，絨毛排列紊亂、稀疏；C 自然恢復(fù)組粘膜輕度充 血、水腫，部分上皮細胞壞死、脫落，絨毛排列較規(guī)整；D 合生元低劑量組粘膜水腫，部分 上皮細胞壞死、脫落，絨毛排列較規(guī)整；E 合生元中劑量組粘膜輕度水腫，僅少量上皮細 胞壞死、脫落，絨毛排列較規(guī)整；F 合生元高劑量組粘膜無水腫，上皮細胞修復(fù)完好，絨毛 形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，排列規(guī)整，高度增加
具體實施例方式下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明實施例1 形態(tài)及染色肉眼觀察MRS平板上菌落形態(tài)；調(diào)取單一菌落涂片，革蘭氏染色，鏡下觀察。結(jié)果 菌落無色，直徑0. 5-2. Omm ；鏡檢見革蘭氏染色陽性，無芽孢桿菌，呈短鏈排列。根據(jù)培養(yǎng)及 形態(tài)染色可初步判定為乳酸桿菌。實施例2:生化反應(yīng)a.配制無糖MRS培養(yǎng)基；b.將乳糖、半乳糖、蔗糖、甘露糖、甘露醇、山梨醇、麥芽糖、海藻糖、鼠李糖、葡萄糖 以0. 22 μ m微孔濾膜過濾后，按2 %的比例分別添加至上述無糖MRS培養(yǎng)基中，制成改良 MRS培養(yǎng)基；c.每IOmL改良培養(yǎng)基中加入溴甲酚紫0. 5ml，作為指示劑；d.取L. acidophilus對數(shù)生長期培養(yǎng)液，接種于上述各培養(yǎng)基中，37°C厭氧培養(yǎng) 36小時，觀察發(fā)酵情況。結(jié)果判斷指示劑由紫色變?yōu)辄S色為陽性，綠色為弱陽性。生化反應(yīng)結(jié)果表1L. acidophilus生化反應(yīng)結(jié)果
種名 乳糖半乳糖庶糖甘露糖甘露醇山梨醇麥芽糖海藻糖 鼠李糖葡萄糖L. acidophil +土 ++ — 一 ± + - +us 1. 1878實施例3 嗜酸乳桿菌(L acidophilus 1. 1878)耐酸性能評價將嗜酸乳桿菌(L acidophilus 1. 1878)的對數(shù)生長期培養(yǎng)液以2500r/min離心 5min,棄上清，以無菌PBS緩沖液洗滌菌體3次，調(diào)菌濃度為108CFU/mL，將菌株接種于人工 胃液中，用HCl和0. Imol .L—1的NaOH if ρΗ為2· 0、3· 0、4· 0，置37°C厭氧培養(yǎng)箱中孵育，分 別于第60、90、180min，取ImL菌懸液，作活菌記數(shù)，ρΗ為6. 2的菌懸液作為Omin正常對照， 計算在各PH條件下菌株的存活率。Omin的濃度為菌懸液濃度X 1/20 (ml)。結(jié)果由表2可以看出，在ρΗ為2.0時，嗜酸乳桿菌(L acidophilus 1. 1878)的活 菌數(shù)隨著時間的延長呈漸進性降低，處理Ih后存活率達46. 5%,3h存活率降低到36. ；在pH為3.0時，嗜酸乳桿菌(L acidophilus 1.1878)的活菌數(shù)基本保持不變，在pH為4. 0 時，菌株在3h內(nèi)均保持較穩(wěn)定的存活率，略有增殖。表2嗜酸乳桿菌L acidophilus 1. 1878在不同PH胃液中的存活細菌數(shù)量log cfu/ml
權(quán)利要求
一種含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于采用嗜酸乳桿菌(L acidophilus1.1878)、益生元、中藥、輔料組成的復(fù)合配方，按照重量百分比計，該組合物中嗜酸乳桿菌用量范圍為1 20％，益生元用量范圍為15 30％，中藥用量范圍為1 10％，其余為食品輔料。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于該組合物中益 生元包括低聚異麥芽糖，低聚果糖，大豆低聚糖中的一種或多種。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于該組合物中中 藥包括山楂6份、茯苓9份、白術(shù)6份、甘草6份。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含有嗜酸乳桿菌和中藥的組合物，其特征在于該組合物中輔 料包括脫脂奶粉、乳糖、山梨醇、谷氨酸鈉中的一種或多種。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4之一的組合物，可應(yīng)用在抑制抗生素相關(guān)腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群、保 護腸粘膜方面的保健品或藥物方面。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種含嗜酸乳桿菌和中藥的組合物及其應(yīng)用，所用嗜酸乳桿菌L acidophilus 1.1878具有較強耐酸、耐膽鹽特性，并有較好粘附性。該組合物中含有嗜酸乳桿菌L acidophilus 1.1878，還含有低聚糖和中草藥等。該組合物可作為食品、保健品或藥品，適于長期食用，主要用于防治抗生素相關(guān)腹瀉、調(diào)節(jié)腸道菌群、保護腸粘膜和增強免疫力。
文檔編號A23L1/28GK101953916SQ201010279440
公開日2011年1月26日 申請日期2010年9月13日 優(yōu)先權(quán)日2010年9月13日
發(fā)明者張彥, 杜丹, 王曉東 申請人:杜丹