專利名稱：一種納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于發(fā)酵工程技術(shù)和副產(chǎn)物綜合利用領(lǐng)域，具體涉及一種以碎米、豆粕和 麩皮為原料制備的納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
納他霉素是一種能有效地抑制和殺死霉菌和酵母菌的多烯烴大環(huán)內(nèi)酯類的抗菌 物質(zhì)。納他霉素對人畜無致癌、致畸和致敏等有害作用，很難被人畜的消化道吸收，美國 食品藥品管理局已于1982年正式批準(zhǔn)納他霉素可在食品中作為安全的生物防腐劑廣泛應(yīng) 用。但目前納他霉素發(fā)酵培養(yǎng)基均為采用商品化的葡萄糖、蛋白胨、酵母浸粉和無機(jī)鹽等 配制而成，生產(chǎn)成本較高，導(dǎo)致納他霉素出售價(jià)格高，這在一定程度上制約了納他霉素的應(yīng) 用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基，用于解決目前納他霉素的發(fā)酵 培養(yǎng)基主要以商品化的化學(xué)藥劑配制而成，成本較高的問題。本發(fā)明解決其技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是一種納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基采用碎 米糖化液、豆粕水解液、麩皮浸提液配制而成，培養(yǎng)基初始PH為7. 0 7. 5，上述各組分按重 量百分比計(jì)為10 30%的碎米糖化液，10 25%的豆粕水解液，2 5%的麩皮浸提液， 余量為水；碎米糖化液通過將碎米加4 10倍(按重量計(jì))水磨漿，蒸煮后用10 50U/g 耐高溫a -淀粉酶85 95°C液化10 30min，冷卻至60 70°C，添加碎米和水總重量的 0. 5 2%。的氯化鈣，50 200U/g 0 -淀粉酶50 60°C進(jìn)行糖化5 20h制成；豆粕水解液通過將豆餅粉加5 10倍(按重量計(jì))水浸泡2 3h后，磨漿，蒸煮 后加入500 2000U/g蛋白酶40 55°C水解4 10h制成；麩皮浸提液通過將麩皮加4 8倍(按重量計(jì))水，40°C浸泡4 10h，取上清液 制成。上述方案中碎米磨漿的過程為將碎米加水浸泡、淘洗后，浸米2 3h，使手感酥 軟、易碎，基本上除去懸浮物和水溶性雜質(zhì)即開始磨漿。上述方案中碎米磨漿的細(xì)度，以通過100目/25. 4mm為宜。有益效果1、本發(fā)明充分合理地利用了廉價(jià)的農(nóng)副產(chǎn)品碎米、豆粕和麩皮，顯著降低了納 他霉素培養(yǎng)基的成本，如稻谷加工過程中產(chǎn)生的碎米，通常用作飼料，其價(jià)值比整粒米低 1/3 1/2，豆粕和麩皮也是非常廉價(jià)，采用這些廉價(jià)的原料可降低納他霉素的生產(chǎn)成本 20%以上。2、本發(fā)明制備的培養(yǎng)基營養(yǎng)豐富，菌體生長旺盛，發(fā)酵產(chǎn)量高，經(jīng)濟(jì)效益好。3、本發(fā)明充分利用了廉價(jià)的農(nóng)副產(chǎn)品碎米、豆粕和麩皮，經(jīng)簡單的水解或浸提制備適合納他霉素發(fā)酵的培養(yǎng)基，其中含有微生物需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，不需要另外補(bǔ)加無 機(jī)鹽、維生素等營養(yǎng)物質(zhì)，實(shí)現(xiàn)了副產(chǎn)物的綜合利用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1 將碎米加水浸泡、淘洗后，加入碎米重量的5倍的水，浸米2h，使手感酥軟、易碎， 基本上除去懸浮物和水溶性雜質(zhì)即開始磨漿，碎米磨漿的細(xì)度，以通過100目/25.4mm為 宜，然后蒸煮，蒸煮后用20U/g耐高溫a -淀粉酶85 95°C液化20min，冷卻至60°C，添加 1%。氯化鈣，100U/g 0 -淀粉酶60°C糖化10h，制成碎米糖化液，蒸煮目的是使碎米漿液充分 糊化，破壞淀粉顆粒，舒展淀粉分子，有利于酶促反應(yīng)，加快液化速度。將豆餅粉加5倍水浸 泡3h后，磨漿，蒸煮后加入1000U/g蛋白酶50°C水解8h，制成豆粕水解液。將麩皮加6倍 水，40°C浸泡6h，取上清液制成麩皮浸提液。采用上述制備的碎米水解液、豆粕水解液、麩皮浸提液配制納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng) 基，培養(yǎng)基初始PH為7. 0，各組分按重量百分比計(jì)，碎米水解液為25% ；豆粕水解液為15%， 麩皮浸提液為2 %，水為58 %。利用上述制備的納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基，接種3%褐黃孢鏈霉菌(Str印temyces gilvosporeus)ATCC 13326種子培養(yǎng)液，三角瓶裝液量為80ml/500mL三角瓶，180r/min， 30°C發(fā)酵48h，制得納他霉素，納他霉素的產(chǎn)量為1. 36g/L。而如果以商品化的化學(xué)藥劑配制納他霉素發(fā)酵的培養(yǎng)基，其對比情況如下采用 葡萄糖3%，2%大豆蛋白胨，0. 5%酵母浸粉，KH2P04lg/L，CaC03l. 5g/L制成發(fā)酵培養(yǎng)基，培 養(yǎng)基的初始pH為7. 0，接種3%褐黃孢鏈霉菌(Streptemycesgi 1 vosporeus) ATCC 13326種 子培養(yǎng)液，三角瓶裝液量為80ml/500mL三角瓶，180r/min, 30°C發(fā)酵48h，納他霉素的產(chǎn)量 為 1. 18g/L。實(shí)施例2:將碎米加水浸泡、淘洗后，加入碎米重量的4倍的水，浸米3h，使手感酥軟、易碎， 基本上除去懸浮物和水溶性雜質(zhì)即開始磨漿，碎米磨漿后蒸煮，蒸煮后用30U/g耐高溫 a -淀粉酶85 95°C液化30min，冷卻至70°C，添加0. 5%。氯化鈣，50U/g ^ -淀粉酶50°C 糖化5h，制成碎米糖化液，蒸煮目的是使碎米漿液充分糊化，破壞淀粉顆粒，舒展淀粉分子， 有利于酶促反應(yīng)，加快液化速度。將豆餅粉加8倍水浸泡2h后，磨漿，蒸煮后加入500U/g 蛋白酶40°C水解4h，制成豆粕水解液。將麩皮加4倍水，40°C浸泡4h，取上清液制成麩皮浸 提液。采用上述制備的碎米水解液、豆粕水解液、麩皮浸提液配制納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng) 基，培養(yǎng)基初始PH為7. 0，各組分按重量百分比計(jì)，碎米水解液為10 % ；豆粕水解液為25 %， 麩皮浸提液為4%，水為61%。實(shí)施例3 將碎米加水浸泡、淘洗后，加入碎米重量的10倍的水，浸米2h，使手感酥軟、易 碎，基本上除去懸浮物和水溶性雜質(zhì)即開始磨漿，碎米磨漿后蒸煮，蒸煮后用20U/g耐高溫 a -淀粉酶85 95°C液化lOmin，冷卻至65°C，添加2%。氯化鈣，200U/g ^ -淀粉酶55°C糖 化20h，制成碎米糖化液，蒸煮目的是使碎米漿液充分糊化，破壞淀粉顆粒，舒展淀粉分子，
4有利于酶促反應(yīng)，加快液化速度。將豆餅粉加10倍水浸泡2. 5h后，磨漿，蒸煮后加入2000U/ g蛋白酶45°C水解10h，制成豆粕水解液。將麩皮加8倍水，40°C浸泡10h，取上清液制成麩 皮浸提液。 采用上述制備的碎米水解液、豆粕水解液、麩皮浸提液配制納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng) 基，培養(yǎng)基初始PH為7. 3，各組分按重量百分比計(jì)，碎米水解液為30 % ；豆粕水解液為10 %， 麩皮浸提液為5%，水為55%。
權(quán)利要求
一種納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于這種納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基采用碎米糖化液、豆粕水解液、麩皮浸提液配制而成，培養(yǎng)基初始pH為7.0～7.5，上述各組分按重量百分比計(jì)為10～30％的碎米糖化液，10～25％的豆粕水解液，2～5％的麩皮浸提液，余量為水；碎米糖化液通過將碎米加4～10倍(按重量計(jì))水磨漿，蒸煮后用10～50U/g耐高溫α 淀粉酶85～95℃液化10～30min，冷卻至60～70℃，添加碎米和水總重量的0.5～2‰的氯化鈣，50～200U/g β 淀粉酶50～60℃進(jìn)行糖化5～20h制成；豆粕水解液通過將豆餅粉加5～10倍(按重量計(jì))水浸泡2～3h后，磨漿，蒸煮后加入500～2000U/g蛋白酶40～55℃水解4～10h制成；麩皮浸提液通過將麩皮加4～8倍(按重量計(jì))水，40℃浸泡4～10h，取上清液制成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于所述的碎米磨漿的過 程為將碎米加水浸泡、淘洗后，浸米2 3h，使手感酥軟、易碎，基本上除去懸浮物和水溶性 雜質(zhì)即開始磨漿。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于所述的碎米磨漿的細(xì) 度，以通過100目/25. 4mm為宜。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基，這種納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基采用碎米糖化液、豆粕水解液、麩皮浸提液配制而成，培養(yǎng)基初始pH為7.0～7.5，上述各組分按重量百分比計(jì)為10～30％的碎米糖化液，10～25％的豆粕水解液，2～5％的麩皮浸提液，余量為水。用本發(fā)明提供的納他霉素的發(fā)酵培養(yǎng)基制備納他霉素，可降低納他霉素的生產(chǎn)成本20％以上，解決了目前納他霉素發(fā)酵培養(yǎng)基主要以商品化的化學(xué)藥劑配制而成，成本較高的問題。
文檔編號C12P19/62GK101914602SQ20101025106
公開日2010年12月15日 申請日期2010年8月11日 優(yōu)先權(quán)日2010年8月11日
發(fā)明者曹榮安, 李大鵬, 高玉榮 申請人:黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)