專利名稱：用于增加脂肪脈管組分的方法及裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于從哺乳動物脂肪分離富含脈管脂肪組織的方法和設(shè)備。在本申請的一個示例中，該組織可以源于通過脂肪抽吸獲得的脂肪組織。
背景技術(shù)：
脂肪細胞是主要構(gòu)成脂肪組織的細胞，其專門用于將能量存儲為脂肪。存在兩種類型的脂肪組織，白脂肪組織(WAT)和棕色脂肪組織(BAT)，它們也分別被稱為白色脂肪和棕色脂肪，并且包括兩種類型的脂肪細胞。在組織學(xué)中，脂肪組織或體脂肪或者就是脂肪是由脂肪細胞構(gòu)成的疏松結(jié)締組織。脂肪組織源于成脂肪細胞。它的主要作用是以脂肪的形式存儲能量，盡管它還緩沖和隔離身體。人類或大多數(shù)動物的肥胖或超重不是依據(jù)體重，而是依據(jù)體脂肪的量。脂肪組織還通過生產(chǎn)激素(例如瘦素、抵抗素和細胞因子TNFa)充當重要的內(nèi)分泌器官。脂肪組織的形成看來似乎受脂肪基因控制。瑞士博物學(xué)家Conrad Gessner在1551年首次識別出脂肪組織。脂肪抽吸，也稱作脂肪整形(“脂肪塑形”)、脂肪雕塑抽吸切除(liposculpture suction lipectomy)或簡稱抽脂術(shù)(“抽吸輔助的脂肪去除”)是從人體上的多個不同部位去除脂肪的美容外科手術(shù)。可應(yīng)用的區(qū)域可以從腹部、大腿、屁股到頸部、手臂的背面和其他地方。自體脂肪轉(zhuǎn)移是指通過吸脂來取出脂肪，對其進行處理并且將其移回到原宿主， 主要用于面部美容和美容化妝，或者皮膚/組織/傷口 /傷疤缺陷矯正或再生之目的。自體干細胞移植是取出干細胞，并且/或者對其進行處理，并且/或者存儲，然后將其交還給同一個人的過程。生長介質(zhì)或培養(yǎng)基為設(shè)計成維持微生物或細胞、或者像小立碗蘚這樣的小型植物的生長的液體或凝膠體。存在各種各樣的、用于不同類型細胞生長的介質(zhì)。主要有兩種類型的生長介質(zhì)用于細胞培養(yǎng)的介質(zhì)，其使用從植物或動物中獲取的特定細胞類型；以及用于微生物培養(yǎng)的介質(zhì)，其被用于微生物(例如細菌或酵母)的生長。最常見的用于微生物的生長介質(zhì)是營養(yǎng)肉湯和瓊脂板；有時，微生物和細胞的培養(yǎng)生長需要專門的介質(zhì)。一些生物體(稱為在合成培養(yǎng)基上不易生長的生物體)因營養(yǎng)需求復(fù)雜而需要專門的環(huán)境。例如，病毒是專性的細胞內(nèi)寄生物，需要由活細胞構(gòu)成的生長介質(zhì)。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，脂肪來源干細胞(ADSC)表現(xiàn)出多能(pluripotential)能力和再生能力，并且具有很多治療方面的期望。然而，更多的最新研究建議，從與其自然基體的接觸中取出的細胞可表現(xiàn)出瘤的特性或者異常的分化。另外，動物模型中被隔離出的ADSC清楚表明，細胞粘附力的損失和增大的新陳代謝能力忽略了很多種不同的基體的使用，從而阻止 ADSC從原始注射部位的運動。安全的用于引導(dǎo)ADSC的去除和隔離的替換方案非常必要和關(guān)鍵。ADSC的解剖位置位于脈管周圍的脂肪空間內(nèi)。因此，微脈管系統(tǒng)中的脂肪豐富的
5組分的ADSC濃度將更高。通過直接的酶降解或機械分離的方式隔離ADSC的過程已由他人提出，并且需要勞動密集的ADSC獲取方法。從脂肪抽吸物(lipoaspirate)的脂肪中隔離 ADSC的示例在6777231號美國專利中示出。然而，這種從自然基體和組織中分離ADSC的方法不僅僅不方便、費時、費錢，而且還存在潛在危險，因為在分離過程中遭到嚴重操縱時，物理分離的細胞可能表現(xiàn)出類似瘤的特性。此外，用于在6777231號專利中詳細描述的方法的儀器昂貴難以購買和維護。因此，需要一種用于從脂肪抽吸物中分離脂肪組織的脂肪豐富的組分，同時不用苛刻的化學(xué)或酶處理或者潛在危險的細胞標記的替換方法。能夠從脂肪抽吸物中分離脂肪組織的脂肪豐富的組分，同時不用嚴厲的化學(xué)或酶處理或者潛在危險的細胞標記的替換方式的發(fā)展呈現(xiàn)了脂肪抽吸領(lǐng)域中的巨大進步，并且滿足了醫(yī)學(xué)專業(yè)上的長期需求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明是一種增加脂肪組織的脈管組分的方法，其包括以下步驟將脂肪組織分解成小塊；清洗這些塊以去除血液、腫脹液和離脫的ADSC ；將清洗過的塊放入容器中；處理容器，使得油、脈管豐富的脂肪、脈管不足的脂肪和水相分層；脈管不足的脂肪為純黃色；脈管豐富的脂肪為橙色；將容器附連到檢測設(shè)備中的檢測腔上，使得管子內(nèi)的材料(即，上述所有的層)依次被推出管子；向容器施壓；移除并且丟棄水相；收集脈管豐富的脂肪；利用檢測設(shè)備檢測脈管不足的脂肪層何時到達檢測腔；以及停止向容器施壓。優(yōu)選地，所述塊小到足以通過脂肪抽吸套管。優(yōu)選地，容器為注射器?；蛘?，容器是下端具有錐形配件的管子。優(yōu)選地，錐形配件為Luer-Lok 。優(yōu)選地，通過施加離心力來進行處理。壓力能夠通過機械手段或加壓氣體來施加。最后，收集到的脈管豐富的脂肪能夠被轉(zhuǎn)移到任何哺乳動物宿主中。脂肪能夠利用任何合適的能量形式來分解，所述能量形式包括激光、聲波和射電波長。更具體地，脂肪能夠利用任何合適的方法來分解，所述方法包括碎石術(shù)、遞能去除術(shù) (hyfrecation)、乳化去除術(shù)(phacoemulsification)、聲波處理、旋轉(zhuǎn)刀片、系列過濾以及強制篩濾?；蛘?，脂肪能夠借助任何合適的化學(xué)手段來分解，所述化學(xué)手段包括膠原酶和高滲介質(zhì)。清洗能夠借助包括鹽水、組織培養(yǎng)基和磷酸鹽緩沖溶液的材料來完成。合適的組織培養(yǎng)基包括GMEM、RPMI、Eagle，s,Fischer' s、DMEM、lscove，s,McCoy' s、L-15、DME-F1 和Ham’ s F12或其等同物。清洗步驟還可以包括使用其孔隙尺寸允許ADSC的單個細胞通過的過濾器?？梢越o容器添加無毒的梯度(gradient)以改善層的分離。這些無毒的梯度可以是組織培養(yǎng)基(如上所述的)、Histopaque 1077、蠟、凡士林、Percoll和CsCl或其等同物。檢測設(shè)備可以是分光光度計、色度計或血氧計。因此，檢測設(shè)備能夠通過顏色或選定的電磁輻射波長檢測脈管不足的脂肪層何時到達檢測腔。本發(fā)明還涉及一種用于檢測脈管豐富的脂肪層何時已經(jīng)通過容納包括脈管豐富的脂肪層和脈管不足的脂肪層的材料的容器的設(shè)備，包括用于向所述容器中的所述材料施壓的裝置；用于容納被推出所述容器的材料的檢測腔；設(shè)在所述檢測腔一側(cè)的光源，其輸出具有選定波長的光；所述檢測腔對于所述選定波長是半透明或透明的；檢測所述光的、與所述檢測腔相對設(shè)置的光電檢測器；連接到所述光電檢測器的控制電子器件；以及連接到所述電子器件的指示器。所述指示器可以是杠桿、音頻警報、伺服機構(gòu)(后者在檢測到容器中的材料已經(jīng)吸收預(yù)定波長的光時停止材料在容器中的前進)或光。選定的波長可以對應(yīng)于脈管不足的脂肪的純黃色(約570nm)，或者血紅蛋白中的鐵的吸收波長，或者脈管豐富的脂肪的純橙色(約590nm)，或者氧合血紅蛋白的吸收波長 (600-750nm)，或者去氧血紅蛋白的吸收波長(850-1000nm)。光源和光電檢測器可以被設(shè)置在收集管的同一側(cè)(反射光譜法)或者收集管的相對側(cè)(透射光譜法)。該設(shè)備可以是一次性的或可消毒的。容器可以是注射器或者具有錐形配件 (Luer-Lok )的容器。用于施壓的裝置可以是活塞，在這種情況下，本發(fā)明還可以包括連接到所述控制電子器件的電機；由所述電機啟動且設(shè)置成推進活塞的用于施壓的第二裝置；并且控制電子器件另外被編程成當檢測腔中的材料在選定波長上吸收時關(guān)閉電機。用于施壓的裝置可以是加壓氣體，在這種情況下，本發(fā)明還可以包括連接到控制電子器件和用于施壓的所述裝置的電磁閥，并且該控制電子器件被另外編程成當管子中的材料在選定波長上吸收時啟動電磁閥。通過參見附圖和優(yōu)選實施例的描述能夠認識和理解本發(fā)明的其他目的和目標。


圖1是在經(jīng)清洗的脂肪組織已經(jīng)被轉(zhuǎn)移到注射器并且經(jīng)離心處理以分離油、脂肪、脈管豐富的脂肪和水相之后的本發(fā)明的優(yōu)選實施例的附圖，與注射器底部相連的是顏色檢測設(shè)備，其能夠區(qū)分純黃色脂肪和脈管豐富的黃色脂肪，注意到，指示器處于PUSH位置；圖2是在脈管豐富的脂肪層已從頂部注射器轉(zhuǎn)移到新的位于下方的治療用注射器之后的本發(fā)明的優(yōu)選實施例的附圖，注意到，指示器現(xiàn)在檢測脈管不足的組分，并且已切換至stop位置，脈管不足的組分和油相被留在原始的頂部注射器中；圖3為更詳細地示出了檢測器的工作和使優(yōu)選實施例自動化的方法的示意圖4為示出了本發(fā)明的替換實施例和使該實施例自動化的方法的示意圖；圖5是說明反射光譜法的簡圖。
具體實施例方式雖然在本文中是參考針對特定應(yīng)用的說明性實施例對本發(fā)明進行描述的，但是應(yīng)當理解本發(fā)明不限于此。本領(lǐng)域技術(shù)人員在領(lǐng)會本文中給出的教導(dǎo)后將認識到落在本申請范圍內(nèi)的其他修改、應(yīng)用和實施例，以及本發(fā)明具有重要使用價值的其他領(lǐng)域。在閱讀此文檔時要用到下列詞匯。自身移植物被移植到從中將其移除的個體的身體上的新位置的組織或器官。自身脂肪轉(zhuǎn)移參見脂肪轉(zhuǎn)移。其與脂肪轉(zhuǎn)移相同，但是更具體地表明脂肪來自同一個人，因此出于縮寫的目的使用自體或“自身”的。這是在美容、重建外科手術(shù)領(lǐng)域中常用的命名原則。無脈管的與血管無關(guān)或不由血管供應(yīng)的。套管用于插入身體以抽出流體或引入藥物的金屬管。亞鐵血紅素從血紅蛋白中獲得的深紅色、含鐵的血色素，C34H32N404!^e。遞能去除術(shù)一種通過向組織遞送能量進行切除或燒灼的方法。下澄液脂肪抽吸容器內(nèi)的脂肪抽吸流體的液體下相，其與更有浮力的、密度更小的上清液(上相)相反，其中所述上清液通常含有脂肪和油。脂肪抽吸物在進行脂肪抽吸過程中被吸出的脂肪、腫脹液、血和漿液的組合體。脂肪抽吸借助小創(chuàng)口和真空抽吸從皮膚下方的局部區(qū)域以外科的方式抽出過剩的脂肪。脂肪轉(zhuǎn)移從身體的一個區(qū)域獲取脂肪，并且將其轉(zhuǎn)移到另一區(qū)域以用于美容、再生或重建外科手術(shù)目的的過程。碎石術(shù)借助碎石機粉碎腎結(jié)石或膽結(jié)石。碎石機用于利用超聲波使腎結(jié)石分裂的設(shè)備。顯微移植物通常只能夠在高倍放大或生化測定或血細胞計數(shù)下可見的較小移植物。切碎切成更小的塊。經(jīng)切碎的已經(jīng)被切成更小塊的。瘤動物或植物中的組織異常生長。瘤可能是良性或惡性的。也稱作腫瘤。瘤的屬于瘤的或與瘤相關(guān)的或者具有瘤的特性的。脈管周圍的屬于血管周圍組織的、與血管周圍組織相關(guān)的、出現(xiàn)在血管周圍組織上的、或者是血管周圍組織。乳化去除術(shù)通過先用超聲振蕩將感染的晶狀體液化，然后通過抽吸將其提移除來移除白內(nèi)障。多能的具有成為多能性的潛能。多能性的在發(fā)展?jié)摿Ψ矫娌还潭ň哂邪l(fā)展可塑性。聲波處理借助聲波能量分散、分裂或滅活諸如病毒的生物材料的過程。分光光度計的屬于分光分度計或光譜儀的或者與之有關(guān)的。
分光光度計用于在光譜部分之間作光度比較的儀器。組織培養(yǎng)基防止細胞脫水或溶解的平衡鹽溶液。它們有時還含有額外的營養(yǎng)物以確保長時間的細胞生存性。異種移植物從一個種類的成員中獲取并且被移植給另一種類的成員的移植物。熟悉美容外科的人們知道，脂肪組織通?？梢酝ㄟ^脂肪抽吸獲得，并且可以在濕潤(具有腫脹液)或干燥(無腫脹液)情況下進行。還可以通過精細的外科解剖切割脂肪組織。在本發(fā)明中，所獲得的脂肪組織然后通過機械或化學(xué)方式被分裂，從而將組織分解成小塊優(yōu)選足夠小以便能夠輕易地穿過脂肪抽吸套管?？梢越柚魏魏线m形式的能量或裝置實施分裂操作，例如(但不限于)激光、碎石術(shù)、遞能去除術(shù)、乳化去除術(shù)、聲波處理、 射電波長、旋轉(zhuǎn)刀片、系列過濾和強制篩濾。在外科手術(shù)期間，經(jīng)切碎的脂肪組織連同腫脹液(如果使用的話)被收集到脂肪抽吸罐中。然后利用鹽水或一些組織培養(yǎng)基(例如lscove介質(zhì)、Eagle介質(zhì)、GMEM、RPMI, Fischer’ s、DMEM、McCoy’ s、DME_Fl或Ham’ s F12)清洗脂肪組織以移除血液和腫脹液。清洗步驟還將洗掉與其自然基體和脂肪組織明顯分離的離脫的ADSC。還可以使用具有允許ADSC尺寸的單細胞通過的任何適當孔隙尺寸的過濾器來進一步清洗和凈化切碎的脂肪組織。經(jīng)清理的脂肪未受到任何另外的酶的、化學(xué)的或機械的分解。然后將脂肪放到容器內(nèi)，并且對其進行處理以分離油、脂肪和水相。容器優(yōu)選為注射器，但是任何具有底部連接器的容器(例如具有Luer-Lok 連接器的試管)均可以使用。 處理優(yōu)選在離心機中進行，但是替換方案是讓脂肪沉淀以便不同成分在重力作用下沉淀分層。很多種已經(jīng)進入商業(yè)生產(chǎn)階段的離心機均可以使用。已證實滿足要求的一種離心機是 Hettich 型 EBA20 式 2002-01。還可以添加各種無毒的梯度以進一步將脂肪相分離成脈管豐富的(朝向靠近水相的底部)與脈管不足的(朝向靠近油部的頂部)。然后輕輕地將容器提出離心機，并且將其附連到貫穿比色或分光光度讀取器的管道。向容器施壓，移離并丟棄水相，接著脈管豐富的相進入分立的收集注射器或容器。一旦檢測到純黃色(脈管不足的)脂肪層，檢測器指示停止施壓，并且不再向注射器施壓。裝填有脈管豐富的組分的新注射器準備好用于立即對任意哺乳動物宿主進行脂肪移植。該脈管豐富的組分可以在注射之前利用額外的藥品或化學(xué)療法進行處置，以用于改善移植、增長、細胞分化、傷口愈合、美容和美觀的目的。圖1是本發(fā)明在理想配置下的概念圖，其中經(jīng)清洗的脂肪組織被轉(zhuǎn)移到注射器1 中，并且被離心以分離油3、脂肪4、脈管豐富的脂肪5和水相6。水相6的形成原因是哺乳動物組織含有水，并且在脂肪抽吸程序和清洗步驟中會加入水。連接到注射器基底的是分光光度計7，其能夠區(qū)分純黃色脂肪4和脈管豐富的脂肪5。很多合適的分光光度計均可使用。很多分光光度計由Hach of Loveland公司制造。一種合適的儀器是Hach DR 2700，其可能需要改進以容納圖3中示出的管子11。指示器8表明注射器1的活塞2可以被推動。圖2是在脈管豐富的脂肪層5從頂部的注射器1轉(zhuǎn)移到位于下方的新的治療用注射器12時的最后步驟中的本發(fā)明的概念圖。注意到，分光光度計7現(xiàn)在檢測脈管不足的組分4，指示器8正在告知用戶不要再推動上部注射器活塞2。脈管不足的脂肪4和油相3留
9在原始的頂部注射器1內(nèi)，并且可以被丟棄。圖3是詳細示出分光光度計7的工作的示意圖。檢測器7包括光源9和光電檢測器10，其包括合適的控制電子器件并且連接到指示器8。光源9發(fā)射具有一個或多個選定波長的光14，光14通過管子11，管子11含有一些從注射器1中推出的材料。波長可以利用棱鏡或衍射格柵來調(diào)節(jié)。或者，可以使用發(fā)射特定波長的LED。當然，管子對選定波長是透明的或至少半透明的。圖4提供了本發(fā)明的替換實施例的示意圖。該實施例包括底部具有Luer-Lok 配件30的試管或離心管觀。借助通過管子M供給容器觀的頂部的壓縮氣體沈提供移動組分3、4、5和6通過容器觀的壓力。管子M通過密封件20被密封在容器觀的頂部。為接通和關(guān)閉壓縮氣體沈的供應(yīng)，在供應(yīng)線M中包括閥門22。由于脈管豐富的脂肪5在590nm(可見光范圍內(nèi))附近吸收，脈管不足的脂肪4在 570nm(也在可見光范圍內(nèi))附近吸收，因此選定的波長可以是這些波長中的任何一個。如果使用與脈管不足的脂肪4對應(yīng)的選定波長(570nm)，當材料在選定波長處不吸收光14時，光14到達光電檢測器10，與光電檢測器10相關(guān)聯(lián)的電子控制機構(gòu)使指示器轉(zhuǎn)變到PUSH位置。當材料在該選定波長處吸收時，沒有光14到達光電檢測器10，與光電檢測器相關(guān)聯(lián)的電子控制機構(gòu)使指示器轉(zhuǎn)變到STOP位置。另一方面，如果使用與脈管豐富的脂肪5對應(yīng)的選定波長(590nm)，材料在選定波長處吸收光14時，光14不到達光電檢測器10，與光電檢測器10相關(guān)聯(lián)的電子控制機構(gòu)使指示器轉(zhuǎn)變到PUSH位置。當材料在該選定波長處開始吸收時，光14到達光電檢測器10，與光電檢測器相關(guān)聯(lián)的電子控制機構(gòu)使指示器轉(zhuǎn)變到STOP位置。實際上，為區(qū)分脈管不足的脂肪4和脈管豐富的脂肪5，可以使用500-700nm范圍內(nèi)的任意波長。因此，指示器8的PUSH和STOP位置是讓操作人員推動或不推動注射器1的活塞 2的指令。通過這種方式，注射器1的操作可以通過將光電檢測器10的電子器件連接到電機16來自動進行，其中電機16連接到能夠推進活塞2的活塞18。于是可以將電子器件編程成當管子11中的材料在選定波長上吸收或停止吸收時關(guān)閉電機16。換言之，波長從約 590nm到約570nm變化，或者反之。對于熟悉分光光度法領(lǐng)域的人員而言，其他改進和提高將是顯而易見的。通過類似的方式，圖4的替換實施例可以通過使用電磁閥22并且將光電檢測器10 連接到該閥門22而被自動化。優(yōu)選的檢測方法是透射。在透射法中，光源9和光電檢測器10位于管子11的相對側(cè)上。在反射法中，光源9和光電檢測器10位于管子同一側(cè)。光14進入管子11及其中的材料較短路程，并且從光源跳動到光電檢測器。這在圖5中示出。在圖3和4中示出的透射法是最常用的類型。顯然，可以用指示光取代指示器8。另外，可以選擇其他頻率來檢測脈管不足的組分4和脈管豐富的組分5中的其他成分是否存在。一種能夠方便檢測的成分是血紅蛋白 (氧合的、去氧的或兩者)。檢測血紅蛋白的技術(shù)被稱作血氧測定法。另一種好檢測的成分是鐵。此外，盡管管子11是用于將注射器1中的材料在光源9和檢測器10之間運送的優(yōu)選設(shè)備，但是作為替換，可以使用任何允許材料通過的檢測腔。如果只使用管道11，則“檢測腔”是管子11中讓光14通過的部分。血氧測定法的原理基于以下事實氧合血紅蛋白吸收更多的紅外光，讓更多的紅光通過，而去氧血紅蛋白吸收更多的紅光，允許更多的紅外光通過。紅光在600-750nm的光波長段中。紅外光處于850-1000nm的光波長段中。脈搏血氧測定法采用具有紅色和紅外LED的發(fā)光器，其發(fā)光通過血流良好的、具有合理透光度的部位。典型的部位是手指、腳趾、耳廓(頂部)或者耳垂。與發(fā)光器相對的是光電檢測器，其接收穿過測量部位的光。存在兩種將光發(fā)送穿過測量部位的方法透射和反射。在透射法中，發(fā)光器和光電檢測器相對于位于其間的測量部位彼此相對。光然后能夠通過該部位。在反射法中，發(fā)光器和光電檢測器在測量部位上方彼此緊挨著。光從發(fā)光器經(jīng)由該部位跳至檢測器。透射法是最常用的類型，并且在此處的討論中將暗含透射法。在透射的紅光(R)和紅外(IR)信號通過測量部位并在光電檢測器處被接收之后， 計算RAR比。將RAR比與“查詢表”(其由經(jīng)驗公式構(gòu)成)作比較，其中所述查詢表將該比值轉(zhuǎn)變?yōu)檠躏柡投?SpC^)。大多數(shù)制造商具有它們自己的、基于在各種Sp02水平上從健康對象中獲得的校準曲線的查詢表。典型地，0. 5的RAR值等同于約100%的Sp02，1. 0的比值等同于約82%的Sp02，而2. 0的比值等同于0%的Sp02。在測量部位上存在固定的光吸收體。它們是皮膚、組織、靜脈血和動脈血。然而， 隨著每次心臟跳動，心臟收縮，并且涌出一股動脈血，其暫時性地提高了經(jīng)過測量部位的動脈血的體積。這導(dǎo)致在這次涌出期間更多的光被吸收。如果以“波形”的形式觀察在光電檢測器處接收的光信號，則在每次心跳時應(yīng)當存在波峰，在心跳之間存在波谷。如果從波峰處的光吸收中減去波谷處的光吸收(其應(yīng)包括所有固定吸收源)，則得到的結(jié)果是僅因增加的血(其為動脈血)的體積導(dǎo)致的吸收特性。由于波峰隨著每次心跳或脈搏出現(xiàn)，因此造出新的術(shù)語“脈搏血氧測定法”。通過將油、脂肪和脈管豐富的脂肪分入單獨的燒瓶并且在放大4X的情況下對各個部分進行拍照來驗證本發(fā)明的概念。從顏色、色彩和飽和度方面對照片進行分析，以確定是否能夠確定任何確定性差異。各層之間在顏色、色彩和飽和度方面存在明顯差異。對Accustat、part#0998-00-0057-01型號的數(shù)據(jù)范圍脈搏血氧計進行修改，并且將其用于確定各個組分中的血紅蛋白。內(nèi)部撥動式開關(guān)的增益從1/4周轉(zhuǎn)動到最大。通過周期性地每隔l/2cc留下02氣泡以模擬搏動，“哄騙”計算機讀取02飽和度。通過這種方式，能夠沿著靜脈管線前后抽吸樣品，其中直接將靜脈管線壓靠從塑料殼體中取出的LED 以形成更好的光學(xué)連接。油指示(register) Omax，普通脂肪(plain fat)指示Omax，脈管豐富的脂肪指示2-4maX。利用三種不同的脂肪樣品在四個獨立實驗中重復(fù)進行。臨床設(shè)備使用的示例220磅的白人女性出于美觀上的緣故接受腹部脂肪抽吸。共獲得300cc的脂肪抽吸物。從抽吸罐中取出總計50cc的脂肪，利用50cc的磷酸鹽緩沖溶液(PBS)將其清洗3 遍以去除殘余的血和下澄液。然后，用消毒過的外科手術(shù)剪進一步將五十cc的脂肪切碎成更小的顯微移植物。利用孔隙尺寸為Imm的金屬濾器過濾脂肪以去除單獨的細胞。然后將其放到五個IOcc的注射器中，并且在300g下離心15分鐘。然后觀察到三種相油、脂肪、 脈管豐富的脂肪和水。通過向注射器施壓輕易地將水相除去，但是在到達水-脈管豐富的脂肪界面時停止施壓。然后通過貫穿比色計的管子將該注射器連接第二注射器。開啟該比色計，通過再次按壓第一注射器的活塞將脈管豐富的脂肪部分轉(zhuǎn)移到第二注射器。推進活塞，直至檢測器只能夠檢測到純黃色的脈管不足的脂肪。第二注射器中的脈管豐富的脂肪被用于脂肪移植治療。本發(fā)明是用于分離哺乳動物脂肪組織的脈管豐富的組分以用于醫(yī)學(xué)治療的方法。 脈管組分可以通過自體脂肪移植被用于哺乳動物皮膚的軟組織增加，或者通過注射到傷口內(nèi)、傷口之下和/或傷口周圍以加速傷口愈合而被用于傷口愈合。它還可以通過注射到受損組織內(nèi)、組織之下和/或組織周圍以加速再生而被用于組織再生。可以向脂肪組織添加額外的專門的組織培養(yǎng)基和/或梯度以更好地分離脈管豐富的組分和脈管不足的組分?？梢韵蛑窘M織添加額外的專門的組織培養(yǎng)基，以誘導(dǎo)脂肪干細胞分化成外胚層和/或中胚層和/或內(nèi)胚層組織。處理過的組織可以被用作同種異體移植物、自體移植物或異種移植物。本發(fā)明還是一種由注射器和檢測器構(gòu)成的設(shè)備，所述檢測器能夠單獨或結(jié)合地區(qū)分顏色、光飽和度、紅外、亞鐵血紅素、氧和鐵中的任何一項，從而允許區(qū)分具有波長約為 570nm的顏色的黃色無脈管脂肪組分和具有波長約為590nm的顏色的橙色氧和亞鐵血紅素豐富的脈管脂肪組分。該檢測器可以是一次性的或可消毒的和重復(fù)使用的。由此在本文中已經(jīng)參考用于特定應(yīng)用場合的特定實施例對本發(fā)明進行了描述。具有本領(lǐng)域普通技術(shù)且接觸本文中給出的教導(dǎo)的人員將認識到落在其范圍內(nèi)的其他修改、應(yīng)用和實施例。因此，所提交的權(quán)利要求旨在覆蓋本發(fā)明范圍內(nèi)的任一和所有這種應(yīng)用、修改和實施例。
權(quán)利要求
1.一種增加脂肪組織的脈管組分的方法，其包括以下步驟a)將脂肪組織分解成小塊；b)清洗所述塊以去除血液、腫脹液和離脫的ADSC；c)將所述清洗過的塊放入容器中；d)處理所述容器，使得油、脈管豐富的脂肪、脈管不足的脂肪和水相分層；所述脈管不足的脂肪為純黃色；所述脈管豐富的脂肪為橙色；e)將所述容器附連到檢測設(shè)備中的檢測腔上；f)向所述容器內(nèi)的所述層施壓；g)移除并且丟棄所述水相；h)收集所述脈管豐富的脂肪；i)利用所述檢測設(shè)備檢測所述脈管不足的脂肪層何時到達所述檢測腔；以及 j)停止向所述容器施壓。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述塊小到足以通過脂肪抽吸套管。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述容器為注射器。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述容器是其下端具有錐形配件的管子。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，通過施加離心力來進行處理。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，壓力通過機械手段來施加。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，壓力由加壓氣體施加。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其還包括將所述收集到的脈管豐富的脂肪轉(zhuǎn)移到任何哺乳動物宿主中的步驟。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述脂肪能夠利用任何合適的能量形式來分解。
10.如權(quán)利要求9所述的方法，其中，所述能量選自包括激光、聲波和射電波長的組。
11.如權(quán)利要求1的方法，其中，所述脂肪能夠利用選自包括碎石術(shù)、遞能去除術(shù)、乳化去除術(shù)、聲波處理、旋轉(zhuǎn)刀片、系列過濾和強制篩濾的組的方法來分解。
12.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述脂肪能夠利用任何合適的化學(xué)手段來分解。
13.如權(quán)利要求12所述的方法，其中，所述化學(xué)品選自包括膠原酶和高滲介質(zhì)的組。
14.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，清洗利用選自包括鹽水、組織培養(yǎng)基和磷酸鹽緩沖溶液的組的材料來完成。
15.如權(quán)利要求13所述的方法，其中，所述組織培養(yǎng)介質(zhì)選自包括GMEM、RPMI、 Eagle，s、Fischer，s、DMEM、lscove，s、McCoy，s、L-15、DME-F1 禾口 Ham，s F12 的組。
16.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述清洗步驟還包括使用其孔隙尺寸允許ADSC的單個細胞通過的過濾器。
17.如權(quán)利要求1所述的方法，其還包括給所述容器添加無毒的梯度以改善所述層的分離。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其中，所述無毒的梯度選自包括組織培養(yǎng)基、 Histopaque 1077、賭、凡士林、Percoll 和 CsCl 的組。
19.如權(quán)利要求18所述的方法，其中，所述組織培養(yǎng)基選自包括GMEM、RPMI、fegle’s、 Fischer，s、DMEM、lscove，s、McCoy，s、L-15、DME-F1 禾口 Ham，s F12 的組。
20.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述檢測設(shè)備為分光光度計。
21.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述檢測設(shè)備為色度計。
22.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述檢測設(shè)備為血氧計。
23.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述檢測設(shè)備通過顏色檢測所述脈管不足的脂肪層何時到達所述檢測腔。
24.一種用于檢測脈管豐富的脂肪層何時已經(jīng)通過容納包括所述脈管豐富的脂肪層和脈管不足的脂肪層的材料的容器的設(shè)備，包括a)用于向所述容器中的所述材料施壓的裝置；b)用于容納被推出所述容器的材料的檢測腔；c)設(shè)在所述檢測腔一側(cè)的光源，其輸出具有選定波長的光；所述檢測腔對于所述選定波長是半透明或透明的；d)檢測所述光的、與所述檢測腔相對設(shè)置的光電檢測器；e)連接到所述光電檢測器的控制電子器件；以及f)連接到所述電子器件的指示器。
25.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述指示器是杠桿。
26.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述指示器是光。
27.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述選定波長對應(yīng)于所述脈管不足的脂肪的純黃色。
28.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述選定波長對應(yīng)于血紅蛋白中的鐵的吸收波長。
29.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述選定波長對應(yīng)于所述脈管豐富的脂肪的純橙色。
30.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述選定波長的范圍為500-700nm。
31.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述選定波長對應(yīng)于氧合血紅蛋白的吸收波長。
32.如權(quán)利要求對所述的設(shè)備，其中，所述選定波長的范圍為600-750nm。
33.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述選定波長對應(yīng)于去氧血紅蛋白的吸收波長。
34.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述選定波長的范圍為850-1000nm。
35.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述光源和所述光電檢測器被設(shè)置在所述檢測腔的同一側(cè)。
36.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述光源和所述光電檢測器被設(shè)置在所述檢測腔的相對側(cè)。
37.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述設(shè)備是可消毒的。
38.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述容器是注射器。
39.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，其中，所述用于施壓的裝置是活塞。
40.如權(quán)利要求39所述的設(shè)備，其還包括a)連接到所述控制電子器件的電機；b)由所述電機啟動且設(shè)置成推進所述活塞的、用于施壓的第二裝置；c)所述控制電子器件被另外編程成當所述管子中的所述材料在所述選定波長上吸收時關(guān)閉所述電機。
41.如權(quán)利要求M所述的設(shè)備，在所述用于施壓的裝置中的是加壓氣體。
42.如權(quán)利要求41所述的設(shè)備，其還包括a)連接到所述控制電子器件和所述用于施壓的裝置的電磁閥；b)所述控制電子器件被另外編程成當所述管子中的所述材料在所述選定波長上吸收時啟動所述電磁閥。
全文摘要
一種方法和設(shè)備，用于處理哺乳動物脂肪組織，使得脈管豐富的組分與脈管不足的組分分離。將以切碎的外科活體組織檢查物和/或從脂肪抽吸中獲得的脂肪抽吸物形式的哺乳動物脂肪組織放置在新的注射器內(nèi)，所述注射器附連到測量顏色、光飽和度、紅外光、亞鐵血紅素、鐵或氧飽和度的檢測設(shè)備。該過程不需要標記物，并且需要最低限度的組織操作和處理。該過程和設(shè)備還可以在苛刻條件下以內(nèi)部操作的方式使用，以立即用在接受脂肪抽吸或外科手術(shù)的同一個體內(nèi)。
文檔編號C12N5/0775GK102216447SQ200980145430
公開日2011年10月12日 申請日期2009年10月14日 優(yōu)先權(quán)日2008年10月15日
發(fā)明者A·Y·吳, D·M·莫羅 申請人:科斯基尼克斯有限責任公司