專利名稱：：具有預防或改善腦功能降低引起的癥狀或疾病的作用的組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及將花生四烯酸和/或以花生四烯酸作為構(gòu)成脂肪酸的化合物作為有效成分的、具有預防或改善腦功能降低引起的癥狀或疾病的作用的組合物及其制備方法。更詳細地說，涉及將選自花生四烯酸、花生四烯酸的醇酯以及構(gòu)成脂肪酸的一部分或全部是花生四烯酸的甘油三酯、磷脂和糖脂中的至少l種作為有效成分的記憶學習能力的降4氐、i/v知能力的降低、情感障礙(例如憂郁病)、智力障礙(例如癡呆，具體地說阿耳茨海默型癡呆、腦血管性癡呆)的預防或改善劑，進一步涉及具有預防或改善作用的組合物及其制備方法。
背景技術(shù)：
：近年來，隨著醫(yī)療的進步，趨向急劇的高齡化社會。隨之而來的老年性癡呆人數(shù)也在增加。根據(jù)"平成12年度版厚生白書"和"癡呆性老AJit策研究報告書"，2000年度的癡呆老人是150~160萬人，65歲或其以上的癡呆患者達到每14人中有l(wèi)人。而且，預測2030年每10人中有1人，患者數(shù)著實增加。老年性癡呆一旦發(fā)生的話，會引起智力功能或感情上的障礙，在日常生活或社會生活上造成不l更。老年性癡呆患者的原因不同，分為腦血管性癡呆、阿耳茨海默型癡呆、它們的混合型，對這些腦疾病的治療有效的藥劑(腦循環(huán)代謝改善藥、抗癡呆藥)的研究開發(fā)不斷進行，但遺憾的是，現(xiàn)狀是沒有有效的治療藥。隨著人上年紀，雖然腦梗塞在一定程度上發(fā)病，但癡呆的發(fā)病可以通過使用腦來預防。由此，不僅可以治療，而且也可以充分開發(fā)以預防為目標的藥劑。但是，從嬰幼兒到老年人都能夠方便飲用且安全、抑制腦功能的降低、預防腦功能的降低引起的癥狀或者疾病、進而具有改善效果的藥劑到目前為止幾乎沒有開發(fā)出來。迄今為止，改善腦功能的方法研究了以下幾種，即，使腦細胞有效吸收營養(yǎng)從而活化細胞的功能的改善腦能量的代謝的方法(例如提高腦內(nèi)葡萄糖水平等)、使腦血液循環(huán)良好從而將必要的營養(yǎng)和氧充分供給到腦細胞中的改善腦循環(huán)的方法(例如增加腦血流)、進一步通過神經(jīng)遞質(zhì)，使在突觸間隙進行的神經(jīng)傳導活化的方法(供給神經(jīng)遞質(zhì)的前體(例如膽堿、乙酰CoA的補充等)、抑制放出的神經(jīng)遞質(zhì)的改變(例如抑制乙酰^酯酶等)、增加神經(jīng)遞質(zhì)放出(例如增加乙酰膽堿、谷氨酸的放出等)、活化神經(jīng)遞質(zhì)受體等)，以及保護神經(jīng)細胞膜(例如抗氧化、補充膜成分、預防動脈硬化等)等等。在這樣的過去的研究中，雖然發(fā)現(xiàn)了預防腦功能降低引起的癥狀或者疾病、進而具有改善效果的成分，但現(xiàn)狀是其效果值得懷疑，在藥物方面也沒有發(fā)現(xiàn)有效的藥劑。而且，考慮應(yīng)用到食品中的場合，還具有所謂受到來自天然物的成分的限定的困難。腦^J旨質(zhì)塊之類的組織，例如在白質(zhì)中1/3，在灰白質(zhì)中1/4被磷脂占有。構(gòu)成腦細胞的各種細胞膜的磷脂中的高度不飽和脂肪酸主要是花生四烯酸和二十二碳六烯酸。但是，這些花生四烯酸和二十二碳六烯酸在動物體內(nèi)不能夠從頭合成(denovo合成)，需要直接或間接地(成為花生四烯酸、二十二碳六烯酸的前體的亞油酸、a-亞麻酸)從飲食中攝取。因此，二十二碳六烯酸提高學習記憶能力、預防、恢復老年性癡呆癥正受到關(guān)注。但是，腦的磷脂的主要脂肪酸不僅是二十二碳六烯酸，花生四烯酸也是重要的脂肪酸，其占有率大致相同。Sonderdegr等明確了海馬磷脂中所占的花生四烯酸的比例在正常人中為12.4質(zhì)量％,而在阿耳茨海默氏病患者中顯著減少至8.1質(zhì)量％(Lipids^，421-425(1991))。這樣，雖然暗示了花生四烯酸可能對維持腦的功能起重要的作用，但是花生四烯酸沒有充分的供給源，因此沒有進行具體的證實。已公開了幾個在維持腦功能上利用花生四烯酸的發(fā)明。特開平6-256179號公報記載的"學習能力提高劑"是以1，2-二醋-sn-甘油衍生物為有效成分的發(fā)明，羅列了在2位結(jié)合的各種高度不飽和脂肪酸，其中之一公開了花生四烯酸。但是，在實施例中具體公開的只是結(jié)合了二十二碳六烯酸的l，2-二醃基-sn-甘油衍生物，只不過是羅列了花生四烯酸，其效果完全沒有^^證實。在特開平10-101568號公4艮記載"腦功能改善和營養(yǎng)組合物，，中，公開了將神經(jīng)節(jié)苷脂和花生四烯酸組合作為提供新的腦功能改善劑和含有該改善劑的營養(yǎng)組合物的手段。但是，雖然公開了用自然老化的大鼠的實驗作為試驗例，但是試驗月齡僅僅是13個月齡，對于人類只達到相當于33歲的年齡(大鼠的1天相當于人類的1個月)，不能說是老化模型的試驗。另外，腦磷脂中所占的花生四烯酸的比例或者花生四烯酸的量在該月齡通常不會顯示出改變，而且，由于是不能確認老年化引起的腦功能的降低的月齡，因此一般認為不能產(chǎn)生花生四烯酸的效果。實際上在試驗例中，沒有評價花生四烯酸單獨的效果，只不過公開了花生四烯酸會提高神經(jīng)節(jié)苷脂的效果。在特開平6-279311號公報記載的"蛋白激酶C同功酶的活化劑"中，公開了活化在細胞內(nèi)信息傳導方面起重要作用的蛋白激酶C，并作為隨之而來的效果，公開了老年性癡呆癥治療藥。但是，活性成分是以高度不飽和脂肪酸為構(gòu)成脂肪酸的磷脂酰絲氨酸衍生物，其高度不飽和脂肪酸之一是花生四烯酸。但是，在實施例中，花生四烯酸的效果與結(jié)合了亞油酸、a一亞麻酸的磷脂酰絲氨酸衍生物在活性上沒有顯著的差別，以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的磷脂酰絲氨酸衍生物沒有優(yōu)先性，花生四烯酸的效果沒有被證實。另外，評價僅取決于酶活性的測定，腦功能的降低引起的癥狀或者疾病的預防或者改善效果一點也不明了。這樣，雖然7>開了幾個在維持腦功能上利用了花生四烯酸的發(fā)明，但是花生四烯酸和以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物不能以充分的供給量存在，因此用動物實驗等不能明確真正的效果，只不過記載了作為脂肪酸之一的花生四烯酸，實際上不能說是真正的發(fā)明。伴隨腦的器質(zhì)性病變的病態(tài)的記憶障礙，短期和長期的記憶障礙是形成癡呆的核心的癥狀。但是，用另外的詞語表達記憶障礙的^1健忘，健忘是在老年人中看到最多的訴苦之一，在各種研究中都曾指出隨著生理的老齡化，人的學習記憶力降低(Katzman，R.andTerry，R.，TheNeurologyofAging,F.A.Davis,Philadelphia,pp.15-50)。從形成記憶的時間的經(jīng)過來看，分為感覺記憶(sensorymemory)、1次記憶(primarymemory)和2次記憶(secondarymemory)。1次記憶也稱為即時i己憶(immediatememory)，2次i己憶稱為長期記憶(long-termmemory)。短期記憶(short-termmemory)包括指1次記憶的場合和指長達2次記憶的學習能力的場合。盡管一旦有持續(xù)約50亳秒的視覺輸入就會形成感覺記憶，但因其極不穩(wěn)定，僅僅在250~500亳秒內(nèi)就會消失。1次記憶在信息處理期間通常有意識地被保持，具有作為工作記憶(workingmemory)的作用。受到處理的信息作為1次記憶向2次記憶傳送并長期保持后，經(jīng)再次記憶而回想起來。因為l次記憶的容量很少，除非反復想起、修正，否則在20~30秒就會消失。2次記憶由經(jīng)1次記憶處理的信息的傳送(transfer)和統(tǒng)合強化(consolidation)、其半永久性貯存(storage)、其進一步恢復(retrieval)的各階段構(gòu)成。該2次記憶隨著年齡增加而顯著受到阻礙。該2次記憶的降低主要取決于直到記憶的貯存的階段的障礙，和從年輕時貯存的記憶的恢復能力有關(guān)，幾乎沒有看到減退。但是，癡呆患者的該記憶常常受到侵害。作為電生理的分析，花生四烯酸的效果之一變得明確了。已知對腦海馬給與高頻率刺激時，突觸興奮，之后突觸應(yīng)答將高水平持續(xù)。將該現(xiàn)象稱為海馬LTP(長期增強)，基于突觸可逆性的現(xiàn)象，成為腦功能評價的指標之一。BMMcgahon等用對照飼料或者花生四烯酸配合飼料(10mg/大鼠/日)飼養(yǎng)22個月齡的老齡大鼠8周，測定大鼠海馬的LTP(NeurobiolAging20,643(1999))。與4個月齡的幼齡大鼠相比較，顯示出老齡大鼠的海馬LTP明顯降低，通過施用花生四烯酸，恢復到幼齡大鼠的水平。但是，海馬LTP的增強從記憶的機理來說，其表示1次記憶的活化，從記憶的固定所需的l次記憶向2次記憶的移動沒有活化。因而，記憶的固定除非通過行為藥理試驗弄清楚，否則就不能證實效果。這樣，雖然公開了通過電生理的指標評價花生四烯酸的效果的例子，但是花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物對本發(fā)明的預防或改善腦功能降低引起的癥狀或者疾病是否有效沒有明確。因而，強烈希望開發(fā)預防腦功能降低引起的癥狀或者疾病、進而顯示出改善效果、應(yīng)用到藥物乃至食品中優(yōu)良的更安全的化合物。發(fā)明的公開因此，本發(fā)明要提供將花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物作為有效成分的腦功能降低引起的癥狀或者疾病的預防或改善劑，以及具有預防或改善腦功能降低引起的癥狀或者疾病的飲食品及其制備方法。更詳細地說，要提供將選自花生四烯酸、花生四烯酸的醇酯以及構(gòu)成脂肪酸的一部分或全部是花生四烯酸的甘油三酯、磷脂和糖脂中的至少1種作為有效成分的記憶'學習能力的降低、認知能力的降低、感情障礙(例如憂郁病)、智力障礙(例如癡呆，具體地說阿耳茨海默型癡呆、腦血管性癡呆)的預防或改善劑，進一步提供具有預防或改善作用的飲食品及其制備方法。本發(fā)明人等為了弄清楚花生四烯酸的或者以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物對腦功能降低引起的癥狀或者疾病的預防或改善效果，進行了深入研究，結(jié)果令人驚奇地是，將超過20個月齡的老齡大鼠提供給Morris型水迷宮試驗，通過行為藥理學分析弄清楚了花生四烯酸或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物的效果。而且,本發(fā)明人等利用微生物成功地工業(yè)化生產(chǎn)了含有20質(zhì)量％或其以上的花生四烯酸的甘油三酯，可以提供給本發(fā)明的效果試驗，從而弄清楚了該甘油三酯的效果。進而，本發(fā)明人等用酶法成功地制備了含有在l，3-位結(jié)合了中鏈月旨肪酸且在2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯的油脂，可以提供給本發(fā)明的效果試驗，從而弄清楚了該甘油三酯的效果。因而，本發(fā)明提供將花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物作為有效成分的腦功能降低引起的癥狀或者疾病的預防或改善劑，以及具有預防或改善腦功能降低引起的癥狀或者疾病作用的飲食品及其制備方法。更詳細地說，提供將選自花生四烯酸、花生四烯酸的醇酯以及構(gòu)成脂肪酸的一部分或全部是花生四烯酸的甘油三酯、磷脂和糖脂中的至少1種作為有效成分的記憶.學習能力的降低、i人知能力的降低、感情障礙(例如憂郁病)、智力障礙(例如癡呆，具體地說阿耳茨海默型癡呆、腦血管性癡呆)的預防或改善劑，進一步提供具有預防或改善作用的飲食品及其制備方法。通過本發(fā)明，可以提供將花生四烯酸或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物作為有效成分的腦功能降低引起的癥狀或者疾病的預防或改善劑，以及具有預防或改善腦功能降低引起的癥狀或者疾病作用的飲食品及其制備方法，對趨向于高齡化社會的人類特別有用。附圖的簡單說明圖1表示在Morris型水迷宮試驗中使用的裝置的概述圖。圖2i兌明學習的獲得(Hit%)。圖3是表示大鼠對嘗試次數(shù)的學習獲得(Hit%)的圖。圖4是表示在用于計量學習獲得的情況的探針試驗中，大鼠游泳60秒的軌跡的圖。圖5是表示用于計量學習獲得的情況的探針試驗的結(jié)果的圖。圖6是表示求得學習參數(shù)和腦海馬中的花生四烯酸量的相關(guān)性的結(jié)果的圖。實施發(fā)明的最佳方式本發(fā)明涉及將花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物以及具有預防或改善腦功能降低引起的癥狀或者疾病作用的飲食品及其制備方法。本發(fā)明的組合物由于具有預防或改善腦功能降低引起的癥狀或者疾病的作用，因此作為在以預防或改善(或者治療)例如記憶.學習能力的降低、認知能力的降低、感情障礙(例如憂郁病)、智力障礙(例如癡呆，具體地說阿耳茨海默型癡呆、腦血管性癡呆)等為目的的飲食品、藥品、保健品等是有用的。更具體地說，本發(fā)明的組合物由于具有預防或改善隨年齡增加而來的腦功能降低引起的癥狀或者疾病的作用，因此作為在以預防或改善(或者治療)記憶'學習能力的降低、認知能力的降低、感情障礙(例如憂郁病)、智力障礙(例如癡呆，具體地說阿耳茨海默型癡呆、腦血管性癡呆)等為目的的飲食品、藥品、保健品、進一步作為以預防健忘、預防癡呆、維持.提高記憶力、維持'提高集中能力、維持'提高注意力、使頭腦清醒、頭腦清楚、變得年輕等為目的的飲食品、健康食品、功能性食品、特定保健用食品、老人用食品等是有用的。作為本發(fā)明的有效成分，除游離的花生四烯酸之外，也可以利用以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的所有化合物。以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物可以舉出花生四烯酸鹽，例如鈣鹽、鈉鹽等。另外，花生四烯酸的醇酯可以舉出例如，花生四烯酸甲酯、花生四烯酸乙酯等。還可以利用構(gòu)成脂肪酸的一部分或全部是花生四烯酸的甘油三酯、磷脂以及糖脂等?？紤]應(yīng)用到食品中的場合,優(yōu)選花生四烯酸為甘油三酯或磷脂的形式，特別^1甘油三酯的形式。含有花生四烯酸的甘油三酯(與含有構(gòu)成脂肪酸的一部分或全部^1花生四烯酸的甘油三酯的甘油三酯的含義一樣)在自然界的來源幾乎不存在，M過本發(fā)明人等，使其可在工業(yè)上利用含有花生四烯酸的甘油三酯，而且通過將超過20個月齡的大鼠提供給Morris型水迷宮試驗，以行為藥理學分析，初次弄清楚了本發(fā)明的有效成分的效果，明確了具有預防或改善腦功能的降低引起的癥狀或者疾病的效果。因而，在本發(fā)明中，可以使用含有作為本發(fā)明有效成分的構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯的甘油三酯(含有花生四烯酸的甘油三酯)。作為含有花生四烯酸的甘油三酯，在構(gòu)成甘油三酯的全部脂肪酸中，花生四烯酸的比例是20質(zhì)量(W/W)%或其以上，優(yōu)選為30質(zhì)量％或其以上，更優(yōu)選為40質(zhì)量％或其以上的油脂(甘油三酯)應(yīng)用到食品中的場合是最好的方式。因而，在本發(fā)明中，只要是通過培養(yǎng)具有生產(chǎn)含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)的能力的微生物得到的，均可使用。作為具有生產(chǎn)含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)能力的孩吏生物，可以舉出屬于被孢霉(Mortierdla)屬、耳霉(Conidiobolus)屬、腐霉(Pvthium)屬、疫霉(Phytophthora)屬、青霉(Penicillium)屬、枝孢(Cladosporium)屬、毛霉(Mucor)屬、鐮孢(Fusarium)屬、曲霉(Aspergillus)屬、紅酵母(Rhodotorula)屬、蟲霉(Entomophthora)屬、刺孢嚢霉(Echinosporangium)屬、水霉(Saprolegnia)屬的微生物。屬于被孢霉(Mortierdla)屬的被孢霉(Mortierella)亞種的微生物可以舉出長孢被孢霉(Mortierdlaelongata)、微小被孢霉(Mortierellaexigua)、喜濕4皮孢霉(Mortierellahygrophila)、高山被孢霉(Mortierellaalpina)等。具體地說，可以舉出長孢被孢霉(Mortierdlaelongata)IF08570、微小被孢霉(Mortierellaexigua)IF08571、喜濕被孢霉(Mortierellahvgrophila)IF05941、高山被孢霉(Mortierellaalpina)IF08568，ATCC16266、ATCC32221、ATCC42430、CBS219.35、CBS224.37、CBS250.53、CBS343.66、CBS527.72、CBS529.72、CBS608.70、CBS754.68等菌林。這些菌林均可從大阪市財團法人發(fā)酵研究所(IFO)和美國典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection,ATCC)以及真菌菌種保藏中心(CBS)，沒有任何限制地得到。另外，也可以使用本發(fā)明的研究組從土壤中分離的菌株長孢被孢霉SAM0219(微工研菌保藏第8703號)(微工研條保藏第1239號)。為了培養(yǎng)在本發(fā)明中使用的菌林，將該菌林的孢子、菌絲或者預先培養(yǎng)得到的預培養(yǎng)液接種到液體培養(yǎng)基或者固體培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)。在液體培養(yǎng)基的場合，作為碳源，通常使用的葡萄糖、果糖、扣瞎、蔗糖、麥芽糖、可溶性淀粉、糖蜜、甘油、甘露糖醇等均可使用，對此沒有限定。作為氮源，除胨、酵母浸骨、麥芽浸骨、肉浸骨、酪蛋白氨酸、玉米漿、大豆蛋白、脫脂大豆、棉籽渣等天然氮源外，還可使用尿素等有機氮源以及硝酸鈉、硝酸銨、硫酸銨等無機氮源。除此之外，根據(jù)需要，磷酸鹽、硫酸鎂、硫酸鐵、硫酸銅等無機鹽和維生素等也可作為微量營養(yǎng)源使用。這些培養(yǎng)基成分只要是不損害微生物的生長的濃度即可，對此沒有特別的限定。實際使用時，通常碳源為0.1~40質(zhì)量(W/V)%，優(yōu)選1~25質(zhì)量(W/V)%的濃度比較好。開始的氮源添加量為0.1~10質(zhì)量(W/V)%,優(yōu)選0.1~6質(zhì)量(W/V)%，在培養(yǎng)過程中注入氮源也無妨。而且，通過控制培養(yǎng)M源濃度，也可以將含有45質(zhì)量％或其以上花生四烯酸的油脂(甘油三酯)作為本發(fā)明的有效成分。培養(yǎng)直至第2~4天，為菌體的增殖期，培養(yǎng)第2~4天后為油脂積累期。開始的碳源濃度為1~8質(zhì)量0/。，優(yōu)選為1~4質(zhì)量％的濃度，僅在菌體增殖期和油脂積累期初期的期間逐次添加碳源，逐次添加的碳源的總和為2~20質(zhì)量％，優(yōu)選為5~15質(zhì)量％。另外，在菌體增殖期和油脂積累期初期期間碳源的逐次添加量根據(jù)開始的氮源濃度來添加，在培養(yǎng)第7天后，優(yōu)選在培養(yǎng)第6天后，更優(yōu)選在培養(yǎng)第4天后，使培養(yǎng)基中的碳源濃度為0，由此可以得到含有45質(zhì)量％或其以上花生四烯酸的油脂(甘油三酯)，可以作為本發(fā)明的有效成分。產(chǎn)花生四烯酸菌的培養(yǎng)溫度因使用的微生物不同而不同，為5~40X:,優(yōu)選為2030"C，或者在20301C培養(yǎng)使菌體增殖后，在5~20匸繼續(xù)培養(yǎng)，也可以生產(chǎn)不飽和脂肪酸。通過這種溫度管理，也可以使生成的脂肪酸中的高度不飽和脂肪酸的比例上升。培養(yǎng)基的pH為410,優(yōu)選為5~9，進行通氣攪拌培養(yǎng)、振蕩培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)。培養(yǎng)通常進行230天，優(yōu)選5~20天，更優(yōu)選進行5~15天。而且，作為提高含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)中的花生四烯酸的比例的手段，除了控制培養(yǎng)基碳源濃度之外，選擇性水解含有花生四烯酸的油脂，也可以得到高含量含花生四烯酸的油脂。在該選擇性7jC解中使用的脂肪酶沒有甘油三酯的位置特異性，7jC解活性與雙鍵數(shù)呈比例降低，所以高度不飽和脂肪酸以外的脂肪酸的酯鍵被水解。此外，產(chǎn)生的PUFA部分在甘油酯間發(fā)生酯交^L^應(yīng)，得到高度不飽和脂肪酸得以增加的甘油三酉旨("EnhancementofArchidonic:SelectiveHydrolysisofaSingle-CellOilfromMorticrdlawithCandidacylindraceaLipase":J.Am.OilChem.Soc.,21，1323-1327(1998))。這樣，可以將選擇性7JC解^^有花生四烯酸的油脂得到的高含量含花生四烯酸的油脂(甘油三酯)作為本發(fā)明的有效成分。為了排除其它脂肪酸的影響，花生四烯酸對本發(fā)明的含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)的全部脂肪酸比例最好高，但并非限定為高比例，實際上在應(yīng)用到食品中的場合，花生四烯酸的絕對量有時也成為問題，即4tA含有10質(zhì)量％或其以上的花生四烯酸的油脂(甘油三酯)，實際上也可以4吏用。而且，在本發(fā)明中，作為構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯，可以使用1，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯。還可以使用含有5摩爾％或其以上，優(yōu)選10摩爾％或其以上，更優(yōu)選20摩爾％或其以上，最優(yōu)選30摩爾％或其以上的1，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的油脂(甘油三酯)。上述甘油三酯在1，3-位結(jié)合的中鏈脂肪酸可以使用選自具有碳原子數(shù)6~12個的脂肪酸。作為具有碳原子數(shù)6~12個的脂肪酸，可以舉出例如，辛酸或者癸酸等，特別優(yōu)選1，3-辛醃基-2-花生四烯?；?甘油(以后也稱為"8A8")。這些1,3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯以高齡者為對象的場合，成為最佳的油脂(甘油三酯)。通常攝取的油脂(甘油三酯)一旦i^小腸，就會被胰脂肪酶水解，但該胰脂肪酶是l，3-位特異性的，甘油三酯的1，3-位斷開，可以得到2分子的游離脂肪酸，同時生成l分子的2-單酰甘油(以后稱為"2-MG，，)。該2-MG的膽汁酸溶解性非常高且吸收性良好，因此可以說一般2-位結(jié)合了脂肪酸的吸收性良好。另外，2-MG—旦溶解在膽汁酸中，就^表面活性劑的作用，起到提高游離脂肪酸的吸收性的作用。其次，游離脂肪酸和2-MG與膽固醇或者磷脂等一起生物合成膽汁酸復合分子團，吸收到小腸上皮細胞中，發(fā)生三^J^甘油的再合成，最^ft為乳糜^U立放出到淋巴中去。可是，該胰脂肪酶的脂肪酸特性是對于飽和脂肪酸高，這使得花生四烯酸具有難于斷開的特征。而且問^U4脂肪酶活性隨著年齡增加而降低，所以對于易于患腦功能的降低引起的癥狀和疾病的高齡者，1，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯成為最佳的油脂(甘油三酯)。作為1，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸和2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯的具體的制備方法之一，可以在含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)和中鏈脂肪酸的存在下，通過使對甘油三酯的l,3-位結(jié)合了酯鍵特異性起作用的脂肪酶發(fā)揮作用來制備。作為原料的油脂(甘油三酯)是以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的甘油三酯，花生四烯酸對構(gòu)成甘油三酯的全部脂肪酸的比例高的場合，為了防止未反應(yīng)油脂(原料甘油三酯以及l(fā)，3-位中只有一個脂肪酸成為中鏈脂肪酸的甘油三酯)的增加引起的反應(yīng)收率的降低，通常的酶反應(yīng)溫度比20~30"C高，為3050"C，優(yōu)選為4050t:。作為對甘油三酯的l，3-位酯鍵特異性起作用的脂肪酶，可以舉出根霉(Rhizopus)屬、根毛霉(Rhizomucer)屬、曲霉(Aspergillus)屬等微生物產(chǎn)生的脂肪酶、豬胰腺脂肪酶等。對于這種脂肪酶，可以使用市售的脂肪酶?？梢耘e出德列馬根酶(Rhizomisdelemar)的脂肪酶(田邊制藥(林)制，夕M/《一"tf)、^1、/厶〕一》-S—/W(Rhizomucermiehei)的脂肪酶(乂求-乂,l/亍一又夕(林)制，ij求廿^厶IM)、黑色曲霉(Anergillusniger)的脂肪酶(天野制藥(林)制，脂肪酶A)等，但并限定于這些酶，只要是l，3-位特異性脂肪酶均可使用。為了提高反應(yīng)效率，^^應(yīng)溫度為3or或其以上，優(yōu)選為40C或其以上，所以上述脂肪酶的使用形式，優(yōu)選使用為了附加酶的耐熱性而固定在固定化載體上的脂肪酶。作為固定化載體，是多孑L質(zhì)(highporous)樹脂，可以舉出具有約100?；蚱湟陨系目讖降碾x子交換樹脂載體，例如DowexMARATHONWBA(商標，^々，5力Jl/)等。相對于l份固定化載體，將其懸浮在l，3-位特異性脂肪酶的水溶液0.5~20倍(質(zhì)量)中，在攪拌下往懸浮液中緩慢加入2~5倍量的冷丙酮(例如-，形成沉淀?？稍跍p壓下干燥該沉淀物來制備固定化酶。更筒單的方法可以相對于1份固定化載體，將0.05~0.4倍量的1，3-特異性脂肪酶溶解在最少量的水中，在攪拌下與固定化載體混合，在減壓下干燥來制備固定化酶。通過該操作，使約卯％的脂肪酶固定在載體上，但在此之前，完全沒有顯示出酯交換活性，在加入了1-10質(zhì)量(w/v)%水的M(原料油脂和中鏈月旨肪酸)中，優(yōu)選在加入了1~3質(zhì)量％水的基質(zhì)中，通過預處理，可以最有效地活化固定化酶，可用于制備。根據(jù)酶的種類，加入到本反應(yīng)系統(tǒng)中的水分量是極其重要的，在不含水的場合，酯交換難于進行，而在7jC分量多的場合，發(fā)生7jC解，甘油酯的回收率降低(如果水解，就會生成甘油二酯、單酸甘油酯)。但是，此時，通過使用經(jīng)預處理活化的固定化酶，加入到本>^應(yīng)系統(tǒng)中的水分量變得不重要，即使在完全不含水的系統(tǒng)中，也可以有效地發(fā)生酯交M應(yīng)。而且通iti^擇酶劑的種類，也可以省略預處理。這樣，通過使用具有耐熱性的固定化酶和提高酶反應(yīng)溫度，即使對于>^有1，3-位特異性脂肪酶的反應(yīng)性低的花生四烯酸的油脂(甘油三酯)，反應(yīng)效率也不會降低，可以有效地制備l，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯。具有預防或改善腦功能的降低引起的癥狀或者疾病作用的飲食品的制備方法是，可將花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物單獨或者與實質(zhì)上不含有花生四烯酸或者即使含有也僅微量的飲食品原料一起混合。這里，所謂微量意指即使飲食品原料中含有花生四烯酸，人攝取了配合了花生四烯酸的食品組合物，也達不到后述的本發(fā)明每天的花生四烯酸的攝取量。特別是在構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯的場合，關(guān)于油脂(甘油三酯)的用途，具有無限的可能性，可用作食品、飲料、藥品、保健品的原料以及添加劑。而且，其使用目的、使用量不受任何限制。例如，作為食品組合物，除通常的食品之外，還可以舉出特定保健用食品、營養(yǎng)輔助食品、新生兒用調(diào)制乳、嬰兒用調(diào)制乳、嬰幼兒用食品、妊產(chǎn)婦食品或者老人用食品等。作為含有油脂的食品的例子，可以舉出肉、魚或者堅果等本來含有油脂的天然食品、調(diào)理湯等時加入油脂的食品、油炸圏餅等使用油脂作為熱介質(zhì)的食品、黃油等油脂食品、曲奇餅干等在加工時加入油脂的加工食品或者硬餅干等在最后加工時噴涂或者涂布油脂的食品等。進而，可添加到不含油脂的農(nóng)產(chǎn)品、發(fā)酵食品、畜產(chǎn)品、7jC產(chǎn)品或者飲料中。而且，即佳是功能性食品、藥品、保健品的形式也無妨，例如可以是經(jīng)腸營養(yǎng)劑、粉末、顆粒、片劑、膠嚢、口含片、內(nèi)服液、懸浮液、乳濁液、糖漿等加工形式。另外，本發(fā)明的組合物除本發(fā)明的有效成分之外，也可以含有在通常的飲食品、藥品或者保健品中使用的各種載體、添加劑。特別是為了防止本發(fā)明的有效成分的氧化劣化，最好含有抗氧化劑。作為抗氧化劑，可以舉出生育酚類、黃酮衍生物、甜茶內(nèi)酯類、曲酸、沒食子酸衍生物、兒茶酸類、7年酸、棉籽酚、吡^^f生物、a酚、愈創(chuàng)木酚、愈創(chuàng)木脂、對-香豆酸、去甲二氫愈創(chuàng)木酸、甾醇類、萜烯類、核酸^^^類、類胡蘿卜素類、木酴素類等之類的天然抗氧化劑和以抗壞血酸棕櫚酸酯、抗壞血酸硬脂酸酯、丁羥基苯曱醚(BHA)、丁羥基甲苯(BHT)、單-叔-丁基氫醌(TBHQ)、4-羥甲基-2,6-二-叔-丁基苯酚(HMBP)為代表的合成抗氧化劑。生育酚類可以舉出a-生育酚、P-生育酚、y-生育酚，S-生育酚、s-生育酚、《-生育酚、Ti-生育酚和生育酚酯(醋酸生育酚酯)等。進一步類胡蘿卜素類可以舉出P-胡蘿卜素、角黃素、蝦青素等。本發(fā)明的組合物除了本發(fā)明的有效成分之外，作為載體，可以舉出各種載體、填料劑、稀釋劑、增量劑、t^t劑、賦形劑、粘合劑溶劑(例如水、乙醇、植物油)、溶解助劑、緩沖劑、溶解促進劑、凝膠化劑、懸浮化劑、小麥粉、米粉、淀粉、玉米淀粉、多糖、乳蛋白、膠原、米糠油、卵磷脂等。作為添加劑，可以舉出維生素類、朝節(jié);^fr、有機酸、香料、防潮劑、纖維素、電解質(zhì)、礦物質(zhì)、營養(yǎng)素、抗氧化劑、防腐劑、芳香劑、濕潤劑、天然的食物提取物、蔬菜提取物等，但并非限于這些。花生四烯酸和以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物的主藥效成分在于花生四烯酸。有報道，從每天的飲食中攝取花生四烯酸的量在關(guān)東地區(qū)為0.14g，在關(guān)西地區(qū)為0.19~0.20g(脂質(zhì)營養(yǎng)學4，73-82，1995)，從高齡者的油脂的攝取量降低的觀點、胰脂肪酶活性降低的觀點等來看，需要攝^4目當量甚至超過該量的花生四烯酸。因而，成人(例如以體重60kg計)每天的本發(fā)明的花生四烯酸和以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物的攝取量以花生四烯酸量換算計，為0.001g20g，優(yōu)選0.01g10g,更優(yōu)選0.05g~5g，最優(yōu)選0.1g2g。將本發(fā)明的有效成分實際應(yīng)用到飲食品中的場合，在食品中配合的花生四烯酸的絕對量也變得重要。但是，在飲食品中配合的絕對量也因配合的飲食品的攝取量而改變，因此食品中配合的甘油三酯為含有構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯的場合，進行配合以使花生四烯酸達到0.0003質(zhì)量％或其以上，優(yōu)選0.003質(zhì)量％或其以上，更優(yōu)選0.03質(zhì)量％或其以上。而且，在飲食品中配合的甘油三酯為含有l(wèi)，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸和2-位結(jié)合了花生四烯酸結(jié)合的甘油三酯的場合，進行配合以使1,3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸和2-位結(jié)合了花生四烯酸結(jié)合的甘油三酯達到0.001質(zhì)量％或其以上，優(yōu)選0.01質(zhì)量％或其以上，更優(yōu)選0.1質(zhì)量％或其以上。使用本發(fā)明的組合物作為藥物的場合，可按照制劑
技術(shù)領(lǐng)域：
中慣用方法，例如日本藥典中記載的方法或者基于它的方法來制備。使用本發(fā)明的組合物作為藥物的場合，組合物中的有效成分的配合量只要能達到本發(fā)明的目的，則對此沒有限定，可以以適當?shù)呐浜媳壤褂谩Ｊ褂帽景l(fā)明的組合物作為藥物的場合，最好以給單位形式給藥，特別優(yōu)選口服給藥。本發(fā)明的組合物的給藥量因年齡、體重、癥狀、給藥次數(shù)等而異，例如，以花生四烯酸換算計，成人(約60kg計)每天給藥本發(fā)明的花生四烯酸和以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物通常約0.001g~20g，優(yōu)選約0.01g~10g，更優(yōu)選約0.05g~5g，最優(yōu)選約O.lg~2g，每天可分成1~3次給藥'腦的磷脂膜的主要的脂肪^A花生四烯酸和二十二碳六烯酸，考慮平衡的場合，本發(fā)明的組合物最好將二十二碳六烯酸和花生四烯酸組合。另外，由于腦的磷脂膜中的二十碳五烯酸的比例非常低，所以本發(fā)明的組合物中最好幾乎不含有二十碳五烯酸。而且，更優(yōu)選幾乎不含有二十碳五烯酸且含有花生四烯酸和二十二碳六烯酸的組合物。而且，在花生四烯酸和二十二碳六烯酸的組合物中，花生四烯j^/二十二碳六烯酸比(質(zhì)量)在0.1~15的范圍內(nèi)，最好在0.25~10的范圍內(nèi)。另外，優(yōu)選配合了不超過花生四烯酸的1/5(質(zhì)量比)的二十碳五烯酸的飲食品。下面通過實施例更具體地說明本發(fā)明。但是，本發(fā)明不受下述實施例的限定。另外，飲食品、健康食品、功能性食品、特定保健用食品、老人用食品等本發(fā)明的食品組合物也包括該食品組合物和/或該食品組合物中的成分具有預防或改善腦功能的降低引起的癥狀或者疾病的作用，更具體地說具有預防或改善隨年齡增加而來的腦功能降低引起的癥狀或者疾病的作用、預防改善記憶學習能力的降低、i^知能力的降低、感情障礙(例如憂郁病)、智力障礙(例如癡呆，具體地說阿耳茨海默型癡呆、腦血管性癡呆)、預防健忘、預防癡呆、維持'提高記憶力、維持'提高集中能力、維持'提高注意力、使頭腦清醒、頭腦清楚、變得年輕等作用的將所述作用記載或顯示在該食品組合物的包裝用容器和/或為促進該食品組合物的銷售的工具(例如小冊子等)上而銷售的食品組合物。實施例1(含有花生四烯酸的甘油三酯的制備方法)4吏用高山被孢酶(Mortierellaalpina)CBS754.68作為產(chǎn)花生四烯酸菌。在10kL培養(yǎng)槽中制名^^有葡萄糖1.8%、脫月旨大豆粉3.1%、大豆油0.1%、KH2PO40.3%、Na2SO40.1%、CaCl2211200.05%和MgCl2"6H2O0.05%的培養(yǎng)基6kL,將初始pH調(diào)節(jié)到6.0。接種預培養(yǎng)液30L，在溫度26通氣量360mV小時，槽內(nèi)壓200kPa的糾下，進行8天的通氣攪拌培養(yǎng)。另外，調(diào)整攪拌數(shù)以使溶解的氧濃度維持在1015ppm。進而，在到第4天時通過流加法使培養(yǎng)基中的葡萄糖濃度為1~2.5o/。的范圍，這之后將葡萄糖濃度維持在0.5~1%(上述的％意指質(zhì)量(w/v)%)。培養(yǎng)結(jié)束后，通過過濾、干燥，回收含有含花生四烯酸的甘油三酯的菌體，從所得菌體用己烷提取油脂，經(jīng)食用油脂的精練工序(脫膠、脫酸、脫臭、脫色)，得到含有花生四烯酸的甘油三酯(花生四烯酸在甘油三酯的任意位置結(jié)合)150kg。將所得油脂(甘油三酯)甲酯化，用氣相色i普分析所得脂肪酸甲酯后，花生四烯酸占全部脂肪酸的比例是40.84質(zhì)量％。另外，棕櫚酸、^!旨酸、油酸、亞油酸、Y-亞麻酸、二高-Y-亞麻酸等分別是11.63、7.45、7.73、9.14、2.23、3.27質(zhì)量％。進一步，將上述含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)乙酯化，從>^有40質(zhì)量％花生四烯酸乙酯的脂肪酸乙酯混合物，通過通用的高速液相色鐠法，分離'精制99質(zhì)量％花生四烯酸乙酯。實施例2(含有5摩爾o/c或其以上8A8的甘油三酯的制備)將離子交換樹脂載體(DowexMARATHONWBA:夂々亇5力,1/,商標)100g懸浮在德列馬根霉(Rhizopusddeniar)脂肪酶12.5%水溶液(夕ij/《-if粉末田邊制藥(林))80mL中，在減壓下干燥，得到固定化月旨肪酶。接著，將實施例1得到的含有40質(zhì)量％花生四烯酸的甘油三酯(TGA40S)80g、辛酸160g、上述固定化脂肪酶12g、水4.8ml在30"C攪拌(130rpm)下反應(yīng)48小時。反應(yīng)結(jié)束后，去除反應(yīng)液，得到活化的固定化脂肪酶。然后，將固定化脂肪酶(德列馬根霉(Rhizopusdd畫r)脂肪酶，載體DowexMARATHONWBA，商標)10g填充到帶有套筒的玻璃柱(1.8x12.5cm，容量31.8ml)中，將實施例1得到的TGA40S和辛酸混合為1:2的混合油脂以一定的流速(4ml/h)流到柱中，實施連續(xù)反應(yīng)，得到反應(yīng)油脂400g。另夕卜，柱溫為4041X:。從所得>^應(yīng)油脂通過分子蒸餾除去未反應(yīng)的辛酸和游離脂肪酸，得到含有8A8的油脂(甘油三酯)。而且，通過氣相色譜法和高速液體色譜法，研究得到的含有8A8的油脂(甘油三酯)中的8A8的比例，為31.6摩爾％(另外，8P8、808、8L8、8G8、8D8的比例分別為0.6、7.9、15.1、5.2、4.8摩爾％。在甘油三酯的2-位結(jié)合的脂肪酸P、O、L、G、D分別表示棕櫚酸、油酸、亞油酸、y-亞麻酸、二高-Y-亞麻酸，8P8稱為1，3-辛SL^-2-棕櫚?；?甘油，808稱為1，3-辛絲-2-油?；?甘油，8L8稱為1，3-辛絲-2-亞油絲-甘油，8G8表示1，3-辛St^-2-Y-亞麻油SL^-甘油，8D8稱為1，3—辛絲一2—二高一Y—亞麻油絲-甘油)。另夕卜，v^得到的含有8A8的油脂(甘油三酯腿過通用的高速液相色i普法分離精制了96摩爾％8A8。實施例3(根據(jù)Morris型水迷宮試驗的TGA40S的學習能力評價)作為老齡大鼠的實驗組，將18個月齡雄性Fischer系大鼠16只分為對照飼料組(8只，OC組)和TGA40S配合飼料組(8只OA組)2組，對各組給予表1所示的對照飼料和SUNTGA40S配合飼料。而且，作為幼齡大鼠的對照組(YC組)，對4個月錄s維性Fischer系大鼠8只給予表1所示的對照飼料(YC組)。另外，在TGA40S配合飼料中使用的TGA40S使用實施例1得到的TGA40S。表l實驗食物<table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>每只大鼠每天的攝食量約20g,所以每只大鼠每天的TGA40S攝取量為O.lg。在TGA40S中結(jié)合的全部脂肪酸內(nèi)，由于40質(zhì)量％是花生四烯酸，所以每只大鼠每天的花生四烯酸的攝取量為40mg(甘油骨架部分的質(zhì)量，方^t^見不計算在內(nèi))。該40mg如果換算為人的攝取量，相當于133mg/60kg/日)。在飼養(yǎng)第3個月(老齡大鼠的場合為21個月齡，幼齡大鼠的場合為7個月齡)的前后，實施Morris型水迷宮學習試驗。Morris型水迷宮試驗是往水槽(直徑120cm，高度35cm)中加入用墨汁弄黑濁的水(液面的高度20cm)，事先*^了大鼠大致勉強能豎起大小的逃避臺(直徑11.5cm，高度19cm)(逃避臺位于水面下，對于在7K槽內(nèi)游泳的大鼠，不能看見逃避臺)，從該^Mf所確定的位置(出發(fā)點)i^進行學習的大鼠，通it^游至逃避臺的空間認識的學習試驗，證實與掌管記憶的腦海馬的關(guān)聯(lián)，該試驗在歐美廣泛使用。在Morris型7jC迷宮試驗中使用的裝置的概述圖示于圖1中。如果經(jīng)過一定次數(shù)，大鼠就會逐漸學習逃避臺的位置。大鼠的學習如下進行。即，從Morris型水迷宮試驗裝置的出發(fā)點放開大鼠，即使經(jīng)過60秒，在大鼠不能到iiia避臺的場合，通過將大鼠放在逃避臺之上，使其學習不能看見的逃避臺的位置。該學習每天2次，連續(xù)進行2周。從出發(fā)點放開大鼠，將游過從出發(fā)點朝著逃避臺土15"C的角度的范圍的時間對于整個游泳時間的比例(Hit%，參見圖2)作為學習的指標。與幼齡大鼠比較，老齡大鼠的學習的獲得率明顯降低，但通過給予TAG40S即花生四烯酸，改善為近似于幼齡大鼠的水平(圖3)。在圖3中，橫軸為試行4次，即以2天為一個刻度表示。接著，為了計量學習獲得的情況，在前述2周學習的第二天即第15天實施探針試驗。獲得學習后，如果拿走逃避臺，大鼠就會圍繞以前逃避臺所在的場所游泳。記憶這樣的逃避臺的位置，以圍繞所在場所游戲的時間(將水槽分為4個區(qū)域，用在逃避臺所在的區(qū)域(1/4)的時間(秒)進^f價)，可以評價學習獲得的情況。顯示出YC組、OA組和OC組的No.l和No.2大鼠的游泳的軌跡(圖4)。另外，由于根據(jù)個體來改變出發(fā)點4吏大鼠學習，圖4中的出發(fā)點(S)和逃避臺所在的區(qū)域因大鼠的個體而異。另夕卜，在圖5中，目標四分之一圓表示逃避臺所在的區(qū)域(1/4)。OC組的大鼠OC-l顯然已迷失方向，其在逃避臺所在區(qū)域僅停留2.4秒。探針試驗的結(jié)果匯集在表2中。表2:探針試驗的結(jié)果實驗組記憶逃避臺的場所，在平均±標準偏差標本標準偏差t值p值根據(jù)t(f;p)表]______所在場所游泳的時間(SD)___________(S)自由度f=n-l=7OA組28.6，36.6，14.8，22.223.20±7.54"7.063.07P<0.0522.2，26.2，13.0,21,8OC組2.4，30.2，23.4，17.419.78±10.79b10.091.25-5.0,23.0,30.4,26.4YC組27.8，34.8，30.6,33.428.43±5.59a5.236.79P<0.001wa，b在不同的文字間有顯著差別(p<0.05)在表2中，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>其中，X表示平均(各組的平均)，μ示總體平均(15秒)，S表示標本標準偏差，SD表示平均±標準偏差，n表示數(shù)據(jù)數(shù)(各組的數(shù)據(jù)數(shù))，S表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>SD標示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>如果用圖表示表2(圖5)，可以看出，對于對老齡大鼠給予TGA40S的OA組，逃避臺所在區(qū)域的逗留時間(記憶逃避臺的場所，在所在場所游泳的時間)顯著地長。由于讓大鼠自由行動60秒并測定逗留時間，所以偶然性水平的15秒表示偶然性逗留的可能性。棒圖顯示出大鼠在逃避臺所在區(qū)域的平均逗留時間。接著，從提供給Morris型水迷宮試驗的大鼠摘出腦海馬，用Folch法提取全部脂質(zhì)。然后，通過薄層色鐠法將脂質(zhì)分級，刮取磷脂級分，通過與乙醇共沸除去7JC后，用10%鹽酸-甲醇制成脂肪酸甲酯后，通過氣相色鐠法進行分析?；谧钚∑椒椒ǎㄟ^一次近似曲線，求出水迷宮學習的參數(shù)("到達逃避臺的時間(越短越好)"，"朝逃避臺游過去的比例(Hit%越大越好)")和腦海馬中的花生四烯酸量的關(guān)系的結(jié)果(圖6),被證實到iii^避臺的時間與海馬花生四烯酸量負相關(guān)(相關(guān)系數(shù)R==-0.38)，但與游泳軌跡的Hit。/。正相關(guān)(相關(guān)系數(shù)R-0.32)。在圖6中，縱軸表示相當于海馬組織lg的花生四烯酸的mg。這樣，通過給予TGA40S,初次弄清楚了學習能力或者認知能力的改善，初次證明了其效果取決于花生四烯酸。實施例4(Morris型水迷宮試驗的8A8的學習能力評價)作為老齡大鼠的實驗組，將18個月齡雄性Fischer系大鼠20只分為對照祠料組(6只OC組)、TGA40S配^^1料組(6只OA組)和8A8配合飼料組(8只8A8組)3組，對各個組給予表3所示的對照飼料、TGA40S配合飼料和8A8配合飼料。此外，作為幼齡大鼠的對照組(YC組)，對4個月齡雄性Fischer系大鼠8只給予表3所示的對照飼料。另外，在8A8配合飼料中使用的8A8使用實施例2得到的96摩爾％8A8。表3實驗食物<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table>由于大鼠每天的攝食量約20g，所以每只大鼠每天TGA40S的攝取量為O.lg。在TGA40S中結(jié)合的全部脂肪酸內(nèi)，由于40質(zhì)量％是花生四烯酸，所以每只大鼠每天的花生四烯酸的攝取量為40mg(甘油骨架部分的質(zhì)量，方便起見不計算在內(nèi))。TGA40S的分子量為928.5(從平均脂肪酸分子量算出)，8A8的分子量為628.7，所以設(shè)計實驗食物以使8A8配合飼料組的每只大鼠的每天的花生四烯酸的攝取量也達到40mg。在飼養(yǎng)第3個月(老齡大鼠的場合為21個月齡，幼齡大鼠的場合為7個月齡)的前后，實施Morris型7JC迷宮學習試驗。實施探針試驗的結(jié)果，記憶逃避臺的位置，在所在場所游泳的時間(水槽分為4個區(qū)域，以在逃避臺所在的區(qū)域(1/4)的時間(秒)進行評價)在YC組、OC組、OA組和8A8組中,分別為28.59±5.44a、13.27±7.89b、22.02±5.35￡和27.18±5.10ac(數(shù)值平均值土標準偏差，a、b、c在不同文字間存在顯著差別(P<0.5)。因此，通過給予以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的甘油三酯，隨著年齡增加而降低的學習的獲得的程度趨向幼齡大鼠的水平，顯著改善。此外，TGA40S和8A8的比^明8A8組的學習獲得的禾呈度有顯示高的傾向。OA組、8A8組大鼠的花生四烯酸才聶取量均相同，因此8A8組顯示出易于被吸收，證實了對因年齡增加而活性降低的胰脂肪酶是有效的。實施例5(通過Morris型水迷宮試驗對含有5%或其以上8A8的甘油三酯的學習能力進W價)作為老齡大鼠的實驗組，將18個月齡雄性Fischer系大鼠20只分為對照飼料組(6只OC組)、8A8配合銅料組(6只8A8組)和含有8A8的油脂配合飼料組(8只8A8組(32摩爾％)組)3組，對各個組給予表4所示的對照飼料、8A8配合飼料和含有8A8的油脂配合飼料。此外，作為幼齡大鼠的對照組，對4個月齡雄性Fischer系大鼠8只給予表4所示的對照飼料(YC組)。另外，在8A8配合飼料中使用的8A8使用實施例2得到的96摩爾％8A8，在含有8A8的油脂配合飼料中使用的含有8A8的油脂(甘油三酯)使用實施例2得到的含有31.6摩爾。/。8A8的油脂(甘油三酯)。表4實驗食物<table>tableseeoriginaldocumentpage27</column></row><table>8A8配合料和實施例4一樣，每只大鼠每天的花生四烯酸的攝取量為40mg。含有8A8的油脂(甘油三酯)配合飼料的場合，大鼠每天的花生四烯酸的^^L量為13.2mg。在培養(yǎng)第3個月(老齡大鼠的場合為21個月齡，幼齡大鼠的場合為7個月齡)的前后實施Morris型水迷宮學習試驗。實施探針試驗的結(jié)果，記憶逃避臺的位置，在所在場所游泳的時間(水槽分為4個區(qū)域，以在逃避臺所在的區(qū)域(1/4)的時間(秒)進W價)在YC組、OC組、8A8組和8A8(32摩爾％)組中，分別為27.91±5.93a、13.75±7.74b、27.00±4.653和21.18±4.89c(數(shù)值:平均值土標準偏差，a、b、c在不同文字間存在顯著差別(P<0.5))。因而，通過給予^^有5摩爾。/。或其以上8A8的油脂(甘油三酯)，隨著年齡增加而降低的學習的獲得的程度趨向幼齡大鼠的水平，顯著改善。但是，根據(jù)8A8配合飼料組，獲得的程度顯然是低值，證實了依賴于8A8的濃度，進一步依賴于花生四烯酸的濃度。實施例6(配合含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)的膠嚢的制備)將7jC加入到明膠100質(zhì)量份和食品添加劑用甘油35質(zhì)量份中，在50~60匸溶解，制備粘度2000cp的明膠被膜。接著，將維生素E油0.05質(zhì)量%與實施例l得到的含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)混合，制備內(nèi)容物1。將維生素E油0.05質(zhì)量％與含有32摩爾％實施例2得到的8A8的油脂(甘油三酯)配合，制備內(nèi)容物2。將實施例1得到的含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)50質(zhì)量％和魚油(金槍魚在所有脂肪酸中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸所占的比例分別為5.1質(zhì)量％和26.5質(zhì)量％)50質(zhì)量％混合，再與維生素E油0.05質(zhì)量。/?；旌?，制備內(nèi)容物3。將實施例1得到的含有花生四烯酸的油脂(甘油三酯)80%和魚油(Jr槍魚在所有脂肪酸中二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸所占的比例分別為5.1質(zhì)量％和26.5質(zhì)量％)20質(zhì)量％混合，再與維生素E油0.05質(zhì)量％混合，制備內(nèi)容物4。使用這些內(nèi)容物l-4，按照常規(guī)方法進行膠嚢成形和干燥，制1粒含有180mg內(nèi)容物的W^嚢。實施例7(在脂肪輸液劑中的使用)加入含有32摩爾％實施例2得到的8A8的油脂(甘油三酯)40g、精制蛋黃卵磷脂48g、油酸20g、甘油100g和0.1N苛性鈉40ml，用均質(zhì)機*后，加入注射用蒸餾水成為4升。在高壓噴霧式乳化機中將其乳化，制備脂質(zhì)乳液。將該脂質(zhì)乳液每200ml注入到塑料袋中后，在121"C進行高壓蒸汽滅菌處理20分鐘，制成脂肪輸液劑。實施例8(在汁中的使用)將P-環(huán)糊精2g添加到20%乙醇水溶液20ml中，在攪拌機攪拌下往其中加入實施例1得到的含有花生四烯酸的甘油三酯(配合0.05質(zhì)量％維生素E)100mg，在50"C孵育2小時。室溫冷卻后(約l小時)，在進一步繼續(xù)攪拌下在4X:孵育10小時。通過離心分離回收生成的沉淀，用正己烷洗滌后，進行冷凍干燥，得到含有含花生四烯酸的甘油三酯的環(huán)糊精包接的化合物1.8g。使該粉末lg與汁10L均勻混合，制^^有含花生四烯酸的甘油三酯的汁。權(quán)利要求1.花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物在制備預防或者改善通過學習效果評價的腦功能的降低引起的阿耳茨海默型癡呆的藥物組合物中的用途。2.權(quán)利要求l所述的用途，以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物是花生四烯酸的醇酯或者構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部為花生四烯酸的甘油三酯、磷脂或者糖脂。3.權(quán)利要求2所述的用途，構(gòu)成脂肪酸的一部分或者4^P是花生四烯酸的甘油三酯是1,3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯。4.權(quán)利要求3所述的用途，中鏈脂肪^1選自具有碳原子數(shù)6~12個的脂肪酸。5.權(quán)利要求4所述的用途，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)8個的脂肪6.權(quán)利要求2所述的用途，其特征在于，構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯中，花生四烯酸的比例相對于構(gòu)成甘油三酯的全部脂肪酸為10質(zhì)量％或其以上。7.權(quán)利要求2所述的用途，構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯是從屬于被孢霉(Mortierella)屬的微生物中提取的。8.權(quán)利要求2所述的用途，構(gòu)成脂肪酸的一部分或者4^是花生四烯酸的甘油三酯是幾乎不含有二十碳五烯酸的甘油三酯。9.權(quán)利要求3所述的用途，1，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸結(jié)合的甘油三酯在組合物中所含的甘油三酯中占5摩爾％或其以上。10.權(quán)利要求9所述的用途，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)6~12個的脂肪酸。11.權(quán)利要求10所述的用途，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)8個的脂肪酸。12.花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物在制備預防或者改善通過學習效果評價的腦功能的降低引起的阿耳茨海默型癡呆的食品組合物中的用途。13.權(quán)利要求12所述的用途，其中食品組合物，含有花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物，以使成人每天的攝取量換算為花生四烯酸量為0.001~20g。14.權(quán)利要求13所述的用途，以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物是花生四烯酸的醇酯或者構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯、磷脂或者糖脂。15.權(quán)利要求14所述的用途，構(gòu)成脂肪酸的一部分或者全部是花生四烯酸的甘油三酯是1,3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯。16.權(quán)利要求15所述的用途，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)612個的脂肪酸。17.權(quán)利要求16所述的用途，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)8個的脂肪酸。18.權(quán)利要求15所述的用途，其中食品組合物含有0.001質(zhì)量％或其以上1，3-位結(jié)合了中鏈脂肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯。19.權(quán)利要求18所述的用途，其特征在于中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)6~12個的脂肪酸。20.權(quán)利要求19所述的用途，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)8個的脂肪酸。21.權(quán)利要求12~20任一項所述的用途，食品組合物是功能性食品、營養(yǎng)輔助食品、特定保健用食品或者老人用食品。22.權(quán)利要求12~20任一項所述的用途，其特征在于該食品組合物和/或該食品組合物中的成分具有預防或者改善腦功能的降低引起的阿耳茨海默型癡呆的作用，將這一事實顯示在該食品組合物的包裝用容器和/或銷售促進用工具上。23.—種具有預防或者改善通過學習效果評價的腦功能的降低引起的阿耳茨海默型癡呆的作用的組合物，其含有甘油三酯而形成，所述甘油三酯含有5摩爾％或其以上1，3-位結(jié)合了中鏈月旨肪酸且2-位結(jié)合了花生四烯酸的甘油三酯。24.權(quán)利要求23所述的組合物，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)6~12個的脂肪酸。25.權(quán)利要求24所述的組合物，中鏈脂肪酸選自具有碳原子數(shù)8個的脂肪酸。26.權(quán)利要求23所述的組合物，進一步含有以二十二六烯酸和/或二十二碳六烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物。27.權(quán)利要求26所述的組合物，以二十二碳六烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物是二十二碳六烯酸的醇酯或者構(gòu)成脂肪酸的一部分或者4^P是二十二碳六烯酸的甘油三酯、磷脂或者糖脂。28.權(quán)利要求26所述的組合物，其特征在于在上述花生四烯酸和二十二碳六烯酸的組合中，花生四烯^/二十二碳六烯酸質(zhì)量比在0.1~15的范圍。29.權(quán)利要求26所述的組合物，其特征在于進一步相對于組合物中的花生四烯酸，組合物中的二十碳五烯^A不超過l/5的量。全文摘要本發(fā)明提供花生四烯酸和/或以花生四烯酸為構(gòu)成脂肪酸的化合物在制備預防或者改善通過學習效果評價的腦功能的降低引起的阿耳茨海默型癡呆的藥物組合物中的用途。文檔編號A23L1/00GK101336913SQ200810131360公開日2009年1月7日申請日期2002年1月29日優(yōu)先權(quán)日2001年8月2日發(fā)明者岡市廣成,岡市洋子,小野佳子,河島洋,秋元健吾申請人:三得利株式會社