專利名稱：高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物原料的制備工藝，特別是高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)的工藝。
背景技術(shù)：
1.在馬希漢等所撰寫(xiě)的“從杜仲葉中提取綠原酸純品的研究”(參見(jiàn)《西北林學(xué)院學(xué)報(bào)》1996，11(2)58-60)中，采用氯仿脫脂、化學(xué)萃取、無(wú)機(jī)鹽沉，此工藝方法未能有效的去除杜仲葉中的雜質(zhì)(如蛋白質(zhì)、膠體、纖維素)，使綠原酸很難溶出，且只適用于實(shí)驗(yàn)室小劑量制備。2.在汪洪武等所撰寫(xiě)的“杜仲葉中綠原酸類物質(zhì)的提取研究”(參見(jiàn)《江西師范大學(xué)學(xué)報(bào)》(自然科學(xué)版)1997，21(4)339-341)中，采用的是溶劑提取、堿性Pb(OAc)和KOAc沉淀，再溶解萃取重結(jié)晶制得，但鉛會(huì)在綠原酸產(chǎn)品中存有殘留，含鉛提取廢液會(huì)對(duì)環(huán)境造成不良影響，因此，該方法不適宜工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)。3.在戚向陽(yáng)等撰寫(xiě)的《杜仲葉綠原酸的提取、分離和鑒定》(參見(jiàn)《植物資源與環(huán)境》1998，7(1)61-62)中，采用水浸提、101樹(shù)脂分離、有機(jī)溶劑萃取純化，其綠原酸的含量?jī)H為24.33％。以上工藝技術(shù)未對(duì)綠原酸提取、純化過(guò)程中的各種影響因素沒(méi)有給以綜合考慮和解決，均不能達(dá)到99％以上的含量和工業(yè)化生產(chǎn)的規(guī)摸。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明正是為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處而提出一種解決生產(chǎn)過(guò)程中綠原酸所含的酚羥基氧化、烯酸酯鍵水解和相繼分子內(nèi)酯基遷移而發(fā)生異構(gòu)等問(wèn)題；以及突破工業(yè)化生產(chǎn)得率低、含量達(dá)不到要求99％以上的瓶頸。
本發(fā)明高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝分如下步驟完成1.預(yù)處理加粉碎后的杜仲葉2至3倍重量的石油醚將杜仲葉進(jìn)行脫酯，過(guò)濾后在杜仲葉中添加0.5-1％的生物復(fù)合酶制劑并放入密閉容器中儲(chǔ)存24-36小時(shí)；其中復(fù)合生物酶制劑是由45％-65％纖維素酶、5％-10％蛋白酶和30％-45％果膠酶組成。
2.提取以杜仲葉重量的4-5倍、濃度為40％-60％的乙醇或丁醇，在40℃-50℃溫度下提取0.5-1小時(shí)，用相同的條件提取兩次，離心過(guò)濾并壓榨；
3.提純?cè)谔崛∫褐刑砑?％-3％復(fù)合還原溶媒，這種復(fù)合還原溶媒由是具有較強(qiáng)還原性的無(wú)機(jī)鹽組成，如由85％-95％硫代硫酸鈉和5％-15％亞硫酸氫鈉組成。將加有還原溶媒的提取液濃縮后用濃鹽酸調(diào)pH至2-3，加濃縮液3-4倍的乙酸乙酯萃取兩次，得乙酸乙酯層，其中加入3％-5％NaOH液中和使乙酸乙酯中的綠原酸進(jìn)入水相，水相分離后再用濃鹽酸酸沉析出綠原酸沉淀，沉淀分離后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重結(jié)晶，干燥即得綠原酸粗品，含量一般為95％-98％左右，提取率約2.7％；4.成品精制綠原酸粗品和去離子水以1∶3或1∶4的料液比，在連續(xù)通99.99％的高純氮?dú)?，保持正壓，壓差?Pa的條件下，溶解并加入8％-10％活性碳加熱到50-60℃回流0.5-1小時(shí)、過(guò)濾、冷卻結(jié)晶，結(jié)晶用2-5倍的分析純丙酮清洗、真空干燥獲得99％以上高純度綠原酸。


說(shuō)明書(shū)附圖為本發(fā)明的詳細(xì)工藝流程圖。
以下是本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比所具有的積極效果1.添加生物復(fù)合酶提高綠原酸的溶出率和還原溶媒保護(hù)綠原酸分子基團(tuán)避免被氧化技術(shù)是高純度綠原酸生產(chǎn)的重大突破，本發(fā)明的使用，使申請(qǐng)人首家完成工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)高純度綠原酸(含量99％以上)的企業(yè)，年產(chǎn)量達(dá)到500公斤。
2.綠原酸純度達(dá)到99％以上，完全能滿足生產(chǎn)凍干粉針的各項(xiàng)指標(biāo)。
3.溶劑用量少，產(chǎn)品溶劑殘留可達(dá)到國(guó)家有關(guān)要求和各項(xiàng)指標(biāo)具體實(shí)施方案實(shí)施例1一種高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝，是將粉碎過(guò)的杜仲葉，用2倍的石油醚將杜仲葉進(jìn)行脫酯，并在其中添加1％的，由65％纖維素酶、5％蛋白酶和30％果膠酶組成的生物復(fù)合酶制劑，處理24時(shí)，再用4倍的40％乙醇溶液分2次在40℃回流提取，第1次0.5小時(shí)，第2次0.5小時(shí)，每次提取后過(guò)濾，合并濾液，在濾液中添加3％的，由90％硫代硫酸鈉、10％亞硫酸氫鈉組成的復(fù)合還原溶媒，并將濾液液濃縮后用濃鹽酸調(diào)pH至2，加3倍乙酸乙酯萃取2次，得乙酸乙酯層。加入3％NaOH液中和，水相再用濃鹽酸酸沉析出綠原酸，分離后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重結(jié)晶，干燥即得綠原酸粗品。將綠原酸粗品以1∶4的料液比，在連續(xù)通入99.99％的高純氮?dú)獗３终龎海瑝翰睿?Pa的條件下，在水中加入10％活性炭回流0.5小時(shí)、過(guò)濾、冷卻結(jié)晶，結(jié)晶用0.5倍的分析純丙酮清洗、真空干燥獲得含量為99.25％高純度綠原酸。
實(shí)施例2一種高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝，是將粉碎過(guò)的杜仲葉，用2倍的石油醚將杜仲葉進(jìn)行脫酯，并在其中添加1％的，由45％纖維素酶、10％蛋白酶和45％果膠酶組成生物復(fù)合酶制劑，處理28時(shí)，再用6倍的50％乙醇溶液分2次在45℃回流提取，第2次0.5小時(shí)，第2次1小時(shí)，每次提取后過(guò)濾，合并濾液，在濾液中添加3％的，由85％硫代硫酸鈉、15％亞硫酸氫鈉組成的復(fù)合還原溶媒，并將濾液液濃縮后用濃鹽酸調(diào)pH至2.5，加3倍乙酸乙酯萃取2次，得乙酸乙酯層。加入4％NaOH液中和，水相再用濃鹽酸酸沉析出綠原酸，分離后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重結(jié)晶，干燥即得綠原酸粗品。將綠原酸粗品以1∶5的料液比，在連續(xù)通入99.99％的高純氮?dú)獗３终龎?，壓差?Pa的條件下，在水中加入10％活性炭回流0.5小時(shí)、過(guò)濾、冷卻結(jié)晶，結(jié)晶用0.5倍的分析純丙酮清洗、真空干燥獲得含量為99.76％高純度綠原酸。
實(shí)施例3一種高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝，是將粉碎過(guò)的杜仲葉，用2倍的石油醚將杜仲葉進(jìn)行脫酯，并在其中添加1％生物復(fù)合酶制劑(同實(shí)施例1相同)處理32時(shí)，再用6倍的60％乙醇溶液分2次在50℃回流提取，第1次1小時(shí)，第2次1小時(shí)，每次提取后過(guò)濾，合并濾液，在濾液中添加3％的，由85％硫代硫酸鈉、15％亞硫酸氫鈉組成的復(fù)合還原溶媒，將濾液液濃縮后用濃鹽酸調(diào)pH至3，加3倍乙酸乙酯萃取2次，得乙酸乙酯層。加入5％NaOH液中和，水相再用濃鹽酸酸沉析出綠原酸，分離后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重結(jié)晶，干燥即得綠原酸粗品。將綠原酸粗品以1∶5的料液比，在連續(xù)通入99.99％的高純氮?dú)獗３终龎?，壓差?Pa的條件下，在水中加入10％活性炭回流1小時(shí)、過(guò)濾、冷卻結(jié)晶，結(jié)晶用1倍的分析純丙酮清洗、真空干燥獲得含量為99.99％高純度綠原酸。
實(shí)施例4生產(chǎn)的工藝如實(shí)施例1所述，所不同的是用40％丁醇溶液作為提取液，獲得綠原酸含量為99.56％。
實(shí)施例5生產(chǎn)的工藝如實(shí)施例2所述，所不同的是添加1％生物復(fù)合酶制劑，組成同實(shí)施例2，處理36時(shí)；4倍乙酸乙酯萃取3次，獲得含量為99.52％綠原酸。
實(shí)施例6生產(chǎn)工藝如實(shí)施例2所述，所不同的是將綠原酸粗品以1∶3的料液比，在連續(xù)通入99.99％的高純氮?dú)獗３终龎?，壓差?Pa的條件下，在水中加入8％活性炭回流1小時(shí)，獲得含量為99.7％綠原酸。
實(shí)施例7生產(chǎn)的工藝如實(shí)施例3所述，所不同的是添加3％的，由95％硫代硫酸鈉、5％亞硫酸氫鈉組成的復(fù)合還原溶媒，獲得含量為99.89％綠原酸。
權(quán)利要求
1.一種高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝，其特征在于分如下步驟完成1.1預(yù)處理加粉碎后的杜仲葉2至3倍重量的石油醚將杜仲葉進(jìn)行脫酯，過(guò)濾后在杜仲葉中添加0.5-1％的生物復(fù)合酶制劑并放入密閉容器中儲(chǔ)存24-36小時(shí)；1.2提取以杜仲葉重量的4-5倍、濃度為40％-60％的乙醇或丁醇，在40℃-50℃溫度下提取0.5-1小時(shí)，用相同的條件提取兩次，離心過(guò)濾并壓榨；1.3提純?cè)谔崛∫褐刑砑?％-3％復(fù)合還原溶媒，將提取液濃縮后用濃鹽酸調(diào)pH至2-3，加濃縮液3-4倍的乙酸乙酯萃取兩次，得乙酸乙酯層，其中加入3％-5％NaOH液中和使乙酸乙酯中的綠原酸進(jìn)入水相，水相分離后再用濃鹽酸酸沉析出綠原酸沉淀，沉淀分離后用少量的乙酸乙酯不完全溶解重結(jié)晶，干燥即得綠原酸粗品，含量一般為95％-98％左右，提取率約2.7％；1.4成品精制綠原酸粗品和去離子水以1∶3或1∶4的料液比，在連續(xù)通入99.99％的高純氮?dú)獗３终龎?，壓差?Pa的條件下，溶解并加入8％-10％活性碳加熱到50-60℃回流0.5-1小時(shí)、過(guò)濾、冷卻結(jié)晶，結(jié)晶用2-5倍的分析純丙酮清洗、真空干燥獲得99％以上高純度綠原酸。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝，其特征在于所說(shuō)的復(fù)合生物酶制劑是由45％-65％纖維素酶、5％-10％蛋白酶和30％-45％果膠酶組成的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)工藝，其特征在于所說(shuō)的復(fù)合還原溶媒由是具有較強(qiáng)還原性的無(wú)機(jī)鹽組成，如85％-95％硫代硫酸鈉和5％-15％亞硫酸氫鈉組成。
全文摘要
本發(fā)明涉及高純度綠原酸工業(yè)化生產(chǎn)的工藝。是在工藝中添加了生物復(fù)合酶提高綠原酸的溶出率和還原溶媒保護(hù)綠原酸分子基團(tuán)避免被氧化技術(shù)是高純度綠原酸生產(chǎn)的重大突破，解決了工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中綠原酸所含的酚羥基氧化、烯酸酯鍵水解和相繼分子內(nèi)酯基遷移而發(fā)生異構(gòu)問(wèn)題。該技術(shù)的使用，是首家完成工業(yè)化規(guī)模生產(chǎn)高純度綠原酸的企業(yè)，年產(chǎn)量達(dá)到500公斤。本發(fā)明所生產(chǎn)的綠原酸純度達(dá)到99％以上，完全能滿足生產(chǎn)凍干粉針的各項(xiàng)指標(biāo)。生產(chǎn)中溶劑用量少，產(chǎn)品溶劑殘留可達(dá)到國(guó)家有關(guān)要求和各項(xiàng)指標(biāo)。
文檔編號(hào)C12P7/62GK1687435SQ20051002070
公開(kāi)日2005年10月26日 申請(qǐng)日期2005年4月14日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月14日
發(fā)明者張潔, 張亮, 李鑫泉 申請(qǐng)人:四川九章生物化工科技發(fā)展有限公司