專利名稱：一種冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種冬蟲夏草培養(yǎng)基，特別涉及一種冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
冬蟲夏草[Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.]是我國特產(chǎn)的一種名貴中藥和高級滋補(bǔ)品，在生物分類上歸屬于真菌界(Kingdom Fungi)、子囊菌門(Ascomycota)、肉座菌目(Hypocreales)、麥角菌科(Clavicpitaceae)、蟲草屬[Cordyceps(Fr.)Link]。我國有關(guān)冬蟲夏草的紀(jì)錄歷史悠久，早在1694年成書的《本草備要》中就以“冬蟲夏草”為名記載了其藥用功效為“甘平，保肺益腎，止血化痰，已勞咳?！薄侗静輳男隆?1757)也明確記載“冬蟲夏草味甘平，入肺、腎二經(jīng)，保肺益腎，補(bǔ)精髓、止血化痰，已勞咳，治膈癥皆良?！痹凇吨腥A人民共和國藥典》(2000年版)中則載有“冬蟲夏草味甘，平。歸肺、腎經(jīng)；功能為補(bǔ)肺益腎，止血化痰。用于久咳虛喘，勞嗽咯血，陽痿遺精，腰膝酸痛。”現(xiàn)代研究表明，冬蟲夏草具有免疫調(diào)節(jié)、祛痰平喘，以及對肝腎損傷的保護(hù)等多種藥理作用，在抗腫瘤、治療腎功能衰竭等方面也有較好的應(yīng)用前景。但是冬蟲夏草是青藏高原特有的真菌，分布地域局限，天然產(chǎn)量非常有限，加上長期過度采集和生態(tài)環(huán)境的破壞，這種珍貴藥材的分布范圍和發(fā)生數(shù)量已經(jīng)出現(xiàn)明顯的萎縮趨勢。由于良好的治療與保健效果，目前國內(nèi)外市場對冬蟲夏草需求量日益增加，價(jià)格昂貴，并在繼續(xù)上漲。通過發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌粉以代替天然冬蟲夏草，也成為緩解自然資源壓力，滿足人民需求的很有潛力的途徑。
近年來國內(nèi)許多單位進(jìn)行了冬蟲夏草的人工培養(yǎng)研究，有的進(jìn)入了工業(yè)化生產(chǎn)，但發(fā)酵培養(yǎng)基都采用天然培養(yǎng)基(指利用動物、植物、微生物或其它天然有機(jī)成分配制而成的培養(yǎng)基)。由于天然培養(yǎng)基成分復(fù)雜，各批次原料營養(yǎng)成分含量不穩(wěn)定，發(fā)酵過程和產(chǎn)品質(zhì)量不易控制；另外天然培養(yǎng)基各營養(yǎng)成分不明確，不適于冬蟲夏草生理生化的研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種冬蟲夏草半合成液體或固體培養(yǎng)基。
本發(fā)明所提供的冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基，包括12.0-20.0克碳(按分子量計(jì)算的碳元素含量)，0.70-1.49克氮(測定得出的氮元素含量)，1.0-1.5克磷酸二氫鉀和0.5-1.0克硫酸鎂，用水定容至1000毫升；所述碳源為蔗糖或葡萄糖或麥芽糖或乳糖，氮源為酵母提取物和蛋白胨或酵母提取物和牛肉膏。
其中，酵母提取物既是氮源又可以提供復(fù)合維生素。
可以根據(jù)需要，在所述培養(yǎng)基中加入質(zhì)量百分含量為1.5-2.0％的瓊脂得到固態(tài)培養(yǎng)基。
所述冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基優(yōu)選為由下述質(zhì)量配比的成分組成蔗糖30.0-50.0克，蛋白胨5.0-10.0克，酵母提取物1.0-3.0克，磷酸二氫鉀1.0-1.5克，硫酸鎂0.5-1.0克，用水定容至1000毫升。尤其優(yōu)選為蔗糖50.0克，蛋白胨10.0克，酵母提取物3.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，用水定容至1000毫升。固體培養(yǎng)基中則再加入質(zhì)量百分含量為1.5-2.0％的瓊脂。
上述冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基均可按常規(guī)方法配制，如將上述質(zhì)量配比的原料放入容器，加熱溶解，混合均勻，滅菌即可。
本發(fā)明的冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基，其組成成分明確，發(fā)酵的原料穩(wěn)定一致，發(fā)酵產(chǎn)品質(zhì)量可控，利用該培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草具有工藝簡單、不存在重金屬污染，菌體生長速度快，菌粉產(chǎn)率高(可達(dá)23g/l以上)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，既適于冬蟲夏草生理生化的研究，也適于冬蟲夏草的工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1、利用冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基生產(chǎn)冬蟲夏草菌粉將從天然冬蟲夏草上分離純化，并經(jīng)分子生物學(xué)鑒定為真正冬蟲夏草菌種的菌株接入冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，分別按常規(guī)方法發(fā)酵生產(chǎn)菌粉。結(jié)果表明冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基的菌粉產(chǎn)率達(dá)23g/l，對照培養(yǎng)基的菌粉產(chǎn)率僅為5.83g/l。其中，冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基的配方為蔗糖50.0克，蛋白胨10.0克，酵母提取物3.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，蒸餾水1000毫升。對照培養(yǎng)基配方為葡萄糖30.0克，蛋白胨8.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，維生素B10.5mg，蒸餾水1000毫升。
實(shí)施例2、利用冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基生產(chǎn)冬蟲夏草菌粉將從天然冬蟲夏草上分離純化，并經(jīng)分子生物學(xué)鑒定為真正冬蟲夏草菌種的菌株接入冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，分別按常規(guī)方法發(fā)酵生產(chǎn)菌粉。結(jié)果表明冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基的菌粉產(chǎn)率達(dá)16g/l，對照培養(yǎng)基的菌粉產(chǎn)率僅為5.83g/l。其中，冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基的配方為葡萄糖50.0克，牛肉膏5.0克，酵母提取物3.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，蒸餾水1000毫升，菌粉產(chǎn)率達(dá)16g/l。對照培養(yǎng)基配方為葡萄糖30.0克，蛋白胨8.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，維生素B10.5mg，蒸餾水1000毫升。
實(shí)施例3、利用冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基生產(chǎn)冬蟲夏草菌粉將從天然冬蟲夏草上分離純化，并經(jīng)分子生物學(xué)鑒定為真正冬蟲夏草菌種的菌株接入冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基和對照培養(yǎng)基中，分別按常規(guī)方法發(fā)酵生產(chǎn)菌粉。結(jié)果表明冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基的菌粉產(chǎn)率達(dá)15g/l，對照培養(yǎng)基的菌粉產(chǎn)率僅為5.83g/l。其中，冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基的配方為麥芽糖50.0克，蛋白胨10.0克，酵母提取物1.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，蒸餾水1000毫升。對照培養(yǎng)基配方為葡萄糖30.0克，蛋白胨8.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，維生素B1 0.5mg，蒸餾水1000毫升。
權(quán)利要求
1.一種冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基，包括12.0-20.0克碳，0.70-1.49克氮，1.0-1.5克磷酸二氫鉀和0.5-1.0克硫酸鎂，用水定容至1000毫升；所述碳源為蔗糖或葡萄糖或麥芽糖或乳糖，氮源為酵母提取物和蛋白胨或酵母提取物和牛肉膏。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基還包括質(zhì)量百分含量為1.5-2.0％的瓊脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基包括蔗糖30.0-50.0克，蛋白胨5.0-10.0克，酵母提取物1.0-3.0克，磷酸二氫鉀1-1.5克，硫酸鎂0.5-1克，用水定容至1000毫升。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基還包括質(zhì)量百分含量為1.5-2.0％的瓊脂。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基包括蔗糖50.0克，蛋白胨10.0克，酵母提取物3.0克，磷酸二氫鉀1.0克，硫酸鎂0.5克，用水定容至1000毫升。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的培養(yǎng)基，其特征在于所述冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基還包括質(zhì)量百分含量為1.5-2.0％的瓊脂。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種冬蟲夏草半合成液體或固體培養(yǎng)基。本發(fā)明所提供的冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基，包括12.0－20.0克碳，0.70－1.49克氮，1.0－1.5克磷酸二氫鉀和0.5－1.0克硫酸鎂，用水定容至1000毫升；所述碳源為蔗糖或葡萄糖或麥芽糖或乳糖，氮源為酵母提取物和蛋白胨或酵母提取物和牛肉膏。本發(fā)明的冬蟲夏草半合成培養(yǎng)基，其組成成分明確，采用該培養(yǎng)基發(fā)酵生產(chǎn)冬蟲夏草菌絲體具有工藝簡單、不存在重金屬污染，菌體生長速度快，菌體產(chǎn)率高(可達(dá)23g/l以上)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)，既適于冬蟲夏草生理生化的研究，也適于冬蟲夏草的工業(yè)化發(fā)酵生產(chǎn)。
文檔編號C12N1/14GK1775943SQ20041009087
公開日2006年5月24日 申請日期2004年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年11月16日
發(fā)明者姚一建, 董彩虹 申請人:中國科學(xué)院微生物研究所