專利名稱：從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種超氧化物歧化酶(SOD)的提取方法。尤其是一種從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法。
背景技術(shù)：
醫(yī)學(xué)研究結(jié)果已經(jīng)表明人體代謝過程中產(chǎn)生的活性氧自由基不僅可以導(dǎo)致人體衰老，還可以引起各種疾病，超氧化物歧化酶則是清除活性氧自由基的最好物質(zhì)之一，為此，超氧化物歧化酶已被廣泛用于醫(yī)療保健、化妝等產(chǎn)品中。以往，超氧化物歧化酶都是從牛、豬等動物的血液中提取，為了避免因血液帶毒而引起交叉感染等問題，目前國際上已有規(guī)定禁止從動物血液中提取超氧化物歧化酶，所以，人們都在尋求從植物體內(nèi)提取超氧化物歧化酶的技術(shù)。迄今為止，人們發(fā)現(xiàn)紫草種子(種子皮)中含有大量的超氧化物歧化酶成分，也公開了從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的技術(shù)。如專利申請?zhí)枮?9122570、名稱為“紫草種子超氧化物歧化酶及其提取方法”的專利申請技術(shù)。該專利申請技術(shù)的提取方法為“a.將原料置于浸泡罐中，用1∶2的水浸泡24小時；b.將浸泡液用離心機離心；c.放入分離罐中分離加入添加劑沉淀2小時；d.取出上清液加熱40-80℃；e.再離心；f.取出上清液進入大超濾器超濾；g.超濾后的上清液再離心，取出上清液用空壓機加壓，進入賽氏過濾器過濾；h.取出過濾液進入小超濾器，剩1公斤取出液進入凍干機；i.經(jīng)24小時凍干后取出凍干粉，以20萬U/單位裝瓶，密封為成品入庫保管?！庇捎谠摲椒ㄖ兄辉诜蛛x過程中加入了添加劑(沉淀劑)，整個提取過程沒有任何觸酶活及保酶活的步驟，并且上清液熱變溫度為40～80℃，使其提取物酶活性低(酶活性650單位/毫克，酶比活350單位/毫克)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的從紫草種子中提取的超氧化物歧化酶活性低的問題，提供一種從紫草種子中提取的超氧化物歧化酶活性高的提取方法。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案是一種從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法，依次包括如下步驟
a.將紫草種子廢渣、水、氯化銅、氯化鋅、氯化鈣按重量比為1∶1.8～2.2∶0.03～0.04∶0.025～0.03∶0.0009～0.001的比例混合并浸泡24～32小時；b.提取上清液；c.熱變上清液；d.用大超濾器過濾上清液得濾液1；e.在濾液1中加入酶?；顒┖笥眯〕瑸V器過濾；f.用賽氏過濾器加壓過濾；g.凍干過濾液。
所述的酶?；顒檎滋恰?br>
所述的提取上清液為用離心機兩次離心過濾。
所述的熱變上清液為將上清液加熱至40～70℃。
本發(fā)明同現(xiàn)有技術(shù)相比，其關(guān)鍵是在提取步驟中，加入了觸酶活劑及保酶活劑，并且選擇了合適的上清液熱變溫度，使其提取物——超氧化物歧化酶活性高，酶活性為3750單位/毫克，酶比活性1950單位/毫克蛋白。
圖1為本發(fā)明實施例的工藝流程圖。
具體實施例方式下面將結(jié)合
本發(fā)明的具體實施方式
。如圖1所示實施例1為首先將100公斤榨過油的紫草種子廢渣、220公斤水、3公斤氯化銅、2.5公斤氯化鋅、0.09公斤氯化鈣進行混合、浸泡24小時；用離心機進行離心以濾去廢渣，提取上清液；對所得到的上清液加熱至40℃進行熱變；用大超濾器過濾上清液得濾液1；在濾液1中加入兆糖，然后再用小超濾器過濾；再用賽氏過濾器加壓過濾。最后用凍干機將過濾液凍干。
實施例2為將50公斤榨過油的紫草種子廢渣、90公斤水、2公斤氯化銅、1.5公斤氯化鋅、0.05公斤氯化鈣進行混合、浸泡32小時；用離心機進行離心濾去廢渣，提取上清液，此步驟重復(fù)兩次；對所得到的上清液加熱至70℃進行熱變；用大超濾器過濾上清液得濾液1；在濾液1中加入兆糖，然后再用小超濾器過濾；再用賽氏過濾器加壓過濾。最后用凍干機將過濾液凍干。
權(quán)利要求
1.一種從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法，依次包括如下步驟a.將紫草種子廢渣、水、氯化銅、氯化鋅、氯化鈣按重量比為1∶1.8～2.2∶0.03～0.04∶0.025～0.03∶0.0009～0.001的比例混合并浸泡24～32小時；b.提取上清液；c.熱變上清液；d.用大超濾器過濾上清液得濾液(1)；e.在濾液(1)中加入酶保活劑后用小超濾器過濾；f.用賽氏過濾器加壓過濾；g.凍干過濾液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法，其特征在于所述的酶保活劑為兆糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法，其特征在于所述的提取上清液為用離心機兩次離心過濾。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法其特征在于所述的熱變上清液為將上清液加熱至40～70℃。
全文摘要
本發(fā)明公開一種從紫草種子中提取超氧化物歧化酶的方法,依次包括如下步驟:將紫草種子廢渣、水、氯化銅、氯化鋅、氯化鈣按重量比為1∶1.8～2.2∶0.03～0.04∶0.025～0.03∶0.0009～0.001的比例混合并浸泡24～32小時;提取上清液;熱變上清液;用大超濾器過濾上清液得濾液1;在濾液1中加入酶保活劑后用小超濾器過濾;用賽氏過濾器加壓過濾,凍干過濾液。其關(guān)鍵是在提取步驟中,加入了觸酶活劑及保酶活劑,并且選擇了合適的上清液熱變溫度,使其提取物——超氧化物歧化酶活性高,酶活性為3750單位/毫克,酶比活性1950單位/毫克蛋白。
文檔編號C12N9/08GK1376783SQ02117768
公開日2002年10月30日 申請日期2002年5月17日 優(yōu)先權(quán)日2002年5月17日
發(fā)明者王鎖春 申請人:大連長青珍稀植物研究所, 大連北方藥物研究所, 王鎖春