專利名稱：藥物、飲料或食品的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于治療或預(yù)防由雌激素受體引起的疾病的藥物組合物、飲料或食品。
近年來的研究表明，除與女性個(gè)體中子宮或性器官的功能有關(guān)外，具有許多內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定作用。事實(shí)上，人們已知在男性個(gè)體中雌激素受體帶有1個(gè)受體位置和1個(gè)DNA識(shí)別位置，具有形成許多分享雌激素的組織和心血管系統(tǒng)的能力。然而，由于該研究剛開始，在男性和女性個(gè)體中除在形成方面之外的雌激素的確切主要功能目前幾乎不知道。
生物學(xué)活性雌激素產(chǎn)生其與細(xì)胞外受體結(jié)合的性質(zhì)。受體和與其結(jié)合的配位轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中，配合物在特異識(shí)別位置結(jié)合DNA以產(chǎn)生特異基因表達(dá)，從而顯示活性。然而，有關(guān)與受體的結(jié)合和調(diào)節(jié)幾乎什么也不知道。
另一方面，激素類活性物質(zhì)或抗激素活性物質(zhì)近年來觀察到用于某些釋放入環(huán)境的化學(xué)物質(zhì)。該物質(zhì)總體稱為內(nèi)分泌物破壞者(或環(huán)境激素)，例如，氯殺蟲劑、用于動(dòng)物的健康產(chǎn)品、塑料、焚化產(chǎn)生的副產(chǎn)物、抗菌劑、除草劑、工業(yè)化學(xué)物質(zhì)，例如雙酚A和壬基酚等已知影響有機(jī)體。已報(bào)道了由于該類物質(zhì)對(duì)野生動(dòng)物的生態(tài)系統(tǒng)的影響而產(chǎn)生的改變的生殖能力(尤其雄性向雌性的轉(zhuǎn)化)、下降的生殖能力、下降的孵化能力、下降的后代存活率、不正常的生殖行為等。精子數(shù)目的降低、子宮內(nèi)膜異位、不育癥、卵巢癌、子宮癌、前列腺癌等已被預(yù)計(jì)是由這些物質(zhì)對(duì)人體健康的影響產(chǎn)生的。
已報(bào)道，某些環(huán)境中的內(nèi)分泌物破壞者結(jié)合雌激素(性激素)的受體以顯示雌激素活性(或用作興奮劑)。例如，對(duì)于降低的生殖能力，包括降低的人體精子的質(zhì)量，已報(bào)道精子數(shù)目在超過50歲時(shí)已降低幾乎一半(BMJ，305609-613，1992)。
使用幼年大鼠的子宮試驗(yàn)是用于測(cè)定可疑的物質(zhì)的內(nèi)分泌破裂活性(或所謂的環(huán)境激素活性)的常用動(dòng)物試驗(yàn)之一，該試驗(yàn)利用子宮的生長(zhǎng)受雌激素控制這樣的事實(shí)。更具體地說，內(nèi)生的雌激素，17β-雌二醇的血液濃度在青春期前的幼年大鼠中保持低水平，子宮響應(yīng)于外生雌激素以劑量依賴方式增長(zhǎng)(T.Inoue(ed.)，“Nailbunpitsukakuran kagaku busshitsu no seibutsu shiken kenkyuuhou”(Biological assays for endocrine-disrupting chemicalsubstances)(2000)Springer-Verlag Tokyo)。因此，當(dāng)大鼠能夠在出生后25天斷奶時(shí)，該試驗(yàn)在出生后18天的有限時(shí)期內(nèi)，即青春期之前進(jìn)行。然而，OECD由于如下原因建議該試驗(yàn)時(shí)間短；不需要特殊技術(shù)；和得到可重復(fù)的結(jié)果(OECD VALIDATION WORK ON IN-VIVOUTEROTROPHIC SCREENING ASSAY，Protocol for demonstration ofdose-response of the utero-trophic assay using the referenceoestrogen athinyl oestradiol(1999))。使用該試驗(yàn)，據(jù)報(bào)道向幼年大鼠給藥被預(yù)期具有內(nèi)分泌破裂活性的雙酚A或4-壬基酚增加子宮重量(Environ Health Perspect，106719-720，1998；Toxicological Sciences，54154-167，2000)。
另一方面，人們認(rèn)為使用以對(duì)抗結(jié)合雌激素受體的物質(zhì)方式結(jié)合雌激素受體和顯示內(nèi)分泌破裂活性的物質(zhì)將有效避免內(nèi)分泌破裂劑的影響。例如，來自大豆的異黃酮已知如內(nèi)分泌破裂劑那樣強(qiáng)地結(jié)合雌激素受體。當(dāng)異黃酮口服時(shí)，它在活體內(nèi)與內(nèi)分泌破裂劑競(jìng)爭(zhēng)，顯示雌激素活性，產(chǎn)生類似于內(nèi)分泌破裂劑的影響(Environ HealthPerspect，106369-373，1998)。
在Shutsung Liao等的專利和專利申請(qǐng)中描述了脂肪酸、兒茶素、沒食子酸衍生物等抑制5α-還原酶的活性，有效用于治療前列腺癌和前列腺肥大(Arch Development Corp.，USA；US5605929，WO99/22728，JP-A11-507022)。沒有這些出版包含包括使用動(dòng)物模型研究的治療實(shí)驗(yàn)，僅根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)方面推測(cè)效果(例如，P.K.Siiteri等，(1970)J.Clin.Invest.，491737-1745，P.C.Walsh等，(1983)J.Clin.Invest.，721772-1777，E.Stoner等，(1992)J.Urol.1471298-1302，G.J.Gormley等，(1992)N.Eng.J.Med.，3271185-1191，N.Bruchovsky等(1988)J.Clin.Endocrinol.Metab.，67806-816)。
5α-還原酶的兩種已知異酶的分布在動(dòng)物種類或組織之間是相當(dāng)不同的(A.E.Thigpen等(1993)J.Clin.Invest.，92903-910；David W.Russell & Jean D.Wilson(1994)Annu.Rev.Biochem.，6325-61)。類型2的5α-還原酶在人體中與前列腺癌和前列腺肥大有關(guān)，而Liao等觀察兒茶素或沒食子酸衍生物抑制類型1的5α-還原酶。因此，根據(jù)Liao等的數(shù)據(jù)，未顯示兒茶素或沒食子酸衍生物對(duì)前列腺癌或前列腺肥大的效果。此外，在JP-A11-507022中描述了沒食子酸衍生物或兒茶素中的沒食子酸根與5α-還原酶的抑制沒有關(guān)聯(lián)，除沒食子酸根之外，在兒茶素中部分結(jié)構(gòu)是重要的。
此外，關(guān)于沒食子酸衍生物或兒茶素抑制5α-還原酶的活性，Liao等報(bào)道除沒食子酸根之外，在兒茶素中部分結(jié)構(gòu)對(duì)于活性是重要的，而沒食子酸衍生物沒有抑制5α-還原酶的活性(US5605929)。Liao等還報(bào)道，5α-還原酶活性在整個(gè)細(xì)胞試驗(yàn)條件下不受抑制(WO99/22728)。
如上所述，至今兒茶素或沒食子酸衍生物未已通過選擇性地阻斷雌激素受體控制通過雌激素受體的信號(hào)。發(fā)明目的本發(fā)明的主要目的是提供用于預(yù)防內(nèi)分泌破裂劑影響的高度安全的藥物組合物、飲料或食品。
本發(fā)明的第二方面涉及用于減輕由興奮劑與雌激素受體結(jié)合引起的疾病癥狀或預(yù)防由興奮劑與雌激素受體結(jié)合引起的疾病的飲料或食品，其含有對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，它通過向其中加入該物質(zhì)生產(chǎn)和/或稀釋該物質(zhì)生產(chǎn)。
是不顯示雌激素活性的拮抗劑的選自如下的物質(zhì)式I的化合物 其中R1和R2表示-H，-OH或-O-R4；R3表示-H或-OH；R4表示式II的化合物 它們的衍生物或其鹽；沒食子酸；它們的衍生物；和它們的可藥用的鹽優(yōu)選用作在第一或第二方面中對(duì)雌激素受體興奮劑具有活性的拮抗活性的物質(zhì)。
式I化合物由屬于兒茶素的物質(zhì)舉例，例如可優(yōu)選使用表兒茶素、表培兒茶素、表培兒茶素沒食子酸鹽、表兒茶素沒食子酸鹽、培兒茶素沒食子酸鹽、兒茶素沒食子酸鹽、兒茶素和培兒茶素。沒食子酸的衍生物由沒食子酸的酯舉例，尤其是沒食子酸與具有8個(gè)或以上碳原子的醇的酯是本發(fā)明優(yōu)選的。
本發(fā)明的興奮劑由內(nèi)分泌破裂劑舉例。例如二噁英、有機(jī)氯化合物、苯酚、對(duì)苯二甲酸酯、芳烴、殺蟲劑、有機(jī)錫化合物、雌激素、滅蟻靈、毒殺芬、涕滅威和開蓬。更具體地說，舉例折侖諾、金雀異黃素、擬雌內(nèi)酯、o，p-DDT、開蓬、甲氧氯、玉米烯酮、二噁英、p-辛基苯酚、壬基苯酚、迪厄耳丁、丁基芐基對(duì)苯二甲酸酯和/或雙酚A。
本發(fā)明的第三方面涉及酒精飲料，其含有屬于兒茶素的物質(zhì)，它通過向其中加入屬于兒茶素的物質(zhì)生產(chǎn)。表培兒茶素沒食子酸鹽優(yōu)選用作在第三方面中屬于兒茶素的物質(zhì)。表培兒茶素沒食子酸鹽的含量?jī)?yōu)選為0.002-0.75％(w/w)。除屬于兒茶素的物質(zhì)外，本發(fā)明的酒精飲料可含有茶提取物。在本發(fā)明的酒精飲料中表培兒茶素沒食子酸鹽與咖啡因的比率優(yōu)選為0.9或以上。根據(jù)本發(fā)明，現(xiàn)在可以提供酒精飲料，其中表培兒茶素沒食子酸鹽含量增加，而咖啡因含量降低。由于屬于兒茶素的物質(zhì)、茶提取物和酒精的協(xié)同效果，本發(fā)明的酒精飲料具有濃茶的感覺、良好的味道全幅面和平衡、改善的酒精的甜昧、苦味收緊的感覺和刺激味道。
本發(fā)明的第四方面涉及茶飲料，它通過包括發(fā)酵步驟的方法生產(chǎn)，其含有濃度為0.01-0.5％(w/w)的表培兒茶素沒食子酸鹽，其中表培兒茶素沒食子酸鹽與咖啡因的比率優(yōu)選為0.9或以上。例如，第四方面的茶飲料是通過包括發(fā)酵步驟生產(chǎn)的罐裝或瓶裝茶飲料。例如，它是綠茶飲料、紅茶飲料、烏龍茶飲料、大麥茶飲料或banaba茶飲料。
發(fā)明的詳細(xì)描述用于本文的興奮劑是指結(jié)合雌激素受體并顯示雌激素活性的物質(zhì)，顯示雌激素活性的物質(zhì)由內(nèi)分泌破裂劑或雌激素舉例說明。
用于本文的內(nèi)分泌破裂劑(也稱為外生內(nèi)分泌破裂劑或環(huán)境激素)是指外生物質(zhì)，它對(duì)在活體中自然顯示的激素的正?；钚赃M(jìn)入動(dòng)物活體產(chǎn)生影響。內(nèi)分泌破裂劑包括保持、促進(jìn)或抑制激素的正?；钚缘奈镔|(zhì)，也包括潛在地影響激素的正?；钚缘奈镔|(zhì)。用于本文的雌激素是指內(nèi)生雌激素，它是在活體中進(jìn)行產(chǎn)生的或合成產(chǎn)生的雌激素。與興奮劑結(jié)合的雌激素受體可以是α型或β型，優(yōu)選它是α型。
目前約70種物質(zhì)(或物質(zhì)組)被預(yù)計(jì)具有內(nèi)分泌破裂活性。根據(jù)用于物質(zhì)的分析方法，這些物質(zhì)在24th Meeting of the Japan Societyfor Envirnmental Chemistry(1998)提要材料中分類如下(1)種類1有機(jī)氯化合物(例如普通有機(jī)氯化合物，多氯代聯(lián)苯(PCB))；(2)種類2酚(例如普通苯酚，雙酚A，2，4-二氯苯酚，五氯苯酚)，(3)種類3對(duì)苯二甲酸酯(例如普通對(duì)苯二甲酸酯)；(4)種類4芳烴(例如苯并芘，二-2-乙基己基己二酸酯(DEHA)，二苯甲酮，4-硝基甲苯，苯乙烯二聚物和三聚物，1，2-二溴-3-氯丙烷，苯乙烯，正丁基苯)；(5)種類5殺蟲劑(例如普通殺蟲劑，2，4，5-T(三氯苯氧基乙酸)，2，4-D(二氯苯氧基乙酸)，苯菌靈，殺草強(qiáng)，滅多蟲)；(6)種類6有機(jī)錫化合物；(7)種類7雌激素；未分類入上述種類的二噁英；以及由上述種類排除的滅蟻靈、毒殺芬、涕滅威和開蓬。這些種類和物質(zhì)示于表1，2和3中。
表1

表2

表3

內(nèi)分泌破裂劑不限制上述物質(zhì)，例如列舉折侖諾、金雀異黃素、擬雌內(nèi)酯、o，p-DDT、開蓬、甲氧氯、玉米烯酮、二噁英、對(duì)辛基苯酚、壬基苯酚、迪厄耳丁、丁基芐基對(duì)苯二甲酸酯和/或雙酚A。
結(jié)合雌激素受體，不顯示雌激素活性和在體內(nèi)顯示對(duì)興奮劑的拮抗活性的任何物質(zhì)可優(yōu)選用作本發(fā)明的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)(下文也稱為拮抗劑)。盡管不打算限制于本發(fā)明，但可優(yōu)選使用例如兒茶素、沒食子酸和/或其衍生物。
用于篩選興奮劑或拮抗劑的方法沒有特殊限制。體內(nèi)篩選方法包括如下步驟。在第一步驟中，候選物質(zhì)可根據(jù)已知方法，例如實(shí)施例7中描述的方法篩選它們結(jié)合雌激素受體的活性。更具體地說，測(cè)量帶有熒光標(biāo)記的候選物質(zhì)結(jié)合雌激素受體的拮抗活性。在第二步驟中，判斷被證實(shí)具有結(jié)合雌激素活性的候選物質(zhì)是否是興奮劑或拮抗劑。判斷可根據(jù)已知方法通過測(cè)定物質(zhì)是否具有雌激素活性進(jìn)行。列舉的方法是如Environ.Health Perspect.，103113-122(1995)中所述的E-SCREEN試驗(yàn)。在試驗(yàn)中，將候選物質(zhì)加入一種人體乳腺癌得到的細(xì)胞，MCF-7的培養(yǎng)物中，測(cè)定其繁殖MCF-7的活性。
此外，盡管不打算限制本發(fā)明，但拮抗劑可例如根據(jù)實(shí)施例1中所述的方法在體內(nèi)有效地篩選。具體地說，給藥雌激素受體興奮劑，再口服給藥候選物質(zhì)，隨后測(cè)定子宮重量的變化。在該情況下，測(cè)定可在給藥后通過將其溶解在乙醇中增加候選物質(zhì)吸收性進(jìn)行。
兒茶素由表兒茶素、表培兒茶素、表培兒茶素沒食子酸鹽、表兒茶素沒食子酸鹽、培兒茶素沒食子酸鹽、兒茶素沒食子酸鹽、兒茶素、培兒茶素和/或它們的衍生物。
本發(fā)明的兒茶素的衍生物沒有具體限制，只要它們對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性。
可用于本發(fā)明的沒食子酸衍生物包括，但不限于，在分子中具有沒食子酸結(jié)構(gòu)的化合物。列舉由沒食子酸中的羥基或羧基和另一分子中的官能團(tuán)反應(yīng)產(chǎn)生的化合物，例如酯、醚或酰胺。尤其是沒食子酸中的羧基與帶有羥基的化合物的酯優(yōu)選用于本發(fā)明中。
酯包括沒食子酸與帶有醇或酚羥基的化合物的酯，列舉沒食子酸戊酯、沒食子酸己酯、沒食子酸庚酯、沒食子酸辛酯、沒食子酸壬酯、沒食子酸癸酯、沒食子酸十一烷基酯、沒食子酸十二烷基酯、沒食子酸十三烷基酯、沒食子酸十四烷基酯、沒食子酸十五烷基酯、沒食子酸十七烷基酯和沒食子酸十八烷基酯。沒食子酸與含有8個(gè)或以上碳原子的脂族醇的酯，例如沒食子酸與辛基醇、十二烷基醇或十六烷基醇的酯是本發(fā)明尤其優(yōu)選的。脂族醇可含有側(cè)鏈或不飽和烴鏈，只要保持拮抗興奮劑結(jié)合雌激素的活性即可。此外，在烴鏈中的氫原子可被鹵素或官能團(tuán)，例如羥基、羧基、氨基或氧代基團(tuán)取代。
本發(fā)明通過興奮劑與雌激素受體引起的疾病由據(jù)報(bào)道由于雌激素的不正常響應(yīng)產(chǎn)生的疾病列舉，例如精子數(shù)目下降、雌激素相關(guān)的癌癥、子宮纖維瘤、子宮內(nèi)膜炎、平滑肌細(xì)胞增生和精液缺乏。使用本發(fā)明的藥物組合物處理或預(yù)防的疾病包括前列腺肥大，對(duì)此，雌激素功能的抑制被預(yù)計(jì)是治療有效的。
用于本文的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)是指與雌激素受體結(jié)合并顯示對(duì)與雌激素受體結(jié)合的興奮劑(例如內(nèi)分泌破裂劑或雌激素)的拮抗活性的物質(zhì)。
本發(fā)明的雌激素由具有雌激素活性的甾族化合物列舉，例如17β-雌二醇、雌酮、共軛雌激素(Premarin(注冊(cè)商標(biāo)))、馬雌激素或乙炔基雌二醇。
根據(jù)本發(fā)明，對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)由選自式I化合物、沒食子酸、它們的衍生物和可藥用的鹽的化合物列舉。本發(fā)明對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)還包括帶有式I結(jié)構(gòu)作為其基本骨架的聚合物和齊聚物。
衍生物由procyanidin B-2 3，3’-雙沒食子酸、procyanidinB-3、prodelphinidin B-43’-沒食子酸鹽、oolongbisflavan A、assamicadin A、theogallin和strictine。
此外，theaflavin、theaflavin沒食子酸鹽、theaflavin沒食子酸鹽B或theaflavin雙沒食子酸鹽可用作本發(fā)明的活性成分。
可用于本發(fā)明的兒茶素由茶兒茶素列舉。兒茶素是一組通常稱為類黃酮顏料組分。茶已知含有8種類型的兒茶素，所使用的兒茶素是商業(yè)上可獲得的。例如可使用由綠茶制備的物質(zhì)，根據(jù)本發(fā)明，制備兒茶素的方法沒有具體限制。例如它們可由化學(xué)合成法或由天然產(chǎn)物提取和純化制備。主要用作本發(fā)明的活性成分的舉例兒茶素是茶兒茶素。盡管不打算限制本發(fā)明，但它們可由天然產(chǎn)物，例如發(fā)酵茶(例如紅茶)、半發(fā)酵茶(例如烏龍茶)或非發(fā)酵茶(例如綠茶)提取。茶提取物優(yōu)選用作本發(fā)明的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)。
例如，盡管不打算限制本發(fā)明，但含有表培兒茶素沒食子酸鹽(下文還稱為EGCG)的提取物如果是由可食原料提取的，則可以使用，優(yōu)選物質(zhì)的EGCG含量高。含有EGCG的提取物由使用水或有機(jī)溶劑，例如Sunphenon 100S、Sunphenon DCF-1、Sunphenon LA-50和SunphenonBG(均由Taiyo Kagaku獲得)得到的茶提取物。上述提取物的EGCG含量分別是50、53、18和50％(w/w)，咖啡因含量分別是10％(w/w)、低于檢測(cè)限、5％(w/w)和3％(w/w)。過量咖啡因的攝取已知導(dǎo)致毒性、致癌作用、高膽固醇含量、鈣尿等。因此，含有降低數(shù)量的雜質(zhì)，例如咖啡因的茶提取物可優(yōu)選用于飲料或食品。此外，(味道)感覺評(píng)價(jià)可通過降低咖啡因含量而改善。
用于本文的“茶”是指茶(Cammellia sinensis，(L)O.Kuntze)整個(gè)植物或其部分(例如葉、木質(zhì)部、根、種子等)的，經(jīng)過或未經(jīng)部分或全部發(fā)酵的粗或干燥產(chǎn)品。每個(gè)部分可單獨(dú)使用或任何多個(gè)部分可結(jié)合使用，茶葉的若干形式可作為提取物的原料。例如，該形式包括由常規(guī)茶生產(chǎn)過程的任何步驟得到，例如原茶葉和最終茶(干燥的茶)。此外，未限制發(fā)酵程度。例如可使用谷粒茶，例如大麥茶、烘烤的米茶或蕎麥茶，或葉茶，例如葉茶，例如綠茶、紅茶、烘烤的綠茶、粉末綠茶、烏龍茶或banaba茶。
如果含有屬于茶兒茶素的物質(zhì)，茶提取物可用作本發(fā)明的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)。因此，可使用粗茶提取物，該粗茶提取物可通過用溫(優(yōu)選熱)水或有機(jī)溶劑提取茶得到。例如，低級(jí)醇，例如甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇或丁醇，低級(jí)酯，例如乙酸甲酯、乙酸乙酯、乙酸丙酯或乙酸丁酯，或酮，例如丙酮或甲基異丁基酮可用作有機(jī)溶劑。每種有機(jī)溶劑可單獨(dú)地或任何多種有機(jī)溶劑可合適地結(jié)合使用，它們可以是無水的或優(yōu)選含水的。
常規(guī)用于提取原藥的方法可優(yōu)選用于用水或有機(jī)溶劑的提取。例如優(yōu)選在攪拌下在沸點(diǎn)或以下的溫度下回流加熱按重量計(jì)1份(干)茶葉和按重量計(jì)5-20份水或有機(jī)溶劑的混合物。提取步驟通常進(jìn)行5分鐘至7天，優(yōu)選10分鐘至24小時(shí)。選擇性地，提取時(shí)間可通過輔助方法，例如攪拌而縮短。不溶解物質(zhì)可通過合適方法，例如過濾或離心由水-或有機(jī)溶劑-提取物分離。除根據(jù)常規(guī)方法制備的熱水-或有機(jī)溶劑-提取物之外，通過用各種有機(jī)溶劑、吸附劑等進(jìn)一步處理提取物得到的產(chǎn)物也包括在可用作本發(fā)明的合成抑制劑的活性成分的茶提取物中，選擇性地，茶提取物可濃縮或干燥和粉末化，或通過由冷水結(jié)晶。
如上所述得到的茶提取物含有在茶(尤其是茶葉)中所包含的兒茶素的混合物，即茶兒茶素，例如表兒茶素、表培兒茶素、表培兒茶素沒食子酸鹽、表兒茶素沒食子酸鹽、培兒茶素沒食子酸鹽、兒茶素沒食子酸鹽、兒茶素、培兒茶素，它還可含有由原料茶得到的雜質(zhì)。
用于治療或預(yù)防由興奮劑與雌激素受體結(jié)合引起疾病的本發(fā)明藥物組合物可使用對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)作為活性成分制備。
用于治療或預(yù)防的本發(fā)明的藥物組合物可通過使用用于本發(fā)明的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)作為活性成分和與已知藥物載體一起配制而配制。為生產(chǎn)組合物，物質(zhì)通常與可藥用的液體或固體載體，和選擇性地溶劑、分散劑、乳化劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、賦形劑、粘合劑。崩解劑、潤(rùn)滑劑等混合以進(jìn)行配制。制劑可以是固體制劑形式，例如片劑、顆粒、粉末、撒布粉和膠囊，或液體制劑，例如正常溶劑、懸浮液和乳液。此外，它可配制入干燥的制劑，它可通過在使用前加入合適的載體重新構(gòu)成液體制劑。
藥物載體可根據(jù)上述具體給藥途徑和劑量形式選擇。對(duì)于口服制劑，可以使用例如淀粉、乳糖、蔗糖、甘露糖醇、羧甲基纖維素、玉米淀粉、無機(jī)鹽等。粘合劑、崩解劑、表面活性劑、潤(rùn)滑劑、流動(dòng)促進(jìn)劑、味覺劑、色素、香料等可包括在口服制劑中。此外液體口服制劑中包含的屬于兒茶素的物質(zhì)的吸收系數(shù)可通過包括濃度為0.2-40％(w/w)的乙醇變得杰出。
腸胃外制劑可根據(jù)常規(guī)方法通過將選自對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，它們的衍生物和其鹽的化合物作為本發(fā)明的藥物組合物的活性組分溶解或懸浮在載體中制備。稀釋劑包括可注射的蒸餾水、生理鹽水、含水葡萄糖溶液、可注射的植物油、芝麻油、花生油、大豆油、玉米油、聚丙二醇和聚乙二醇。選擇性地，殺菌劑、穩(wěn)定劑、滲透調(diào)節(jié)劑、光滑劑等可加入溶液或懸浮液中。
用于治療或預(yù)防的本發(fā)明的藥物組合物通過對(duì)于組合物的劑量形式合適的途徑給藥。給藥途徑不限制于具體一種。組合物可內(nèi)部或外部(或局部)或通過注射給藥。可注射的制劑可例如靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、經(jīng)眼等給藥，外部制劑包括栓劑。
用于治療或預(yù)防的本發(fā)明的藥物組合物的劑量根據(jù)特定的劑量形式、給藥途徑和用途以及所治療的患者的年齡、體重和癥狀合適的確定和改變。通常，包含在配方中用于本發(fā)明的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)的日劑量基于無毒給藥含量，為約0.001g-約100g，優(yōu)選約0.001g-約10g，更優(yōu)選約0.001g-約5g。當(dāng)然，劑量可根據(jù)各種因素改變，因此，在某些情況下，低于上述的劑量將是足夠的，但在其它情況下，會(huì)需要超過上述的劑量。本發(fā)明的藥物組合物可口服給藥，或它可以通過加入選擇的食品或飲料，例如酒精飲料或茶飲料每日食用。用于本發(fā)明的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)可用作用于緩解由于興奮劑與雌激素受體的結(jié)合而導(dǎo)致的疾病癥狀或預(yù)防該疾病的飲料或食品的原料。
本發(fā)明的加入飲料或食品的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，由于容易操作或與其它添加劑混合，可以任何形式加入飲料或食品，例如液體、漿料、粉末、片狀或顆粒。干燥可以根據(jù)常規(guī)干燥方法，例如噴霧干燥、轉(zhuǎn)鼓干燥、真空干燥或凍干進(jìn)行。
本發(fā)明的飲料或食品含有對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，它含有，通過稀釋生產(chǎn)和/或通過向其中加入該物質(zhì)生產(chǎn)。
在本發(fā)明的飲料或食品中對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)的含量沒有特殊限制。飲料或食品可以0.0005-90％(w/w)的濃度含有該物質(zhì)。
本發(fā)明的食品或飲料不限制于具體一種，其實(shí)例包括如下產(chǎn)品加工的谷類食品(例如小麥面粉產(chǎn)品、淀粉產(chǎn)品、預(yù)混合產(chǎn)品、面條、通心面、大豆醬、蕎麥面條、小麥麩質(zhì)面包、米粉、明膠條和小包裝米餅)、加工的脂肪和油產(chǎn)品(例如塑料脂肪和油、“天麩羅”油、色拉油、蛋黃醬和調(diào)味品)、加工的大豆產(chǎn)品(例如豆腐、味噌和發(fā)酵大豆)、加工的肉產(chǎn)品(例如火腿、培根、模壓火腿和香腸)、加工的海產(chǎn)品(例如凍粉碎的魚、熟魚漿、熟魚漿的管狀卷、碎魚餅、魚漿的深度干燥小餡餅、魚丸、腱、魚肉火腿或香腸、干狐鰹、加工的魚籽產(chǎn)品、罐狀海產(chǎn)品和在甜醬油中煮熟的魚)、乳制品(例如牛奶、乳酪、酸乳酪、黃油、濃縮牛奶、奶粉和冰淇淋)、加工的蔬菜和水果產(chǎn)品(例如果醬、果子醬、泡菜、果汁、蔬菜飲料和混合飲料)、甜食(例如巧克力、餅干、甜小面包、蛋糕、甜米糕和甜米)、酒精飲料(例如清酒、中國(guó)酒、葡萄酒、威士忌酒、shochu、伏特加酒、白蘭地、杜松子酒、朗姆酒、啤酒、果酒和利口酒)、奢侈品飲料(例如綠茶、紅茶、烏龍茶、咖啡、軟飲料和乳酸飲料)、調(diào)味品(例如大豆醬油、醬油、醋、甜清酒)、罐裝、瓶裝或袋裝食品(例如各種熟食品，例如蓋上熟牛肉和蔬菜的米飯、在小罐中與肉和蔬菜一起煮的米飯、帶有紅豆蒸米飯和咖喱菜飯)、半干或濃縮食品(例如肝漿、其它醬、用于蕎麥面條的湯或udon和濃縮湯)、干食品(例如即食面、即食咖哩飯菜、速溶咖啡、果汁粉、湯粉、即食味噌湯、煮制食品、煮制的飲料和煮制的湯)、冷凍食品(例如壽喜燒、chawan-mushi、烤鰻魚、牛肉漢堡、燒麥、裝填碎肉的面團(tuán)布丁、各種棒狀食品和水果雞尾酒)、固體或液體食品(例如湯)、加工的農(nóng)業(yè)或森林產(chǎn)品(例如香料)、加工的家畜產(chǎn)品、加工的海產(chǎn)品等。
對(duì)于生產(chǎn)本發(fā)明的飲料或食品的方法沒有具體限制，任何用于生產(chǎn)飲料或食品的包括烹調(diào)、加工和其它通常采用的方法的方法均可使用只要得到的飲料或食品含有作為活性成分的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)、通過向其中加入該物質(zhì)而生產(chǎn)和/或通過稀釋該物質(zhì)而生產(chǎn)。例如，具有新穎香味和高EGCG含量的功能飲料或食品可通過以合適的比率混合含有EGCG的粉末(Sunphenon 100S)與綠茶生產(chǎn)。由于定義用于飲料的濃度的香味為1(標(biāo)準(zhǔn))，茶濃度通常為0.05-4，優(yōu)選0.1-2。增甜劑、酸化劑、香料等可選擇性地加入得到的含有EGCG飲料或食品中，可加入還原劑。
例如，可將乙醇以0.5-20％(w/w)的濃度加入飲料中以制備含有EGCG的酒精飲料。可進(jìn)一步加入二氧化碳以制備含有EGCG的碳酸酒精飲料。
本發(fā)明提供了其中增加了EGCG含量的飲料或食品。在該飲料或食品中EGCG含量?jī)?yōu)選為0.002-5％(w/w)，更優(yōu)選0.01-0.5％(w/w)。EGCG可加入茶提取物或含有兒茶素的提取物，此外，可加入純化的EGCG。
通過向飲料或食品加入EGCG以增加EGCG含量提供其中咖啡減少或由其除去咖啡因和不導(dǎo)致咖啡因的過量攝取的含有EGCG的飲料或食品。
本發(fā)明提供了酒精飲料，它通過向其中加入屬于兒茶素的物質(zhì)生產(chǎn)。用于本文的酒精飲料是指含有酒精的飲料，在酒精飲料中乙醇的含量是例如0.2-40％(w/w)。
可舉例含有所加入的屬于兒茶素的物質(zhì)的清酒、中國(guó)酒、葡萄酒、威士忌酒、shochu、伏特加酒、白蘭地、杜松子酒、朗姆酒、啤酒、軟酒精飲料、果酒和利口酒。與相應(yīng)的含有茶提取物的酒精飲料相比，在該酒精飲料中，屬于兒茶素的物質(zhì)的含量增加，相對(duì)于該物質(zhì)的咖啡因的數(shù)量降低。
在酒精存在下屬于兒茶素的物質(zhì)的吸收率增加，因此，在本發(fā)明的酒精飲料中屬于兒茶素的物質(zhì)的吸收率是非常高的。由于現(xiàn)在能夠僅增加屬于兒茶素的物質(zhì)，物質(zhì)的選擇性攝取成為可能。如果攝取大量的茶提取物，也攝取了大量咖啡因。然而，如果在本發(fā)明的酒精飲料中攝取屬于兒茶素的物質(zhì)，則避免了大量攝取咖啡因。因此，本發(fā)明的酒精飲料是用于選擇性攝取用于改善健康的屬于兒茶素的物質(zhì)的杰出安全的酒精飲料。
由于感覺評(píng)價(jià)，在本發(fā)明的酒精飲料中屬于兒茶素的物質(zhì)的含量?jī)?yōu)選為0.004-1.5％(w/w)，更優(yōu)選0.02-1％(w/w)。由于感覺評(píng)價(jià)，在本發(fā)明的酒精飲料中EGCG的含量?jī)?yōu)選為0.002-0.75％(w/w)，更優(yōu)選0.01-0.5％(w/w)。
以0.01-0.5％(w/w)的濃度含有EGCG和其中EGCG與咖啡因的比率為0.9或更高的茶飲料(例如紅茶飲料、綠茶飲料、烏龍茶飲料或大麥茶飲料)是具有新型香味的茶飲料，其中茶提取物的香味改善，咖啡因含量降低。用于本文的茶飲料是指飲料，它使用茶作為主要原料生產(chǎn)，它通過包括發(fā)酵步驟的方法產(chǎn)生，茶飲料例如通過加熱發(fā)酵。
對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)可在烹調(diào)或加工之前、在過程中或之后加入。物質(zhì)可通過將其加入烹調(diào)或加工產(chǎn)品或用于烹調(diào)或加工的產(chǎn)品中而稀釋。物質(zhì)可在生產(chǎn)飲料或食品的任何一個(gè)步驟中加入。物質(zhì)可通過將其加入飲料或食品或它們所用的原料中，或?qū)⑵浒ㄔ陲嬃匣蚴称分卸♂?。物質(zhì)可加入一次或多次，因此，新飲料或食品可方便地生產(chǎn)。該飲料或食品含有有效量的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)。與所選擇的生產(chǎn)步驟無關(guān)，含有對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，通過向其中加入該物質(zhì)而生產(chǎn)的和/或通過稀釋該物質(zhì)而生產(chǎn)的飲料或食品定義為本發(fā)明的飲料或食品。
本發(fā)明的飲料或食品含有對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，通過向其中加入該物質(zhì)而生產(chǎn)和/或通過稀釋該物質(zhì)而生產(chǎn)。該飲料或食品可以是濃縮的，飲料或食品的形式?jīng)]有具體限制，只要對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)以顯示其生理功能所需的數(shù)量包含即可。本發(fā)明的飲料或食品可以是可食形式，例如片劑、顆粒和膠囊。
作為濃縮產(chǎn)物提供并且在食用前合適稀釋后使用的濃縮的飲料或食品包括在本發(fā)明的飲料或食品(包括酒精飲料和茶飲料)中。
當(dāng)給藥用于治療或預(yù)防的本發(fā)明的藥物組合物時(shí)，在藥物組合物中所包含的拮抗劑拮抗具有內(nèi)分泌破裂活性的物質(zhì)的結(jié)合。因此，物質(zhì)對(duì)活體的有害影響可治療或預(yù)防。本發(fā)明的藥物組合物可用于緩減或預(yù)防由于雌激素的拮抗而由雌激素引起的不合適的生理疾病癥狀。此外，如以下實(shí)施例所述，由具有內(nèi)分泌破裂活性的物質(zhì)引起的子宮的增大可根據(jù)本發(fā)明避免。因此，用于治療或預(yù)防的本發(fā)明的藥物組合物用于治療或預(yù)防各種由于包含雌激素的不正?？刂贫鸬募膊』虬Y狀。
當(dāng)本發(fā)明的飲料或食品食用時(shí)，在飲料或食品中所包含的拮抗劑拮抗具有內(nèi)分泌破裂活性的物質(zhì)，因此，可治療或預(yù)防物質(zhì)對(duì)活體的有害影響。此外，由于雌激素而引起的不合適生理疾病癥狀可由本發(fā)明的飲料或食品的雌激素的拮抗作用而減輕或預(yù)防。
實(shí)施例如下實(shí)施例進(jìn)一步詳細(xì)說明本發(fā)明，但不構(gòu)成對(duì)其范圍的限制。
實(shí)施例1檢查EGCG對(duì)雙酚A的抗雌激素活性(1)EGCG對(duì)未成熟大鼠子宮重量的影響17日齡的雌性SD大鼠(由Japan SLC購(gòu)買)與其母親一起得到，在20日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?？诜蛷?qiáng)制給藥懸浮在花生油(Nacalai Tesque)中的每kg體重5ml EGCG(Sigma)或雙酚A(下文稱為BisA，Tokyo Kasei Kogyo)，以類似方式向?qū)φ沾笫蠼o藥花生油。給藥每日一次，持續(xù)三天，稱重在最后給藥后24小時(shí)后取出的子宮。
(2)檢查興奮(雌激素)活性給藥BisA或EGCG(80或800mg/kg)，結(jié)果示于表4中。當(dāng)給藥800mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的137％，另一方面，給藥EGCG不導(dǎo)致子宮重量的增加。
表4組 (n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組 7 40.4±2.8 100BisA 800mg/kg 7 55.2±2.3** 137EGCG 80mg/kg 7 42.2±1.7 104800mg/k 6 39.3±3.2 97平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差**相對(duì)于對(duì)照組p＜0.01(3)檢查拮抗(抗雌激素)活性同時(shí)給藥BisA(800mg/kg)和EGCG(800mg/kg)，結(jié)果示于表5中。
當(dāng)給藥800mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的147％，另一方面，給藥EGCG時(shí)，增加抑制至116％。
表5組(n) 子宮重量(mg) 比率％對(duì)照組 5 37.2±2.4100BisA 800mg/kg 4 54.7±5.5* 147BisA+EGCG 800mg/kg6 43.0±2.7116平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差**相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05實(shí)施例2檢查在乙醇中的EGCG溶液對(duì)雙酚A的抗雌激素活性17日齡的雌性SD大鼠(由Japan SLC購(gòu)買)與其母親一起得到，在20日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。稱重BisA使得它以200或40mg/kg給藥，溶解在少量體積的乙醇中。向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。得到的混合物連續(xù)口服給藥3天，在下一天取出子宮并稱重。將EGCG通過加入乙醇溶解，向其中加入水以調(diào)節(jié)最終乙醇濃度為10％。在給藥BisA前一天和每次連續(xù)給藥BisA前30分鐘口服給藥該溶液，結(jié)果示于表6中。
表6組 (n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組5 43.4±2.7 100BisA 200mg/kg6 57.7±5.2* 133BisA 200mg/kg+EGCG 100mg/kg 5 47.4±2.6 109BisA 200mg/kg+EGCG 200mg/kg 5 39.8±4.5 92BisA 40mg/kg 4 64.5±9.2* 149BisA 40mg/kg+EGCG 100mg/kg 5 41.2±2.2 95平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差**相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05當(dāng)給藥200mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的133％，另一方面，當(dāng)附加地給藥100mg/kg或200mg/kgEGCG時(shí)，增加分別抑制至109％或92％。此外，當(dāng)給藥40mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的149％，另一方面，當(dāng)附加地給藥100mg/kgEGCG時(shí)，增加抑制至95％。
這說明當(dāng)口服給藥EGCG時(shí)，它不顯示雌激素活性(即它不用作興奮劑)，但對(duì)于BisA，它用作拮抗劑。此外，它說明溶解在合適數(shù)量的乙醇的EGCG抑制子宮重量的增加即使給藥相對(duì)少量。在患有由于內(nèi)分泌破裂劑引起的不合適生理疾病(例如精子數(shù)目降低或前列腺肥大)或由于不正常的雌激素活性引起的變質(zhì)腫瘤、子宮內(nèi)膜炎或子宮纖維瘤的個(gè)體中，使用EGCG作為對(duì)雌激素的拮抗劑能夠提供預(yù)防或減輕疾病癥狀的藥物組合物、飲料或食品。
實(shí)施例3檢查在乙醇中的EGCG溶液對(duì)4-壬基酚的抗雌激素活性16日齡的雌性SD大鼠(Japan SLC)與其母親一起購(gòu)買，在19日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
稱重4-壬基酚(下文稱為NP)使得它以50mg/kg給藥，向其中加入花生油稀釋。得到的混合物連續(xù)口服給藥3天，在第3次給藥后一天取出子宮并稱重。將EGCG通過加入乙醇溶解，向其中加入水以調(diào)節(jié)最終乙醇濃度為10％。在給藥NP前90分鐘口服給藥該溶液，結(jié)果示于表7中。
表7組 (n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組 7 30.9±2.1 100NP 50mg/kg 7 44.4±3.2* 144NP 50mg/kg+EGCG 200mg/kg7 33.7±1.9 109平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差**相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05結(jié)果，當(dāng)給藥50mg/kg NP時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的144％，另一方面，當(dāng)附加地給藥200mg/kgEGCG時(shí)，增加分別抑制至109％。
實(shí)施例4檢查乙醇濃度對(duì)EGCG抗雌激素活性的影響16日齡的雌性SD大鼠(Japan SLC)與其母親一起購(gòu)買，在19日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
稱重BisA使得它以40mg/kg給藥，溶解在少量體積的乙醇中。向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。得到的混合物皮下給藥連續(xù)3天，在第三次給藥后一天取出子宮并稱重。將EGCG(200mg/kg)通過加入乙醇溶解，向其中加入水以調(diào)節(jié)最終乙醇濃度為10、5、1、0.5或0％。在給藥BisA前90分鐘口服給藥該溶液，結(jié)果示于表8中。
當(dāng)給藥40mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的186％，，當(dāng)附加地給藥沒有乙醇的200mg/kgEGCG時(shí)，增加僅抑制至161％。另一方面，當(dāng)乙醇以5％或10％的濃度包括時(shí)，增加分別抑制至140％或138％。因此，與不包括乙醇的情況相比，子宮重量的增加明顯抑制。
表8組 (n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組7 26.9±2.3 100BisA 40mg/kg 7 49.9±2.1* 186BisA+在10％中的EGCG 7 37.0±1.3* 138**BisA+在5％中的EGCG7 37.6±1.8* 140*BisA+在1％中的EGCG7 40.1±2.0* 149BisA+在0.5％中的EGCG 7 40.9±1.8* 152BisA+在0％中的EGCG7 43.3±1.8* 161平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05**相對(duì)于乙醇0％p＜0.05根據(jù)結(jié)果，可以預(yù)期，同樣在皮下給藥BisA的情況下，以5％或以上的濃度給藥在乙醇中的EGCG與給藥沒有乙醇的EGCG觀察的結(jié)果相比，將產(chǎn)生較強(qiáng)的抗雌激素活性。
實(shí)施例5檢查乙醇中EGCG溶液的抗雌激素活性16日齡的雌性SD大鼠(Japan SLC)與其母親一起購(gòu)買，在19日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。
稱重BisA使得它以40mg/kg給藥，溶解在少量體積的乙醇中。向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。得到的混合物皮下給藥連續(xù)3天，在第三次給藥后一天取出子宮并稱重。將EGCG(200mg/kg)通過加入乙醇溶解，向其中加入水以調(diào)節(jié)最終乙醇濃度為10或0％。在給藥BisA前30分鐘口服給藥該溶液，結(jié)果示于表9中。
當(dāng)給藥40mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的162％，，當(dāng)附加地給藥沒有乙醇的200mg/kgEGCG時(shí)，未抑制增加。另一方面，當(dāng)在10％乙醇溶液中給藥EGCG時(shí)，增加抑制至118％。
表9組(n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組 6 30.8±3.1 100BisA 40mg/kg 6 50.0±2.7* 162BisA+在10％中的EGCG7 36.4±1.4* 118**BisA+在0％中的EGCG 7 50.9±2.2* 165平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05**相對(duì)于乙醇0％p＜0.05實(shí)施例6在乙醇中EGCG溶液的抗雌激素活性的劑量關(guān)系16日齡的雌性SD大鼠(Japan SLC)與其母親一起購(gòu)買，在19日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。稱重BisA使得它以40mg/kg給藥，溶解在少量體積的乙醇中。向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。得到的混合物皮下或口服給藥連續(xù)3天，在第三次給藥后一天取出子宮并稱重。將EGCG通過加入乙醇溶解，向其中加入水以調(diào)節(jié)最終乙醇濃度為10％。在給藥BisA前30分鐘口服給藥該溶液，結(jié)果示于表10中。
當(dāng)口服給藥40mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的140％，另一方面，當(dāng)附加地給藥在含有10％乙醇的溶液中的EGCG時(shí)，增加抑制至106％，即僅給藥低至40mg/kg BisA。此外，當(dāng)皮下給藥40mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組的160％，另一方面，通過給藥EGCG溶液(40mg/kg)，增加抑制至136％。
表10組 (n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組6 32.7±1.0 100BisA 40mg/kg，口服 6 45.7±2.3* 140BisA+EGCG 40mg/kg6 34.8±2.8 106**BisA+EGCG 100mg/kg5 33.0±4.4 101*BisA 40mg/kg，皮下 5 52.2±2.9* 160BisA+EGCG 40mg/kg5 44.4±1.5* 136***BisA+EGCG 100mg/kg 5 39.6±1.0* 121***平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05**相對(duì)于口服BisA40mg/kg，p＜0.05***相對(duì)于皮下BisA40mg/kg，p＜0.05實(shí)施例7使用FP Screen-for-Competitors裝置，ER-α，高靈敏度裝置(V2577PanVera)試驗(yàn)各種沒食子酸衍生物與雌激素受體的結(jié)合。試驗(yàn)基本上根據(jù)在裝置所附的手冊(cè)中所述的方法進(jìn)行。將各種沒食子酸衍生物中的一種(正辛基沒食子酸酯(沒食子酸正辛基酯)、正十二烷基沒食子酸酯(沒食子酸正十二烷基酯)和正十六烷基沒食子酸酯(沒食子酸正十烷基酯))溶解在DMSO中，無菌稀釋以制備稀釋的樣品(0.5M-0.0000000005M)。將49μl裝置所附的篩選緩沖液加入1μL的稀釋樣品之一中，充分?jǐn)嚢?。向其中加入裝置所附的50μL的10nM-15nMES1-ER(α)配合物(ES1(結(jié)合ER的熒光配位體)和ER(α)(雌激素受體α)的配合物)，得到總共100μL體積。在室溫下靜置1小時(shí)后，使用Full-Range BEACON2000(PanVera)在360nm的興奮波長(zhǎng)和535nm發(fā)射波長(zhǎng)下測(cè)量熒光偏振。
結(jié)果示于附


圖1和表11中。在附圖中，正方形(■)、三角形()和菱形(◆)分別表示正十六烷基沒食子酸酯、正辛基沒食子酸酯和正十二烷基沒食子酸酯的結(jié)果。每種沒食子酸衍生物與雌激素受體的結(jié)合強(qiáng)度表示濃度，此時(shí)，衍生物顯示在配合物中通過與ES1競(jìng)爭(zhēng)，抑制50％的ES1-ER(α)配合物結(jié)合的活性(IC50)。它顯示盡管結(jié)合強(qiáng)度不同，但沒食子酸衍生物(正辛基沒食子酸酯、正十二烷基沒食子酸酯和正十六烷基沒食子酸酯)具有結(jié)合雌激素受體的活性。
表11樣品 IC50(M)正辛基沒食子酸酯 3.38×10-6正十二烷基沒食子酸酯 3.11×10-7正十六烷基沒食子酸酯 4.76×10-8實(shí)施例8用于培養(yǎng)的細(xì)胞增生的試驗(yàn)根據(jù)在Ana M.Soto等(Environ.Health Perspect.103113-122(1995))中描述的稱為E-SCREEN試驗(yàn)的方法進(jìn)行。簡(jiǎn)單地說，將體積100μl的4.0×103人體乳腺癌得到的MCF-7細(xì)胞在96孔板的每個(gè)孔中接種，將板培養(yǎng)過夜。隨后向其中加入BisA或BisA和正辛基沒食子酸酯的混合物，沒有添加的孔用作對(duì)照組。細(xì)胞進(jìn)一步在培養(yǎng)基，沒有酚紅的補(bǔ)加5％FCS并用活性炭-葡萄聚糖處理的Dulbecco改性Eagle培養(yǎng)基中培養(yǎng)4天，使用MTT方法測(cè)量細(xì)胞數(shù)量。
結(jié)果示于表12中，在BisA存在下細(xì)胞增生的數(shù)量超過對(duì)照組的1.8倍，另一方面，它顯示當(dāng)加入BisA和正辛基沒食子酸酯時(shí)，細(xì)胞增生抑制至與對(duì)照組幾乎相同的程度。
表12添加 細(xì)胞數(shù)量增加的相對(duì)比率(％)無添加劑(對(duì)照組) 100BisA 180BisA+正辛基沒食子酸酯 91實(shí)施例9正辛基沒食子酸酯對(duì)BisA的抗雌激素活性16日齡的雌性SD大鼠(Japan SLC)與其母親一起購(gòu)買，在19日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將正辛基沒食子酸酯(Tokyo Kasei Kogyo)溶解在少量體積的乙醇中。向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。得到的混合物向20日齡的雌性大鼠口服給藥連續(xù)3天，稱重在最后一次給藥后一天取出的子宮。含有5％乙醇的花生油用作載體給藥組。將BisA溶解在少量體積的乙醇中，向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。在給藥正辛基沒食子酸酯后1.5小時(shí)口服給藥該溶液，結(jié)果示于表13中。
當(dāng)口服給藥40mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的161％，另一方面，當(dāng)附加地給藥126或25mg/kg正辛基沒食子酸酯時(shí)，增加明顯抑制至108％，即相當(dāng)于對(duì)照組。
表13組 (n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組 5 30.4±0.7 100BisA 40mg/kg+載體 7 48.9±2.1* 161BisA+正辛基沒食子酸酯25mg/kg6 32.7±3.5 108*BisA+正辛基沒食子酸酯 7 32.9±3.6 108**126mg/kg平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05**相對(duì)于載體p＜0.05正辛基沒食子酸酯顯示對(duì)BisA的抗雌激素活性，當(dāng)考慮劑量相比時(shí)，效果相當(dāng)于或強(qiáng)于EGCG。
實(shí)施例10正辛基沒食子酸酯對(duì)NP的抗雌激素活性16日齡的雌性SD大鼠(Japan SLC)與其母親一起購(gòu)買，在19日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將正辛基沒食子酸酯(Tokyo Kasei Kogyo)溶解在少量體積的乙醇中。向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。得到的混合物向20日齡的雌性大鼠口服給藥連續(xù)3天，稱重在最后一次給藥后一天取出的子宮。含有5％乙醇的花生油用作載體給藥組。稱重NP使得它以50mg/kg給藥，通過加入花生油稀釋。在給藥正辛基沒食子酸酯后1.5小時(shí)口服給藥該溶液，結(jié)果示于表14中。
當(dāng)口服給藥50mg/kg NP時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的144％，另一方面，當(dāng)附加地給藥126mg/kg正辛基沒食子酸酯時(shí)，增加明顯抑制至117％。
表14組(n) 子宮重量(mg)比率％對(duì)照組 7 33.1±1.2 100NP 50mg/kg+載體 7 47.6±2.3* 144NP+正辛基沒食子酸酯25mg/kg 5 40.4±3.6 122NP+正辛基沒食子酸酯126mg/kg5 38.6±2.4 117**平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05**相對(duì)于載體p＜0.05正辛基沒食子酸酯也顯示對(duì)NP的抗雌激素活性，當(dāng)考慮劑量相比時(shí)，效果相當(dāng)于或強(qiáng)于EGCG。
實(shí)施例11正辛基沒食子酸酯或正十六烷基沒食子酸酯對(duì)皮下給藥的BisA的抗雌激素活性17日齡的雌性SD大鼠(Japan SLC)與其母親一起購(gòu)買，在20日齡斷奶，在下一天進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。將正辛基沒食子酸酯或正十六烷基沒食子酸酯(均來自Tokyo Kasei Kogyo)溶解在少量體積的乙醇中。向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度。得到的混合物向21日齡的雌性大鼠口服給藥連續(xù)3天，稱重在最后一次給藥后一天取出的子宮。含有5％乙醇的花生油用作載體給藥組。將BisA溶解在少量體積的乙醇中，向其中加入花生油得到5％的最終乙醇濃度，混合物皮下給藥，結(jié)果示于表15中。
當(dāng)口服給藥40mg/kg BisA時(shí)，子宮重量增加至到對(duì)照組(100％)的145％，另一方面，當(dāng)附加地給藥5或25mg/kg正辛基沒食子酸酯時(shí)，增加分別明顯抑制至117或102％。此外，當(dāng)附加地給藥1或5mg/kg正十六烷基沒食子酸酯時(shí)，增加分別明顯抑制至109或104％，即在每種情況下相當(dāng)于對(duì)照組。
表15組(n)子宮重量(mg)比率％對(duì)照組 7 4.1±3.7100BisA 40mg/kg+載體 7 59.7±2.7* 145BisA+正辛基沒食子酸酯5mg/kg7 48.3±1.5 117**BisA+正辛基沒食子酸酯25mg/kg 7 42.1±1.9 102**BisA+正十六烷基沒食子酸酯1mg/kg7 45.1±2.3 109**BisA+正十六烷基沒食子酸酯5mg/kg7 43.1±2.0 104**平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤差*相對(duì)于對(duì)照組p＜0.05**相對(duì)于載體p＜0.05正辛基沒食子酸酯和正十六烷基沒食子酸酯顯示對(duì)BisA的抗雌激素活性。
實(shí)施例12將用作含有EGCG的提取物的Sunphenon DCF-1以0.001、0.01、0.05、0.1、0.5、1.0或1.5％的濃度加入商業(yè)獲得的大麥茶。得到的產(chǎn)品進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)，由10人組成專題小組，用于味、香、色和總評(píng)價(jià)的感覺評(píng)價(jià)通過比較本發(fā)明的含有的含有EGCG的提取物的大麥茶飲料和沒有添加的對(duì)照大麥茶進(jìn)行。5個(gè)等級(jí)用于感覺評(píng)價(jià)(1良好；5差)，結(jié)果用平均值表示，結(jié)果示于表16中。
表16加入含有EGCG的提取物的效果含EGCG 感覺評(píng)價(jià)提取物(％)味香色總 評(píng)價(jià)0 4.0 3.5 2.8 3.8 正常(對(duì)照組)0.001 3.6 3.3 2.8 3.5 味道的輕微良好平衡收緊味道的弱效果0.004 3.3 3.2 2.8 3.3 全幅面味道收緊味道效果味道平衡0.02 3.2 3.0 2.8 3.1 全幅面味道收緊味道效果味道平衡0.05 3.2 3.0 2.8 3.1 輕微刺激味道濃厚感覺0.1 3.0 3.0 2.8 3.0 刺激味道濃厚感覺0.5 3.1 3.0 2.8 3.0 刺激味道濃厚感覺1.0 3.2 3.0 2.8 3.1 強(qiáng)刺激味道良好全幅面和平衡濃厚感覺1.5 3.4 3.0 2.8 3.3 強(qiáng)刺激味道良好全幅面和平衡濃厚感覺2.0 3.6 3.2 2.8 3.5 腐敗刺激味道的平衡濃厚感覺如表16所示，含有濃度為0.02-1.0％(w/w)的含有EGCG提取物的產(chǎn)品被評(píng)價(jià)為具有良好濃厚感覺、全幅面和味道平衡，是優(yōu)選的。對(duì)于含有濃度為0.004-1.5％(w/w)的含有EGCG提取物的每個(gè)產(chǎn)品總評(píng)價(jià)得分為3.3或以下，說明這些經(jīng)評(píng)價(jià)是優(yōu)選的。
實(shí)施例13在實(shí)施例12中制備的大麥茶飲料(含有濃度為0.05％(w/v)的Sunphenon DCF-1作為含有EGCG提取物)中以1、2、4、8、16、20或35％(v/v)的最終濃度加入乙醇。如實(shí)施例12中所述進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)，結(jié)果示于表17中。
表17加入含有EGCG的提取物的效果乙醇 感覺評(píng)價(jià) 總 評(píng)價(jià)(％，v/v) 味香色0 3.2 3.0 3.0 3.1全幅面味道的良好平衡2 2.8 2.7 2.6 2.7柔和香和味提高的苦味4 2.5 2.6 2.5 2.5柔和的香和味提高的香提高的苦味8 2.2 2.6 2.5 2.4同上16 2.6 2.7 2.6 2.6同上20 3.0 2.7 2.7 2.7輕微可注意的酒精氣味味道深度35 3.0 2.8 2.7 2.8可注意的酒精無味味道深度如表17所示，以濃度為2-35％(v/v)含有乙醇和EGCG的茶飲料，與沒有乙醇的產(chǎn)品相比，通常評(píng)價(jià)為具有柔和香味和味道，平滑的結(jié)構(gòu)、改善的苦味和突出的茶香味。因此，觀察到通過結(jié)合EGCG和乙醇的改善香味和味道的協(xié)同效果。對(duì)于含有濃度為2-35％(v/v)的乙醇的每個(gè)產(chǎn)品總評(píng)價(jià)得分為2.8或以下，說明這些產(chǎn)品經(jīng)評(píng)價(jià)是優(yōu)選的。
通過結(jié)合EGCG和乙醇，本發(fā)明提供了帶有改裝的香味和味道的協(xié)同效果的高EGCG含量的可口酒精飲料。
實(shí)施例14(1)使用Sunphenon DCF-1作為含EGCG提取物制備含有含EGCG提取物和具有如表18中所示的組成的茶飲料。根據(jù)常規(guī)方法制備商業(yè)可獲得的banaba茶、綠茶、烏龍茶或大麥茶用作茶。本發(fā)明的產(chǎn)品含有濃度為0.1％(w/v)的含EGCG提取物，而對(duì)照組沒有。如實(shí)施例12所述進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)，結(jié)果示于表19中。
表18Banaba 茶綠茶烏龍茶蕎麥茶PC P C P C P C加EGCG的量0.1 0 0.1 0 0.1 0 0.1 0(％，w/v)P本發(fā)明的產(chǎn)品；C對(duì)照組。
表19感覺評(píng)價(jià)含EGCG飲料項(xiàng)總味 香 色Banaba P 2.9 2.7 3.4 3.1茶 C 3.4 3.6 3.8 3.6綠茶P 2.7 3.1 3.2 3.0C 3.5 3.7 3.4 3.6烏龍茶 P 3.0 3.0 3.1 3.0C 3.5 3.7 3.5 3.6蕎麥茶 P 3.1 3.2 3.2 3.1C 3.7 3.6 3.6 3.6P本發(fā)明的產(chǎn)品；C對(duì)照組。
如表19所示，結(jié)合混合茶與含EGCG提取物制備的本發(fā)明的飲料評(píng)價(jià)為新飲料，均具有協(xié)調(diào)的香味，具有良好平衡的茶味道，單獨(dú)的茶不是提供的新全幅面評(píng)價(jià)，達(dá)到香和味的平衡，帶有興奮性感覺的苦味。
本發(fā)明的banaba茶飲料、綠茶飲料、烏龍茶飲料和蕎麥茶飲料的EGCG含量和咖啡因含量分別是0.05％(w/v)和低于檢測(cè)限度、0.068％(w/v)和0.015％(w/v)、0.05％(w/v)和0.004％(w/v)、和0.05％(w/v)和低于檢測(cè)限度。
在4％(v/v)的最終濃度在本發(fā)明的茶飲料中加入乙醇制備的酒精飲料顯示良好香味。
含有烏龍茶的商業(yè)可獲得的酒精飲料的EGCG含有為0.001％(w/v)。
(2)制備具有如表20所示組成的茶飲料。每種飲料含有濃度為0.05％(w/v)的含EGCG提取物(Sunphenon BG)，并含有或不含濃度為4％(v/v)的乙醇。具體地說，得到500ml兩倍濃縮的商業(yè)可獲得的紅茶提取物，在表20中所示的組分加入提取物中以制備含有或不含酒精的1000ml檸檬茶飲料。本發(fā)明的產(chǎn)品含有含EGCG提取物(SunphenonBG)，而對(duì)照組不含。產(chǎn)品裝入200ml的罐中，在83℃下消毒1分鐘以制備罐裝飲料。如實(shí)施例12所示進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)。評(píng)審小組由10個(gè)成員組成，使用5個(gè)等級(jí)用于感覺評(píng)價(jià)(1良好，5差)。結(jié)果用平均數(shù)值表示，結(jié)果示于表21中。
表20含乙醇不含乙醇(％) (％)茶 50 501/5檸檬汁 0.10.1檸檬酸或檸檬酸鈉s.a. s.a.維生素C 0.02 0.02糖(甘蔗)4.54.5Sunphenon BG0.05 0.05酒精含量(v/v) 4.00pH 3.73.7s.a.適量表21檸檬茶 項(xiàng) 總味 香 色本發(fā)明含酒精檸檬茶產(chǎn)品2.8 2.9 3.22.9對(duì)照組 3.3 3.6 3.53.4本發(fā)明不含酒精檸檬茶產(chǎn)品2.9 3.1 3.23.0對(duì)照組 3.5 3.7 3.53.6如表21所示，含有含EGCG提取物，含有或不含酒精的本發(fā)明的檸檬茶飲料被評(píng)價(jià)為新飲料，每種具有中等刺激的味道和收緊的味道，比對(duì)照組具有較好味、香和色的平衡。
此外，通過制備綠茶飲料、烏龍茶飲料、大麥茶飲料和紅茶飲料生產(chǎn)各種茶飲料，其中EGCG與咖啡因的比率為0.9或以上，EGCG含量為0.01-0.2％(w/v)，并消毒。
每種茶飲料是具有中等刺激感覺的綠茶飲料、烏龍茶飲料、大麥茶飲料或紅茶飲料，其中EGCG的香味加入茶提取物的香味中。
商業(yè)可獲得的無菌茶飲料的EGCG與咖啡因的比率為0.7-0.8，EGCG含有低于0.01％(w/w)。
商業(yè)可獲得的的無菌紅茶飲料的EGCG與咖啡因的比率為0.6，EGCG含量為0.004％(w/w)。
實(shí)施例15使用Sunphenon LA-10作為含EGCG提取物制備湯。本發(fā)明的產(chǎn)品含有提取物，而對(duì)照組不含。含有EGCG提取物的湯的組成示于表22中，制備具有該組成的湯，裝入200ml的罐中，通過在120℃加熱15分鐘消毒以制備罐裝產(chǎn)品。如實(shí)施例12中所示進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)。評(píng)審小組由10個(gè)成員組成，使用5個(gè)等級(jí)用于感覺評(píng)價(jià)(1良好，5差)。結(jié)果用平均數(shù)值表示，結(jié)果示于表23中。
表22含有EGCG的提取物的湯的組成本發(fā)明產(chǎn)品對(duì)照組(％，w/v)(％，w/v)含有BGCG提取物 0.15 0低濃度瓊脂* 0.25 0.25乳清礦物 0.60 0.60提取物 0.13 0.13糖 0.10 0.10胡椒 0.00050.0005維生素C 0.02 0.02pH 5.0白利糖度 1.1酸度(相對(duì)檸檬酸) 0.025*來自Ina Shokuhin KogyopH用檸檬酸或檸檬酸鈉調(diào)節(jié)。
表23感覺評(píng)價(jià)項(xiàng)湯 總味 香 色本發(fā)明產(chǎn)2.62.8 3.1 2.8對(duì)照組 3.23.6 3.5 3.4如表23所示，本發(fā)明的產(chǎn)品與對(duì)照組相比，被評(píng)價(jià)為具有全幅面和濃厚感覺，含EGCG提取物與豬肉提取物的香和味配合良好，具有單獨(dú)的豬肉提取物不能提供的新味道，和其中蔬菜和肉味彼此協(xié)調(diào)的柔和香味。含EGCG提取物在調(diào)節(jié)得和味中作為隱藏的香味是有效的。對(duì)照組趨向于失去香和味的平衡。如上所述，這說明本發(fā)明的含EGCG提取物作為調(diào)味品用于基于其特性香和味的烹調(diào)是杰出的。
實(shí)施例16“furikake”(撒在米飯上的美味調(diào)味干食品)通過將2.4kg魚肉、0.5kg鹽和0.3kg谷氨酸鈉(總共3.2kg)以每公斤混合物3g的比率與(本發(fā)明的產(chǎn)品)或不與(對(duì)照組)凍干的含EGCG提取物混合，和根據(jù)常規(guī)方法造粒得到的混合物制備。將0.4kg紫菜和1.2kg芝麻與約3.2kg造粒產(chǎn)品均勻混合。將furikake撒在熟米飯上，如實(shí)施例12中所述進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)。結(jié)果，與對(duì)照組相比，本發(fā)明的產(chǎn)品被評(píng)價(jià)為具有抑制的由魚肉產(chǎn)生的魚味，味道和收緊味道的全幅面評(píng)價(jià)。這說明作為隱藏的香味，有類似香料功能。因此，本發(fā)明的furikake的總質(zhì)量被明顯改善。
實(shí)施例17通過向根據(jù)常規(guī)方法制備的100ml清酒加入0.02g含EGCG提取物(Sunphenon 100S)制備本發(fā)明的產(chǎn)品。不添加EGCG的清酒用作對(duì)照組。如實(shí)施例12進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)，結(jié)果示于表24中。
表24感覺評(píng)價(jià)本發(fā)明產(chǎn)品 對(duì)照組味平衡 2.8 3.5全幅面 2.7 3.6余味 3.0 3.6香 2.9 3.2總 2.8 3.4如表24所示，與對(duì)照組相比，本發(fā)明的產(chǎn)品被評(píng)價(jià)為具有改善的香和味，良好平衡的味道、收緊味道和杰出全幅面的豪華產(chǎn)品。
實(shí)施例18通過向根據(jù)常規(guī)方法制備的100ml甜清酒或發(fā)酵調(diào)料加入0.05g含EGCG提取物(Sunphenon 100S)制備本發(fā)明的產(chǎn)品。不添加EGCG的產(chǎn)品用作對(duì)照組。如實(shí)施例12進(jìn)行感覺評(píng)價(jià)，結(jié)果示于表25中。
表25；感覺評(píng)價(jià)甜清酒發(fā)酵調(diào)料P C P C平衡 2.9 3.0 2.93.2香 2.7 3.0 3.03.4色 2.7 3.0 3.13.5總 2.8 3.0 2.93.3P本發(fā)明的產(chǎn)品；C對(duì)照組。
如表25所示，與對(duì)照組相比，本發(fā)明的產(chǎn)品被評(píng)價(jià)為是新的甜清酒和發(fā)酵調(diào)料，它具有刺激感覺，味道的總體上改善的平衡，尤其是改善的甜味，和改善的香和味。
工業(yè)應(yīng)用如上詳細(xì)說明，對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，以及含有該物質(zhì)的飲料或食品能夠有效減輕或避免由于過量雌激素或內(nèi)分泌破裂劑引起的不合適生理疾病，即具有雌激素受體的惡性瘤、子宮纖維瘤、子宮內(nèi)膜炎、精子數(shù)量降低、前列腺肥大等。
此外，本發(fā)明提供了飲料或食品，其中增加了屬于兒茶素的物質(zhì)，它具有帶有刺激感覺的苦味、收緊的味道以及良好平衡的味道。
權(quán)利要求
1.用于治療或預(yù)防由興奮劑與雌激素受體結(jié)合引起的疾病的藥物組合物，其含有作為活性物質(zhì)的對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)。
2.權(quán)利要求1的藥物組合物，其中對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)是至少一種選自如下的化合物式I的化合物 其中R1和R2表示-H，-OH或-O-R4；R3表示-H或-OH；R4表示式II的化合物 它們的衍生物或其鹽；沒食子酸；它們的衍生物；和它們的可藥用的鹽。
3.權(quán)利要求1或2的藥物組合物，其中對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)是屬于兒茶素的物質(zhì)。
4.權(quán)利要求3的藥物組合物，其中屬于兒茶素的物質(zhì)是至少一種選自如下兒茶素(a)-(h)、它們的衍生物和其鹽的物質(zhì)(a)表兒茶素；(b)表培兒茶素；(c)表培兒茶素沒食子酸鹽；(d)表兒茶素沒食子酸鹽；(e)培兒茶素沒食子酸鹽；(f)兒茶素沒食子酸鹽；(g)兒茶素；和(h)培兒茶素。
5.權(quán)利要求2的藥物組合物，其中沒食子酸的衍生物沒食子酸的酯。
6.權(quán)利要求5的藥物組合物，其中沒食子酸的酯是沒食子酸與具有8個(gè)或以上碳原子的醇的酯。
7.權(quán)利要求5的藥物組合物，其中沒食子酸的酯是辛基沒食子酸酯、十二烷沒食子酸酯或十六烷基沒食子酸酯。
8.權(quán)利要求1-7的任何之一的藥物組合物，其中興奮劑是內(nèi)分泌破裂劑。
9.權(quán)利要求8的藥物組合物，其中內(nèi)分泌破裂劑是至少一種分類于如下種類(1)-(9)的化合物(1)二噁英；(2)有機(jī)氯化合物；(3)苯酚；(4)對(duì)苯二甲酸酯；(5)芳烴；(6)殺蟲劑；(7)有機(jī)錫化合物；(8)雌激素；和(9)滅蟻靈、毒殺芬、涕滅威或開蓬。
10.權(quán)利要求9的藥物組合物，其中內(nèi)分泌破裂劑是至少一種選自折侖諾、金雀異黃素、擬雌內(nèi)酯、o，p-DDT、開蓬、甲氧氯、玉米烯酮、二噁英、p-辛基苯酚、壬基苯酚、迪厄耳丁、丁基芐基對(duì)苯二甲酸酯和雙酚A的物質(zhì)。
11.用于減輕或避免由于興奮劑與雌激素受體結(jié)合引起的疾病的飲料或食品，它含有對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)，它通過加入該物質(zhì)生產(chǎn)和/或通過稀釋該物質(zhì)生產(chǎn)。
12.權(quán)利要求11的飲料或食品，其中對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)是至少一種選自如下的化合物式I的化合物 其中R1和R2表示-H，-OH或-O-R4；R3表示-H或-OH；R4表示式II的化合物 它們的衍生物或其鹽；沒食子酸；它們的衍生物；和它們的可藥用的鹽。
13.權(quán)利要求11或12的飲料或食品，其中對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗活性的物質(zhì)是屬于兒茶素的物質(zhì)。
14.權(quán)利要求13的飲料或食品，其中屬于兒茶素的物質(zhì)是至少一種選自如下兒茶素(a)-(h)、它們的衍生物和其鹽的物質(zhì)(a)表兒茶素；(b)表培兒茶素；(c)表培兒茶素沒食子酸鹽；(d)表兒茶素沒食子酸鹽；(e)培兒茶素沒食予酸鹽；(f)兒茶素沒食子酸鹽；(g)兒茶素；和(h)培兒茶素。
15.權(quán)利要求12的飲料或食品，其中沒食子酸的衍生物沒食子酸的酯。
16.權(quán)利要求15的飲料或食品，其中沒食子酸的酯是沒食子酸與具有8個(gè)或以上碳原子的醇的酯。
17.權(quán)利要求16的飲料或食品，其中沒食子酸的酯是辛基沒食子酸酯、十二烷沒食子酸酯或十六烷基沒食子酸酯。
18.權(quán)利要求11-16的任何之一的飲料或食品，其中興奮劑是內(nèi)分泌破裂劑。
19.權(quán)利要求18的飲料或食品，其中內(nèi)分泌破裂劑是至少一種分類于如下種類(1)-(9)的化合物(1)二噁英；(2)有機(jī)氯化合物；(3)苯酚；(4)對(duì)苯二甲酸酯；(5)芳烴；(6)殺蟲劑；(7)有機(jī)錫化合物；(8)雌激素；和(9)滅蟻靈、毒殺芬、涕滅威或開蓬。
20.權(quán)利要求19的飲料或食品，其中內(nèi)分泌破裂劑是至少一種選自折侖諾、金雀異黃素、擬雌內(nèi)酯、o，p-DDT、開蓬、甲氧氯、玉米烯酮、二噁英、p-辛基苯酚、壬基苯酚、迪厄耳丁、丁基芐基對(duì)苯二甲酸酯和雙酚A的物質(zhì)。
21.含有屬于兒茶素的物質(zhì)的酒精飲料，它通過向其中加入屬于兒茶素的物質(zhì)生產(chǎn)。
22.權(quán)利要求21的酒精飲料，其中屬于兒茶素的物質(zhì)是表培兒茶素沒食子酸鹽。
23.權(quán)利要求21的酒精飲料，它含有茶提取物。
24.權(quán)利要求22或23的酒精飲料，它以表培兒茶素沒食子酸鹽與咖啡因的比率為0.9或以上含有咖啡因。
25.權(quán)利要求21-24的任何之一的酒精飲料，它含有濃度為0.002-0.75％(w/w)的表培兒茶素沒食子酸鹽。
26.權(quán)利要求21-25的任何之一的酒精飲料，它具有茶的濃厚感覺以及良好全幅面和味道平衡。
27.通過包括發(fā)酵步驟的方法生產(chǎn)的茶飲料，它以0.01-0.5％(w/w)的濃度含有表培兒茶素沒食子酸鹽，其中表培兒茶素沒食子酸鹽與咖啡因的比率是0.9或以上。
全文摘要
用于由于興奮劑(內(nèi)分泌破裂劑等)與雌激素受體結(jié)合引起的疾病的藥物或預(yù)防藥，其特征在于作為活性成分，它含有對(duì)雌激素受體興奮劑具有拮抗作用的拮抗劑，例如兒茶素(例如表培兒茶素沒食子酸鹽)。
文檔編號(hào)A23L1/39GK1413117SQ00817506
公開日2003年4月23日 申請(qǐng)日期2000年10月23日 優(yōu)先權(quán)日1999年10月29日
發(fā)明者西山英治, 大野木宏, 近藤昭宏, 大屋敷春夫, 佐川裕章, 水谷滋利, 加藤郁之進(jìn) 申請(qǐng)人:寶酒造株式會(huì)社