冬蟲夏草連續(xù)深層發(fā)酵液和發(fā)酵粉的生產(chǎn)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及冬蟲夏草技術(shù)領(lǐng)域，更具體而言，涉及冬蟲夏草連續(xù)深層發(fā)酵液和發(fā) 酵粉的生產(chǎn)方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 冬蟲夏草是一種特殊蟲和真菌共生的生物體，其菌絲體通過各種方式感染蝙蝠蛾 (鱗翅目蝙蝠蛾科蝙蝠蛾屬昆蟲）的幼蟲，以其體內(nèi)的有機(jī)物質(zhì)作為營養(yǎng)能量來源進(jìn)行寄生 生活，經(jīng)過不斷生長發(fā)育和分化后，最終菌絲體扭結(jié)并形成子座伸出寄主外殼，從而形成的 一種特殊的蟲菌共生的生物體。入藥部位為菌核和子座的復(fù)合體。冬蟲夏草首次記載使用 是清代吳儀洛《本草叢新》，書中認(rèn)為冬蟲夏草性味甘，溫。功能補肺益腎，化痰止咳?？捎?之于久咳虛喘，產(chǎn)后虛弱、陽痿陰冷等"虛"的病癥。據(jù)研究：冬蟲夏草主要含有冬蟲夏草素、 冬蟲夏草酸、腺苷和多糖等成分；冬蟲夏草素能抑制鏈球菌、鼻疽桿菌炭疽桿菌等病菌的生 長，又是抗癌的活性物質(zhì)，對人體的內(nèi)分泌系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)有好的調(diào)節(jié)作用；蟲草酸能改變 人體微循環(huán)，具有明顯的降血脂和鎮(zhèn)咳祛痰作用；蟲草多糖是免疫調(diào)節(jié)劑，可增強機(jī)體對病 毒及寄生蟲的抵抗力。由于優(yōu)質(zhì)天然蟲草產(chǎn)量極其有限，無法滿足需求，貨源奇缺，價格昂 貴，為滿足廣大消費者的需求，有必要對現(xiàn)有技術(shù)進(jìn)行改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)中所存在的不足，提供一種冬蟲夏草連續(xù)深層發(fā)酵液和發(fā)酵粉 的生產(chǎn)方法。
[0004] 為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為： 冬蟲夏草連續(xù)深層發(fā)酵液和發(fā)酵粉的生產(chǎn)方法，按照以下步驟進(jìn)行： a、 伴生菌和冬蟲夏草的母種純化； b、 伴生菌和冬蟲夏草的發(fā)酵罐菌種培養(yǎng)； c、 混合連續(xù)深層發(fā)酵； d、 發(fā)酵液的制備； e、 發(fā)酵粉的制備。
[0005] 所述a步驟中伴生菌母種純化按照以下方式進(jìn)行：1)配制原料；2)制作培養(yǎng)基；3) 分裝試管；4)塞皮塞；5)試管包扎；6)培養(yǎng)基滅菌；7)擺放斜面；8)檢查滅菌效果；9)母種 接種；10)培養(yǎng)菌種； 上述配制原料具體為：按照下列組分分別進(jìn)行配置，蔗糖50g/L，胰蛋白胨10g/L， 酵母提取物 3g/L，無機(jī)離子(初始 pH 為 5. 6-6. 0) :0· 3g CaC12 · 2H20、lg ΚΗ2Ρ04、0· 5g MgS04*7H20、lg NaCl、0.01g CuS04*5H20、0.01g FeS04*7H20、0.01g MnC12*4H20、0.01g ZnC12 ;無機(jī)離子可配成IOX母液在4°C保存，馬鈴薯200克，葡萄糖20克，瓊脂18-20克， PH自然； 上述制作培養(yǎng)基具體為：選擇優(yōu)質(zhì)的馬鈴薯，去皮，挖去芽眼，削掉青綠部分，切成長 0. 5毫米的薄片，稱取200克，加水1000毫升，煮沸后微火保持30分鐘，馬鈴薯煮熟而不酥， 即8成熟左右，然后用2層沾濕紗布過濾，之后加入瓊脂繼續(xù)加熱，并不斷用玻璃棒攪拌至 瓊脂完全溶化，最后依次加入蔗糖、葡萄糖、胰蛋白胨、酵母提取物、無機(jī)離子，繼續(xù)加熱并 攪拌至全部溶化，最后用清水補足至1000毫升，即可進(jìn)行分裝。
[0006] 所述a步驟中冬蟲夏草母種純化按照以下方式進(jìn)行：1)配制原料；2)制作培養(yǎng)基； 3)接種；4)培養(yǎng)； 上述配制原料具體為：按照下列組分分別進(jìn)行配置，麥麩50克，馬鈴薯200克，葡萄糖 20克，蛋白胨5克，瓊脂18 - 20克，磷酸二氫鉀1.5克，硫酸鎂0.75克，PH自然； 上述制作培養(yǎng)基具體為：將馬鈴薯加入1000 ml的水中，煮沸后微火保持30分鐘，然后 用雙層沾濕紗布過濾，之后加入瓊脂繼續(xù)加熱，并不斷用玻璃棒攪拌至瓊脂完全溶化，再依 次加入麥麩、葡萄糖、磷酸二氫鉀、蛋白胨、硫酸鎂，繼續(xù)加熱并攪拌至全部溶化，最后用清 水補足至1000毫升，完成培養(yǎng)基制作。
[0007] 所述b步驟中伴生菌發(fā)酵罐菌種培養(yǎng)按照以下方式進(jìn)行：1)配制原料；2)制作； 3)接種；4)培養(yǎng)； 上述配制原料具體為：按照下列組分分別進(jìn)行配置，蔗糖50g/L，胰蛋白胨10g/L，酵 母提取物38/1，無機(jī)離子（初始？!1為5.6-6.0):0.3 8〇3(：12,2!120、18詘2?04、0.58 MgS04*7H20、lg NaCl、0.01g CuS04*5H20、0.01 g FeS04*7H20、0.01g MnC12*4H20、0.01g ZnC12 ;無機(jī)離子可配成IOX母液在4°C保存，馬鈴薯200克，葡萄糖20克，PH自然； 上述制作為：將以上配方制成液體培養(yǎng)基，裝入1000 ml搖瓶，放入攪拌子，塞好瓶口， 包上防潮紙，放入滅菌鍋，封好鍋口，打開放氣閥，當(dāng)有大量蒸氣排出時關(guān)閉放氣閥，溫度升 至121°C _123°C，時間持續(xù)為30分鐘，然后讓其自然冷卻，壓力回零時，打開滅菌鍋蓋取出 液體瓶。
[0008] 所述b步驟中冬蟲夏草發(fā)酵罐菌種培養(yǎng)按照以下方式進(jìn)行：1)配制原料；2)制作； 3)接種；4)培養(yǎng)； 上述配制原料具體為：按照下列組分分別進(jìn)行配置，麥麩50克，馬鈴薯200克，葡萄糖 20克，蛋白胨5克，磷酸二氫鉀1.5克，硫酸鎂0.75克，PH自然； 上述制作為：將以上配方制成液體培養(yǎng)基，裝入1000 ml搖瓶，放入攪拌子，塞好瓶口， 包上防潮紙，放入滅菌鍋，封好鍋口，打開放氣閥，當(dāng)有大量蒸氣排出時關(guān)閉放氣閥，溫度升 至121°C _123°C，時間持續(xù)為30分鐘，然后讓其自然冷卻，壓力回零時，打開滅菌鍋蓋取出 液體瓶。
[0009] 所述C步驟按照以下方式進(jìn)行：1)發(fā)酵罐滅菌處理；2)混合連續(xù)深層發(fā)酵液體培 養(yǎng)基；3)裝料滅菌；4)接種；5)混合發(fā)酵液體的培養(yǎng)； 上述混合連續(xù)深層發(fā)酵液體培養(yǎng)基按照下列組分進(jìn)行配置，蔗糖50g/L，胰蛋白胨 l〇g/L，酵母提取物 3g/L ;無機(jī)離子(初始 pH 為 5. 6-6. 0) :0· 3g CaC12 · 2H20、Ig KH2P04、 0.5g MgS04*7H20、lg NaCl，0.01g CuS04*5H20、0.01g FeS04*7H20、0.01g MnC12*4H20、 0.0 lg ZnC12,無機(jī)離子可配成IOX母液在4°C保存，馬鈴薯200克，葡萄糖20克，PH自然； 上述接種是將培養(yǎng)好的伴生菌發(fā)酵菌種與冬蟲夏草發(fā)酵菌種進(jìn)行混合接種。
[0010] 所述d步驟按照以下方式進(jìn)行：使用過濾機(jī)在溫度25~28°C開始過濾，回流過濾 液10分鐘，收集澄清的濾液，即得冬蟲夏草發(fā)酵液；過濾所得的液體經(jīng)超高溫瞬時殺菌機(jī) 殺菌，殺菌溫度（ll〇±5) °C，時間10秒，殺菌過的液體放至?xí)捍婀藜彼倮鋮s到50~55°C， 進(jìn)行濃縮；在真空度〇. 096~0. 099兆帕、液體溫度50~55°C、蒸汽壓力0. 196~0. 294兆 帕下濃縮，濃縮至可溶性固形物達(dá)42%~45%后進(jìn)行二次殺菌；將濃縮好的液體用液體灌 裝機(jī)將液體裝入專用瓶(袋）中，然后在90°C殺菌30分鐘；將成品在-18~-25°C冷庫中恒 溫冷藏。
[0011] 所述e步驟按照以下方式進(jìn)行：把過濾后的發(fā)酵固形物用低溫凍干設(shè)備全部干燥 后，再用低溫磨粉設(shè)備磨成120目的細(xì)粉，即得冬蟲夏草發(fā)酵粉，再進(jìn)行真空包裝保存。
[0012] 與現(xiàn)有技術(shù)相比本發(fā)明所具有的有益效果為： 本發(fā)明在通過對青藏高原的野生冬蟲夏草菌種分離、提純，并通過連續(xù)深層發(fā)酵技術(shù)， 提取出人工發(fā)酵的蟲草液和蟲草粉。多項關(guān)鍵指標(biāo)都超過天然的冬蟲夏草，并具有質(zhì)量穩(wěn) 定藥效的特性。所含的蟲草硒是抗癌、抗氧化生理活性中極其重要的微量元素之一，在蟲草 素中達(dá)0. 21gm，遠(yuǎn)高于天然蟲草的0. 0049gm。核苷是蟲草中的主要有效成分之一，具有抗 癌、抗病毒、抗菌等作用，優(yōu)等天然蟲草可達(dá)〇. 1%數(shù)量級，蟲草素甚至可達(dá)〇. 30%。天然蟲草 與蟲草素菌絲氨