高效防控水稻稻瘟病的植物精油的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)科技領(lǐng)域，尤其是一種高效防控水稻稻瘟病的植物精油。
【背景技術(shù)】
[0002] 水稻是我國的主要糧食作物之一，水稻稻瘟病是由水稻稻瘟病菌 識7^^)引起的真菌病害，世界各國水稻產(chǎn)區(qū)均有發(fā)生，同時也是影響我國水稻生產(chǎn)安全最 嚴重的病害之一。目前，防治水稻稻瘟病一般都是化學農(nóng)藥，如稻瘟靈、咪鮮胺、三環(huán)唑等， 由于這些化學農(nóng)藥的廣泛使用，導致三"R"問題日趨嚴重，已引起社會高度關(guān)注。因此，研 宄與開發(fā)高效、安全的生物農(nóng)藥防控水稻稻瘟病已成為植保專家的重要研宄課題，也是水 稻生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的必由之路，而植物源農(nóng)藥作為生物農(nóng)藥的一部分，其開發(fā)研宄一直是 新農(nóng)藥研宄的熱點課題之一。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 本發(fā)明的目的是：提供一種高效防控水稻稻瘟病的植物精油，它高效的、安全，對 環(huán)境友好，以克服現(xiàn)有技術(shù)的不足。
[0004] 本發(fā)明是這樣實現(xiàn)的：高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其主效成分為檸檬醛及 香矛酉全。
[0005] 所述的檸檬醛及香茅醛的質(zhì)量比為2: 1。
[0006] 為了進一步驗證本發(fā)明的技術(shù)效果，將本發(fā)明的產(chǎn)品進行條件試驗。
[0007] 實驗材料 1. 1. 1供試病原菌 水稻稻瘟病病菌ZB15 grisea)采自田間自然發(fā)病水稻植株上的病菌，經(jīng) 本實驗室分離、純化、鑒定后保存?zhèn)溆谩?br>[0008] 供試藥劑 供試藥劑為山蒼子精油中2種成分：檸檬醛、香茅醛（貴州大學作物保護研宄所自制， 含量均大于90%。） 1.2實驗方法 1. 2. 1菌絲生長速率抑制法 參照慕立義的研宄方法，將供試山蒼子精油活性化合物分別稀釋成系列濃度梯度的母 液，按一定比例加入到融化好的PDA培養(yǎng)基中，混合后倒入滅菌的培養(yǎng)皿中，制成系列濃度 梯度的含檸檬醛培養(yǎng)基平板。供試的稻瘟病菌株，先在PDA培養(yǎng)基上，置于28°C下培養(yǎng)7-10 d，菌落長至培養(yǎng)皿邊緣時，用直徑為5 mm的打孔器在菌落邊緣打取菌餅，然后將菌餅移到 上述含藥的培養(yǎng)基平板中央。以不加藥的平板培養(yǎng)基為對照。每平板接種1塊，每處理3 次重復，28°C全黑暗培養(yǎng)。待對照菌絲長至培養(yǎng)皿直徑的三分之二時，用"十"字交叉法測 定各處理的菌落生長直徑，每皿用十字交叉測量四次直徑，計算菌絲生長速率抑制率及EC 5tl 值。
[0009] 孢子萌發(fā)抑制法
a.采用米糠培養(yǎng)基產(chǎn)孢的方法：稱取20 g米糠加入到約800 mL水中，煮沸約10 min， 然后加入10 g蔗糖和10-15 g瓊脂，瓊脂融化后，定容1000 mL，再加熱煮沸。將培養(yǎng)基分 裝在三角瓶中，滅菌后倒入直徑90 mm的培養(yǎng)皿中，30-40 mL/皿，不加蓋，使培養(yǎng)基表面水 分風干（培養(yǎng)基表面有冷凝水會影響稻瘟病的生長）。取培養(yǎng)好的菌絲塊，分多點接種到培 養(yǎng)基平板上，置于28°C恒溫培養(yǎng)箱中大約10 d，菌絲長滿全皿進行產(chǎn)孢培養(yǎng)，將少許無菌水 倒入培養(yǎng)皿中，用滅菌過的毛筆輕輕刷洗培養(yǎng)基表面，刷洗力度適中，太輕氣生菌絲未被洗 掉，產(chǎn)孢量少，刷的太重，平板表面的菌絲容易受傷，影響產(chǎn)孢量。然后置于365 nm黑光燈 下12:12(L:D)、T: 28°C左右培養(yǎng)，48 h后，培養(yǎng)基表面即產(chǎn)生大量孢子，表現(xiàn)為一層青灰色 的新鮮霉層，倒入少量無菌水，用毛筆輕輕刷洗霉層表面，過濾、鏡檢，調(diào)配成所需濃度的孢 子懸浮液。
[0010] b.測定：將供試藥劑配成系列濃度的稀釋液，各取0.5 mL藥液至10 mL的試管 中，再加入4. 5 mL孢子懸浮液，混勻，配成含山蒼子精油活性化合物系列濃度的孢子懸浮 液，以不含藥孢子懸浮液作空白對照，每處理3次重復，于28°C恒溫黑暗培養(yǎng)20-24 h后， 搖勻，用滴管各吸取少量孢子懸浮液置于潔凈的凹型玻片上，蓋上蓋玻片，在20 X 10倍 顯微鏡下觀察孢子萌發(fā)情況，每個處理隨機檢查孢子200個左右，凡孢子芽管大于孢子的 短半徑時即算萌發(fā)，否則不算萌發(fā)，對照萌發(fā)率95%以上，計算孢子萌發(fā)抑制率及EC m值。
[0011] 共度系數(shù)（CTC)值計算 采用孫云沛法求出毒力指數(shù)、理論毒力指數(shù)、實際毒力指數(shù)及混劑的共毒系數(shù)CTC值， 并據(jù)此作出綜合評價，CTC>120表示增效作用，80〈CTC < 120表示相加作用，CTC < 80表示 拮抗作用。
[0012] 共毒系數(shù)CTC值計算公式如下：
式中Ax-藥劑A在混劑中的百分含量； Bx-藥劑B在混劑中的百分含量。
[0013] 結(jié)果與分析 根據(jù)農(nóng)藥生物測定技術(shù)中，兩種成分混用的聯(lián)合作用計算法，算出各種混合比例的共 毒系數(shù)，山蒼子精油活性化合物檸檬醛與香茅醛按不同比例組合對稻瘟病菌菌絲生長抑制 毒力測定結(jié)果如表1所示。在試驗設(shè)定的配比下，檸檬醛與香茅醛配比為1:10時，對菌絲 生長的抑制表現(xiàn)為拮抗作用；配比為1:8、1:6、4 :1、6:1、8:1、10:1時，對菌絲生長的抑制表 現(xiàn)為相加作用；而配比為1: 4、1: 2、I: I、2:1時，對菌絲生長的抑制表現(xiàn)為增效作用。其中配 比為2:1的EC5tl值為17. 16 μ g/mL，明顯低于作為單一成分時檸檬醛和香茅醛對稻瘟病菌 的EC5tl值，也明顯低于春雷霉素的EC 5Q值，且其共毒系數(shù)為最高，達到了 259. 14,增效作用 最明顯。
[0014]山蒼子精油活性化合物檸檬醛與香茅醛按不同比例組合對稻瘟病菌孢子萌發(fā)抑 制毒力測定結(jié)果如表2所示。檸檬醛與香茅醛不同配比對稻瘟病孢子萌發(fā)的抑制作用存在 著明顯的差異，其中檸檬醛與香茅醛配比為1:10、1:8時，對孢子萌發(fā)的抑制表現(xiàn)為拮抗作 用；配比為1:6、1 :4、6:1、8:1、10:1時，對孢子萌發(fā)的抑制表現(xiàn)為相加作用；而配比為1:2、 1:1、2:1、4:1時，對孢子萌發(fā)的抑制表現(xiàn)為增效作用。其中配比為2:1的EC 5tl值為20. 19 μ g/mL，明顯低于作為單一成分時的檸檬醛和香茅醛的EC5tl值，也明顯低于春雷霉素的EC5tl 值。而且其共毒系數(shù)為最高，達到了 196. 86,增效作用最明顯。
[0015] 小結(jié) 本發(fā)明涉及一種用于防治水稻稻瘟病的植物精油主效成分組合，它由檸檬醛和香茅醛 按2 :1的質(zhì)量比組成。這個組合在室內(nèi)對稻瘟病菌菌絲生長和孢子萌發(fā)的EC5tl值分別為 17. 16 μ g/mL和20. 19 μ g/mL，共毒系數(shù)CTC值分別達到了 259. 14和196. 86,從這個數(shù)據(jù) 可看出此組合不僅用量少而且對菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制都具有明顯的增效作用。故可 以本發(fā)明的方案為基礎(chǔ)，研制出一種新型的、高效的、綠色安全的防治水稻稻瘟病菌的植物 源農(nóng)藥。注：ND表不未檢出。
[0016] 由于采用了上述技術(shù)方案，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明通過將檸檬醛和香茅醛進行 復配混用，該組合對水稻稻瘟病的菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制都具有明顯的增效作用，防 治效果可達75%左右，防治效果顯著，能有效降低農(nóng)藥的用量，不僅減小了勞動強度，節(jié)省 了成本，解決濫施農(nóng)藥的問題。本發(fā)明簡單易行，材料來源廣泛，成本低廉，使用效果好。
【具體實施方式】
[0017] 下面結(jié)合實施例對本發(fā)明更具體的描述，但本發(fā)明的實施方案不限于這些實施 例，實施例中所述的份數(shù)均以重量計。
[0018] 本發(fā)明的實施例：稱取97%檸檬醛原藥13. 32份和96%香茅醛原藥6. 66份，加入 乳化劑0P-10 10份，ox-7513 30份，助溶劑10份，穩(wěn)定劑1份，水補足，剪切1小時，即得 20%檸檬醛?香茅醛微乳劑（ME)。
[0019] 用以上所得的20%檸檬醛?香茅醛ME防治水稻稻瘟病田間藥效試驗，試驗效果匯 總?cè)缦拢?2014年8月在貴州黃平縣舊州鎮(zhèn)水稻試驗田，該地區(qū)歷年均有稻瘟病的發(fā)生，試驗地 水稻品種為凱香優(yōu)1號，土壤肥力中上等，地勢平整，灌溉條件良好，試驗區(qū)的水肥管理和 其他栽培條件基本一致。試驗于水稻抽穗至灌漿期穗頸瘟發(fā)生時用20%檸檬醛?香茅醛 ME800倍液噴霧，間隔7天后第二次施藥，施藥器械為3WBJ-16DZ多功能靜電噴霧器。以6% 春雷霉素可濕性粉劑（WP) 800倍液為對照。
[0020] 防治稻瘟病的效果見表3,20%檸檬醛?香茅醛ME800倍液在藥后7天的防效為 76. 65%，藥后14天有所上升，防效達到86. 64%，與6%春雷霉素 WP800倍液的防治效果表現(xiàn) 差異顯著。
【主權(quán)項】
1. 一種高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其特征在于：其主效成分為檸檬醛及香茅 醛。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其特征在于：所述的檸檬 醛及香茅醛的質(zhì)量比為2:1。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種高效防控水稻稻瘟病的植物精油，其主效成分為檸檬醛及香茅醛。本發(fā)明通過將檸檬醛和香茅醛進行復配混用，該組合對水稻稻瘟病的菌絲生長和孢子萌發(fā)的抑制都具有明顯的增效作用，防治效果可達75%左右，防治效果顯著，能有效降低農(nóng)藥的用量，不僅減小了勞動強度，節(jié)省了成本，解決濫施農(nóng)藥的問題。本發(fā)明簡單易行，材料來源廣泛，成本低廉，使用效果好。
【IPC分類】A01P3/00, A01N35/02
【公開號】CN104920359
【申請?zhí)枴緾N201510361355
【發(fā)明人】李明, 李榮玉, 吳小毛, 盧春
【申請人】貴州大學
【公開日】2015年9月23日
【申請日】2015年6月28日