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防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥及其制備方法和應(yīng)用與流程

文檔序號(hào):12658605閱讀:438來(lái)源:國(guó)知局
本發(fā)明屬于生物農(nóng)藥領(lǐng)域,具體涉及防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,還涉及該農(nóng)藥的制備方法和應(yīng)用。
背景技術(shù)
:核桃樹腐爛病菌(CytosporamandshuricaMiura)屬于子囊菌綱,座囊菌目,囊抱菌屬。核桃樹腐爛病俗稱水爛病、爛果病、爛皮病,該病在美國(guó)、加拿大、日本和我國(guó)均有發(fā)生,我國(guó)尤以遼寧、山東、河北發(fā)病嚴(yán)重。腐爛病菌寄生范圍很廣,除蘋果外還能為害梨、桃、李、杏等多種果樹。核桃樹腐爛病菌主要危害果實(shí)。發(fā)病初期在果面部分出現(xiàn)圓形、黑至黑褐色小斑,逐漸擴(kuò)大成輪紋狀。隨著癥狀的進(jìn)一步發(fā)展,病斑呈淡褐至黑褐色,整個(gè)果實(shí)即變?yōu)樗疂n狀軟化腐爛。發(fā)病后期在病斑表面形成黑色小粒點(diǎn)狀的分生抱子器,偶爾從抱子器中溢出白色線頭狀抱子角。核桃樹腐爛病菌不僅侵染田間生長(zhǎng)的蘋果,引起20%-30%的爛果,由于其潛伏侵染特性,還可引起蘋果采后腐爛,成為貯藏期的重要病害,嚴(yán)重影響果實(shí)的產(chǎn)質(zhì)量,給果農(nóng)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失。目前核桃樹腐爛病在生產(chǎn)上主要以化學(xué)藥劑防治為主,而化學(xué)農(nóng)藥的廣泛應(yīng)用使公眾越來(lái)越擔(dān)心其安全性和對(duì)環(huán)境造成的污染問題;同時(shí)化學(xué)防治容易引起抗藥性產(chǎn)生,大量使用時(shí)會(huì)造成農(nóng)藥殘留物超標(biāo),危害人類及其他生物的生存,引起環(huán)境污染,破壞生態(tài)平衡。隨著人們環(huán)保意識(shí)的增強(qiáng)和對(duì)綠色無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品需求的擴(kuò)大,使得植物病害的生物防治越來(lái)越受到人們的關(guān)注,生物防治因其具有對(duì)環(huán)境、生態(tài)和人類健康安全的優(yōu)點(diǎn),在世界各國(guó)得到了廠泛的重視并發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。利用生物農(nóng)藥防治植物病害是當(dāng)今植病界十分活躍的研究領(lǐng)域之一,并已顯示出良好的應(yīng)用前景。生物農(nóng)藥是公認(rèn)的很有前途的生防因子。生物農(nóng)藥以其種類和數(shù)量眾多、分布廣泛、作用方式多樣、對(duì)非靶標(biāo)生物安全及不污染環(huán)境等優(yōu)點(diǎn)而倍受重視。在國(guó)內(nèi)外的研究中,利用生物農(nóng)藥防治植物病害特別是土傳病害的報(bào)道很多且都取得了良好的效果。但目前并未見用于防治核桃樹腐爛病菌的生物農(nóng)藥。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的之一在于提供一種防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,它具有安全、防治核桃樹腐爛病效果好,環(huán)境友好等特點(diǎn),降低了多菌靈的使用次數(shù),減少多菌靈的抗性藥;本發(fā)明的目的之二在于提供防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥的制備方法,工藝簡(jiǎn)單,適合于工業(yè)生產(chǎn);本發(fā)明的目的之三在于提供生物農(nóng)藥在防治核桃樹腐爛病中的應(yīng)用。為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:1、防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,其特征在于,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液5%-10%、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液10%-25%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液10%-25%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物3%-5%,余量為水。優(yōu)選的,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液6%-8%、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液15%-23%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液12%-20%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物3.5%-4.5%,余量為水。優(yōu)選的,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液7%、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液18%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液15%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物4%,余量為水。本發(fā)明中,所述乳酸菌發(fā)酵液由以下方法制備:將乳酸菌劃線培養(yǎng)后挑取單菌落接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),然后在25-35℃下在搖床中培養(yǎng)20-30小時(shí)獲得種子液,然后將種子液按重量比為l:8-20接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),再在25-35℃下在搖床中60-80小時(shí)得乳酸菌發(fā)酵液;所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液由以下方法制備:將枯草芽孢桿菌發(fā)酵液劃線培養(yǎng)后挑取單菌落于液體培養(yǎng)基內(nèi),在25-35℃下在搖床中培養(yǎng)20-30小時(shí)獲得種子液,然后將種子液按重量比為l:8-20接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),再在25-35℃下在搖床中60-80小時(shí)得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液;所述細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液由以下方法制備:將細(xì)黃連霉菌劃線培養(yǎng)后挑取單菌落于液體培養(yǎng)基內(nèi),在25-35℃下在搖床中培養(yǎng)30-80小時(shí)獲得種子液,然后將種子液按重量比為l:8-20接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),再在25-35℃下在搖床中60-80小時(shí)得細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液;所述苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物由以下方法制備:按重量比為1~2:1~2:1~2分別取花椒、馬鞭草和苦參干品混合,加入相當(dāng)于混合物重量3~5倍的水浸泡1~3小時(shí),然后90~100℃保持10~30分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)?,收集濾液即可。進(jìn)一步,所述液體培養(yǎng)基由以下方法制備:按重量份取淀粉10-30份,牛肉膏10-30份,蛋白胨10-30份,NaCl4-8份,水1000-3000份;充分溶解后加入NaOH調(diào)pH至7-7.5,過濾,經(jīng)濕熱滅菌,冷卻至18~35℃即得液體培養(yǎng)基。2、所述防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥的制備方法,包括如下步驟:a、按配方取乳酸菌發(fā)酵液的200-300倍稀釋液,然后加入配方量的枯草芽孢桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液和細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液,獲得發(fā)酵液混合物,記為培養(yǎng)液A;b、按重量比分別取花椒、馬鞭草和苦參干品,加入相當(dāng)于混合物重量3~5倍的水浸泡1~3小時(shí),然后90~100℃保持10~30分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)?,收集濾液獲得苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物;c、將培養(yǎng)液A與苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物混合攪拌均勻后,于30℃-50℃放置48h以上即得防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥。本發(fā)明中,所述乳酸菌發(fā)酵液由以下方法制備:將乳酸菌劃線培養(yǎng)后挑取單菌落接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),然后在25-35℃下在搖床中培養(yǎng)20-30小時(shí)獲得種子液,然后將種子液按重量比為l:8-20接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),再在25-35℃下在搖床中60-80小時(shí)得乳酸菌發(fā)酵液;所述枯草芽孢桿菌發(fā)酵液由以下方法制備:將枯草芽孢桿菌發(fā)酵液劃線培養(yǎng)后挑取單菌落于液體培養(yǎng)基內(nèi),在25-35℃下在搖床中培養(yǎng)20-30小時(shí)獲得種子液,然后將種子液按重量比為l:8-20接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),再在25-35℃下在搖床中60-80小時(shí)得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液;所述細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液由以下方法制備:將細(xì)黃連霉菌劃線培養(yǎng)后挑取單菌落于液體培養(yǎng)基內(nèi),在25-35℃下在搖床中培養(yǎng)30-80小時(shí)獲得種子液,然后將種子液按重量比為l:8-20接種于液體培養(yǎng)基內(nèi),再在25-35℃下在搖床中60-80小時(shí)得細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液。優(yōu)選的,所述液體培養(yǎng)基由以下方法制備:按重量份取淀粉10-30份,牛肉膏10-30份,蛋白胨10-30份,NaCl4-8份,水1000-3000份;充分溶解后加入NaOH調(diào)pH至7-7.5,過濾,經(jīng)濕熱滅菌,冷卻至18~35℃即得液體培養(yǎng)基。本發(fā)明的有益效果在于:(1)本發(fā)明的防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,是將拮抗細(xì)菌發(fā)酵液與中藥提取物按一定比例制成(微)生物農(nóng)藥,具有防效好、安全、環(huán)境友好等特點(diǎn),降低了化學(xué)農(nóng)藥的使用次數(shù),減少抗性藥,是生產(chǎn)綠色食品所必須的生物農(nóng)藥。(2)本發(fā)明的防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥的制備方法,操作簡(jiǎn)單,對(duì)環(huán)境友好,適于大規(guī)模生產(chǎn)。具體實(shí)施方式下面將對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行詳細(xì)的描述。實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法,通常按照常規(guī)條件或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例1防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液5%、枯草芽孢桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液10%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液10%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物3%,余量為水。其中乳酸菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將乳酸菌接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在25℃下培養(yǎng)30小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在25℃下在搖床中培養(yǎng)20小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi),25℃下在搖床中60小時(shí)得乳酸菌發(fā)酵液;種子液與液體培養(yǎng)基的重量份數(shù)比為l:8。枯草芽孢桿菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將枯草芽孢桿菌發(fā)酵液接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在25℃下培養(yǎng)30小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在25℃下在搖床中培養(yǎng)20小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌培養(yǎng)基內(nèi),25℃下在搖床中60小時(shí)得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液;種子液與培養(yǎng)液的重量份數(shù)比為l:8;細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將細(xì)黃連霉菌接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在25℃下培養(yǎng)30小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在25℃下在搖床中培養(yǎng)20小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌培養(yǎng)基內(nèi),25℃下在搖床中60小時(shí)得細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液;種子液與培養(yǎng)液的重量份數(shù)比為l:8。所述苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物由以下方法制備:按重量份分別取花椒、馬鞭草和苦參干品各1份,加水10份浸泡2小時(shí)后100℃保持10分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)?,收集濾液即可。防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥制備方法:a、按配方取乳酸菌發(fā)酵液的200-300倍稀釋液,然后加入配方量的枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液和細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液,獲得培養(yǎng)液A;b、按重量份分別取花椒、馬鞭草和苦參干品各1份,加水10份浸泡2小時(shí)后100℃保持10分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)占癁V液獲得苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物;c、將培養(yǎng)液A與苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物混合攪拌均勻后,于30℃放置48h以上即得防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥。本實(shí)施例中,固體瓊脂平板培養(yǎng)基是由下述制備方法制得:按重量份取1份胰蛋白胨,0.5份酵母提取物,0.5份氯化鈉,1份瓊脂和水800份,混合加熱熔化,加入NaOH調(diào)pH至7,過濾,裝瓶封口后進(jìn)行濕熱滅菌,無(wú)菌操作倒入平板,冷卻至室溫得固體培養(yǎng)基。本實(shí)施例中,液體培養(yǎng)基是由下述制備方法制得:按重量份取淀粉10份,牛肉膏10份,蛋白胨10份,NaCl4份和水1000份;混合加熱熔化,加入NaOH調(diào)pH至7,過濾,裝瓶封口后進(jìn)行濕熱滅菌,冷卻至室溫得液體培養(yǎng)基。其中,濕熱滅菌是裝瓶封口的培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),0.8kg/cm2,115℃,15min濕熱滅菌。實(shí)施例2防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液10%、枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液25%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液25%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物5%,余量為水。其中乳酸菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將乳酸菌接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在30℃下培養(yǎng)36小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在30℃下在搖床中培養(yǎng)24小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi),25℃下在搖床中72小時(shí)得乳酸菌發(fā)酵液;種子液與液體培養(yǎng)基的重量份數(shù)比為l:9??莶菅挎邨U菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將枯草芽孢桿菌發(fā)酵液接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在30℃下培養(yǎng)36小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在30℃下在搖床中培養(yǎng)24小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌培養(yǎng)基內(nèi),30℃下在搖床中72小時(shí)得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液;種子液與培養(yǎng)液的重量份數(shù)比為l:9;所述細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將細(xì)黃連霉菌接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在30℃下培養(yǎng)36小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在30℃下在搖床中培養(yǎng)24小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌培養(yǎng)基內(nèi),30℃下在搖床中72小時(shí)得細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液;種子液與培養(yǎng)液的重量份數(shù)比為l:9。所述苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物由以下方法制備:按重量份分別取花椒、馬鞭草和苦參干品各1份,加水10份浸泡2小時(shí)后100℃保持20分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)?,收集濾液即可。防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥制備方法:a、按配方取乳酸菌發(fā)酵液的200-300倍稀釋液,然后加入配方量的枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液和細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液,獲得培養(yǎng)液A;b、按重量份分別取花椒、馬鞭草和苦參干品各1份,加水10份浸泡2小時(shí)后100℃保持20分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)?,收集濾液獲得苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物;c、將培養(yǎng)液A與苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物混合攪拌均勻后,于35℃放置48h以上即得防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥。本實(shí)施例中,固體瓊脂平板培養(yǎng)基是由下述制備方法制得:按重量份取1份胰蛋白胨,0.5份酵母提取物,0.5份氯化鈉,1份瓊脂和水800份,混合加熱熔化,加入NaOH調(diào)pH至7,過濾,裝瓶封口后進(jìn)行濕熱滅菌,無(wú)菌操作倒入平板,冷卻至室溫得固體培養(yǎng)基。本實(shí)施例中,液體培養(yǎng)基是由下述制備方法制得:按重量份:取淀粉20份,牛肉膏20份,蛋白胨20份,NaCl5份,水2000份;加入到沸水浴鍋中混合加熱熔化,加入NaOH調(diào)pH至7.5,過濾,裝瓶封口后進(jìn)行濕熱滅菌,冷卻至室溫得液體培養(yǎng)基。其中,濕熱滅菌是裝瓶封口的培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),0.9kg/cm2,120℃,25min濕熱滅菌。固體瓊脂平板培養(yǎng)基是由下述制備方法制得:1.5份胰蛋白胨,0.6份酵母提取物,0.6份氯化鈉,1.5份瓊脂,水1000份加入到沸水浴鍋中混合加熱熔化,加入NaOH調(diào)pH至7.5,過濾,裝瓶封口后進(jìn)行濕熱滅菌,無(wú)菌操作倒入平板,冷卻至室溫得固體培養(yǎng)基。實(shí)施例3防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液10%、枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液15%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液15%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物4%,余量為水。其中乳酸菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將乳酸菌接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在35℃下培養(yǎng)80小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在35℃下在搖床中培養(yǎng)30小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi),35℃下在搖床中80小時(shí)得乳酸菌發(fā)酵液;種子液與液體培養(yǎng)基的重量份數(shù)比為l:20??莶菅勘U菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將枯草芽孢桿菌發(fā)酵液接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在35℃下培養(yǎng)80小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在35℃下在搖床中培養(yǎng)30小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌培養(yǎng)基內(nèi),30℃下在搖床中80小時(shí)得枯草芽孢桿菌發(fā)酵液;種子液與培養(yǎng)液的重量份數(shù)比為l:20;所述細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液由以下方法制備:取固體瓊脂平板培養(yǎng)基,將細(xì)黃連霉菌接種于固體瓊脂平板培養(yǎng)基,在35℃下培養(yǎng)80小時(shí)得菌落;取單菌落,接種于滅菌液體培養(yǎng)基內(nèi)在35℃下在搖床中培養(yǎng)30小時(shí),制成種子液;將種子液接種到滅菌培養(yǎng)基內(nèi),30℃下在搖床中80小時(shí)得細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液;種子液與培養(yǎng)液的重量份數(shù)比為l:20。所述苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物由以下方法制備:按重量份分別取花椒、馬鞭草和苦參干品各1份,加水10份浸泡2小時(shí)后100℃保持30分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)?,收集濾液即可。防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥制備方法:a、按配方取乳酸菌發(fā)酵液的200-300倍稀釋液,然后加入配方量的枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液和細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液,獲得培養(yǎng)液A;b、按重量份分別取花椒、馬鞭草和苦參干品各1份,加水10份浸泡2小時(shí)后100℃保持30分鐘,冷卻,過濾棄殘?jiān)?,收集濾液獲得苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物;c、將培養(yǎng)液A與苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物混合攪拌均勻后,于50℃放置48h以上即得防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥。本實(shí)施例中,液體培養(yǎng)基是由下述制備方法制得:按重量份:取淀粉30份,牛肉膏30份,蛋白胨30份,NaCl8份,水3000份;加入到沸水浴鍋中混合加熱熔化,加入NaOH調(diào)pH至7.5,過濾,裝瓶封口后進(jìn)行濕熱滅菌,冷卻至室溫得液體培養(yǎng)基。其中,濕熱滅菌是裝瓶封口的培養(yǎng)基放入高壓蒸汽滅菌鍋內(nèi),1.05kg/cm2,130℃,30min濕熱滅菌。固體瓊脂平板培養(yǎng)基是由下述制備方法制得:2份胰蛋白胨,1份酵母提取物,1份氯化鈉,1.5份瓊脂,水1000份加入到沸水浴鍋中混合加熱熔化,加入NaOH調(diào)pH至7.5,過濾,裝瓶封口后進(jìn)行濕熱滅菌,無(wú)菌操作倒入平板,冷卻至室溫得固體培養(yǎng)基。實(shí)施例4防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液7%、枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液18%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液15%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物4%,余量為水。其制備方法與實(shí)施例1相同。實(shí)施例5防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液6%、枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液15%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液12%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物3.5%,余量為水。其制備方法與實(shí)施例1相同。實(shí)施例6防治核桃樹腐爛病的生物農(nóng)藥,按重量百分比計(jì)由以下組分組成:乳酸菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液8%、枯草芽抱桿菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液23%,細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液200-300倍稀釋液20%,苦參、花椒和馬鞭草混合物提取物4.5%,余量為水。其制備方法與實(shí)施例1相同。應(yīng)用實(shí)施例:為了證明本發(fā)明的生物農(nóng)藥對(duì)核桃樹腐爛病的效果進(jìn)行了多次試驗(yàn),防治效果效好,下述實(shí)驗(yàn)中所用生物農(nóng)藥是采用實(shí)施例1~7的方法制備的,另外,還做了三組平行對(duì)照試驗(yàn),對(duì)照A的生物農(nóng)藥配方不含乳酸菌發(fā)酵液,對(duì)照B的生物農(nóng)藥配方不含枯草芽孢桿菌發(fā)酵液,對(duì)照C的生物農(nóng)藥配方不含細(xì)黃連霉菌發(fā)酵液,其余同實(shí)施例1。每組田間實(shí)驗(yàn)4年總計(jì)實(shí)驗(yàn)示范339畝2508棵有腐爛病的核桃樹,每棵樹只噴施一次。試驗(yàn)結(jié)果如表1-4:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,本發(fā)明對(duì)核桃腐爛病當(dāng)年治愈率為100%,次年有20棵核桃樹腐爛病復(fù)發(fā),復(fù)發(fā)率為0.80%,最高復(fù)發(fā)率為0.94%,最低復(fù)發(fā)率為0.59%。表1本發(fā)明的生物農(nóng)藥田間試驗(yàn)結(jié)果年份病樹當(dāng)年治愈治愈率次年復(fù)發(fā)復(fù)發(fā)率2013502502100%40.80%2014532532100%50.94%2015676622100%40.59%2016798792100%60.75%平均627627100%50.80%總計(jì)25082508100%200.80%表2對(duì)照A的生物農(nóng)藥田間試驗(yàn)結(jié)果年份病樹當(dāng)年治愈治愈率次年復(fù)發(fā)復(fù)發(fā)率201350247193.8%40.80%201453250494.7%50.94%201567663593.9%40.59%201679876595.8%70.88%平均627593.7594.6%50.80%總計(jì)2508237594.6%200.80%表3對(duì)照B的生物農(nóng)藥田間試驗(yàn)結(jié)果年份病樹當(dāng)年治愈治愈率次年復(fù)發(fā)復(fù)發(fā)率201350248997.6%71.4%201453250695.3%81.5%201567665797.3%91.3%201679876395.9%111.4%平均62760496.5%8.751.4%總計(jì)2508241696.5%351.4%表4對(duì)照C的生物農(nóng)藥田間試驗(yàn)結(jié)果結(jié)合上述試驗(yàn),本發(fā)明的生物農(nóng)藥田間實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明有下述特點(diǎn):1、本發(fā)明農(nóng)藥治愈率高,復(fù)發(fā)率低。當(dāng)年一次噴施總治愈率達(dá)100%,平均復(fù)發(fā)率為0.80%最高不超過1%。2、本發(fā)明無(wú)需多次噴施,每個(gè)疤只需一次就可康復(fù)。3、無(wú)需嚴(yán)格刮凈病疤,適合于大多數(shù)果農(nóng)掌握和使用。4、本發(fā)明農(nóng)藥無(wú)污染,適合于綠色食品生產(chǎn),有利于提高果品品質(zhì)。最后說明的是,以上優(yōu)選實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技術(shù)方案而非限制,盡管通過上述優(yōu)選實(shí)施例已經(jīng)對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)的描述,但本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解,可以在形式上和細(xì)節(jié)上對(duì)其作出各種各樣的改變,而不偏離本發(fā)明權(quán)利要求書所限定的范圍。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3 
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