本發(fā)明涉及病毒學(xué)領(lǐng)域，具體的說(shuō)是一種低溫抑制腫大細(xì)胞病毒在大菱鲆中復(fù)制的方法。
背景技術(shù)：
溫度是魚(yú)類最重要的環(huán)境因子之一，它能夠通過(guò)改變魚(yú)類新陳代謝和蛋白質(zhì)合成等方面的功能，進(jìn)而影響魚(yú)的生長(zhǎng)、存活和抗病能力。腫大細(xì)胞病毒(Megalocytivirus)屬于虹彩病毒科，是一種大型、正二十面體的雙連DNA病毒。腫大細(xì)胞病毒是一種魚(yú)類的重要病毒，能夠感染多種經(jīng)濟(jì)魚(yú)類，包括大菱鲆(Scophthalmus maximus)。目前腫大細(xì)胞病毒病的防治尚無(wú)有效措施。同時(shí)關(guān)于通過(guò)溫度控制大菱鲆病毒感染方面的研究尚無(wú)報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的在于提供一種低溫抑制腫大細(xì)胞病毒在大菱鲆中復(fù)制的方法。
為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：
一種抑制腫大細(xì)胞病毒在大菱鲆中復(fù)制的方法：將感染腫大細(xì)胞病毒的大菱鲆在低溫養(yǎng)殖，進(jìn)而使得腫大細(xì)胞病毒得以抑制。
所述低溫指14℃至16℃。所述經(jīng)低溫培養(yǎng)感染腫大細(xì)胞病的大菱鲆的存活率得以提升。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：
1.本發(fā)明的方法能夠通過(guò)溫度調(diào)控有效抑制腫大細(xì)胞病毒在大菱鲆中復(fù)制。
2.本發(fā)明的方法不用施加抗生素等藥物。
附圖說(shuō)明
圖1為本發(fā)明實(shí)施例提供的低溫對(duì)腫大細(xì)胞病毒在大菱鲆中復(fù)制的抑制情況圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。實(shí)施例旨在對(duì)本發(fā)明進(jìn)行舉例描述，而非以任何形式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。
實(shí)施例1：低溫抑制腫大細(xì)胞病毒在大菱鲆中復(fù)制。
將腫大細(xì)胞病毒RBIV-C1(參見(jiàn)Zhang M,Xiao Z,Hu Y,Sun L.Characterization of a megalocytivirus from cultured rock bream,Oplegnathus fasciatus(Temminck&Schlege),in China.Aquac Res.2012；43:556–64。)懸浮于PBS中至2x106copies/ml，即為病毒懸液。將120條大菱鲆(每條重約13.5g)隨機(jī)分為4組(30條/組)，分別命名為A、B、C和D。將每條魚(yú)腹腔注射50μl上述病毒懸液。將A、B、C和D組魚(yú)分別在14℃、16℃、20℃和22℃養(yǎng)殖。在病毒注射后2、6、10、12、16和18天，取魚(yú)脾臟組織，利用DNA提取試劑盒(購(gòu)于天根生化科技(北京)有限公司)從組織中提取DNA，用絕對(duì)定量PCR法檢測(cè)組織中病毒含量(具體方法見(jiàn)上述參考文獻(xiàn)Zhang M,Xiao Z,Hu Y,Sun L.Characterization of a megalocytivirus from cultured rock bream,Oplegnathus fasciatus(Temminck&Schlege),in China.Aquac Res.2012；43:556–64。)。結(jié)果表明，A組和B組魚(yú)的病毒數(shù)幾乎檢測(cè)不到，且隨著時(shí)間進(jìn)程沒(méi)有顯著變化；與此相反，C和D組魚(yú)的病毒數(shù)隨著時(shí)間進(jìn)程不變?cè)黾?，其中D組魚(yú)在12天以后全部死亡，因此病毒數(shù)只計(jì)算到12天。結(jié)果見(jiàn)圖1。這些結(jié)果表明14℃和16℃的低溫能有效抑制腫大細(xì)胞病毒復(fù)制。
所述PBS組成成分按重量百分比計(jì)：0.8％NaCl,0.02％KCl,0.358％Na2HPO4.12H2O,0.024％NaH2PO4，余量為水。
另外，再另選取與上述同樣條件的120條大菱鲆(同上)隨機(jī)分為4組(30條/組)，分別命名為A、B、C和D。將每條魚(yú)腹腔注射50μl上述實(shí)施例1的病毒懸液。將A、B、C和D組魚(yú)分別在14℃、16℃、20℃和22℃養(yǎng)殖。在以后的30天中，每天觀察并記錄各組魚(yú)的死亡情況。30天后，統(tǒng)計(jì)各組魚(yú)的總死亡數(shù)目：A組，0條；B組,0條；C組，30條；D組，30條。由上述結(jié)果表明14℃和16℃的低溫可以抑制腫大細(xì)胞病毒復(fù)制，從而提升病毒感染魚(yú)類的存活率。