技術(shù)特征：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種西藏虎頭蘭微滴玻璃化超低溫保存方法，包括以下步驟：1)材料獲取，在西藏虎頭蘭離體植株上取大約2mm長的節(jié)段，將節(jié)段在無菌條件下接入VW基礎(chǔ)培養(yǎng)基；2)莖尖切割，在體視鏡下，切割莖尖，將外層的兩片葉原基切去；3)莖尖預(yù)培養(yǎng)，切割得到的莖尖在預(yù)培養(yǎng)培養(yǎng)基上暗處理；4)加載處理，將莖尖在加載溶液中；5)植物微滴玻璃化處理，在冰上處理；6)超低溫保存，將經(jīng)過PVS2處理的莖尖轉(zhuǎn)移到無菌鋁箔條上并插入液氮；7)解凍和卸載處理，將鋁箔條從液氮中移出并直接轉(zhuǎn)入卸載溶液；8)恢復(fù)培養(yǎng)，將解凍后的莖尖轉(zhuǎn)移到恢復(fù)培養(yǎng)基上進(jìn)行恢復(fù)培養(yǎng)，超低溫保存莖尖的存活率和再生率更高，解凍后的莖尖在恢復(fù)培養(yǎng)階段生長更為迅速。

技術(shù)研發(fā)人員：李唯奇;林亮;賈艷霞;徐倩
受保護(hù)的技術(shù)使用者：中國科學(xué)院昆明植物研究所
技術(shù)研發(fā)日：2016.10.27
技術(shù)公布日：2017.07.11