本發(fā)明屬于蚊蟲防治領(lǐng)域，具體涉及一種攜帶沃爾巴克氏體的白蚊伊蚊定點(diǎn)分區(qū)釋放方法。

背景技術(shù)：
：

從果蠅、伊蚊和庫(kù)蚊體內(nèi)提取沃爾巴克氏體并成功將其導(dǎo)入到登革熱媒介白蚊伊蚊體內(nèi)，建立了穩(wěn)定的攜帶新型沃爾巴克氏體的蚊株。攜帶沃爾巴克氏體的雄蚊與非攜帶沃爾巴克氏體雌蚊交配所產(chǎn)的卵不能發(fā)育。通過(guò)大量釋放攜帶沃爾巴克氏體的雄蚊，可以使蚊子種群數(shù)量降低至不足以引起登革熱流行。

然后考慮到攜帶沃爾巴克氏體的白蚊伊蚊的釋放面積很大，釋放地的地形又很復(fù)雜。如何釋放才能既能使釋放量少，又能夠達(dá)到很好的效果的釋放方法就是急需考量的。

目前國(guó)外有用車邊走邊釋放的方法來(lái)覆蓋整個(gè)面，以求達(dá)到每個(gè)區(qū)域分布很平均，但是這種釋放方法有個(gè)缺點(diǎn)，就是蚊蟲可能的孳生地和可能的棲息地可能相對(duì)量比較少，而非孽生地和非棲息地可能相對(duì)比較多，這樣就會(huì)影響壓制效果。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
：

本發(fā)明的目的是提供一種可以根據(jù)野外蚊蟲數(shù)量及時(shí)調(diào)整，靈敏度較高并最大限度減少蚊蟲損失，而且在蚊蟲分布較多的地方也能達(dá)到很好的壓制效果的攜帶沃爾巴克氏體的白蚊伊蚊定點(diǎn)分區(qū)釋放方法。

本發(fā)明的攜帶沃爾巴克氏體的白蚊伊蚊定點(diǎn)分區(qū)釋放方法，其特征在于，包括以下步驟：

a、勘察地形：在釋放分區(qū)內(nèi)，根據(jù)不同地形以及周圍的環(huán)境情況，選擇蚊蟲的孳生地和

棲息地附近作為釋放點(diǎn)，所述的棲息地是環(huán)境潮濕，遮光以及植被茂盛的地方；

b、清理孳生地：清理釋放分區(qū)內(nèi)盛水以及蚊蟲可能產(chǎn)卵的容器；

c、釋放：在釋放點(diǎn)用BG-Trap成蚊誘捕裝置誘捕白蚊伊蚊，統(tǒng)計(jì)BG-Trap成蚊誘捕裝置誘捕到的雄蚊，然后對(duì)雄蚊進(jìn)行PCR檢測(cè)，判斷其是否攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體，分別統(tǒng)計(jì)攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陽(yáng)性雄蚊數(shù)和不攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陰性雄蚊數(shù)，得到釋放比例，釋放比例＝攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陽(yáng)性雄蚊數(shù)/不攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陰性雄蚊數(shù)，然后按照釋放比例大于等于5在釋放點(diǎn)定點(diǎn)釋放攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陽(yáng)性雄蚊。

在釋放點(diǎn)用BG-Trap成蚊誘捕裝置誘捕白蚊伊蚊，統(tǒng)計(jì)BG-Trap成蚊誘捕裝置誘捕到的雄蚊，并進(jìn)行熒光定量PCR檢測(cè)，野外的白紋伊蚊不攜帶庫(kù)蚊的沃爾巴克氏體，釋放的白紋伊蚊攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體，根據(jù)這一特點(diǎn)，設(shè)計(jì)庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的特異性引物，wPipF:5’-GTTTGTGCAGCTAATAG-3’；wPipR:5’-GTCTGCAAGGCCTATTTCTACTG-3’；通過(guò)熒光定量PCR能夠區(qū)分BG-Trap誘捕到的野外的白紋伊蚊和釋放的白紋伊蚊數(shù)量，計(jì)算出釋放比例。

優(yōu)選，是按照釋放比例等于5在釋放點(diǎn)定點(diǎn)釋放攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陽(yáng)性雄蚊。

本發(fā)明的攜帶沃爾巴克氏體的白蚊伊蚊定點(diǎn)分區(qū)釋放方法，其主要是根據(jù)地形地貌以及周圍的環(huán)境，在孳生地和可能的棲息地附近(比如植被茂盛，人流量大，充足的水源)多釋放一些，這樣在保證盡量每個(gè)區(qū)域分布平均的情況下又有所側(cè)重，并且可以根據(jù)野外蚊蟲數(shù)量和地點(diǎn)及時(shí)調(diào)整，靈敏度較高并最大限度減少蚊蟲損失，而且在蚊蟲分布較多的地方也能達(dá)到很好的壓制效果。

具體實(shí)施方式：

以下實(shí)施例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明，而不是對(duì)本發(fā)明的限制。

實(shí)施例1：

本實(shí)施例中的誘卵器購(gòu)自廣東省東南實(shí)業(yè)有限公司，其產(chǎn)品名稱為誘蚊誘卵器。

本實(shí)施例中的BG-Trap成蚊誘捕裝置購(gòu)自上海奇棟實(shí)業(yè)有限公司，其產(chǎn)品名稱為QD-Ⅱ型成蚊誘捕器。

a、我們將沙仔島各地形之間有天然阻隔的區(qū)域劃分為22個(gè)釋放分區(qū)，基本保證了每個(gè)釋放分區(qū)的相對(duì)獨(dú)立。在每個(gè)釋放分區(qū)內(nèi)，根據(jù)不同地形以及周圍的環(huán)境情況，選擇蚊蟲的孳生地和棲息地附近作為合適的釋放點(diǎn)，所述的棲息地是環(huán)境潮濕，遮光以及植被茂盛的地方。

b、清理釋放分區(qū)內(nèi)盛水以及蚊蟲可能產(chǎn)卵的容器，即需要清除掉所有區(qū)域內(nèi)可以盛水容器內(nèi)的積水，有些無(wú)法清除或者頑固的孳生地需要用藥進(jìn)行處理。

c、沙仔島每個(gè)區(qū)域平均會(huì)有8個(gè)左右的釋放點(diǎn)，在釋放點(diǎn)用BG-Trap成蚊誘捕裝置誘捕白蚊伊蚊，統(tǒng)計(jì)BG-Trap成蚊誘捕裝置誘捕到的雄蚊，然后對(duì)雄蚊進(jìn)行PCR檢測(cè)，判斷其是否攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體，分別統(tǒng)計(jì)攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陽(yáng)性雄蚊數(shù)和不攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陰性雄蚊數(shù)，得到釋放比例，釋放比例＝攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陽(yáng)性雄蚊數(shù)/不攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陰性雄蚊數(shù)，然后按照釋放比例等于5在釋放點(diǎn)定點(diǎn)釋放攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的陽(yáng)性雄蚊。

所述的對(duì)雄蚊進(jìn)行PCR檢測(cè)，其庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的熒光檢測(cè)引物為：

wPipF:5’-GTTTGTGCAGCTAATAG-3’；

wPipR:5’-GTCTGCAAGGCCTATTTCTACTG-3’。

釋放后用誘卵器和BG-Trap成蚊誘捕裝置對(duì)白紋伊蚊進(jìn)行實(shí)時(shí)監(jiān)控，具體結(jié)果參見(jiàn)表1：

對(duì)照小虎島是采用邊走邊釋放攜帶庫(kù)蚊沃爾巴克氏體的白蚊伊蚊雄蚊的方式。

表1 2016年6月份沙仔島和小虎島壓制效果

從表1可以看出，定點(diǎn)釋放的壓制效果要好于邊走邊放的模式。跟對(duì)照區(qū)小虎島相比，沙仔島的卵壓制效果和成蚊壓制效果基本都達(dá)到85％左右。而且沙仔島目前的陽(yáng)性孳生地已經(jīng)大大減少。