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一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥及制備方法與流程

文檔序號(hào):12200011閱讀:338來源:國(guó)知局

本發(fā)明涉及生物殺蟲制劑及生產(chǎn)方法,更具體涉及一種對(duì)鱗翅目螟蛾科幼蟲有殺蟲活性的廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,同時(shí)還涉及一種對(duì)鱗翅目螟蛾科幼蟲有殺蟲活性的廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥的制備方法,適用于螟蟲和其他多種鱗翅目害蟲的生物防治。



背景技術(shù):

桿狀病毒包括甲型桿狀病毒、乙型桿狀病毒、丙型桿狀病毒和丁型桿狀病毒四個(gè)病毒屬,是專一性感染昆蟲和其它節(jié)肢動(dòng)物的病毒。甲型桿狀病毒是感染鱗翅目害蟲的核型多角體病毒,乙型桿狀病毒是感染昆蟲的顆粒體病毒,丙型桿狀病毒是感染膜翅目害蟲的核型多角體病毒,丁型桿狀病毒是感染雙翅目害蟲的病毒。桿狀病毒可以讓感染害蟲罹患不治之癥死亡。當(dāng)害蟲取食多角體病毒后,多角體蛋白在昆蟲中腸強(qiáng)堿性環(huán)境下降解,將病毒粒子釋放出來,侵入中腸細(xì)胞,在細(xì)胞核中呈數(shù)量級(jí)擴(kuò)增。擴(kuò)增的病毒粒子隨血淋巴循環(huán)很快進(jìn)入不同組織器官,對(duì)害蟲進(jìn)行全身性感染。昆蟲所有組織被病毒感染后都產(chǎn)生大量病毒粒子,病毒粒子由多角體蛋白包埋,形成多角體,昆蟲全身都被病毒多角體占據(jù),蟲體液化,只有幼蟲的幾丁質(zhì)表皮包裹。病毒感染致死幼蟲表皮破裂后,釋放出多角體病毒繼續(xù)感染目標(biāo)害蟲。這樣,病毒就可以在害蟲之間以及上下代之間進(jìn)行傳播,形成大面積的昆蟲病毒病。

桿狀病毒殺蟲劑具有對(duì)目標(biāo)害蟲殺蟲效果好,對(duì)人畜及其它高等動(dòng)物安全,不污染環(huán)境,不傷害天敵,不易導(dǎo)致害蟲產(chǎn)生抗性等諸多優(yōu)點(diǎn),國(guó)內(nèi)外已有多種桿狀病毒殺蟲劑進(jìn)行了工廠化生產(chǎn)和田間應(yīng)用,我國(guó)也有十多種病毒殺蟲劑完成農(nóng)藥登記注冊(cè)。然而,在實(shí)際應(yīng)用中,桿狀病毒殺蟲劑存在三個(gè)主要缺陷,一是殺蟲譜窄,傳統(tǒng)上一種昆蟲病毒只能感染一種害蟲,而田間往往同時(shí)發(fā)生多種害蟲,用一種病毒制劑難以防治;二是昆蟲病毒殺蟲速度慢,施藥后5-10天才看到明顯殺蟲效果,農(nóng)民不易接受;三是昆蟲病毒對(duì)紫外光敏感,在太陽(yáng)光直射下容易失活。另外,昆蟲病毒生產(chǎn)目前還主要依賴活體繁殖的方法生產(chǎn),通過大量宿主幼蟲,當(dāng)幼蟲長(zhǎng)到四齡時(shí),5-8%的幼蟲繼續(xù)在無病毒環(huán)境下飼養(yǎng)、化蛹、羽化成蛾交配產(chǎn)卵,繁殖下一代幼蟲進(jìn)行昆蟲傳代和病毒生產(chǎn)。92-95%的四齡幼蟲接種病毒感染,大多數(shù)感染幼蟲感染后5-10天死亡,病毒致死蟲尸中充滿病毒顆粒,收集蟲尸提取病毒制備生物生物農(nóng)藥。在大規(guī)模工廠化生產(chǎn)中,大量成蟲蛾子交配產(chǎn)卵后死亡,成為廢物需要處理。病毒生產(chǎn)中為了獲得較大病毒產(chǎn)量,常使用較大蟲齡幼蟲感染病毒生產(chǎn),致使有3-8%的幼蟲感染后不能致死而化蛹,這些蛹不能用于健康幼蟲傳代,也沒有生產(chǎn)病毒的價(jià)值,因?yàn)橛俭w內(nèi)病毒含量極低,這些蛹只能作為廢物丟棄。在昆蟲病毒殺蟲劑的生產(chǎn)和應(yīng)用發(fā)展中,需要開發(fā)廣譜、殺蟲速度快、并具有抗紫外能力的新型制劑,并能對(duì)生產(chǎn)中的死蛾、廢蛹等污染物進(jìn)行再利用處理,避免環(huán)境污染,促進(jìn)昆蟲病毒生物農(nóng)藥產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

本發(fā)明的目的是在于提供了一種對(duì)鱗翅目螟蛾科幼蟲有殺蟲活性的廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,配方合理,使用方便,該生物農(nóng)藥突破了一種昆蟲只能防治一種害蟲的傳統(tǒng)觀念,一種病毒制劑可防治30多種害蟲,尤其對(duì)農(nóng)業(yè)上難以防治的玉米螟等螟蟲有較好的防治效果。同時(shí),該制劑中添加的光保護(hù)劑、增效劑和害蟲引誘劑種類更多樣,效果更完善,對(duì)環(huán)境更友好。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是在于提供了一種對(duì)鱗翅目螟蛾科幼蟲有殺蟲活性的廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥的制備方法,方法易行,操作簡(jiǎn)便,而且將生產(chǎn)中的死蛾和廢蛹等廢物處理變成生物農(nóng)藥的有用成份,實(shí)現(xiàn)循環(huán)經(jīng)濟(jì)模式,使生產(chǎn)和制備過程完全沒有廢物污染。

為了實(shí)現(xiàn)上述的目的,本發(fā)明采用以下技術(shù)措施:

一種利用替代宿主玉米螟或棉鈴蟲生產(chǎn)廣譜桿狀病毒芹菜夜蛾核型多角體病毒(Anagrapha falcifera multiple nucleopolyhedrovirus,AnfaNPV),有如下特征:該病毒形態(tài)為多角體。多角體大小約1.45μm,病毒粒子桿狀,為多粒包埋型,病毒粒子大小約為38×306nm。病毒對(duì)Tn368等昆蟲細(xì)胞系敏感,對(duì)玉米螟和棉鈴蟲等昆蟲也敏感。申請(qǐng)人從污染的Tn368培養(yǎng)細(xì)胞中篩選得到一株廣譜桿狀病毒。開始只認(rèn)為它是一株普通的AcMNPV,后來經(jīng)過棉鈴蟲和玉米螟的擴(kuò)增,發(fā)現(xiàn)它的殺蟲譜和殺蟲活性與AcMNPV不同。通過部分基因組序列測(cè)定,結(jié)合其他生理生化特征和分子特征,鑒定其為一種廣譜芹菜夜蛾核型多角體病毒,命名為芹菜夜蛾核型多角體病毒C1株(Anagrapha falcifera multiple nucleopolyhedrovirus-C1)。該病毒株已于2016年7月14日保藏于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(簡(jiǎn)稱CCTCC,湖北省武漢市武昌珞珈山),保藏編號(hào):CCTCC NO:V201640。

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,它由以下重量份的原料制成:

所述的200億PIB/ml病毒懸液(請(qǐng)見本發(fā)明制備步驟A).

所述的昆蟲源氨基酸(請(qǐng)見本發(fā)明制備步驟B)。

所述的昆蟲幾丁質(zhì)合成抑制劑氟啶脲、氟蟲脲及2萬IU/μg蘇云金桿菌等均商品化產(chǎn)品。

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,它由以下重量份的原料制成(優(yōu)選范圍):

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,它由以下重量份的原料制成(最好范圍):

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,它由以下重量份的原料制成(最佳值):

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒體病毒生物農(nóng)藥的制備方法,其步驟是:

A、廣譜桿狀病毒的生產(chǎn):

使用人工飼料飼養(yǎng)玉米螟和棉鈴蟲幼蟲,棉鈴蟲1-3齡群體飼養(yǎng),4齡后單頭飼養(yǎng),玉米螟則在整個(gè)幼蟲期都群體飼養(yǎng)。待幼蟲長(zhǎng)到4齡時(shí),分別接種芹菜夜蛾核型多角體病毒進(jìn)行感染。感染病毒的幼蟲在溫度27±1℃,相對(duì)濕度75-85%條件下繼續(xù)培養(yǎng),培養(yǎng)7-10天后,92-97%幼蟲體內(nèi)充滿病毒顆粒而死亡,收集病毒致死蟲尸加工制備200億PIB/mL病毒懸液。

B、生產(chǎn)中出現(xiàn)的死蛾廢蛹污染物處理及昆蟲源氨基酸提?。?/p>

在工廠化病毒生產(chǎn)中,有3-8%的幼蟲不能致死而進(jìn)入化蛹。這些經(jīng)病毒感染而沒有在幼蟲期死亡而化得蛹體內(nèi)病毒含量極低,只能作為廢物。蟲種室每天數(shù)萬頭蛾子交配產(chǎn)卵后死亡成為污染物。為了處理這些廢料并提取有用物質(zhì)在病毒殺蟲劑中應(yīng)用,每天將死亡蛾子和廢蛹分別收集,85-88℃浸煮5-10分鐘,撈出后40-50℃烘干至含水量為5-8%,然后將兩者混合,粉碎成漿糊狀,按1:4重量比(死蛾廢蛹1:鹽酸4)加入5Mol/L鹽酸溶液,在88-87℃反應(yīng)缶中反應(yīng)13-17小時(shí),加氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液pH至6.5-7終止反應(yīng)。經(jīng)網(wǎng)紗過濾,不能降解的渣子作為有機(jī)肥料組分使用,液體部分經(jīng)測(cè)定總氨基酸含量作為昆蟲源氨基酸在病毒殺蟲劑中使用。液體中含有昆蟲源短肽,并含有昆蟲源油脂,在制備病毒殺蟲劑時(shí),這些短肽及油脂隨昆蟲源氨基酸一并加入,昆蟲源油脂和短肽的特殊氣味對(duì)害蟲幼蟲具有引誘作用,引誘幼蟲從隱蔽植物部位出來取食噴施在植株表面的昆蟲病毒,提高殺蟲效果。

C、昆蟲病毒制劑制備:

病毒制劑包括病毒懸液、納米級(jí)二氧化硅、熒光增白劑、昆蟲源氨基酸、芳香族氨基酸、木質(zhì)素磺酸鈉、植物源油脂、昆蟲幾丁質(zhì)合成抑制劑氟啶脲和氟蟲脲、阿拉伯膠及無菌水。各原料成分按比例依次加入反應(yīng)缶中,常溫常壓(不需要標(biāo)注范圍)下140-160轉(zhuǎn)/分鐘攪拌1-2小時(shí),得到一種灰白色的懸浮劑產(chǎn)品,檢驗(yàn)合格后分裝入庫(kù)。

所述病毒懸液由芹菜夜蛾核型多角體病毒感染替代宿主得到,替代宿主為玉米螟或棉鈴蟲。由于芹菜夜蛾沒有人工飼養(yǎng)的報(bào)道,使用替代宿主生產(chǎn),解決了該病毒不能利用原始宿主芹菜夜蛾生產(chǎn)的問題。同時(shí),兩種替代宿主人工飼養(yǎng)技術(shù)成熟,可全程群體飼養(yǎng)或半程群體飼養(yǎng),對(duì)病毒敏感,單蟲病毒產(chǎn)量高,可提高生產(chǎn)效率,減少生產(chǎn)成本。

本發(fā)明的主要特點(diǎn)就是用替代宿主玉米螟和棉鈴蟲交替生產(chǎn)芹菜夜蛾核型多角體病毒,維持病毒基因多樣性和高效感染多種害蟲的基因特性,同時(shí)將生產(chǎn)中廢蛹和死蛾處理提取昆蟲源氨基酸和短肽,作為光保護(hù)劑和害蟲引誘劑在病毒殺蟲劑中應(yīng)用。由于申請(qǐng)人已有成熟的棉鈴蟲和玉米螟生產(chǎn)技術(shù),芹菜夜蛾核型多角體病毒利用這兩種替代宿主大量生產(chǎn),成本較低,具有市場(chǎng)開發(fā)潛力。

本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果:

其一.實(shí)現(xiàn)了利用兩種替代宿主交替生產(chǎn)病毒的方法,且成本較低廉。

芹菜夜蛾核型多角體病毒(AnfaNPV)是一種廣譜桿狀病毒,但其原始宿主不能人工飼養(yǎng),不能在活體上大量增殖,細(xì)胞培養(yǎng)增殖既困難成本也十分高昂。我們用人工大量飼養(yǎng)的玉米螟或棉鈴蟲幼蟲活體增殖生產(chǎn),在保持病毒殺蟲活性和廣譜殺蟲特性的同時(shí),使該病毒生產(chǎn)方便,我們已有成熟的玉米螟和棉鈴蟲人工飼料和人工飼養(yǎng)技術(shù),有提高桿狀病毒產(chǎn)量的方法。利用替代宿主生產(chǎn)廣譜桿狀病毒,技術(shù)成熟,方法簡(jiǎn)便,幼蟲可部分或全程群體飼養(yǎng),單蟲平均病毒產(chǎn)量高,生產(chǎn)成本低,市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力強(qiáng)。

其二.殺蟲譜寬,并對(duì)多種螟蟲和其他重要害蟲有很好的防效。

以前開發(fā)的昆蟲桿狀病毒殺蟲劑,要么是殺蟲譜窄,只對(duì)一兩種害蟲有控制作用;要么雖殺蟲譜很寬,但對(duì)許多重要害蟲殺蟲活性很低,沒有應(yīng)用價(jià)值。大多數(shù)昆蟲病毒殺蟲劑對(duì)螟蟲防效較低。本發(fā)明提供用替代宿主生產(chǎn)的廣譜桿狀病毒殺蟲劑,不僅生產(chǎn)方便,而且對(duì)玉米螟等螟蛾科害蟲有較好的防效,同時(shí)對(duì)棉鈴蟲、煙青蟲、甜菜夜蛾等夜蛾科昆蟲幼很好控制作用。本殺蟲劑既保持病毒殺蟲劑作為生物農(nóng)藥的特性,對(duì)人畜和高等動(dòng)物安全,適于在蔬菜、玉米、水稻等作物上大量施用,又克服了桿狀病毒殺蟲譜窄和對(duì)螟蟲防效差的缺陷,擴(kuò)大了昆蟲病毒殺蟲劑的殺蟲譜。一種劑型含一種桿狀病毒就可同時(shí)防治包括多種螟蟲在內(nèi)的重要害蟲,具有很好的應(yīng)用前景和市場(chǎng)開發(fā)前景。

其三.增加昆蟲源成分作為劑型中的光保護(hù)和取食引誘劑成分,既很好地處理了生產(chǎn)中死蛾和廢蛹的污染問題,又使劑型組分更完善。

桿狀病毒作為生物殺蟲劑的另一個(gè)缺陷是病毒對(duì)紫外光有一定的敏感性,長(zhǎng)期在陽(yáng)光下暴曬易喪失活性。為了彌補(bǔ)這一缺陷,需要在病毒殺蟲劑中添加光保護(hù)劑。以前的病毒殺蟲可濕性粉劑和其它劑型中添加的光保護(hù)劑主要是活性炭及剛果紅等染料,光保護(hù)效果也不理想。還有的僅加入熒光增白劑和納米無機(jī)材料,由于光保護(hù)劑品種單一,劑量較少,保護(hù)作用也不明顯。本發(fā)明提供的抗螟蟲廣譜桿狀病毒殺蟲劑中,除添加微量無機(jī)納米材料、芳香族族氨基酸和少量熒光增白劑外,增加昆蟲源成分作為劑型中的光保護(hù)劑和幼蟲取食引誘劑組分。在從死蛾和廢蛹中提取蟲源氨基酸的過程中,改變傳統(tǒng)的提取方法,不經(jīng)過提取昆蟲脂肪油的步驟直接進(jìn)行酸解提取昆蟲源氨基酸,也不用等電點(diǎn)法分離溶液中未降解的昆蟲源短肽。這些昆蟲源短肽和昆蟲源脂肪油都包含在昆蟲源氨基酸溶液中。在劑型制備過程中,這些短肽和油脂隨昆蟲源氨基酸按比例加入劑型中,成為劑型的組分。來源于昆蟲身體的成分昆蟲源氨基酸和昆蟲源短肽對(duì)昆蟲病毒有更好的保護(hù)作用,而昆蟲源脂肪油和昆蟲源氨基酸由于具有特殊的氣味對(duì)昆蟲幼蟲有很好引誘作用,引誘害蟲取食昆蟲病毒,提高昆蟲病毒殺蟲劑的殺蟲效率和殺蟲速度,田間應(yīng)用效果大大提高。

具體實(shí)施方式

本發(fā)明提供的抗螟蟲廣譜桿狀病毒殺蟲劑,包括昆蟲病毒懸液、納米級(jí)二氧化硅、熒光增白劑、芳香族氨基酸、昆蟲源氨基酸、木質(zhì)素磺酸鈉、植物油脂、昆蟲幾丁質(zhì)合成抑制劑氟啶脲、高效Bt和無菌水。所述病毒懸液由芹菜夜蛾核型多角體病毒感染替代宿主得到的,替代宿主為玉米螟或棉鈴蟲。所述廣譜桿狀病毒殺蟲劑的組分及其重量配比是:200億PIB/ml病毒懸液5-15%,納米級(jí)二氧化硅0.1-0.2%,昆蟲源氨基酸0.05-0.1,芳香族氨基酸0.1-0.15%,熒光增白劑0.5-1%,木質(zhì)素磺酸鈉0.1-0.5%,昆蟲幾丁質(zhì)合成抑制劑氟啶脲0-0.05%(也可以不加,照樣獲得同樣的技術(shù)效果),昆蟲幾丁質(zhì)合成抑制劑氟蟲脲0-0.1%(也可以不加,照樣獲得同樣的技術(shù)效果),阿拉伯膠0.05-0.1%,油菜籽油0.1-4.0%,大豆油甲酯0.5-2.0,2萬IU/μg蘇云金桿菌0-5%(也可以不加,照樣獲得同樣的技術(shù)效果),無菌水余量。

下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。

實(shí)施例1:

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,它由以下重量份的原料制成:

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒芹菜夜蛾核型多角體病毒生物農(nóng)藥的制備方法,其步驟是:

A、廣譜桿狀病毒的生產(chǎn):

廣譜桿狀病毒為芹菜夜蛾核型多角體病毒,替代宿主為玉米螟,用500萬PIB/mL病毒懸液感染人工飼料飼養(yǎng)的4齡玉米螟幼蟲生產(chǎn)芹菜夜蛾核型多角體病毒。按重量計(jì),該玉米螟幼蟲的人工飼料配方是:大豆粉8.4%,玉米粉10.7%,酵母粉5%,白糖4.2%,Vc 0.28%,50萬單位/克紅霉素0.07%,瓊脂0.84%,山梨酸0.28%,無菌水70.23%。病毒感染替代宿主后6-10天收集病毒病致死蟲尸處理,加工成200億PIB/mL的病毒懸液。

B、生產(chǎn)中出現(xiàn)死蛾和廢蛹污染物的處理及昆蟲源氨基酸的提?。?/p>

病毒生產(chǎn)中,有6或7或8%的幼蟲不能致死而進(jìn)入化蛹。這些經(jīng)病毒感染而沒有在幼蟲期死亡而化得蛹體內(nèi)病毒含量極低,只能作為廢物,蟲種室每天大量蛾子交配產(chǎn)卵后死亡成為污染物。為處理這些死蛾廢蛹,每天將死亡蛾子和廢蛹分別收集,83或84或85或86或87℃浸煮5或7或9或10分鐘,撈出后40或42或45或47或49或50℃烘干至含水量為5或6或7或8%,然后將兩者混合,粉碎后不進(jìn)行脫脂處理,直接進(jìn)行酸解。按1:4重量比(死蛾廢蛹1:鹽酸4)加入5Mol/L鹽酸溶液,在83或84或85或86或87℃反應(yīng)缶中反應(yīng)13或14或15或16或17小時(shí),加氫氧化鈉調(diào)節(jié)溶液pH至6.5或6.7或7終止反應(yīng)。經(jīng)網(wǎng)紗過濾,不能降解的渣子作為有機(jī)肥料組分使用,液體部分經(jīng)測(cè)定總氨基酸含量作為昆蟲源氨基酸在病毒殺蟲劑中使用。液體中含有昆蟲源短肽,并含有昆蟲源油脂,在制備病毒殺蟲劑時(shí),這些短肽及油脂隨昆蟲源氨基酸比例一并加入。昆蟲源油脂和短肽的特殊氣味對(duì)害蟲幼蟲具有引誘作用,引誘幼蟲從隱蔽植物部位出來取食噴施在植株表面的昆蟲病毒,提高殺蟲效果。

C、廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥的制備:

病毒制劑包括病毒懸液、納米級(jí)二氧化硅、熒光增白劑、昆蟲源氨基酸、芳香族氨基酸、木質(zhì)素磺酸鈉、植物源油脂、幾丁質(zhì)合成抑制劑氟啶脲和氟蟲脲、阿拉膠及無菌水。各組分依次加入反應(yīng)缶中,常溫常壓下150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌1.5小時(shí),得到一種灰白色的懸浮劑產(chǎn)品,檢驗(yàn)合格后分裝。

所述病毒懸液由芹菜夜蛾核型多角體病毒感染替代宿主得到,替代宿主為玉米螟。由于芹菜夜蛾沒有人工飼養(yǎng)的報(bào)道,使用替代宿主生產(chǎn),解決了該病毒不能利用原始宿主芹菜夜蛾生產(chǎn)的問題。同時(shí),替代宿主玉米螟人工飼養(yǎng)技術(shù)成熟,可全程群體飼養(yǎng),對(duì)病毒敏感,單蟲病毒產(chǎn)量達(dá)72億-95億PIB,生產(chǎn)效率高,生產(chǎn)成本低,具有市場(chǎng)開發(fā)潛力。

實(shí)施例2:

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,它由以下重量份的原料制成:

一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥的制備方法,其步驟是:

A、廣譜桿狀病毒為芹菜夜蛾核型多角體病毒,替代宿主為棉鈴蟲,用200萬PIB/mL病毒懸液感染人工飼料飼養(yǎng)的4齡棉鈴蟲幼蟲生產(chǎn)芹菜夜蛾核型多角體病毒。按重量計(jì),該棉鈴蟲幼蟲的人工飼料配方是:黃豆粉、小麥粉、玉米粉各6%,酵母粉1.2%,瓊脂條1%,Vc和復(fù)合Vb各0.1%,山梨酸和尼泊金乙酯各0.03%,無菌水79.57%。病毒感染替代宿主后5或6或7或8天收集病毒病致死蟲尸處理,加工成200億PIB/mL的病毒懸液。

B、生產(chǎn)中出現(xiàn)死蛾和廢蛹污染物的處理及昆蟲源氨基酸的提取

病毒生產(chǎn)中,有3-5%的幼蟲不能致死而進(jìn)入化蛹,成為廢物需要處理,蟲種室每天大量蛾子交配產(chǎn)卵后死亡成為污染物。這些廢物經(jīng)85℃高溫處理后,請(qǐng)分別去鱗毛或去蛹皮后直接進(jìn)行酸解提取昆蟲源氨基酸、昆蟲源多肽和昆蟲源脂肪酸混合物。提取方法與實(shí)施例1相同,測(cè)定其中的氨基酸含量,稱為昆蟲源氨基酸。

C、病毒殺蟲劑制備:各組分依次加入反應(yīng)缶中,常溫常壓下150轉(zhuǎn)/分鐘攪拌1.5小時(shí),得到一種灰白色的懸浮劑產(chǎn)品,檢驗(yàn)合格后分裝。

所述病毒懸液由芹菜夜蛾核型多角體病毒感染替代宿主得到,替代宿主為棉鈴蟲。使用替代宿主棉鈴蟲生產(chǎn),也解決該病毒不能利用原始宿主芹菜夜蛾生產(chǎn)的問題。同時(shí),棉鈴蟲人工飼養(yǎng)技術(shù)成熟,1-3齡幼蟲可群體飼養(yǎng),對(duì)病毒敏感,單蟲病毒產(chǎn)量達(dá)100-150億PIB,生產(chǎn)效率高,生產(chǎn)成本低,也具有市場(chǎng)開發(fā)潛力。另外,利用棉鈴蟲和玉米螟交替生產(chǎn)廣譜桿狀病毒,保持了病毒的基因多樣性,克服病毒長(zhǎng)期在單一替代宿主中復(fù)致繁殖可能出現(xiàn)變異而失去廣譜行特征的風(fēng)險(xiǎn),使病毒廣譜性持續(xù)保持。

實(shí)施例2的昆蟲病毒殺蟲劑在江西吉安和安徽懷寧防治水稻螟蟲,防治對(duì)象為稻縱卷葉螟1-2齡幼蟲。病毒制劑按照1,000,750,500倍稀釋,用背負(fù)式噴霧器對(duì)水稻葉片正、反面噴藥,畝噴藥液量60公斤。等量清水為空白對(duì)照(CK),化學(xué)防治田作為對(duì)比。藥后蟲口調(diào)查每隔1d進(jìn)行1次,共調(diào)查4次。計(jì)算蟲口減退率和校正防治效果。結(jié)果顯示,施藥后第2天,沒有蟲口死亡。施藥后第4天就出現(xiàn)防治效果。施藥后第4、6、8、10天,校正防效分別為18.28-25.12%、54.16-63.81%,81.61-86.96%和89.88-91.37%。試驗(yàn)結(jié)果表明,一種防治螟蟲廣譜桿狀病毒殺蟲劑殺蟲速度明顯比其他昆蟲病毒制劑殺蟲速度快,并具有很好的防治效果。另外,該產(chǎn)品在江西水稻上應(yīng)用,發(fā)現(xiàn)有促分蘗作用。在安徽應(yīng)用,通過測(cè)產(chǎn)發(fā)現(xiàn)還有增產(chǎn)作用,與完全用化學(xué)農(nóng)藥防治的稻田相比,增產(chǎn)10.2-15.0%。

實(shí)施例3-6:

一種抗螟蟲防治螟蟲廣譜桿狀病毒生物農(nóng)藥,它由以下重量份的原料制成:

其制備步驟與實(shí)施例1相同。

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