本發(fā)明涉及一種金線蓮無激素容器化培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)基，屬于添加有機(jī)物的無激素MS培養(yǎng)基培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
金線蓮Anoectochilus roxburghii(Wal1.) Lindl為蘭科開唇蘭屬多年生草本植物。金線蓮主要分布在我國(guó)福建、臺(tái)灣、廣東、廣西、海南、四川、貴州和云南等海拔在300～1200m的丘陵地帶。金線蓮中氨基酸含量、抗衰老活性物質(zhì)及微量元素含量均高于野生西洋參，是一種已被廣泛應(yīng)用的中草藥。全株可入藥，有消炎止痛、滋陰降火、清熱解毒之功效，近年來主要用于治療高血壓、糖尿病、腫瘤、風(fēng)濕病、小兒發(fā)育不良等癥，在中藥界，金線蓮有“金草”、“藥王”之稱。金線蓮除藥用外，其株型小巧美觀，葉脈金黃色呈網(wǎng)狀排列，也是一種極具觀賞價(jià)值的室內(nèi)觀賞珍品。
金線蓮的種子發(fā)育不全，在自然條件下發(fā)芽率極低，目前，組培快繁已成為金線蓮種苗繁殖的主要手段。當(dāng)前，金線蓮都是通過種子或取莖段等為外植體進(jìn)行組織培養(yǎng)建立金線蓮無菌快繁體系，大棚煉苗移栽，然后收獲成苗。但在栽培生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)，金線蓮生長(zhǎng)十分緩慢，到15cm左右便封頂，而且整個(gè)生長(zhǎng)周期達(dá)3-5個(gè)月。
若在不添加激素的情況下通過瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)，不經(jīng)田間栽培即可直接采收，也能達(dá)到甚至超過田間栽培的植株高度和產(chǎn)量，且品質(zhì)良好，還可省去煉苗、移栽、管理等生產(chǎn)環(huán)節(jié)，生長(zhǎng)周期縮短、成本降低，經(jīng)濟(jì)效益提高。金線蓮無激素組織培養(yǎng)，屬金線蓮生產(chǎn)的一種高效低成本的新途徑，是促進(jìn)金線蓮快速培養(yǎng)的重要技術(shù)手段。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種金線蓮無激素容器化培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)基，以室內(nèi)容器化培養(yǎng)代替田間栽培環(huán)節(jié)，培養(yǎng)90天后其平均株高達(dá)到16.5cm。
為了實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的目的，技術(shù)方案具體包括如下步驟：
（1）以800mL的蘭花組培瓶為培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶中盛200mL培養(yǎng)基；
（2）步驟（1）中每個(gè)培養(yǎng)瓶定植15株苗高為3cm~5cm的金線蓮組培生根苗，組培溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為2000Lx，光照時(shí)間為14h/d，培養(yǎng)90天后可收獲金線蓮；
所述200mL培養(yǎng)基包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基和生長(zhǎng)培養(yǎng)基；
所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括MS培養(yǎng)基和蛋白胨；
所述生長(zhǎng)培養(yǎng)基包括土豆汁、豆芽汁、活性炭、蔗糖和瓊脂條；
所述200mL培養(yǎng)基組成包含：
3g/L的蛋白胨；
150g/L的土豆汁；
200g/L的豆芽汁；
0.5g/L的活性炭；
30g/L的蔗糖；
8g/L的瓊脂條；
余量為MS培養(yǎng)基。
本發(fā)明中，所述活性炭的比表面積為1000-1600m2/g。
本發(fā)明的有益效果：
1、以不含激素的MS培養(yǎng)基+蛋白胨為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，同時(shí)添加天然有機(jī)物土豆汁和豆芽汁對(duì)金線蓮進(jìn)行容器化培養(yǎng)，蛋白胨、土豆汁、豆芽汁為金線蓮生長(zhǎng)提供了充足的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和微量元素，無需激素的促進(jìn)調(diào)控，采收的金線蓮產(chǎn)品不含激素成分，可以用于嬰幼兒產(chǎn)品生產(chǎn)；
2、采用比表面積為1000-1600m2/g的活性炭，具有一定的吸附作用，能吸附因植株持續(xù)生長(zhǎng)產(chǎn)生的有毒物質(zhì)，同時(shí)營(yíng)造一定的黑暗環(huán)境，有利于根系發(fā)育；
3、金線蓮在含有豐富有機(jī)物的無激素培養(yǎng)基中生長(zhǎng)發(fā)育良好，培養(yǎng)90天后其平均株高到達(dá)16.5cm，株高較現(xiàn)有技術(shù)提高了10%，并且植株整齊、健壯、色深，產(chǎn)量比同樣數(shù)量的組培苗在田間栽培的產(chǎn)量提高15%~20%；
4、采用800mL的蘭花組培瓶，能夠滿足植株充分生長(zhǎng)，200mL培養(yǎng)基為植株持續(xù)生產(chǎn)提供充足的營(yíng)養(yǎng)。
具體實(shí)施方式
以下將參照實(shí)例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，但本發(fā)明不限于這些具體實(shí)例。
具體實(shí)施例1：
（1）以800mL的蘭花組培瓶為培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶中盛200mL培養(yǎng)基；
（2）步驟（1）中每個(gè)培養(yǎng)瓶定植15株苗高為3cm~5cm的金線蓮組培生根苗，組培溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為2000 Lx，光照時(shí)間為14h/d，培養(yǎng)90天后可收獲金線蓮，金線蓮株高為平均15.9cm；
所述200mL培養(yǎng)基組成包含：
3g/L的蛋白胨；
100g/L的土豆汁；
150g/L的豆芽汁；
0.5g/L的活性炭；
30g/L的蔗糖；
8g/L的瓊脂條；
余量為MS培養(yǎng)基。
具體實(shí)施例2：
（1）以800mL的蘭花組培瓶為培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶中盛200mL培養(yǎng)基；
（2）步驟（1）中每個(gè)培養(yǎng)瓶定植15株苗高為3cm~5cm的金線蓮組培生根苗，組培溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為2000 Lx，光照時(shí)間為14h/d，培養(yǎng)90天后可收獲金線蓮，金線蓮株高為平均16.2cm；
所述200mL培養(yǎng)基組成包含：
3g/L的蛋白胨；
130g/L的土豆汁；
180g/L的豆芽汁；
0.5g/L的活性炭；
30g/L的蔗糖；
8g/L的瓊脂條；
余量為MS培養(yǎng)基。
具體實(shí)施例3：
（1）以800mL的蘭花組培瓶為培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶中盛200mL培養(yǎng)基；
（2）步驟（1）中每個(gè)培養(yǎng)瓶定植15株苗高為3cm~5cm的金線蓮組培生根苗，組培溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為2000 Lx，光照時(shí)間為14h/d，培養(yǎng)90天后可收獲金線蓮，金線蓮株高為平均16.5cm；
所述200mL培養(yǎng)基組成包含：
3g/L的蛋白胨；
150g/L的土豆汁；
200g/L的豆芽汁；
0.5g/L的活性炭；
30g/L的蔗糖；
8g/L的瓊脂條；
余量為MS培養(yǎng)基。
具體實(shí)施例4：
（1）以800mL的蘭花組培瓶為培養(yǎng)瓶，培養(yǎng)瓶中盛200mL培養(yǎng)基；
（2）步驟（1）中每個(gè)培養(yǎng)瓶定植15株苗高為3cm~5cm的金線蓮組培生根苗，組培溫度為25±2℃，光照強(qiáng)度為2000 Lx，光照時(shí)間為14h/d，培養(yǎng)90天后可收獲金線蓮，金線蓮株高為平均16.3cm；
所述200mL培養(yǎng)基組成包含：
3g/L的蛋白胨；
180g/L的土豆汁；
250g/L的豆芽汁；
0.5g/L的活性炭；
30g/L的蔗糖；
8g/L的瓊脂條；
余量為MS培養(yǎng)基。