鐵皮石斛優(yōu)質(zhì)試管苗限根培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)容器的制造方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種適于鐵皮石斛為主的蘭科植物組培生根壯苗培養(yǎng)中防止根系纏繞、不利出瓶的定苗限根培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)容器。其特征在于：將常規(guī)培養(yǎng)瓶內(nèi)部分隔為均等的區(qū)域，這樣也就將培養(yǎng)基分隔為相應(yīng)的分?jǐn)?shù)，在快繁的最后一步定苗時(shí)，將相應(yīng)的小苗定植于分區(qū)內(nèi)，壯苗生根時(shí)生長出來的根系就只能在相應(yīng)分區(qū)內(nèi)生長，小苗類似于在育苗穴盤內(nèi)生長，只有分區(qū)內(nèi)的根有時(shí)有纏繞現(xiàn)象，而不會(huì)出現(xiàn)整瓶內(nèi)所的小苗的根系相互纏繞現(xiàn)象，這樣可培育出較粗壯的試管苗，成苗后出瓶時(shí)操作非常方便，大大節(jié)約了出瓶時(shí)的用工量，同時(shí)還不會(huì)對根系及莖葉造成傷害，能夠大大提高出瓶效率和移栽成活率。
【專利說明】鐵皮石斛優(yōu)質(zhì)試管苗限根培養(yǎng)方法及其培養(yǎng)容器
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種蘭科植物(特別是石斛屬、兜蘭屬、蘭屬等)組織培養(yǎng)育苗方法，具體為在植物組織培養(yǎng)的定苗培養(yǎng)、壯苗生根階段進(jìn)行限根培養(yǎng)，是一種高科技育苗技術(shù)新型方法，屬于生物工程【技術(shù)領(lǐng)域】植物組織培養(yǎng)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]蘭科是單子葉植物中的第一大科，其中許多種類具有重要的觀賞價(jià)值、藥用價(jià)值和食用價(jià)值。蘭科植物的無性分蘗繁殖繁殖系數(shù)低，不適于人類的需求，其種子成熟時(shí)僅為一層種皮包裹胚性細(xì)胞團(tuán)，無完整的胚結(jié)構(gòu)，自然條件下有性繁殖系數(shù)也很低，為了滿足人類生活和生產(chǎn)的需求只有通過組織培養(yǎng)的方法進(jìn)行無性繁殖(取莖、芽、根、花等器官組培繁殖)或是種子瓶播繁育種苗，所有組培育苗過程都要經(jīng)歷一個(gè)將原球莖或小苗接種到壯苗生根培養(yǎng)基上進(jìn)行壯苗使其形成具有健壯根系和一定高度植株的健壯試管苗，這時(shí)為了保證試管苗質(zhì)量，培養(yǎng)容器內(nèi)可培養(yǎng)的小苗數(shù)相對固定，這一過程稱為定苗培養(yǎng)或叫壯苗培養(yǎng)。
[0003]目前國內(nèi)通過組織培養(yǎng)技術(shù)進(jìn)行工廠化育苗的有以鐵皮石斛為首的石斛類、兜蘭和蘭屬的蘭科植物，傳統(tǒng)定苗培養(yǎng)方法是將小苗全接種于一個(gè)培養(yǎng)瓶內(nèi)，隨著小苗逐漸長大，試管苗的根系纏繞在培養(yǎng)瓶底部，盤根錯(cuò)節(jié)的根錯(cuò)綜復(fù)雜交結(jié)在一起，傳統(tǒng)的蘭花專用培養(yǎng)瓶，630ml的大瓶子，底部外徑為9.6cm，上部出苗口外徑為4.9cm;采用直筒型的370ml組培瓶，出苗口稍大些，但是壯苗培養(yǎng)一段時(shí)間后，根系在底部盤結(jié)成一團(tuán)，出瓶時(shí)極為不易，會(huì)對試管苗的根、莖、葉造成很大的損傷，大大的降低了移栽成活率；同時(shí)為了盡量減少出瓶對試管苗的損傷操作人員得細(xì)致出瓶；另外出瓶后清洗培養(yǎng)基的工作也得小心細(xì)致不損傷根系，這樣耗費(fèi)的時(shí)間增``加，降低了出瓶的工作效率。
[0004]采用限根培養(yǎng)方法能夠克服試管苗茁壯生長與出瓶之間的矛盾，試管苗移栽簡單方便，試管苗受到損傷小，移栽后緩苗時(shí)間少，移栽成活率大大提高。
[0005]到目前為止沒有人在組織培養(yǎng)中提出限根培養(yǎng)方法和設(shè)計(jì)專用容器。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]關(guān)于本發(fā)明的目的是為了解決鐵皮石斛工廠化育苗中，定苗生根培養(yǎng)一段時(shí)間后小苗逐漸長大，試管苗的根系纏繞在培養(yǎng)瓶底部，盤根錯(cuò)節(jié)的根錯(cuò)綜復(fù)雜交結(jié)在一起，出瓶時(shí)傷根、傷葉、費(fèi)力費(fèi)時(shí)的不良現(xiàn)象。本發(fā)明還設(shè)計(jì)了蘭科植物限根培養(yǎng)的專用培養(yǎng)瓶。
[0007]本發(fā)明的目的可以通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)。
[0008]鐵皮石斛優(yōu)質(zhì)試管苗限根培養(yǎng)方法，本發(fā)明的主要技術(shù)在提出了“限根培養(yǎng)法”這一新概念，并設(shè)計(jì)了專用培養(yǎng)容器，具體步驟如下:
1、播種:將鐵皮石斛種子播種到萌發(fā)培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)萌發(fā)得到原球莖。種子萌發(fā)及分化培養(yǎng)基 MS + NAA (0.6-0.4)mg/L + 6-BA (0.15-0.05) mg/L+ 蔗糖 30g/L + 瓊脂粉 7.2g/L+ 椰子汁 100 ml/L。[0009]2、成苗培養(yǎng)。將原球莖轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基上，培養(yǎng)3-4周，形成具有2-3條0.5 cm長的根，莖分化出2-3個(gè)節(jié)，具有3-4片小葉，植株高0.6-0.8cm的小苗。
[0010]3、限根培養(yǎng)。將較大的原球莖或分化小苗定植于裝在限根培養(yǎng)容器中的壯苗生根培養(yǎng)基上進(jìn)行限根培養(yǎng)，壯苗生根培養(yǎng)基為MS + NAA(1.0- 0.4) mg/L + 6-BA (0.1-0.05) mg/L+蔗糖30g/L +瓊脂粉7.2 g/L+香蕉泥60 g/L，培養(yǎng)8至12周后小苗長大，根系茁壯但并不相互纏繞，出瓶時(shí)容易操作，非常方便。
[0011]4、試管苗移栽。將限根壯苗培養(yǎng)得到的優(yōu)質(zhì)小苗轉(zhuǎn)入自然光照和溫度的煉苗室或大棚中鍛煉7天，然后打開瓶蓋3-5天，取出試管苗洗凈根部培養(yǎng)基，使表面水分陰至半干后栽培，以杉木碎塊為栽培基質(zhì)，保持適當(dāng)?shù)耐L(fēng)和空氣濕度，在溫度適宜時(shí)小苗緩苗期為兩周,第三周后恢復(fù)生長,移栽成活率大于95%。
[0012]用于上述培養(yǎng)的容器:650ml的小口瓶分隔為25個(gè)區(qū)域，370ml的大口瓶均勻分隔為16個(gè)區(qū)域。區(qū)域高度為2.5-3 cm。根據(jù)情況，為了區(qū)域間的物質(zhì)交流，隔層上可設(shè)計(jì)4-9個(gè)直徑為0.1-0.15 cm的圓形小孔。
[0013]培養(yǎng)容器，其外形為常規(guī)的各種培養(yǎng)瓶，主要是制作時(shí)在其底部用與瓶子相同的材料做成相應(yīng)具小孔分隔，既限制了根的生長范圍又不阻礙各小苗根部間的生長有利物質(zhì)交流。
[0014]本發(fā)明不僅適用于鐵皮石解，還適用于組培工廠化育苗中根系易纏繞的各種石斛、兜蘭、國蘭、雜交蘭。
[0015]本發(fā)明技術(shù)具有以下優(yōu)點(diǎn): 1、培養(yǎng)瓶內(nèi)不同分區(qū)的小苗可以培養(yǎng)較長時(shí)間長得較大較壯，出瓶時(shí)以分區(qū)為單位夾出，不會(huì)出現(xiàn)根系扯斷、莖折斷、葉受傷的情況。
[0016]2、提高了出瓶的效率，方便根系的清洗，減少用工量。
[0017]3、根系的呈直立狀長2.5-3cm方便栽培。
[0018]4、小苗損傷小,緩苗時(shí)間減少,恢復(fù)生長快,成活率大在提高。
【權(quán)利要求】
1.鐵皮石斛優(yōu)質(zhì)試管苗限根培養(yǎng)法，將授粉后5個(gè)月的蒴果取下，播種在萌發(fā)培養(yǎng)基上，3周后可見種子萌發(fā)產(chǎn)生原球，7至10周內(nèi)將較密的原球莖用接種環(huán)繼代于萌發(fā)培養(yǎng)基中，14到19周內(nèi)，將原球莖或分化后帶1-3片小葉的小苗接種于專用瓶中進(jìn)行限根培養(yǎng)。
2.限根培養(yǎng)時(shí)，每個(gè)區(qū)域內(nèi)定植小苗數(shù)為石斛類1-3苗，由于其培養(yǎng)過程中易分化側(cè)芽成小苗，所以最終可形成有4-6苗的叢生試管苗,這與栽培中每叢要求的數(shù)量正好適宜；兜蘭類每個(gè)小區(qū)域定植小苗數(shù)為1-2苗，因?yàn)槎堤m類試管苗移栽多采用單苗栽培。
3.由于一個(gè)鐵皮石斛果實(shí)內(nèi)種子多達(dá)近十萬粒，播種后萌發(fā)率在95%以上，種子萌發(fā)原球莖成苗后小苗質(zhì)量高于人工增殖原球莖成苗質(zhì)量，所以盡量只用播種后首次形成的原球莖或小苗定苗，如果誘導(dǎo)原球莖增殖，繼代培養(yǎng)次數(shù)不超過三次。
4.根據(jù)權(quán)利2所述的培養(yǎng)容器，其外形為常規(guī)的各種培養(yǎng)瓶，主要是制作時(shí)在其底部用與瓶子相同的材料做成相應(yīng)具小孔分隔，既限制了根的生長范圍又不阻礙各小苗根部間的生長有利物質(zhì)交流。
5.培養(yǎng)容器分隔:650ml的小口瓶分隔為25個(gè)區(qū)域，370ml的大口瓶均勻分隔為16個(gè)區(qū)域。
6.分隔區(qū)域所用隔層高度為2.5-3cm。
7.根據(jù)情況，在隔層上可設(shè)計(jì)4-9個(gè)直徑為0.1-0.15 cm圓形小孔，小孔的作用有兩點(diǎn)，第一方便區(qū)域間的物質(zhì)交流，第二利用小孔水平高度的不同，可根據(jù)培養(yǎng)植物的不同調(diào)節(jié)隔層內(nèi)培養(yǎng)基的高度。
【文檔編號】A01H4/00GK103477977SQ201310346213
【公開日】2014年1月1日 申請日期:2013年8月11日 優(yōu)先權(quán)日:2013年8月11日
【發(fā)明者】周麗 申請人:周麗