本發(fā)明涉及滇重樓種植領(lǐng)域，具體地說，是涉及一種滇重樓快速繁殖方法。

背景技術(shù)：

重樓主要用于消腫止痛、抗癌、清熱解毒和止血等作用，對蛇蟲咬傷、跌打損傷有獨(dú)特療效，既可直接入藥，又是季勝德蛇藥片、云南白藥、熱毒清和宮血寧等多種中成藥的主要原料斗之一；由于重樓是多年生植物，并且對生長環(huán)境要求較高，另外重樓種子有胚后熟的生理特性，要經(jīng)歷“二次休眠”期，在自然條件下需要經(jīng)過2年時間才能萌發(fā)，出苗率非常低，自然生長速度十分緩慢，僅靠野生資源繁殖已不能滿足市場需求。

目前為止，重樓的快速繁殖技術(shù)及產(chǎn)業(yè)化種植尚未取得令人滿意的結(jié)果；近年來重樓價格持續(xù)上漲，直接導(dǎo)致了對野生重樓掠奪式采挖，因此開發(fā)重樓快速繁殖技術(shù)，是解決重樓資源緊缺、保證其可持續(xù)利用的關(guān)鍵手段。

現(xiàn)有技術(shù)中，重樓采用塊莖繁殖方式，但這種方式一個塊莖只能繁育一個芽體，形成的根較少，生長緩慢；而目前重樓根莖鮮貨約80-110元/kg，每畝需80kg重樓根莖，每畝地種苗成本就達(dá)8000元；另外重樓只有生長三年以后其中的有效成分重樓皂苷才能符合國家藥典標(biāo)準(zhǔn)，而且生長環(huán)境要求高、塊莖繁殖投入高、生長周期長，所以現(xiàn)有的重樓繁殖方法還是不夠完善。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種滇重樓快速繁殖方法，以解決現(xiàn)有滇重樓塊莖繁殖方式存在的一個塊莖只能繁育一個芽體，形成的根較少，生長緩慢，不能滿足現(xiàn)有市場對重樓繁殖的需求的問題。

為了解決上述問題，發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種滇重樓快速繁殖方法包括下列步驟：

(1)選擇多年生，健壯，無損傷，無病蟲害鮮重為80g以上的滇重樓根莖，作為繁殖種源；

(2)將步驟(1)的滇重樓根莖新鮮挖出洗凈后晾3-7天，切除根莖上的不定根，再切取帶芽體的3-6個莖節(jié)；

(3)將步驟(2)的莖節(jié)用無菌水沖洗3-6次后切除其上的芽體后，將上述根莖莖節(jié)切成3-5cm的塊狀結(jié)構(gòu)；

(4)將步驟(3)的塊狀結(jié)構(gòu)接入繁殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；繁殖培養(yǎng)基包括1.0-4.0mg·L^-1ABT1、0.1-1.0mg·L^-1BA、200-500mg·L^-1生化黃腐酸鉀，在培養(yǎng)溫度為6-15℃、每天光照8-12小時、光照強(qiáng)度為500-1500lx的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；

(5)步驟(4)的塊狀結(jié)構(gòu)長出第一片真葉，不定根生長4條以上時，將其移栽至松軟的土壤中生長。

具體地，步驟(4)的繁殖培養(yǎng)基中還包括0.1-2％粒徑為50-60的目麥飯石粉、0.2-1％的草木灰、0.1-0.5％沙。

具體地，步驟(5)中移栽至松軟土壤中的培養(yǎng)溫度為12-22℃、相對濕度75％-85％、每天光照6-10小時、光照強(qiáng)度為600-1200lx。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，發(fā)明具有以下有益效果：本發(fā)明中生化黃腐酸鉀和ABT1一起用于滇重樓塊莖繁殖時能達(dá)到的效果更好，使滇重樓塊莖繁殖的不定芽誘導(dǎo)率、出芽率、出根率、移栽后的成活率更高；本發(fā)明中麥飯石粉和沙使繁殖培養(yǎng)基具有一定通透性使滇重樓塊莖能更好的生長，草木灰對繁殖培養(yǎng)基進(jìn)一 步消毒，補(bǔ)充滇重樓塊莖生長需要的多種礦物元素使其生長的更好更粗壯。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對發(fā)明作進(jìn)一步說明，發(fā)明的實(shí)施方式包括但不限于下列實(shí)施例。

實(shí)施例1

選擇多年生，健壯，無損傷，無病蟲害鮮重為80g以上的滇重樓根莖，作為繁殖種源；然后將滇重樓根莖新鮮挖出洗凈后晾3天，切除根莖上的不定根，再切取帶芽體的3個莖節(jié)；然后將莖節(jié)用無菌水沖洗3次后切除其上的芽體后，將上述根莖莖節(jié)切成3cm的塊狀結(jié)構(gòu)；然后將塊狀結(jié)構(gòu)接入繁殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；繁殖培養(yǎng)基包括1.0mg·L^-1ABT1、0.1mg·L^-1BA、200mg·L^-1生化黃腐酸鉀、0.1％粒徑為50的目麥飯石粉、0.2％的草木灰、0.1％沙，在培養(yǎng)溫度為6℃、每天光照8小時、光照強(qiáng)度為500x的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；在塊狀結(jié)構(gòu)長出第一片真葉，不定根生長4條時，將其移栽至松軟的土壤中生長；松軟土壤中的培養(yǎng)溫度為12℃、相對濕度75％、每天光照6小時、光照強(qiáng)度為600x。

實(shí)施例2

選擇多年生，健壯，無損傷，無病蟲害鮮重為80g以上的滇重樓根莖，作為繁殖種源；然后將滇重樓根莖新鮮挖出洗凈后晾4天，切除根莖上的不定根，再切取帶芽體的4個莖節(jié)；然后將莖節(jié)用無菌水沖洗4次后切除其上的芽體后，將上述根莖莖節(jié)切成3.5cm的塊狀結(jié)構(gòu)；然后將塊狀結(jié)構(gòu)接入繁殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；繁殖培養(yǎng)基包括2.0mg·L^-1ABT1、0.3mg·L^-1BA、300mg·L^-1生化黃腐酸鉀、0.5％粒徑為55的目麥飯石粉、0.5％的草木灰、0.2％沙，在培養(yǎng)溫度為10℃、每天光照10小時、光照強(qiáng)度為8000x的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；在塊狀結(jié)構(gòu)長出第一片真葉，不定根生長5條時，將其移栽至松軟的土壤中生長；松軟土壤中的培 養(yǎng)溫度為18℃、相對濕度78％、每天光照8小時、光照強(qiáng)度為10000x。

實(shí)施例3

選擇多年生，健壯，無損傷，無病蟲害鮮重為80g以上的滇重樓根莖，作為繁殖種源；然后將滇重樓根莖新鮮挖出洗凈后晾5天，切除根莖上的不定根，再切取帶芽體的5個莖節(jié)；然后將莖節(jié)用無菌水沖洗5次后切除其上的芽體后，將上述根莖莖節(jié)切成4cm的塊狀結(jié)構(gòu)；然后將塊狀結(jié)構(gòu)接入繁殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；繁殖培養(yǎng)基包括3.0mg·L^-1ABT1、0.7mg·L^-1BA、400mg·L^-1生化黃腐酸鉀、1.5％粒徑為58的目麥飯石粉、0.8％的草木灰、0.4％沙，在培養(yǎng)溫度為12℃、每天光照11小時、光照強(qiáng)度為10000x的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；在塊狀結(jié)構(gòu)長出第一片真葉，不定根生長6條時，將其移栽至松軟的土壤中生長；松軟土壤中的培養(yǎng)溫度為21℃、相對濕度83％、每天光照9小時、光照強(qiáng)度為12000x。

實(shí)施例4

選擇多年生，健壯，無損傷，無病蟲害鮮重為80g以上的滇重樓根莖，作為繁殖種源；然后將滇重樓根莖新鮮挖出洗凈后晾7天，切除根莖上的不定根，再切取帶芽體的6個莖節(jié)；然后將莖節(jié)用無菌水沖洗6次后切除其上的芽體后，將上述根莖莖節(jié)切成5cm的塊狀結(jié)構(gòu)；然后將塊狀結(jié)構(gòu)接入繁殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；繁殖培養(yǎng)基包括4.0mg·L^-1ABT1、0.1mg·L^-1BA、500mg·L^-1生化黃腐酸鉀、2％粒徑為60的目麥飯石粉、1％的草木灰、0.5％沙，在培養(yǎng)溫度為15℃、每天光照12小時、光照強(qiáng)度為15001x的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；在塊狀結(jié)構(gòu)長出第一片真葉，不定根生長7條時，將其移栽至松軟的土壤中生長；松軟土壤中的培養(yǎng)溫度為22℃、相對濕度85％、每天光照10小時、光照強(qiáng)度為12001x。

實(shí)施例5

選擇多年生，健壯，無損傷，無病蟲害鮮重為80g以上的滇重樓根莖，作 為繁殖種源；然后將滇重樓根莖新鮮挖出洗凈后晾7天，切除根莖上的不定根，再切取帶芽體的6個莖節(jié)；然后將莖節(jié)用無菌水沖洗6次后切除其上的芽體后，將上述根莖莖節(jié)切成5cm的塊狀結(jié)構(gòu)；然后將塊狀結(jié)構(gòu)接入繁殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；繁殖培養(yǎng)基包括4.0mg·L^-1ABT1、0.1mg·L^-1BA、2％粒徑為60的目麥飯石粉、1％的草木灰、0.5％沙，在培養(yǎng)溫度為15℃、每天光照12小時、光照強(qiáng)度為15001x的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；在塊狀結(jié)構(gòu)長出第一片真葉，不定根生長7條時，將其移栽至松軟的土壤中生長；松軟土壤中的培養(yǎng)溫度為22℃、相對濕度85％、每天光照10小時、光照強(qiáng)度為12001x。

實(shí)施例6

選擇多年生，健壯，無損傷，無病蟲害鮮重為80g以上的滇重樓根莖，作為繁殖種源；然后將滇重樓根莖新鮮挖出洗凈后晾7天，切除根莖上的不定根，再切取帶芽體的6個莖節(jié)；然后將莖節(jié)用無菌水沖洗6次后切除其上的芽體后，將上述根莖莖節(jié)切成5cm的塊狀結(jié)構(gòu)；然后將塊狀結(jié)構(gòu)接入繁殖培養(yǎng)基中培養(yǎng)；繁殖培養(yǎng)基包括0.1mg·L^-1BA、500mg·L^-1生化黃腐酸鉀、2％粒徑為60的目麥飯石粉、1％的草木灰、0.5％沙，在培養(yǎng)溫度為15℃、每天光照12小時、光照強(qiáng)度為15001x的條件下進(jìn)行培養(yǎng)；在塊狀結(jié)構(gòu)長出第一片真葉，不定根生長7條時，將其移栽至松軟的土壤中生長；松軟土壤中的培養(yǎng)溫度為22℃、相對濕度85％、每天光照10小時、光照強(qiáng)度為12001x。

經(jīng)過25天查看實(shí)施例1、2、3、4、5、6和現(xiàn)有繁殖方法的不定芽誘導(dǎo)率、出芽率、出芽率、移栽至松軟土壤的成活率，通過取出相同數(shù)量的塊莖通過求平均數(shù)的方法得出上述各參數(shù)的值；具體情況如下表：

結(jié)果分析：實(shí)施例1至實(shí)施例4的不定芽誘導(dǎo)率、出芽率、出根率、移栽后的成活率均相近，不具有顯著差別，且其均比現(xiàn)有繁殖方法的不定芽誘導(dǎo)率、出芽率、出根率、移栽后的成活率高，故本發(fā)明的繁殖方法相對現(xiàn)有繁殖方法具有顯著優(yōu)勢；實(shí)施例5和實(shí)施例6的不定芽誘導(dǎo)率、出芽率、出根率、移栽后的成活率均低于實(shí)施例1至實(shí)施例4，實(shí)施例5相對實(shí)施例1至實(shí)施例4缺少了生化黃腐酸鉀，實(shí)施例6相對實(shí)施例1至實(shí)施例4缺少了ABT1；故生化黃腐酸鉀和ABT1一起用于滇重樓塊莖繁殖時能達(dá)到的效果更好，使滇重樓塊莖繁殖的不定芽誘導(dǎo)率、出芽率、出根率、移栽后的成活率更高；本發(fā)明中麥飯石粉和沙使繁殖培養(yǎng)基具有一定通透性使滇重樓塊莖能更好的生長，草木灰對繁殖培養(yǎng)基進(jìn)一步消毒，補(bǔ)充滇重樓塊莖生長需要的多種礦物元素使其生長的更好更粗壯。

按照上述實(shí)施例，便可很好地實(shí)現(xiàn)發(fā)明。值得說明的是，基于上述結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的前提下，為解決同樣的技術(shù)問題，即使在發(fā)明上做出的一些無實(shí)質(zhì)性的改動或潤色，所采用的技術(shù)方案的實(shí)質(zhì)仍然與發(fā)明一樣，故其也應(yīng)當(dāng)在發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。