本發(fā)明涉及水產(chǎn)養(yǎng)殖技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黑斑石斑魚的人工繁殖方法。
背景技術(shù)：
黑斑石斑魚，(學(xué)名：Epinephelus tukula)俗名金錢斑，又名藍身大石斑，為輻鰭魚綱鱸形目鱸亞目鮨科石斑魚屬的魚類。分布于印度西太平洋區(qū)，從紅海、東非至澳洲昆士蘭海域，棲息深度10-150米，體長可達200厘米，重量110公斤。
黑斑石斑魚為世界名貴暖水性魚類，其主要生活在珊瑚礁區(qū)，為底棲性魚類，屬肉食性，以魚類、甲殼類等為食，可做為食用魚及游釣魚。體型僅次于鞍帶石斑魚，生長較快，是極具養(yǎng)殖前途的石斑魚物種。
目前，各種石斑魚類均遭到持續(xù)的濫捕，多種石斑魚類面臨絕種危機。過度的捕撈，使得魚的數(shù)量大幅下跌，導(dǎo)致成功繁殖的機會銳減。其中，黑斑石斑魚國內(nèi)外市場苗種并無供應(yīng)，僅少量苗種來自天然海域。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的在于提供一種黑斑石斑魚的人工繁殖方法，通過對黑斑石斑魚的親本培育，促使親魚產(chǎn)卵，然后用受精卵孵化出仔魚、培育成能供養(yǎng)殖的魚種，為規(guī)?；l(fā)展黑斑石斑魚養(yǎng)殖提供合理的、孵化率高的解決方案。
一種黑斑石斑魚的人工繁殖方法，包括以下步驟：
(1)親本選擇
a.雌性親本：選擇8齡以上、體重20-40kg、體型正常、無病害、活力強的黑斑石斑魚作為雌性親本；
b.雄性親本：選擇8齡以上、體重25-40kg、體型正常、無病害、活力強的黑斑石斑魚作為雄性親本；
(2)親本的培育池塘
培育親本的池塘面積為2畝，水深3－3.5m，設(shè)進、排水口各1個，培育密度75－100尾/畝，雌雄比例為1：(0.5-1)；
(3)非繁殖季節(jié)親魚的培育
a.飼料及投喂：飼料種類為冰凍的藍圓鲹、鮐魚，切成合適親魚口徑的小塊，每二天投喂飼料1次，每次投喂以親魚停止攝食為度，每次投喂量為親魚體重的2.5％－3.0％；
b.培育水溫與水質(zhì)控制：在熱帶地區(qū)取露天池塘的自然水溫進行親魚培育；
c.水質(zhì)管理：每三天換水1次，換水量為池塘水量的25％，保持水體透明度在35－45cm；
(4)繁殖前的強化培育
a.培育水溫：在熱帶地區(qū)，親魚的強化培育自11月至3月間進行，取自然水溫，11月份池塘水溫27－28℃開始，此后水溫逐漸下降，至1月份時，水溫為18－20℃，3月份時，水溫上升至23－24℃；
b.強化培育中飼料的種類與用量：飼料種類分三種，第一種是5份魷魚+1份牡蠣，第二種是人工軟顆粒飼料，含4份鰻魚粉+6份魚漿，混合后每公斤飼料添加維生素C 3克、維生素E 3克，制成軟顆粒投喂，第三種是鮐魚或藍圓鲹，三種飼料輪換使用，每三天投喂1次，每次投喂量為親魚體重的2.0％－3.0％，投喂時間在上午進行；
c.水質(zhì)管理：每5天換水1次，換水量為池塘水量的25％－30％，保持水體透明度在50cm以上；
(5)人工繁殖
a.催產(chǎn)時機的選擇：在熱帶地區(qū)，經(jīng)過強化培育的親魚一般三月份開始逐漸達到性腺成熟，日常管理中應(yīng)注意觀察，一旦發(fā)現(xiàn)親魚體色變深，即可進行人工催產(chǎn)；
b.催產(chǎn)劑與劑量：HCG-(200-400)單位+LHRH-(4-6)微克/kg體重，二種催產(chǎn)劑分別用0.6％氯化鈉溶液溶解后，混勻后使用；
C.催產(chǎn)劑注射方式：將親魚從培育池塘捕起，選擇腹部大、生殖孔微紅的個體進行藥物催產(chǎn)，采用腹腔注射方式，注射時間選擇在10：00-12:00時進行，注射后，立即將親魚放回池塘；
d.親魚產(chǎn)卵：注射催產(chǎn)劑的次日可觀察到親魚產(chǎn)卵，親魚產(chǎn)卵通常在16:00-19:00進行，持續(xù)1-2h；
(6)受精卵的收集與處理：
收集受精卵時，在培育池的增氧機前5～6m處設(shè)置集卵網(wǎng)，利用增氧機開動產(chǎn)生的水流，將受精卵收集到集卵網(wǎng)內(nèi)，事先準備一洗卵盆，盆內(nèi)放一只20目的手抄網(wǎng)，將受精卵倒入手抄網(wǎng)里，讓受精卵從網(wǎng)目中濾下，撤去手抄網(wǎng)，然后用瓢在洗卵盆內(nèi)順時針輕輕地攪動，使水在盆內(nèi)旋轉(zhuǎn)，再以一條軟管用虹吸法將聚集的壞卵和雜物去除，重復(fù)此法1～2次，用40目手抄網(wǎng)將受精卵撈起，新鮮海水沖洗后，稱重，放入孵化網(wǎng)箱內(nèi)；
(7)受精卵的孵化
準備一個容積500L、底部設(shè)有排水閥的孵化桶，在孵化桶內(nèi)放置氣石充氣，將經(jīng)受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化條件為水溫23－30℃，鹽度28－33，pH7.8～8.5，孵化密度為250－300萬粒受精卵/m3，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內(nèi)海水的清新。
在本發(fā)明中，所述步驟(3)中，培育過程中需要定期消毒、防?。好渴鞂τH魚池消毒防病1次，上旬用10％聚維銅碘溶液全池遍灑1次，使池塘水體呈0.1毫克/升濃度，中旬用二氧化氯全池遍灑1次，使池塘水體呈0.3毫克/升濃度，下旬用醋酸銅遍灑1次，使池塘水體呈0.5毫克/升濃度，防止細菌病、寄生蟲病的發(fā)生。
在本發(fā)明中，所述步驟(5)b中，將300000單位HCG溶解在100ml0.6％氯化鈉溶液中，再將5000微克LHRH溶解在100ml0.6％氯化鈉溶液中，然后將二種溶液混合，每公斤親魚體重注射混合液0.2ml，注射時，先稱取親魚體重，根據(jù)體重計算用量。
在本發(fā)明中，所述步驟(6)中，集卵網(wǎng)囊網(wǎng)長6m，囊口高1.2m，末端開口徑約0.4m，兩側(cè)各設(shè)長6m左右的翼網(wǎng)，翼網(wǎng)中間高1.2m，末端高0.9m。
在本發(fā)明中，所述步驟(7)中，排除壞卵和雜物的方法：讓氣石停止充氣10～15min，正常的受精卵在停氣后會上浮，而死卵或未受精卵及少量雜物將沉于孵化桶的底部，開啟孵化桶底部的排水閥，緩慢排水，將死卵或未受精卵及雜物排出，一邊排水一邊檢查，當排出的水中出現(xiàn)正常受精卵時，則關(guān)閉排水閥，停止排水，恢復(fù)充氣，并向孵化桶補充海水至正常水位，同時，要將所排出的受精卵收集稱重，以便計算受精卵數(shù)量。
綜上所述，本發(fā)明一種黑斑石斑魚的人工繁殖法的有益效果為：
(1)黑斑石斑魚是一個極其養(yǎng)前景的物種，本發(fā)明通過人工繁殖，獲得批量的仔魚，用于養(yǎng)殖生產(chǎn)。
(2)在本發(fā)明中，強化培育部分尤為重要，由于黑斑石斑魚的性腺發(fā)育，需要有一個低溫培育過程，然后在水溫上升的過程中達到性腺成熟，并且，在上述降溫繼而升溫的過程，需要配合合適的營養(yǎng)，營養(yǎng)不足很難使親魚性腺快速發(fā)育，營養(yǎng)過剩又使親魚體內(nèi)積累過多的脂肪，本發(fā)明以三種飼料輪換使用的方法，能有效地促使親魚性腺得到很好的發(fā)育。
(3)在受精卵的收集和處理步驟中，提供了排除壞卵和雜物的方法，能更精確的收集受精卵并進行稱重。
(4)通過本方法培育出的仔魚養(yǎng)殖性能好，肉質(zhì)鮮美，性價比高。
具體實施方式
以下將結(jié)合實施例對本發(fā)明的構(gòu)思及產(chǎn)生的技術(shù)效果進行清楚、完整的描述，以充分地理解本發(fā)明的目的、特征和效果。顯然，所描述的實施例只是本發(fā)明的一部分實施例，而不是全部實施例，基于本發(fā)明的實施例，本領(lǐng)域的技術(shù)人員在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下所獲得的其他實施例，均屬于本發(fā)明保護的范圍。
一種黑斑石斑魚的人工繁殖方法，包括以下步驟：
(1)親本選擇
a.雌性親本：選擇8齡以上、體重20-40kg、體型正常、無病害、活力強的黑斑石斑魚作為雌性親本。
b.雄性親本：選擇8齡以上、體重25-40kg、體型正常、無病害、活力強的黑斑石斑魚作為雄性親本。
(2)親本的培育池塘
培育親本的池塘面積為2畝，水深3－3.5m，設(shè)進、排水口各1個，培育密度75－100尾/畝，雌雄比例為1：(0.5-1)。
(3)非繁殖季節(jié)親魚的培育
a.飼料及投喂：飼料種類為冰凍的藍圓鲹、鮐魚，切成合適親魚口徑的小塊，每二天投喂飼料1次，每次投喂以親魚停止攝食為度，每次投喂量為親魚體重的2.5％－3.0％；
b.培育水溫與水質(zhì)控制：在熱帶地區(qū)取露天池塘的自然水溫進行親魚培育；
c.水質(zhì)管理：每三天換水1次，換水量為池塘水量的25％，保持水體透明度在35－45cm。作為優(yōu)選方案，水池需定期消毒、防?。好渴鞂τH魚池消毒防病1次，上旬用10％聚維銅碘溶液全池遍灑1次，使池塘水體呈0.1毫克/升濃度，中旬用二氧化氯全池遍灑1次，使池塘水體呈0.3毫克/升濃度，下旬用醋酸銅遍灑1次，使池塘水體呈0.5毫克/升濃度，防止細菌病、寄生蟲病的發(fā)生。
(4)繁殖前的強化培育
a.培育水溫：在熱帶地區(qū)，親魚的強化培育自11月至3月間進行，取自然水溫，11月份池塘水溫27－28℃開始，此后水溫逐漸下降，至1月份時，水溫為18－20℃，3月份時，水溫上升至23－24℃。作為優(yōu)選方案，將精液取出后，注入試管密封，4℃下暫存，備用，暫存的精液在一周內(nèi)仍有授精能力。作為另一個優(yōu)選方案，可選擇采用控溫池塘培育親魚，可摹仿自然水溫變化對水溫進行調(diào)節(jié)，即從水溫28℃開始進行強化培育，2個月內(nèi)逐漸將水溫降至18℃，然后，2個月內(nèi)將水溫逐漸升至25℃。
b.強化培育中飼料的種類與用量：飼料種類分三種，第一種是5份魷魚加1份牡蠣，第二種是人工軟顆粒飼料，含4份鰻魚粉加6份魚漿，混合后每公斤飼料添加維生素C 3克、維生素E 3克，制成軟顆粒投喂，第三種是鮐魚或藍圓鲹，三種飼料輪換使用，每三天投喂1次，每次投喂量為親魚體重的2.0％－3.0％，投喂時間在上午進行。強化培育部分在整個方法中尤為重要，由于黑斑石斑魚的性腺發(fā)育，需要有一個低溫培育過程，然后在水溫上升的過程中達到性腺成熟，并且，在上述降溫繼而升溫的過程，需要配合合適的營養(yǎng)，營養(yǎng)不足很難使親魚性腺快速發(fā)育，營養(yǎng)過剩又使親魚體內(nèi)積累過多的脂肪，本發(fā)明以三種飼料輪換使用的方法，能有效地促使親魚性腺得到很好的發(fā)育。
c.水質(zhì)管理：每5天換水1次，換水量為池塘水量的25％－30％，保持水體透明度在50cm以上。
(5)人工繁殖
a.催產(chǎn)時機的選擇：在熱帶地區(qū)，經(jīng)過強化培育的親魚一般三月份開始逐漸達到性腺成熟，日常管理中應(yīng)注意觀察，一旦發(fā)現(xiàn)親魚體色變深，即可進行人工催產(chǎn)。
b.催產(chǎn)劑與劑量：HCG-(200-400)單位+LHRH-(4-6)微克/kg體重，二種催產(chǎn)劑分別用0.6％氯化鈉溶液溶解后，混勻后使用。作為優(yōu)選方案，將300000單位HCG溶解在100ml0.6％氯化鈉溶液中，再將5000微克LHRH溶解在100ml0.6％氯化鈉溶液中，然后將二種溶液混合，每公斤親魚體重注射混合液0.2ml，注射時，先稱取親魚體重，根據(jù)體重計算用量。
c.注射方式：將親魚從培育池塘捕起，選擇腹部大、生殖孔微紅的個體進行藥物催產(chǎn)，采用腹腔注射方式，注射后，立即將親魚放回池塘，注射時間選擇在10:00-12:00時行；
d.親魚產(chǎn)卵：注射催產(chǎn)劑的次日可觀察到親魚產(chǎn)卵，親魚產(chǎn)卵通常在16:00-19:00進行，持續(xù)1-2h，開始時雄魚追逐雌魚，產(chǎn)卵時兩魚齊頭并進向前游動，突然身體垂直沖出水面，雌雄親魚同時完成產(chǎn)卵、排精，之后分開游動或下沉到池底；
(6)受精卵的收集與處理
收集受精卵時，在培育池的增氧機前5～6m處設(shè)置集卵網(wǎng)，利用增氧機開動產(chǎn)生的水流，將受精卵收集到集卵網(wǎng)內(nèi)，事先準備一洗卵盆，盆內(nèi)放一只20目的手抄網(wǎng)，將受精卵倒入手抄網(wǎng)里，讓受精卵從網(wǎng)目中濾下，撤去手抄網(wǎng)，這樣可除去大的雜物，然后用瓢在洗卵盆內(nèi)順時針輕輕地攪動，使水在盆內(nèi)旋轉(zhuǎn)，這樣可使大部分壞死的卵和一些雜物聚集在旋渦中央，再以一條軟管用虹吸法將聚集的壞卵和雜物去除，重復(fù)此法1～2次，用40目手抄網(wǎng)將受精卵撈起，新鮮海水洗一、二遍，稱重，放入孵化網(wǎng)箱內(nèi)。
其中，集卵網(wǎng)為一種小型張網(wǎng)，用80目尼龍篩絹網(wǎng)縫合而成，囊網(wǎng)長6m，囊口高1.2m，末端開口徑約0.4m，兩側(cè)各設(shè)長6m左右的翼網(wǎng)，翼網(wǎng)中間高1.2m，末端高0.9m，集卵網(wǎng)的上下綱分別系結(jié)浮子和沉子，設(shè)置在葉輪增氧機前方收集受精卵，一般集卵時間在1.0h左右，應(yīng)及時將受精卵取出，受精卵量大時，應(yīng)提前取出，然后繼續(xù)集卵，收取受精卵時，提取囊袋，將系在囊袋末端的繩子解開，準備一塑料桶，將受精卵流入桶里，迅速將收集到的受精卵帶到岸上作進一步處理。
作為優(yōu)選方案，排除壞卵和雜物的方法為：讓氣石停止充氣10～15min，正常的受精卵在停氣后會上浮，而死卵或未受精卵及少量雜物將沉于孵化桶的底部，開啟孵化桶底部的排水閥，緩慢排水，將死卵或未受精卵及雜物排出，一邊排水一邊檢查，當排出的水中出現(xiàn)正常受精卵時，則關(guān)閉排水閥，停止排水，恢復(fù)充氣，并向孵化桶補充海水至正常水位，同時，要將所排出的受精卵收集稱重，以便計算受精卵數(shù)量。
(7)受精卵的孵化
準備一個容積500L、底部設(shè)有排水閥的孵化桶，在孵化桶內(nèi)放置氣石充氣，將經(jīng)受精卵放入孵化桶中孵化，受精卵孵化條件為水溫23－30℃，鹽度28－33，pH7.8～8.5，孵化密度為250－300萬粒受精卵/m3，每2小時換水一次，每次換水量為孵化桶容積的一半，以保持孵化桶內(nèi)海水的清新，孵化過程中，發(fā)現(xiàn)其中有死卵或未受精卵要及時排除。
黑斑石斑魚的受精卵經(jīng)孵化8小時左右，胚胎發(fā)育至原腸期，即可將受精卵包裝、運輸至育苗場，受精卵在孵化24－26小時后，即可孵出仔魚，用于人工育苗。黑斑石斑魚受精卵的包裝運輸方法為尼龍袋充氧運輸法，一只70cm×40cm的尼龍袋，裝上過濾海水5－8L，約占尼龍袋容積的1/4，放入受精卵100g，排除袋內(nèi)空氣，充進氧氣并扎緊袋口，再用紙箱或泡沫塑料箱包裝好，立即裝上運輸工具。運輸受精卵過程中，氣溫較高時，包裝箱中可加上適量冰袋降溫，適宜的運輸溫度為24－25℃度。
上述對本發(fā)明的實施方式作了詳細說明，但是本發(fā)明并不限于上述實施方式，在本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員所具備的知識范圍內(nèi)，還可以在不脫離本發(fā)明宗旨的前提下作出各種變化。