一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑及其制備方法
【專利摘要】一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑及其制備方法，它涉及一種生物型種衣劑及其制備方法。本發(fā)明要解決目前施用農(nóng)藥解決土傳病害的方法有劇毒、不安全環(huán)保的問題。本發(fā)明的生物型種衣劑由發(fā)酵液、10g/L～50g/L的分散劑、9g/L～29g/L的載體和9g/L～19g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。方法：一、制備側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液；二、制備枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；三、加入分散劑、載體和成膜劑，混勻即得。本發(fā)明的生物種衣劑不含有任何高毒劇毒成分，安全環(huán)保，用于防治大豆根腐病和大豆孢囊線蟲病。本發(fā)明用于生物型種衣劑的制備。
【專利說明】一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種生物型種衣劑及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]大豆根腐病和大豆孢囊線蟲病在我國各大豆產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生，以東三省為重，具有危害重、難防治的特點，通常是高毒劇毒農(nóng)藥施用的對象，但是隨著人們安全環(huán)保意識的提高，高毒劇毒農(nóng)藥在農(nóng)業(yè)上的應用受到極大的限制。目前急需高效低毒的生物農(nóng)藥來解決土傳病害的危害問題。而種衣劑往往是防治土傳病害的主要劑型。目前還未見有利用側(cè)孢短芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌復配制成生物種衣劑的報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明的目的是為了解決目前施用農(nóng)藥解決土傳病害的方法有劇毒、不安全環(huán)保的問題，提供一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑及其制備方法。
[0004]本發(fā)明的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑由發(fā)酵液、10g/L~50g/L的分散劑、9g/L~29g/L的載體和9g/L~19g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。 [0005]本發(fā)明的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑的制備方法，按照以下步驟進行:
[0006]一、制備側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液；
[0007]二、制備枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；
[0008]三、將步驟一制備的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和步驟二制備的枯草芽孢桿菌發(fā)酵液按等比例混合后得發(fā)酵液，向發(fā)酵液中依次加入10g/L~50g/L的分散劑、9g/L~29g/L的載體和9g/L~19g/L的成膜劑,混合均勻后即得。
[0009]其中，所述的側(cè)抱短芽抱桿菌BL-21 (Brevibacillus laterosporus BL-21)來自保藏中心，保藏單位為中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國.武漢.武漢大學，保藏編號為CCTCC NO:M2013717，保藏時間為2013年12月26日；所述的枯草芽孢桿菌HNDF2(Bacillus subtilis HNDF2)來自保藏中心，保藏單位為中國典型培養(yǎng)物保藏中心，保藏地址為中國.武漢.武漢大學，保藏編號為CCTCC NO:M2013716，保藏時間為2013年12月26曰。
[0010]側(cè)抱短芽抱桿菌BL-21 (Brevibacillus laterosporus),又名側(cè)抱芽抱桿菌(Bacillus laterosporus)。
[0011]本發(fā)明中種衣劑助劑成分組成為分散劑、載體和成膜劑。
[0012]本發(fā)明包含以下有益效果:
[0013]本發(fā)明提供了一種利用兩種芽孢桿菌制備生物種衣劑的技術(shù)，是利用兩種芽孢桿菌的純發(fā)酵液混合后再加入助劑，制成生物型種衣劑，用于防治大豆根腐病和大豆孢囊線蟲病，本發(fā)明的生物種衣劑不含有任何高毒劇毒成分，安全環(huán)保，有較好的發(fā)展前景。【專利附圖】

【附圖說明】
[0014]圖1為大豆種子包衣效果圖。
【具體實施方式】
[0015]本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉【具體實施方式】，還包括各【具體實施方式】間的任意組合。
[0016]【具體實施方式】一:本實施方式的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑由發(fā)酵液、10g/L~50g/L的分散劑、9g/L~29g/L的載體和9g/L~19g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。
[0017]本實施方式的有益效果:
[0018]本實施方式提供了一種利用兩種芽孢桿菌制備生物種衣劑的技術(shù)，是利用兩種芽孢桿菌的純發(fā)酵液混合后再加入助劑，制成生物型種衣劑，用于防治大豆根腐病和大豆孢囊線蟲病，本實施方式的生物種衣劑不含有任何高毒劇毒成分，安全環(huán)保，有較好的發(fā)展前
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[0019]【具體實施方式】二:本實施方式與【具體實施方式】一不同的是:所述的分散劑為娃藻土。其它與【具體實施方式】一相同。 [0020]【具體實施方式】三:本實施方式與【具體實施方式】一或二不同的是:所述的載體為木質(zhì)素磺酸鈉。其它與【具體實施方式】一或二相同。
[0021]【具體實施方式】四:本實施方式與【具體實施方式】一至三之一不同的是:所述的成膜劑由海藻酸鈉、黃原膠和殼聚糖復配而成，其中海藻酸鈉、黃原膠和殼聚糖的質(zhì)量比為3:1:1。其它與【具體實施方式】一至三之一相同。
[0022]【具體實施方式】五:本實施方式與【具體實施方式】一至四之一不同的是:所述的防治大豆土傳病害的生物型種衣劑由發(fā)酵液、10g/L~30g/L的分散劑、9g/L~20g/L的載體和9g/L~15g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。其它與【具體實施方式】一至四之一相同。
[0023]【具體實施方式】六:本實施方式與【具體實施方式】一至五之一不同的是:所述的防治大豆土傳病害的生物型種衣劑由發(fā)酵液、15g/L的分散劑、10g/L的載體和10g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。其它與【具體實施方式】一至五之一相同。
[0024]【具體實施方式】七:本實施方式一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑的制備方法，按以下步驟進行:
[0025]一、制備側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液；
[0026]二、制備枯草芽孢桿菌發(fā)酵液；
[0027]三、將步驟一制備的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和步驟二制備的枯草芽孢桿菌發(fā)酵液按等比例混合后得發(fā)酵液，向發(fā)酵液中依次加入10g/L~50g/L的分散劑、9g/L~29g/L的載體和9g/L~19g/L的成膜劑,混合均勻后即得。
[0028]本實施方式的有益效果:
[0029]本實施方式制備方法簡單，易于操作。[0030]【具體實施方式】八:本實施方式與【具體實施方式】七不同的是:步驟一中所述的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖9.64g/L、蛋白胨12.15g/L、碳酸鈣2.44g/L、NaC14g/L、KH2PO40.2g/L和MnSO40.5g/L，調(diào)節(jié)pH值至5.5~8.5。其它與【具體實施方式】七相同。
[0031]【具體實施方式】九:本實施方式與【具體實施方式】七或八不同的是:步驟一中所述的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖5.27g/L、牛肉膏13.lg/L、碳酸鈣2.44g/L、NaC15.6g/L和MnSO40.35g/L，調(diào)節(jié)pH值至5.5~8.5。其它與【具體實施方式】七或八相同。
[0032]【具體實施方式】十:本實施方式與【具體實施方式】七至九之一不同的是:步驟一和步驟二中所述的發(fā)酵液的制備方法為:將側(cè)孢短芽孢桿菌BL-21和枯草芽孢桿菌HNDF2分別接種于牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基上，于30°C恒溫培養(yǎng)18h~24h后，每個試管倒入IOmL無菌水將菌苔洗下，用血球計數(shù)板計數(shù)，將濃度調(diào)至IO8個/mL待用，將上述制備好的菌懸液以體積比1/100的量分別移接到裝有50mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，于30°C、180r.rnirT1轉(zhuǎn)速下，震蕩培養(yǎng)48h。其它與【具體實施方式】七至九之一相同。
[0033]【具體實施方式】十一:本實施方式與【具體實施方式】七至十之一不同的是:所述的分散劑為硅藻土。其它與【具體實施方式】七至十之一相同。[0034]【具體實施方式】十二:本實施方式與【具體實施方式】七至十一之一不同的是:所述的載體為木質(zhì)素磺酸鈉。其它與【具體實施方式】七至十一之一相同。
[0035]【具體實施方式】十三:本實施方式與【具體實施方式】七至十二之一不同的是:所述的成膜劑由海藻酸鈉、黃原膠和殼聚糖復配而成，其中海藻酸鈉、黃原膠和殼聚糖的質(zhì)量比為3:1:1。其它與【具體實施方式】七至十二之一相同。
[0036]以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。
[0037]實施例一:
[0038]本實施例防治大豆土傳病害的生物型種衣劑的制備方法，按照以下步驟進行:
[0039]一、有效成分(發(fā)酵液)的制備
[0040]1、將側(cè)孢短芽孢桿菌BL-21和枯草芽孢桿菌HNDF2分別接種于牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基上，于30°C恒溫培養(yǎng)18h~24h后，每個試管倒入IOmL無菌水將菌苔洗下，用血球計數(shù)板計數(shù)，將濃度調(diào)至IO8個/mL待用；
[0041]2、將上述制備好的菌懸液以體積比1/100的量分別移接到裝有50mL側(cè)孢短芽孢桿菌和枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL的三角瓶中，于30°C、轉(zhuǎn)速為180r.mirT1的條件下震蕩培養(yǎng)48h ；
[0042]3、將上述制備好的側(cè)孢短芽孢桿菌BL-21發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌HNDF2發(fā)酵液按照體積比為1:1的比例混合均勻，即得生物型種衣劑的有效成分。
[0043]二、種衣劑的制備
[0044]1、種衣劑助劑成分組成為:硅藻土作為分散劑(15g/L)，木質(zhì)素磺酸鈉作為載體(10g/L)，成膜劑(10g/L)由海藻酸鈉、黃原膠、殼聚糖按照質(zhì)量比為3:1:1的比例復配而成；
[0045]2、將培養(yǎng)好的兩株芽孢桿菌發(fā)酵液等比例混合后，按順序加入上述分散劑、載體和成膜劑；
[0046]3、將酸性大紅按照5g/L的量加入種衣劑中，攪拌均勻，作為警戒色；
[0047]4、將配好的種衣劑按照種子質(zhì)量的4%~5%，即包100克種子用種衣劑的量為4mL~5mL,將大豆種子振搖包裹均勻后，晾干。
[0048]本實施例大豆種子包衣效果圖如圖1所示。
[0049]發(fā)明效果驗證試驗如下:
[0050]1、本實施例制備的生物型種衣劑各項指標測定
[0051]表1種衣劑產(chǎn)品各項指標測定結(jié)果
【權(quán)利要求】
1.一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑，其特征在于防治大豆土傳病害的生物型種衣劑由發(fā)酵液、10g/L~50g/L的分散劑、9g/L~29g/L的載體和9g/L~19g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑，其特征在于所述的分散劑為娃藻土。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑，其特征在于所述的載體為木質(zhì)素磺酸鈉。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑，其特征在于所述的成膜劑由海藻酸鈉、黃原膠和殼聚糖復配而成，其中海藻酸鈉、黃原膠和殼聚糖的質(zhì)量比為3:1:1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑，其特征在于所述的防治大豆土傳病害的生物型種衣劑由發(fā)酵液、10g/L~30g/L的分散劑、9g/L~20g/L的載體和9g/L~15g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑，其特征在于所述的防治大豆土傳病害的生物型種衣劑由發(fā)酵液、15g/L的分散劑、10g/L的載體和10g/L的成膜劑制成；其中所述的發(fā)酵液由等體積的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和枯草芽孢桿菌發(fā)酵液組成。
7.一種制備權(quán)利要求1所述的防治大豆土傳病害的生物型種衣劑的方法，其特征在于它包括以下步驟: 一、制備側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液； 二、制備枯草芽孢桿菌發(fā)酵液； 三、將步驟一制備的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵液和步驟二制備的枯草芽孢桿菌發(fā)酵液按等比例混合后得發(fā)酵液，向發(fā)酵液中依次加入10g/L~50g/L的分散劑、9g/L~29g/L的載體和9g/L~19g/L的成膜劑，混合均勻后即得。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑的制備方法，其特征在于步驟一中所述的枯草芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖9.64g/L、蛋白胨12.15g/L、碳酸鈣 2.44g/L、NaC14g/L、KH2PO40.2g/L 和 MnSO40.5g/L,調(diào)節(jié) pH 值至 5.5 ~8.5。
9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑的制備方法，其特征在于步驟一中所述的側(cè)孢短芽孢桿菌發(fā)酵培養(yǎng)基配方為:葡萄糖5.27g/L、牛肉膏13.1g/L、碳酸鈣 2.44g/L、NaC15.6g/L 和 MnSO40.35g/L，調(diào)節(jié) pH 值至 5.5 ~8.5。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種防治大豆土傳病害的生物型種衣劑的制備方法，其特征在于步驟一和步驟二中所述的發(fā)酵液的制備方法為:將側(cè)孢短芽孢桿菌BL-21和枯草芽孢桿菌HNDF2分別接種于牛肉膏蛋白胨斜面培養(yǎng)基上，于30°C恒溫培養(yǎng)18h~24h后，每個試管倒入IOmL無菌水將菌苔洗下，用血球計數(shù)板計數(shù)，將濃度調(diào)至IO8個/mL待用，將上述制備好的菌懸液以體積比1/100的量分別移接到裝有50mL發(fā)酵培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，于30°C、180r.rnirT1轉(zhuǎn)速下，震蕩培養(yǎng)48h。
【文檔編號】A01P3/00GK103875715SQ201410114051
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年3月25日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月25日
【發(fā)明者】杜春梅, 李曉明, 平文祥, 王莉莉, 范曉旭, 楊智越, 徐德陽 申請人:黑龍江大學