一種香石竹脫毒組培快繁方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種香石竹脫毒組培快繁方法，包括熱處理、外植體表面消毒、莖尖玻璃和莖尖培養(yǎng)等步驟；以香石竹植株葉腋間生出的側(cè)芽為外植體，乙醇和次氯酸鈉配合使用可以獲得充足的無菌外植體，外植體在誘導培養(yǎng)基上可以直接分成再生植株，植株的再生率達到67%；誘導培養(yǎng)基的配方為1LMS培養(yǎng)基中添加蔗糖25-35g、瓊脂5-8g、IAA1-3mg、NAA0.5-1.5mg、ZT0.5-2mg。
【專利說明】一種香石竹脫毒組培快繁方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及一種一種香石竹脫毒組培快繁方法，屬于植物組織培養(yǎng)領域。
【背景技術】
[0002]香石竹即康乃馨,又名獅頭石竹、磨香石竹、大花石竹、荷蘭石竹，為石竹科、石竹屬類植物?？的塑爸饕植加跉W洲溫帶以及中國大陸的福建、湖北等地，原產(chǎn)于地中海地區(qū)，康乃馨是肯尼亞的主要出口種類，也是美洲哥倫比亞最大的出口花卉品種，在亞洲的日本、韓國、馬來西亞等國都有大量栽培，在歐洲，德國、匈牙利、意大利、波蘭、西班牙、土耳其、英國和荷蘭等國栽培的規(guī)模都很大，是目前世界上應用最普遍的花卉之一?？的塑巴ǔｉ_重瓣花，花色多樣且鮮艷，氣味芳香，代表了健康和美好，從1907年起，開始以粉紅色康乃馨作為母親節(jié)的象征，故今常被作為獻給母親的花。
[0003]目前，康乃馨的市售前景非常樂觀，需求量極大。康乃馨通常用過扦插或組織培養(yǎng)進行大規(guī)模的人工育種，扦插的植株比較容易成活，但是需求大量的原始插穗才能進行；組織培養(yǎng)技術可以在短時間內(nèi)繁育大量的的微繁體，但是組織培養(yǎng)過程中的愈傷組織以及再生植株感染病毒或真菌的現(xiàn)象比較常見，影響種質(zhì)的質(zhì)量和繁育。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]針對現(xiàn)有技術存在的缺陷，本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種香石竹脫毒組培快繁的方法，降低植物組織培養(yǎng)過程中外植體、愈傷組織或再生芽的病毒污染現(xiàn)象，為微繁體繁殖提供充足的優(yōu)質(zhì)種質(zhì)資源。
[0005]為了達到上述目的，本發(fā)明采用如下技術方案:一種香石竹脫毒組培快繁方法，包括如下步驟:
(1)熱處理:將香石竹植株于36-38°C下熱處理一周，光強為3000-4000LX，光周期為 12h ；
(2)外植體表面消毒:以香石竹植株葉腋間生出的側(cè)芽為外植體,先用自來水沖洗30min,然后用體積濃度為75%的乙醇消毒30s,再用3%_5%的次氯酸鈉處理5_10min,最后用無菌蒸餾水清洗5次，用無菌吸水紙吸取多余的水分備用；
(3)莖尖剝離:切除葉片使芽體暴露，用消毒的解剖針剝離幼葉，直到只剩下2個最幼小的葉原基；
(4)莖尖培養(yǎng):將最后剩有2片幼葉的葉原基接種到誘導培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，每周轉(zhuǎn)接一次，5-7周即可獲得脫毒再生植株。
[0006]進一步的，步驟2中，所述的次氯酸鈉的濃度為4%，消毒時間為7min。
[0007]進一步的，步驟4中，所述的誘導培養(yǎng)基的配方為，IL MS培養(yǎng)基中添加蔗糖25_35g、瓊脂 5_8g、IAAl_3mg、NAA 0.5-1.5mg> ZT 0.5_2mg。
[0008]進一步的，步驟4中，所述的培養(yǎng)條件為溫度22_25°C，光強為1000_2000Lx，光周期為16h。[0009] 本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明所述的方法，香石竹的可以直接分化成再生植株，工序簡單、以操作，避免外植體形成愈傷組織再分化或芽生根中的不定因素影響，再生植株無病毒，可以短時間內(nèi)為香石竹提供充足的再生植株，植株的再生率達到67%。
【具體實施方式】
[0010]以下通過實施例進一步闡述本發(fā)明的有益效果:
實施例1:
一種香石竹脫毒組培快繁方法，包括如下步驟:
(1)熱處理:將香石竹植株于36-38°C下熱處理一周，光強為3000-4000LX，光周期為
12h ；
(2)外植體表面消毒:以香石竹植株葉腋間生出的側(cè)芽為外植體,先用自來水沖洗30min,然后用體積濃度為75%的乙醇消毒30s,再用4%的次氯酸鈉處理7min,最后用無菌蒸餾水清洗5次，用無菌吸水紙吸取多余的水分備用；
(3)莖尖剝離:切除葉片使芽體暴露，用消毒的解剖針剝離幼葉，直到只剩下2個最幼小的葉原基；
(4)莖尖培養(yǎng):將最后剩有2片幼葉的葉原基接種到誘導培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，每周轉(zhuǎn)接一次，培養(yǎng)條件為溫度22-25°C，光強為1000-2000LX，光周期為16h ;誘導培養(yǎng)基的配方為，IL MS培養(yǎng)基中添加蔗糖30g、瓊脂7g、IAAlmg、NAA 0.5mg、ZT 0.5mg ;共接種100個葉原基，其中有42個直接分化成再生植株，再生率為42%，有22個分化成叢生芽。
[0011]實施例2:
方法同實施例1，所不同的是，誘導培養(yǎng)基的配方為，IL MS培養(yǎng)基中添加蔗糖30g、瓊脂7g、IAA3mg、NAA 1.5mg、ZT 2mg ;共接種100個葉原基，其中有55個直接分化成再生植株，再生率為55%，有10個分化成叢生芽。
[0012]實施例3:
方法同實施例1，所不同的是，誘導培養(yǎng)基的配方為，IL MS培養(yǎng)基中添加蔗糖30g、瓊脂7g、IAAl.5mg、NAA 0.5mg、ZT Img ;共接種100個葉原基，其中有67個直接分化成再生植株，再生率為67%，有15個分化成叢生芽。
[0013]實施例4:
方法同實施例1，所不同的是，誘導培養(yǎng)基的配方為，IL MS培養(yǎng)基中添加蔗糖30g、瓊脂7g、IAA0.5mg、NAA 1.5mg、ZT Img ;共接種100個葉原基，其中有60個直接分化成再生植株，再生率為60%，有25個分化成叢生芽。
[0014]實施例5:
方法同實施例1，所不同的是，誘導培養(yǎng)基的配方為，IL MS培養(yǎng)基中添加蔗糖30g、瓊脂7g、IAAl.5mg、NAA lmg、ZT 1.5mg ;共接種100個葉原基，其中有61個直接分化成再生植株，再生率為61%，有18個分化成叢生芽。
[0015]上述實例只是為說明本發(fā)明的技術構(gòu)思以及技術特點，并不能以此限制本發(fā)明的保護范圍。凡根據(jù)本發(fā)明的實質(zhì)所做的等效變換或修飾，都應該涵蓋在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
【權利要求】
1.一種香石竹脫毒組培快繁方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)熱處理:將香石竹植株于36-38°C下熱處理一周，光強為3000-4000LX，光周期為12h ； (2)外植體表面消毒:以香石竹植株葉腋間生出的側(cè)芽為外植體,先用自來水沖洗30min,然后用體積濃度為75%的乙醇消毒30s,再用3%_5%的次氯酸鈉處理5_10min,最后用無菌蒸餾水清洗5次，用無菌吸水紙吸取多余的水分備用； (3)莖尖剝離:切除葉片使芽體暴露，用消毒的解剖針剝離幼葉，直到只剩下2個最幼小的葉原基； (4)莖尖培養(yǎng):將最后剩有2片幼葉的葉原基接種到誘導培養(yǎng)基上進行培養(yǎng)，每周轉(zhuǎn)接一次，5-7周即可獲得脫毒再生植株。
2.根據(jù)權利要求1所述的香石竹脫毒組培快繁方法，其特征在于，步驟2中所述的次氯酸鈉的濃度為4%，消毒時間為7min。
3.根據(jù)權利要求1所述的香石竹脫毒組培快繁方法，其特征在于，步驟4中所述的誘導培養(yǎng)基的配方為，IL MS培養(yǎng)基中添加蔗糖25-35g、瓊脂5-8g、IAAl_3mg、NAA 0.5-1.5mg、ZT 0.5_2mg。
4.根據(jù)權利要求1所述的香石竹脫毒組培快繁方法，其特征在于，步驟4中所述的培養(yǎng)條件為溫度22-25°C，光強為1000-2000LX，光周期為16h。
【文檔編號】A01H4/00GK103636493SQ201310588226
【公開日】2014年3月19日 申請日期:2013年11月21日 優(yōu)先權日:2013年11月21日
【發(fā)明者】張明 申請人:青島佰眾化工技術有限公司