專利名稱：一種含有可水培陸生植物的抑藻劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于抑藻劑這一技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
近年來，隨著人類活動的增加，湖泊、水庫富營養(yǎng)化日益嚴重，導致水華頻繁爆發(fā)，水資源的利用效能降低，水產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟因此遭受了巨大的損失，水環(huán)境安全也因此面臨著嚴重的威脅。因此，有效抑制富營養(yǎng)化水體中浮游藻類的過量生長及防止水華發(fā)生成為目前環(huán)境領(lǐng)域的研究熱點和前沿。在眾多控制藻類生長的方法中，傳統(tǒng)的物理、化學抑制藻類生長的方法會不可避免地破壞生態(tài)平衡并造成環(huán)境污染。而生物方法尤其是利用植物化感作用抑藻被認為是一種新型的生物抑藻技術(shù)，具有高效、生態(tài)安全性好等特點，因而頗受關(guān)注。目前對利用植物化感作用抑藻主要是集中于沉水、挺水和浮游植物的研究，但是水體中營養(yǎng)鹽的直接脅迫和毒害作用會造成沉水植物的消亡；維持淺水湖泊清水狀態(tài)的磷濃度通常為0.05-0.15 mg/L，當水體中的總磷濃度超過0.15 mg/L時，湖泊會開始從草型生態(tài)系統(tǒng)轉(zhuǎn)化為藻型生態(tài)系統(tǒng)。再者，由于浮游藻類大量生長，水生植物不但會受到各種環(huán)境因子的影響，而且會受到營養(yǎng)、光照等方面的沖擊而導致消亡，故要達到發(fā)揮抑藻效果的蓋度是較難實現(xiàn)的，從而無法有效控制有害藻類的過量增殖。同時，藍藻也會通過藻毒素等化感物質(zhì)的分泌影響水生植物的化感潛能。此外，水生植物又受季節(jié)和氣候的限制，因此水生植物化感抑藻在實際應(yīng)用中有一定的局限性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種含有可水培陸生植物的抑藻劑。本發(fā)明解決技術(shù)問題的技術(shù)方案為:一種含有可水培陸生植物的抑藻劑，所述的抑藻劑為蔥白的水提液。所述的蔥白的水提液通過以下方法制備:將蔥白和蒸餾水室溫浸提4-6天，在無菌條件下通過0.22 μ m的微孔濾膜過濾，所得的濾液；蔥白和蒸餾水質(zhì)量比為1:10。所述的抑藻劑為蔥葉水取物。所述的蔥葉的水提液通過以下方法制備:將蔥葉和蒸餾水室溫浸提4-6天，在無菌條件下通過0.22 μ m的微孔濾膜過濾，所得的濾液，蔥葉和蒸餾水質(zhì)量比為1:10。大蔥(Alliumfistulosum L.var.giganteam Makino)是常見的陸生植物，屬百合科蔥屬，是以葉鞘組成的肥大假莖和嫩葉為產(chǎn)品的2-3年生草本植物；大蔥在我國的栽培歷史長達3000余年，是世界上主要栽培大蔥的國家之一，它由蔥白和蔥葉組成。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，大蔥作為陸生植物的代表，是一種重要的藥材原料，其總提取物、蛋白成分、脂溶性成分及多糖成分均有抑菌能力。大蔥的蔥白的水提液和蔥葉的水提物具有非常好的抑藻性能，并且可以利用大蔥水培的特性在景觀池塘或在人工浮床進行栽植，既可以防止水華的發(fā)生，還可以美化環(huán)境甚至采集食用。


圖1為不同濃度的蔥白的水提液對銅綠微囊藻生長的影響。圖2為不同濃度的蔥葉的水提液對銅綠微囊藻生長的影響。圖3為不同濃度的蔥白、蔥葉水的水提液對銅綠微囊藻生長的抑制率(%)。在圖3中，a:10 mL/L蔥白水浸提液，b:30 mL/L蔥白水浸提液，c:50mL/L蔥白水浸提液，d: 10 mL/L蔥葉水浸提液，e:30 mL/L蔥葉水浸提液,f:50 mL/L蔥葉水浸提液。圖4為銅綠微囊藻細胞計數(shù)與熒光值的關(guān)系曲線。
具體實施例方式下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作詳細的說明。實驗材料:·
1.1銅綠微囊藻(Microcystisaeruginosa)和斜生柵藻(Scenedesmus obliquus)由中國科學院水生生物研究所藻種庫提供；采用BG-1l培養(yǎng)基培養(yǎng)。新鮮大蔥，購于蕪湖市菜市場。BG-1l培養(yǎng)基主要成分NaNO3,1.5 g/L ；K2HPO4 3H20,0.04 g/L ；MgS04 7H20,0.075 g/L ；CaCl2 2H20,0.036 g/L ;檸檬酸，0.006 g/L ;檸檬酸鐵銨，0.006 g/L ；EDTA,0.001 g/L ；Na2C03,0.02 g/L ；A5 solution,0.1 mL ；A5 solution 配方:H3B03，2.86 g/L ;MnCl2 4H20,1.86 g/L ；ZnSO4 7H20,0.22 g/L ；Na2MoO4 2H20,0.39 g/L ；CuSO4.5H20,0.08 g/L ；Co (NO3)2 6H20，0.05 g/L。1.2實驗前用對銅綠微囊藻進行擴大培養(yǎng)。培養(yǎng)條件為:光照強度4000 lx，光暗比為12h:12h，溫度(25±1)°C。每天搖動:Γ5次，使銅綠微囊藻細胞進入對數(shù)生長期。1.3測定方法銅綠微囊藻細胞計數(shù)采用血細胞計數(shù)板，熒光值測定采用熒光分光光度計。1.4數(shù)據(jù)處理化感物質(zhì)對藻類的抑制率(inhibition rate)公式為:IR = (1-N/N0) X 100%式中，IR—抑制率；N—加入浸提液組的熒光值；％—對照組的熒光值。將大蔥浸提液最終濃度與生長抑制率作一元線性回歸，求出半效應(yīng)濃度EC5tl(mL/L)。藻類的比增長率(specific growth rate)公式為:μ = In (Xn-Xlri) / (W1)式中，μ為比增長率分別為當天和I天前的熒光值；tn和V1分別對應(yīng)Xn和Xlri的培養(yǎng)時間(天數(shù))。數(shù)據(jù)采用Excel 2003軟件處理，各組間差異采用單因素方差分析(one-wayAN0VA)，P<0.05表示有顯著性差異，P<0.01表示有極顯著差異。實施例1:蔥白的水提液通過以下方法制備:將蔥白與蒸餾水室溫浸提4天，在無菌條件下通過0.22 μ m的微孔濾膜過濾，所得的濾液；蔥白和蒸餾水質(zhì)量比為1:10。所述的蔥葉的水提液通過以下方法制備:將蔥葉與蒸餾水室溫浸提4天，在無菌條件下通過0.22 μ m的微孔濾膜過濾，所得的濾液，蔥葉和蒸餾水質(zhì)量比為1:10。實施例2:藻密度與熒光值的關(guān)系曲線。取對數(shù)生長期的銅綠微囊藻，用BG-1l培養(yǎng)基稀釋成5個藻細胞密度梯度，用血球計數(shù)板計數(shù)，同時分別測熒光值。其結(jié)果如圖4所示:細胞密度與其熒光值存在著正相關(guān)關(guān)系(R2=0.9960)，故可以用熒光值來反映銅綠微囊藻的生長狀況。實施例3:不同濃度的大蔥蔥白、蔥葉水浸提液對銅綠微囊藻生長的影響。取對數(shù)生長期的銅綠微囊藻分別放入100 mL錐形瓶中，再加入不同稀釋倍數(shù)的BG-1l培養(yǎng)基使各組培養(yǎng)基最終濃度相等，藻細胞最終濃度均為5.0XlO5 cells/mL，藻液最終體積為50 mL。錐形瓶中蔥白或蔥葉的水提液的最終濃度分別為O、10 mL/L,30 mL/L、50 mL/L,同時設(shè)不加蔥白或蔥葉水提液的對照組(空白)，每組設(shè)3個平行，各組置于1.2相同條件下培養(yǎng)。每隔24h進行熒光值的測定，連續(xù)測定5d。

由圖1可知，蔥白的水提液各處理組從第Id開始，與對照組相比就具有顯著性差異，p〈0.05，且隨著蔥白的水提液濃度的增加以及處理時間的延長，實驗組熒光值和同期對照組相比差距愈顯著；而由圖2可知，蔥葉的水提液各處理組熒光值曲線與同期對照組相比至處理第3d后才表現(xiàn)為顯著性差異，但是其熒光值與相同濃度的蔥白的水提液各處理組相比也具有顯著性差異，P〈0.05，即蔥白的水提液對銅綠微囊藻的抑制作用明顯強于蔥葉的水提液。由圖3可知，蔥白的水提液各處理組隨著處理時間的延長，抑制率升高明顯，比較同期各處理組的抑制率，還可發(fā)現(xiàn)濃度越高，抑制率越高，濃度為50 mL/L處理組在第5d抑制率達到97.10% ；而對于蔥葉的水提液，濃度為50 mL/L處理組在第5d的抑制率是33.27%，蔥葉的水提液處理組抑制率明顯低于蔥白水浸提液。進一步說明蔥白的水提液對銅綠微囊藻的抑制作用明顯強于蔥葉水浸提液。EC50按照第5d計算，蔥白的水提液的抑制率達到了 50%以上，蔥葉的水提液的抑制率沒有達到50%，故只計算蔥白的水提液的半抑制濃度，結(jié)果為12.7 mL/L。從EC5tl值可以看出，蔥白的水提液具有非常強的抑藻能力。實施例4:不同濃度的大蔥蔥白、蔥葉水浸提液對銅綠微囊藻的比增長率的影響。表I大蔥蔥白水浸提液對銅綠微囊藻的比增長率的影響(%)
權(quán)利要求
1.一種含有可水培陸生植物的抑藻劑，其特征在于:所述的抑藻劑為蔥白的水提液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種含有可水培陸生植物的抑藻劑，其特征在于:所述的蔥白的水提液通過以下方法制備:將蔥白和蒸餾水室溫浸提4-6天，在無菌條件下通過·0.22 μ m的微孔濾膜過濾所得的濾液；蔥白和蒸餾水質(zhì)量比為1:10。
3.一種含有可水培陸生植物的抑藻劑，其特征在于:所述的抑藻劑為蔥葉水取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種含有可水培陸生植物的抑藻劑，其特征在于:所述的蔥葉的水提液通過以下方法制備:將蔥葉和蒸餾水室溫浸提4-6天，在無菌條件下通過·0.22 μ m的微孔濾膜過濾所得的濾液，蔥葉和蒸餾水質(zhì)量比為1:10。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種含有可水培陸生植物的抑藻劑，所述的抑藻劑為蔥白的水提液。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比，大蔥作為陸生植物的代表，是一種重要的藥材原料，其總提取物、蛋白成分、脂溶性成分及多糖成分均有抑菌能力。大蔥的蔥白的水提液和蔥葉的水提物具有非常好的抑藻性能，并且可以利用大蔥水培的特性在景觀池塘或在人工浮床進行栽植，既可以防止水華的發(fā)生，還可以美化環(huán)境甚至采集食用。
文檔編號A01P13/00GK103155959SQ201310059370
公開日2013年6月19日 申請日期2013年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2013年2月26日
發(fā)明者張庭廷, 周楊, 李源, 李 誠, 劉璐 申請人:安徽師范大學