專利名稱：一種白及種子的采集和保存方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種白及種子的采集和保存方法。
背景技術(shù)：
白及是蘭科植物白及Bletilla sfriata (Thunb.) Reiehb.f.的干燥塊莖，具有收斂止血，消腫生肌等功效，用于治療咯血，吐血，外傷出血，瘡瘍腫毒，皮膚皸裂等癥(國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部)[S].北京:中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010:95)。白及藥理作用廣泛，是一種常見的收斂止血中藥。吳久健等研究發(fā)現(xiàn)白及水溶性部位和正丁醇部位是其止血作用的主要有效部位，而乙酸乙酯部位主要起活血作用；他們進(jìn)一步研究表明白及正丁醇提取部位和水溶性部位可顯著升高腺苷二磷酸誘導(dǎo)的家兔血小板最大聚集率，而乙酸乙酯提取部 位可顯著抑制ADP誘導(dǎo)的血小板聚集(吳久健，袁孟良，鄒儷華，等.白及不同提取部位對(duì)小鼠止血活性實(shí)驗(yàn)研究表明[J].藥學(xué)實(shí)踐雜志，2011，29(3):206-209.)。除了止血作用，白及在臨床上還廣泛用于治療咳血、吐血、瘡瘍腫毒、皮膚皸裂、口腔枯膜病等病癥，療效顯著。除了在中藥復(fù)方中得到廣泛的應(yīng)用，白及已經(jīng)被制成各種中成藥，如白及顆粒、快胃片、云南白藥、復(fù)方白及膏等。作為天然高分子材料，功能緩釋性、局部滯留性、自身降解性、無(wú)刺激性、無(wú)毒副作用、資源豐富、廉價(jià)易得等輔料的特性，使白及膠成為目前用途最為廣泛的天然藥用輔料。除了在醫(yī)藥領(lǐng)域具有其他藥物不可替代的作用之外，白及還廣泛應(yīng)用于食品工業(yè)、煙草工業(yè)、化工行業(yè)(包括高檔美容產(chǎn)品)等。白及自古是美容良藥，被譽(yù)為“美白仙子”，在加上它一般無(wú)毒副作用，特別適合作為天然化妝品的功能組分。目前，很多以白及為原料的化妝品及日用品已經(jīng)走入市場(chǎng)，如仟尋一凡白及花細(xì)胞美顏霜、白及韓方手工香皂、白及花凈白原液等。以中藥白及制成的白及牙膏，可用于防治口腔潰瘍、咽喉腫痛、牙周炎、牙齦炎、防齲、口腔異味等口腔和牙科疾病，符合回歸自然、崇尚綠色的發(fā)展趨勢(shì)。在工業(yè)方面，白及還用作染布的粘合劑，是高級(jí)卷煙煙條粘合劑，野山參斷須修復(fù)劑，裱中國(guó)字畫粘合齊U，胃鏡檢查的保護(hù)劑，美容面膜等。白及良好的應(yīng)用價(jià)值是白及的用量不斷增加，資源也日益短缺。目前我國(guó)白及的產(chǎn)量難以滿足市場(chǎng)的需求，白及資源短缺的問(wèn)題制約了白及產(chǎn)業(yè)的發(fā)展，再加上自然界無(wú)限度的濫挖，使白及種質(zhì)逐年退化。石晶等(石晶，羅毅波，宋希強(qiáng).我國(guó)白芨市場(chǎng)調(diào)查與分析[J].中國(guó)園藝文摘，2010，(8):48-51)對(duì)我國(guó)白及栽培種植、經(jīng)營(yíng)銷售企業(yè)信息和藥用市場(chǎng)價(jià)格等進(jìn)行調(diào)查分析，結(jié)果顯示過(guò)度采挖和生境破壞導(dǎo)致白及野生資源量急劇下降。我國(guó)白及目前大多還是依賴野生，野生白及資源是有限的，越挖越少。連年的狂采濫挖，再加上自然災(zāi)害的影響，使野生白及產(chǎn)量急劇下降，供需矛盾日益擴(kuò)大，資源日益短缺。2007年白及市場(chǎng)需求量就已經(jīng)突破1500噸，2010年市場(chǎng)總需求量在2000噸以上，去年全年我國(guó)的白及總產(chǎn)量在80(Γ900噸之間，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足產(chǎn)業(yè)的需求。白及需求的進(jìn)一步拓寬，資源的逐年銳減，導(dǎo)致白及市場(chǎng)價(jià)格一直持續(xù)大幅攀升，且居高不下。20世紀(jì)80年代，白及屬于三類藥材小品種的白及藥用量不大，價(jià)格多在4元飛元上下浮動(dòng)。進(jìn)入20世紀(jì)90年代，隨著白及在中成藥中的配方應(yīng)用，其用量相應(yīng)增加，價(jià)格開始上揚(yáng)。但整個(gè)20世紀(jì)90年代，白及的需求相對(duì)穩(wěn)定，價(jià)格平穩(wěn)維持在8元 12元之間。進(jìn)入21世紀(jì)，科技飛速發(fā)展，白及的用途不再局限于醫(yī)藥領(lǐng)域，其價(jià)格也隨使用量的不斷增加而急速上升。從06年開始，白及價(jià)格逐步上漲，在09年下半年白及價(jià)格開始暴漲，2010年白及價(jià)格已經(jīng)升至140元每千克。在浙江省農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè)交流會(huì)上了解到，目前白及的市場(chǎng)平均價(jià)格超過(guò)160元每公斤，個(gè)別地方甚至高達(dá)200元每公斤。長(zhǎng)期以來(lái)，白及處于就地采收-就地留種-就地再栽培這樣的原始循環(huán)狀態(tài)。長(zhǎng)期反復(fù)地栽培，而白及本身卻因環(huán)境、自身等原因在不斷地發(fā)生變異，所以白及種質(zhì)根本無(wú)法保證其生長(zhǎng)性能和藥用性能。而且，目前尚未有白及種子種苗質(zhì)量方面系統(tǒng)的研究報(bào)道，目前白及資源開發(fā)利用瓶頸在于種源培植，其中白及種苗繁育技術(shù)現(xiàn)在國(guó)內(nèi)尚無(wú)大面積試驗(yàn)開展，小面積栽培以無(wú)性繁殖為主，可是無(wú)性繁殖無(wú)法短期內(nèi)提供足夠的種苗，沒有大規(guī)模種苗，大規(guī)模白及種植基地建設(shè)就是無(wú)源之水。為研究白及的種子資源，實(shí)現(xiàn)白及的快速繁殖，對(duì)白及種子進(jìn)行有效保存尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種白及種子采集和保存方法，該方法簡(jiǎn)便易行，成本低，可有效保持白及種子活力，進(jìn)一步為白及的人工繁殖奠定了良好的基礎(chǔ)。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一種白及種子的采集和保存方法，所述方法包括:(I)采集:取樣檢測(cè)白及蒴果中白及種子的生活力達(dá)到80%以上時(shí)，將白及的蒴果連果柄一起用剪刀剪下；在浙江，白及種子的采集 時(shí)間以8月中下旬至10月上旬為宜；(2)保存前處理:將采集的白及蒴果洗凈，先用75% (v/v)酒精消毒2 3min，無(wú)菌水沖洗，然后用0.1% (w/w) HgCl2消毒12 15min,無(wú)菌水沖洗,將蒴果表面水分吸干、裝入無(wú)菌紙袋，3(T35°C干燥至含水量小于15% (2°/Γ 5%)時(shí)，干燥完成；(3)保存:將干燥后的白芨蒴果置于密閉容器中保存。步驟(I)白及種子的生活力按如下方法進(jìn)行檢測(cè):取TTC用0.lmol/L pH7.2磷酸緩沖配制成0.5%的濃度，得到染色液，將白及種子加入到染色液中，40°C烘箱處理24h，然
后在光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)染色和未染色的種子，按以下公式計(jì)算得到白及種子的生活力:
權(quán)利要求
1.一種白及種子的采集和保存方法，所述方法包括: (1)采集:取樣檢測(cè)白及蒴果中白及種子的生活力達(dá)到80%以上時(shí)，將白及的蒴果連果柄一起用剪刀剪下； (2)保存前處理:將采集的白及蒴果洗凈，先用75%酒精消毒2 3min，無(wú)菌水沖洗，然后用0.1% HgCl2消毒12 15min,無(wú)菌水沖洗,將蒴果表面水分吸干、裝入無(wú)菌紙袋，3(T35°C干燥至含水量小于15%時(shí),干燥完成； (3)保存:將干燥后的白芨蒴果置于密閉容器中保存。
2.按權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(I)白及種子的生活力按如下方法進(jìn)行檢測(cè):取TTC用0.lmol /L pH7.2磷酸緩沖配制成0.5%的濃度，得到染色液，將白及種子從蒴果中取出，加入到染色液中，40°C烘箱處理24h，然后在光學(xué)顯微鏡下計(jì)數(shù)染色和未染色的種子，按以下公式計(jì)算得到白及種子的生活力:
3.按權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)在液氮中冷凍保存。
4.按權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)在室溫不超過(guò)25°C條件下保存。
5.按權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟(3)在4°C下低溫保存。
全文摘要
本發(fā)明提供了一種白及種子的采集和保存方法，所述方法包括取樣檢測(cè)白及蒴果中白及種子的生活力達(dá)到80%以上時(shí)，將白及的蒴果連果柄一起用剪刀剪下，將采集的白及蒴果洗凈，用75%酒精和0.1%HgCl2先后進(jìn)行消毒處理，再30~35℃干燥至含水量小于15%，置于密閉容器中保存。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在(1)種子的采集時(shí)間確切；如果白及種子采集過(guò)早，種子尚未成熟或成熟不完全，這樣的種子活力低，發(fā)芽率不高，即使能發(fā)芽，所發(fā)出的苗長(zhǎng)勢(shì)也欠佳；如果采集時(shí)間太晚，則蒴果破裂，一方面種子容易染菌，另一方面種子部分或全部飛掉，很難收集到優(yōu)質(zhì)的種子。(2)種子經(jīng)處理后保存方法簡(jiǎn)單實(shí)用，可有效保持白及種子的活力，具有廣闊的應(yīng)用前景。
文檔編號(hào)A01F25/00GK103081605SQ201210591638
公開日2013年5月8日 申請(qǐng)日期2012年12月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月30日
發(fā)明者丁志山, 蔣福升, 李偉平, 金波, 黃燕芬 申請(qǐng)人:浙江中醫(yī)藥大學(xué)