專利名稱：一種食用菌母種培養(yǎng)基及母種制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及食用菌的栽培領(lǐng)域，尤其涉及一種食用菌母種培養(yǎng)基及母種制作方法。
背景技術(shù)：
制種是食用菌生產(chǎn)過程中的重要步驟。食用菌菌種是指食用菌菌絲體(營養(yǎng)體)及其依附生長的培養(yǎng)原料。在生產(chǎn)上，食用菌菌種分為母種、原種和栽培種三個級別。三個級別菌種培養(yǎng)原料的配方組成差別較大。母種培養(yǎng)基一般以試劑、植物營養(yǎng)器官煮液調(diào)配而成，以試管或培養(yǎng)皿為容器，便于菌種的運輸和保藏；原種培養(yǎng)基一般以糧食顆粒、農(nóng)業(yè)下腳料為原料配制而成；栽培種培養(yǎng)基一般以農(nóng)業(yè)下腳料為原料調(diào)配而成；原種和栽培種一般以袋子或瓶子為容器。不同級別的菌種培養(yǎng)基的構(gòu)成一般是以利于菌絲體生長及利于轉(zhuǎn)接到下一級別為原則。不同于植物“種子”的概念，食用菌的“種”是菌絲體一級一級的擴大繁殖的培養(yǎng)物，這些培養(yǎng)物最后著生在栽培原料中長出子實體(菇)。一般一個母種可以轉(zhuǎn)接到數(shù)個到十?dāng)?shù)個原種，一個原種可以轉(zhuǎn)接到數(shù)十個栽培種，一個栽培種可以轉(zhuǎn)接到數(shù)十個栽培瓶/袋中，由此可見，一個母種可以決定成千上萬個栽培單元的收成情況。母種菌種在生產(chǎn)上，除要求母種培養(yǎng)基能滿足食用菌菌絲體生長外，還要求其來源易得、易處理、低成本。食用菌制種技術(shù) 是基于微生物學(xué)中純培養(yǎng)技術(shù)衍生而來，其技術(shù)特征體現(xiàn)在培養(yǎng)基配方的選擇和配比上，或者在對菌絲體的轉(zhuǎn)接操作上。為適應(yīng)不同類型食用菌生長需要，培養(yǎng)基配方的選擇是多種多樣的，從各種農(nóng)副產(chǎn)品、下腳料到動植物器官組織，都可以成為食用菌培養(yǎng)基配方。另外，不同的制種目的也影響培養(yǎng)基的選擇，甚至是菌種轉(zhuǎn)接操作。例如制成生產(chǎn)用的菌種，一般會使菌絲體過渡在營養(yǎng)物“由貧入富”的培養(yǎng)基中，而制作保藏用的菌種時，情況則剛好相反。食用菌母種培養(yǎng)基的通用基礎(chǔ)配方是馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基去皮馬鈴薯200g(煮熟取其湯汁)，葡萄糖20g，瓊脂20g，水1000mL，pH自然。此外還有營養(yǎng)加富型的綜合馬鈴薯葡萄糖培養(yǎng)基、馬鈴薯麥麩綜合培養(yǎng)基、馬鈴薯蛋白胨綜合培養(yǎng)基和馬鈴薯酵母粉綜合培養(yǎng)基等配方，它們是在馬鈴薯培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上，添加磷酸二氫鈉、硫酸鎂、維生素B、蛋白胨、酵母提取粉等試劑調(diào)配而成。某些對pH有要求的食用菌，如草菇，則需要進行培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)。此外，母種培養(yǎng)基也用于野生食用菌的組織分離中。此時配方中還可能添加植物根莖煮液、泥土煮液乃至動物(昆蟲)煮液等。視乎不同野生食用菌需求和試驗摸索。高粱、小米等谷物富含淀粉和蛋白質(zhì)，能為食用菌提供足夠的碳源和氮源營養(yǎng)，且顆粒分散性好，有利于菌絲在新的培養(yǎng)料中快速、面廣地定植，因此在制種生產(chǎn)上經(jīng)常用于作為原種(二級種)培養(yǎng)基。在其制作過程中，涉及把高粱用水煮透至無白心這一過程。但目前高粱煮液通常都是直接棄去而未加任何改造利用，造成浪費
發(fā)明內(nèi)容
針對以上不足，本發(fā)明提供一種環(huán)保、通用性強、節(jié)省試劑及配方簡單、成本低廉的母種培養(yǎng)基，還提供一種制作過程簡單方便的母種培養(yǎng)基制作方法及母種制作方法。本發(fā)明通過以下方案達到上述目的
一種食用菌母種培養(yǎng)基，包括高粱煮液及2%質(zhì)量體積比的瓊脂。一種制作上述食用菌母種培養(yǎng)基的方法，包括以下步驟
(1)制作高粱煮液取紅高粱顆粒，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液；
(2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，分裝后高溫高壓滅菌以后得食用菌母種培養(yǎng)基。優(yōu)選的，上述制作方法包括以下步驟
(1)制作高粱煮液取谷粒飽滿的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持45-60min，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液；
(2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，分裝入玻璃試管，加入量為試管長度的1/4，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母種培養(yǎng)基。另一種食用菌母種培養(yǎng)基，包括高粱煮液及2%質(zhì)量體積比的瓊脂及2%質(zhì)量體積比的無水葡萄糖。一種制作上述另一種食用菌母種培養(yǎng)基的方法，包括以下步驟
(1)制作高粱煮液取紅高粱顆粒，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液；
(2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，再加入質(zhì)量體積比為2%的無水葡萄糖，攪拌均勻，分裝后高溫高壓滅菌以后得食用菌母種培養(yǎng)基。優(yōu)選的，上述制作另一種食用菌母種培養(yǎng)基的方法包括以下步驟
(1)制作高粱煮液取谷粒飽滿的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持45-60min，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液；
(2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，再加入質(zhì)量體積比為2%的無水葡萄糖，攪拌均勻，分裝入玻璃試管，加入量為試 管長度的1/4，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母種培養(yǎng)基。優(yōu)選的，上述所有方法中的步驟(2)中的分裝入18X 180mm的玻璃試管中，加入量為試管長度的1/4,分裝完成后以娃膠塞塞好試管。
優(yōu)選的，上述所有方法中的步驟(I)中按照高粱水的質(zhì)量體積比為1:3比例混合高粱顆粒和水時，不斷攪拌和補充熱水。一種利用前面所述的所有食用菌母種培養(yǎng)基進行食用菌母種的制作方法，包括將無污染食用菌母種轉(zhuǎn)接至食用菌母種培養(yǎng)基中，再置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。優(yōu)選的，上述食用菌母種的制作方法，包括選取培養(yǎng)基未出現(xiàn)干縮現(xiàn)象的健康無污染食用菌母種，用接種鏟截取大小均勻的種塊，在無菌操作狀態(tài)下轉(zhuǎn)接至高粱煮液斜面培養(yǎng)基中，將接種完成的斜面正面放置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。本發(fā)明通過以下的驗證試驗來驗證本發(fā)明的母種培養(yǎng)基的及制作的母種的效果1、試驗材料
I)培養(yǎng)基的選取分別選取實施例1、2、3、4的食用菌母種培養(yǎng)基，另選取商品化的PDA培養(yǎng)基(配方為馬鈴薯(提取浸出粉)300g、葡萄糖20g、瓊脂15g、氯霉素0.1g)作為對照，標(biāo)記為C。 2)選取菌種及接種選擇健康無污染的靈芝(學(xué)名fefloofe/ma標(biāo)記為Gl )、杏鮑燕{學(xué)^iPleurotus erjTwii，標(biāo)記為 Pe)、茶樹燕(學(xué)名cylingracea,標(biāo) 記為Ac)母種各一只，分別取大小相近的接種塊接種在上述五種斜面培養(yǎng)基上，每一個菌種每一個配方的斜面培養(yǎng)基接種三支(即設(shè)立三個重復(fù))。2、試驗方法
所有接種完成的試管放置在25±1°C避光培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)3d，待菌絲體前端形成平整一致的菌絲邊緣線時，即可記錄劃線作為菌絲生長速度起始線。而后每隔24h記錄一次菌絲邊緣線，連續(xù)記錄7d，取前5個記錄作為統(tǒng)計數(shù)據(jù)。3、數(shù)據(jù)記錄及計算
計算各個食用菌品種在不同培養(yǎng)基配方上的平均生長速度，結(jié)果如圖1所示，并拍照記錄結(jié)果。觀察靈芝、杏鮑菇、茶樹菇在五種斜面培養(yǎng)基中的接種第20天的菌絲體外觀，結(jié)果分別如圖2、3、4所示。從圖中可看出，沒有發(fā)現(xiàn)異常菌絲生長現(xiàn)象，并且實際上，菌絲體在之前已滿管，而不是第20天才滿管。由圖1可以看出，靈芝、杏鮑菇、茶樹菇這三種常見食用菌可以在含高粱煮液的斜面培養(yǎng)基上正常生長。就菌絲體平均長速而言，靈芝菌絲體在料水比小(高粱水的質(zhì)量體積比=1:12，即實施例1和2)的斜面培養(yǎng)基上的生長速度要快于料水比大的配方(高粱水的質(zhì)量體積比=1:3，即實施例3和4)，也比在商品化的試劑制成的培養(yǎng)基(標(biāo)號C)上生長的速度快；在料水比小的配方中，加入葡萄糖促進了靈芝菌絲體的生長，而在料水比大的配方中，不加入葡萄糖的配方中菌絲體長速比加入葡萄糖的配方要快；在料水比大的配方中，不加入葡萄糖的配方其上面的菌絲體生長速度近似于商品化試劑培養(yǎng)基，而加入葡萄糖的情況則比商品化試劑培養(yǎng)基上的更慢。在料水比大小的比較中，杏鮑菇的菌絲生長速度也出現(xiàn)類似靈芝的情況；在兩個料水比配方中，不加入葡萄糖的配方能讓菌絲生長得更快；料水比大的配方中，不加入葡萄糖的配方其上面的菌絲體生長速度近似于商品化試劑培養(yǎng)基，而加入葡萄糖的情況則比商品化試劑培養(yǎng)基上的更慢。
茶樹菇則在各配方中表現(xiàn)出相近的生長速度。綜上所述，結(jié)果顯示，使用料水比小的高粱煮液配方，更適合食用菌生長。而葡萄糖的加入與否，則需視不同種類的食用菌而定。各品種的差異顯著性分析顯示，對于實驗所選的靈芝品種，選擇料水小且添加葡萄糖的配方最佳；對于實驗所選杏鮑菇品種，選擇料水小且不添加葡萄糖的配方最佳；對于實驗所選茶樹菇品種，選擇料水比小的配方即可(添加與不添加葡萄糖的結(jié)果差異不顯著)。本發(fā)明利用高粱原種制備過程中產(chǎn)生的高粱煮液為原料，在控制高粱料水比的基礎(chǔ)上，調(diào)配制成了適合多種食用菌生長的母種培養(yǎng)基。在此之前，高粱煮液在菌種生產(chǎn)中一直是作為廢液被直接丟棄的，因此，本發(fā)明可以其在制作原種培養(yǎng)基的同時制作母種培養(yǎng)基。目前為止，還未發(fā)現(xiàn)利用高粱煮液作為食用菌母種配方的相關(guān)報道。本發(fā)明的優(yōu)點在于
I)提高原料利用率、降低成本本發(fā)明以高粱的煮液為主要成分，添加瓊脂粉、或者可選擇地添加葡萄糖等成分制成。高粱培養(yǎng)基是食用菌原種生產(chǎn)中的一個經(jīng)典培養(yǎng)基，但通常高粱煮液都是作為廢液直接棄去而未加任何改造利用。利用生產(chǎn)原種時的高粱煮液來制作母種，一方面提供了原料的利用率；另一方面，能節(jié)省另外采用馬鈴薯、蛋白胨、酵母提取粉等試劑，從而降低了生產(chǎn)成本。2)制作簡單、節(jié)省工時勞力高粱培養(yǎng)基作為食用菌原種生產(chǎn)中的一個經(jīng)典原種培養(yǎng)基，在其制作過程中，已經(jīng)涉及了把高粱用水煮透至無白心這一過程，產(chǎn)生的高粱煮液通常都直接丟棄，本發(fā)明將制作高粱原種培養(yǎng)基的副產(chǎn)品高粱煮液利用來做母種培養(yǎng)基，因此可實現(xiàn)原種、母種同時制作，制作簡單，且節(jié)省工時及勞力。

3)通用性強由于大多數(shù)木腐型食用菌(如靈芝、杏鮑菇、猴頭菇、金針菇等)都可采用高粱培養(yǎng)基培養(yǎng)，因此以高粱煮液為主要成分的母種培養(yǎng)基也適用于這些食用菌。4)利于后續(xù)制種食用菌菌種的擴大繁殖過程，是一個讓菌絲體在不同質(zhì)地培養(yǎng)料中過渡，逐步適應(yīng)原生培養(yǎng)料(木料或草料)的過程。母種階段的培養(yǎng)基大多由試劑構(gòu)成，其營養(yǎng)豐富易得，因此食用菌菌絲體生長快速。而原種和栽培種培養(yǎng)基多是糧食、農(nóng)業(yè)下腳料等含大分子物質(zhì)為主的營養(yǎng)源，需要菌絲體自己分泌各種水解酶，進而吸收利用。因此每一級別的擴繁，也是一個讓菌絲體適應(yīng)不同培養(yǎng)料的過程。但是，由于本發(fā)明中的母種培養(yǎng)基中的主要成分與原種來源一致，都來自高粱，因此更容易讓菌絲體在擴繁當(dāng)中適應(yīng)新培養(yǎng)原料。


圖1為三種食用菌在五種斜面培養(yǎng)基上的生長速度比較結(jié)果U =0.05，DuccanX圖2為靈芝在五種斜面培養(yǎng)基中的接種第20天的菌絲體外觀。圖3為杏鮑菇在五種斜面培養(yǎng)基中的接種第20天的菌絲體外觀。圖4為茶樹菇在五種斜面培養(yǎng)基中的接種第20天的菌絲體外觀。
具體實施例方式以下結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步說明。
實施例1 :制作食用菌母種1、制作高粱煮液取谷粒飽滿、無蟲蛀的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:12，混合高粱顆粒和水，高粱和水的用量視母種試管的尺寸和數(shù)量確定，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持60min，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液。2、制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂條，加熱至瓊脂條熔解，分裝入18X 180mm的玻璃試管中，加入量為試管長度的1/4，分裝完成后以硅膠塞塞好試管，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母種培養(yǎng)基。3、制作食用菌母種選取培養(yǎng)基未出現(xiàn)干縮現(xiàn)象的健康無污染食用菌母種，用接種鏟截取大小均勻的種塊，在無菌操作狀態(tài)下轉(zhuǎn)接至高粱煮液斜面培養(yǎng)基中，將接種完成的斜面正面放置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。實施例2 :制作食用菌母種1、制作高粱煮液取谷粒飽滿、無蟲蛀的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:12，混合高粱顆粒和水，高粱和水的用量視母種試管的尺寸和數(shù)量確定，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持55min，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液。2、制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂條，加熱至瓊脂條熔解，再加入質(zhì)量體積比為2%的無水葡萄糖，攪拌均勻，分裝入18X 180mm的玻璃試管中，加入量為試管長度的1/4，分裝完成后以硅膠塞塞好試管，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母
種培養(yǎng)基。3、制作食用菌母種選取培養(yǎng)基未出現(xiàn)干縮現(xiàn)象的健康無污染食用菌母種，用接種鏟截取大小均勻的種塊，在無菌操作狀態(tài)下轉(zhuǎn)接至高粱煮液斜面培養(yǎng)基中，將接種完成的斜面正面放置于避 光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。實施例3 :制作食用菌母種1、制作高粱煮液取谷粒飽滿、無蟲蛀的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3，混合高粱顆粒和水，高粱和水的用量視母種試管的尺寸和數(shù)量確定，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持45min，期間不斷攪拌和補充熱水，注意勿讓其過度粘稠而使料板結(jié)或干燒，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液。2、制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉，加熱至瓊脂粉熔解，分裝入18 X 180mm的玻璃試管中，加入量為試管長度的1/4，分裝完成后以硅膠塞塞好試管，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母種培養(yǎng)基。3、制作食用菌母種選取培養(yǎng)基未出現(xiàn)干縮現(xiàn)象的健康無污染食用菌母種，用接種鏟截取大小均勻的種塊，在無菌操作狀態(tài)下轉(zhuǎn)接至高粱煮液斜面培養(yǎng)基中，將接種完成的斜面正面放置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。實施例4 :制作食用菌母種1、制作高粱煮液取谷粒飽滿、無蟲蛀的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3，混合高粱顆粒和水，高粱和水的用量視母種試管的尺寸和數(shù)量確定，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持50min，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液。2、制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂條，加熱至瓊脂條熔解，再加入質(zhì)量體積比為2%的無水葡萄糖，攪拌均勻，分裝入18X 180mm的玻璃試管中，加入量為試管長度的1/4，分裝完成后以硅膠塞塞好試管，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母
種培養(yǎng)基。 3、制作食用菌母種選取培養(yǎng)基未出現(xiàn)干縮現(xiàn)象的健康無污染食用菌母種，用接種鏟截取大小均勻的種塊，在無菌操作狀態(tài)下轉(zhuǎn)接至高粱煮液斜面培養(yǎng)基中，將接種完成的斜面正面放置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。以上所述，僅為本發(fā)明的較佳的具體實施例，但本發(fā)明的保護范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種食用菌母種培養(yǎng)基，其特征在于，包括高粱煮液及2%質(zhì)量體積比的瓊脂。
2.如權(quán)利要求1所述的一種食用菌母種培養(yǎng)基，其特征在于，還包括2%質(zhì)量體積比的無水葡萄糖。
3.一種制作如權(quán)利要求1所述的食用菌母種培養(yǎng)基的方法，其特征在于，包括以下步驟 (O制作高粱煮液取紅高粱顆粒，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液； (2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，分裝后高溫高壓滅菌以后得食用菌母種培養(yǎng)基。
4.如權(quán)利要求3所述的制作方法，其特征在于，包括以下步驟 (O制作高粱煮液取谷粒飽滿的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持45-60min，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液； (2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，分裝入玻璃試管，加入量為試管長度的1/4，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母種培養(yǎng)基。
5.一種制作如權(quán)利要求2所述的食用菌母種培養(yǎng)基的方法，其特征在于，包括以下步驟 (1)制作高粱煮液取紅高粱顆粒，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液； (2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，再加入質(zhì)量體積比為2%的無水葡萄糖，攪拌均勻，分裝后高溫高壓滅菌以后得食用菌母種培養(yǎng)基。
6.如權(quán)利要求5所述的制作方法，其特征在于，包括以下步驟 (O制作高粱煮液取谷粒飽滿的紅高粱顆粒，自來水洗凈，加水至超過高粱顆粒后浸泡過夜，浙干多余水分，按高粱水的質(zhì)量體積比為1:3和1:12兩個比例，混合高粱顆粒和水，加熱高粱顆粒和水至煮沸，再保持45-60min，煮至高粱顆粒掰開不見白心為止，除去高粱顆粒以后得高粱煮液； (2)制作食用菌母種培養(yǎng)基將高粱煮液經(jīng)兩層濾布過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，再加入質(zhì)量體積比為2%的無水葡萄糖，攪拌均勻，分裝入玻璃試管，加入量為試管長度的1/4，在121°C、0.1MPa條件下高溫高壓滅菌30min，滅菌結(jié)束后傾斜擺放試管，凝固后得食用菌母種培養(yǎng)基。
7.如權(quán)利要求3-6中任意權(quán)利要求所述的制作方法，其特征在于，所述步驟(2)中的分裝入18X 180mm的玻璃試管中，加入量為試管長度的1/4，分裝完成后以硅膠塞塞好試管。
8.如權(quán)利要求3-6中任意權(quán)利要求所述的制作方法，其特征在于，所述步驟(I)中按照高粱水的質(zhì)量體積比為1:3比例混合高粱顆粒和水時，不斷攪拌和補充熱水。
9.一種利用權(quán)利要求1或2中的食用菌母種培養(yǎng)基進行食用菌母種的制作方法，其特征在于，包括將無污染食用菌母種轉(zhuǎn)接至食用菌母種培養(yǎng)基中，再置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
10.如權(quán)利要求9所述的一種食用菌母種制作方法，其特征在于，包括選取培養(yǎng)基未出現(xiàn)干縮現(xiàn)象的健康無污染食用菌母種，用接種鏟截取大小均勻的種塊，在無菌操作狀態(tài)下轉(zhuǎn)接至高粱煮液斜面培養(yǎng)基中，將接種完成的斜面正面放置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。
全文摘要
本發(fā)明涉及食用菌栽培領(lǐng)域，尤其涉及一種食用菌母種培養(yǎng)基及母種制作方法。一種食用菌母種培養(yǎng)基，包括高粱煮液及2%質(zhì)量體積比的瓊脂，還可選擇性地包括2%的無水葡萄糖。其制作方法包括以下步驟(1)制作高粱煮液；(2)將高粱煮液過濾，按照質(zhì)量體積比2%加入瓊脂粉或瓊脂條，加熱至瓊脂粉或瓊脂條熔解，或可選擇性地加入2%的無水葡萄糖，制作成食用菌母種培養(yǎng)基。一種利用上述食用菌母種培養(yǎng)基進行食用菌母種的制作方法，包括將無污染食用菌母種轉(zhuǎn)接至食用菌母種培養(yǎng)基中，再置于避光培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。本發(fā)明的優(yōu)點在于1)提高原料利用率、降低成本。2)制作簡單、節(jié)省工時勞力。3)通用性強。4)利于后續(xù)制種。
文檔編號C05G3/00GK103030459SQ20121048634
公開日2013年4月10日 申請日期2012年11月26日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月26日
發(fā)明者張一帆, 胡惠萍, 楊小兵, 周振輝, 陳多揚, 邵滿超, 袁啟華, 夏鳳娜, 黃龍花 申請人:廣東省微生物研究所, 廣東粵微食用菌技術(shù)有限公司