專利名稱:一種酒糟型生物有機(jī)肥的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及肥料技術(shù)領(lǐng)域,具體來(lái)就涉及一種生物有機(jī)肥的制備方法。
背景技術(shù):
固態(tài)白酒丟糟(即酒糟)是白酒生產(chǎn)的主要副產(chǎn)物,也是白酒生產(chǎn)的主要污染物。據(jù)統(tǒng)計(jì),丟糟的產(chǎn)生量是白酒產(chǎn)量的4-8倍,目前僅中國(guó)需處理的丟糟達(dá)5000萬(wàn)噸以上。因此,酒糟的綜合利用對(duì)資源開發(fā)和環(huán)境保護(hù)具有十分重要的意義。一方面由于一般采用高粱、小麥等原料,丟糟中含有豐富的蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素以及各種微量元素等,為固態(tài)白酒丟糟的綜合利用提供了良好的條件。另一方面由于生產(chǎn)工藝特殊,丟糟的酸度高,易腐敗變質(zhì),若不及時(shí)處理,必然嚴(yán)重污染環(huán)境。根據(jù)酒糟的特點(diǎn),人們對(duì)其資源化利用進(jìn)行了多方面的研究。目前,酒糟作為肥料普遍采用自然堆肥的方法,存在反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)、臭味大、利用 率低等特點(diǎn)。煙曲霉05/7從爐77狀fumigatus^, CICC 2434,保藏于中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏中心,可同時(shí)分解纖維素、半纖維素,兼具生命力強(qiáng)、降解效果突出的優(yōu)勢(shì)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服上述缺點(diǎn)而提供的一種生產(chǎn)周期短、臭味小、利用率高的酒糟型生物有機(jī)肥的制備方法。一種酒糟型生物有機(jī)肥的制備方法,包括步驟如下
(I)煙曲霉fumigatus)種子培養(yǎng)液的制備
a、種子培養(yǎng)基配制
馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基馬鈴薯200g,葡萄糖20g,自來(lái)水1000ml,pH自然;制法馬鈴薯去皮后,切成小塊,加水煮爛(煮沸2(T30min,能被玻璃棒戳破即可),用4層紗布過(guò)濾,再加糖和瓊脂,加熱融化后再補(bǔ)充水分至1000ml,121°C下滅菌20min ;
馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15 20g,自來(lái)水1000ml,pH自然;制法馬鈴薯去皮后,切成小塊,加水煮爛(煮沸2(T30min,能被玻璃棒戳破即可),用
4層紗布過(guò)濾,再加糖和瓊脂,加熱融化后再補(bǔ)充水分至1000ml,121°C下滅菌20min ;
b、種子復(fù)活
將煙曲霉在無(wú)菌環(huán)境中接種至馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基,45 °C恒溫條件下靜止培養(yǎng)
72h ;
C、種子活化
將復(fù)活后的煙曲霉在無(wú)菌環(huán)境下接種至馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基,在45°C恒溫條件下靜止培養(yǎng)72h ;d、種子擴(kuò)培
將活化后的菌種在無(wú)菌環(huán)境中用接種環(huán)接3飛環(huán)至馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基,在45°C恒溫條件下培養(yǎng)72h后即為煙曲霉種子培養(yǎng)液;
(2)生物有機(jī)肥的制備按酒糟與水質(zhì)量比I: f 1:2混合均勻得培養(yǎng)基基質(zhì),按液固比ml/g接種2 6%的煙曲霉種子培養(yǎng)液,通氣量15 30%,42 48°〇下培養(yǎng)4 7天即可。本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比,具有明顯的有益效果,從以上技術(shù)方案可知選用煙曲霉{Aspergillus fumigatus)對(duì)酒糟進(jìn)行預(yù)處理,可使酒糟中纖維素、半纖維素得以降解,縮短酒糟型生物有機(jī)肥的生產(chǎn)周期,對(duì)酒糟的綜合利用提供有利條件。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例I 一種酒糟型生物有機(jī)肥的制備方法,包括步驟如下
(1)煙曲霉(Aspergillusfumigatus')種子培養(yǎng)液的制備
a、種子培養(yǎng)基配制
馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基馬鈴薯200g,葡萄糖20g,自來(lái)水1000ml,pH自然;制法馬鈴薯去皮后,切成小塊,加水煮爛(煮沸2(T30min,能被玻璃棒戳破即可),用4層紗布過(guò)濾,再加糖和瓊脂,加熱融化后再補(bǔ)充水分至1000ml,121°C下滅菌20min ;
馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15 20g,自來(lái)水1000ml,pH自然;制法馬鈴薯去皮后,切成小塊,加水煮爛(煮沸2(T30min,能被玻璃棒戳破即可),用
4層紗布過(guò)濾,再加糖和瓊脂,加熱融化后再補(bǔ)充水分至1000ml,121°C下滅菌20min ;
b、種子復(fù)活
將購(gòu)于中國(guó)工業(yè)微生物菌種保藏中心煙曲霉0^/76 /^777心fumigatus'), CICC 2343,在無(wú)菌環(huán)境中接種至馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基,45°C恒溫條件下靜止培養(yǎng)72h ;
C、種子活化
將復(fù)活后的煙曲霉在無(wú)菌環(huán)境下接種至馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基,在45°C恒溫條件下靜止培養(yǎng)72h ;d、種子擴(kuò)培
將活化后的菌種在無(wú)菌環(huán)境中用接種環(huán)接3飛環(huán)至馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基,在45°C恒溫條件下培養(yǎng)72h后即為煙曲霉種子培養(yǎng)液;
(2)生物有機(jī)肥的制備
稱取30g酒糟,加入水45g,接種3ml煙曲霉種子培養(yǎng)液,攪拌均勻,通氣量20% (液面占整個(gè)發(fā)酵容器的體積),42°C下發(fā)酵4天即得。按下述方法測(cè)定所得生物有機(jī)肥中pH值、E4/E6值、氨態(tài)氮、有機(jī)質(zhì)、發(fā)芽指數(shù)
I.pH的測(cè)定
生物有機(jī)肥用去離子水按酒糟與水比I :10 (W(g) :V(ml)),在室溫下,于200r/min下水平振蕩Ih后,濾紙過(guò)濾,吸取20ml濾液,用pH計(jì)直接測(cè)定pH值。2.腐植酸 E4/E6
吸取上述濾液20ml,分別測(cè)定在465nm和665nm處地吸光度,兩者之比即為E4/E6值。3.氨態(tài)氮的測(cè)定
采用甲醛滴定法測(cè)定其中氨態(tài)氮含量(GB/T 3600-2000)。
4.有機(jī)質(zhì)含量的測(cè)定
采用灼燒法(灼失重法)測(cè)定酒糟中有機(jī)質(zhì)含量。
權(quán)利要求
1.一種酒糟型生物有機(jī)肥的制備方法,包括步驟如下 (1)煙曲霉種子培養(yǎng)液的制備 a、種子培養(yǎng)基配制 馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基馬鈴薯200g,葡萄糖20g,自來(lái)水1000ml,pH自然;制法馬鈴薯去皮后,切成小塊,加水煮爛,用4層紗布過(guò)濾,再加糖和瓊脂,加熱融化后再補(bǔ)充水分至 1000ml, 121°C 下滅菌 20min ; 馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基馬鈴薯200g,葡萄糖20g,瓊脂15 20g,自來(lái)水1000ml,pH自然;制法馬鈴薯去皮后,切成小塊,加水煮爛,用4層紗布過(guò)濾,再加糖和瓊脂,加熱融化后再補(bǔ)充水分至1000ml,121°C下滅菌20min ; b、種子復(fù)活 將煙曲霉在無(wú)菌環(huán)境中接種至馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基,45°C恒溫條件下靜止培養(yǎng)72h ; C、種子活化 將復(fù)活后的煙曲霉在無(wú)菌環(huán)境下接種至馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基,在45°C恒溫條件下靜止培養(yǎng)72h ;d、種子擴(kuò)培 將活化后的菌種在無(wú)菌環(huán)境中用接種環(huán)接3飛環(huán)至馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基,在45°C恒溫條件下培養(yǎng)72h后即為煙曲霉種子培養(yǎng)液; (2)生物有機(jī)肥的制備按酒糟與水質(zhì)量比I:f 1:2混合均勻得培養(yǎng)基基質(zhì),按液固比ml/g接種2 6%的煙曲霉種子培養(yǎng)液,通氣量15 30%,42 48°〇下培養(yǎng)4 7天即可。
2.如權(quán)利要求I所述的酒糟型生物有機(jī)肥的制備方法,其中加水煮爛是指煮沸2(T30min,能被玻璃棒戳破即可。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種酒糟型生物有機(jī)肥的制備方法,包括步驟如下(1)煙曲霉(Aspergillusfumigatus)種子培養(yǎng)液的制備a、種子培養(yǎng)基配制;b、種子復(fù)活;c、種子活化;d、種子擴(kuò)培;(2)生物有機(jī)肥的制備按酒糟與水質(zhì)量比1:1~1:2混合均勻得培養(yǎng)基基質(zhì),按液固比ml/g接種2~6%的煙曲霉種子培養(yǎng)液,通氣量15~30%,42~48℃下培養(yǎng)4~7天即可。本發(fā)明生產(chǎn)周期短、臭味小、利用率高。
文檔編號(hào)C05F5/00GK102653477SQ201210145060
公開日2012年9月5日 申請(qǐng)日期2012年5月11日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月11日
發(fā)明者王曉丹, 袁頡, 邱樹毅, 鄒明鑫 申請(qǐng)人:貴州大學(xué)