專利名稱：：Am菌根菌在脫毒馬鈴薯試管苗移栽中的應(yīng)用方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種生物菌種在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中的應(yīng)用方法，具體為一種AM菌根真菌在脫毒馬鈴薯試管苗移栽中的應(yīng)用方法。二
背景技術(shù)：
：馬鈴薯是重要的糧食、蔬菜、飼料和工業(yè)原料，具有產(chǎn)量高、適應(yīng)性強(qiáng)、營(yíng)養(yǎng)豐富等特性，已成為世界第四大糧食作物。我國(guó)是世界上最大的馬鈴薯種植和生產(chǎn)國(guó)，種植面積居世界首位。隨著組織培養(yǎng)方法在生產(chǎn)上的應(yīng)用，利用組織培養(yǎng)技術(shù)生產(chǎn)脫毒苗從而提高作物產(chǎn)量的方法在蔬菜、花卉等園藝作物上得以廣泛應(yīng)用。近年來馬鈴薯脫毒苗技術(shù)正在被快速推廣，在提高馬鈴薯產(chǎn)量和改善其品質(zhì)方面發(fā)揮了積極作用。在該項(xiàng)技術(shù)中，馬鈴薯脫毒試管苗的移栽成活率是制約生產(chǎn)效率的重要因素，如何控制移栽條件，為試管苗提供適宜的移栽環(huán)境，促進(jìn)植株對(duì)養(yǎng)分的吸收進(jìn)而快速生長(zhǎng)，保證試管苗從無菌環(huán)境順利過渡到普通栽培條件下生長(zhǎng)，從而提高移栽成活率，是生產(chǎn)實(shí)踐中需要解決的技術(shù)難題。叢枝菌根真菌(Arbuscularmycorrhizalfungus)，簡(jiǎn)稱AM真菌，是一類能夠與大多數(shù)植物形成共生關(guān)系的真菌，是目前已探明的與植物關(guān)系最為密切的土壤微生物之一。菌根與植物營(yíng)養(yǎng)關(guān)系中研究最多的是磷素營(yíng)養(yǎng)。菌根能夠顯著地改善植物的磷營(yíng)養(yǎng)狀況、提高植物耐干旱、耐鹽、耐重金屬污染和抗病能力。已有報(bào)道在滅菌土壤中接種菌根真菌可對(duì)盆栽馬鈴薯根部發(fā)生侵染，并明顯促進(jìn)馬鈴薯對(duì)氮、磷、鉀的吸收，提高馬鈴薯的植株鮮、干重，塊莖結(jié)實(shí)數(shù)和產(chǎn)量。雖然AM真菌在盆栽試驗(yàn)中已有應(yīng)用先例，但目前尚無AM真菌在脫毒馬鈴薯生產(chǎn)中的應(yīng)用方法的報(bào)道，特別是沒有關(guān)于在試管苗移栽環(huán)節(jié)中應(yīng)用AM真菌并得到有益效果的報(bào)道。三
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是為脫毒馬鈴薯試管苗移栽提供一種提高試管苗移栽成活率并促進(jìn)其生長(zhǎng)進(jìn)而增加微型薯產(chǎn)量的方法，特別是利用AM菌根真菌共生促生性能的低成本環(huán)保增產(chǎn)方法。本發(fā)明的技術(shù)方案為AM菌根真菌在脫毒馬鈴薯試管苗移栽中的應(yīng)用方法，該方法包括以下的步驟(1)原料準(zhǔn)備準(zhǔn)備三葉草種子、AM菌根真菌菌種，將河沙過篩并用104GyCcTY-射線輻照滅菌；(2)接種劑制備以河沙為培養(yǎng)基質(zhì)，以三葉草為寄主植物，在栽培盆內(nèi)從下往上依次鋪上河沙、AM菌、河沙、三葉草種子、河沙，澆透水后放在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)；70-120天后將三葉草的地上部分全部剪掉，將含有真菌孢子、根外菌絲、感染的三葉草根系的河沙混合拌勻，用作菌根菌接種劑；(3)苗床制備從下往上按照"土一接種劑一土"的順序鋪設(shè)苗床，其中底層與面層土的厚度比為3:l，加入接種劑的量以其所含AM菌根真菌孢子數(shù)確定，比例為每公斤土加入3000—3500個(gè)孢子；(4)移栽與管護(hù)將苗床澆透水后，移栽扦插脫毒馬鈴薯試管苗，定植后除草、保持土壤濕度、防治病蟲害和雜草。在移栽基質(zhì)中接入AM菌根真菌，接種劑接入密度、厚度、深度，保證了真菌能有效侵染馬鈴薯脫毒苗根系(主要為新生根系)，顯著促進(jìn)植株對(duì)磷的吸收，改善作物的營(yíng)養(yǎng)狀況，促進(jìn)植株的生長(zhǎng)發(fā)育，提高作物的抗逆性并實(shí)現(xiàn)增產(chǎn)。采用如上的方法后，脫毒馬鈴薯試管苗成活率提高30%以上，微型薯產(chǎn)量提高25%以上。具體實(shí)施例方式本發(fā)明中涉及的AM菌根真菌一球囊霉屬叢枝菌根真菌(Glomusmosseae)的菌種是從北京市農(nóng)林科學(xué)院植物營(yíng)養(yǎng)與資源研究所"中國(guó)叢枝菌根真菌種質(zhì)資源庫(kù)(BGC)"購(gòu)得。實(shí)施例1(1)原料準(zhǔn)備準(zhǔn)備三葉草種子、球囊霉屬叢枝菌根真菌(Glomusmosseae)菌種，將河沙過篩并用10&yCcTY-射線輻照滅菌。(2)接種劑制備以河沙為培養(yǎng)基質(zhì)，以三葉草為寄主植物，在栽培盆內(nèi)從下往上依次鋪上河沙、AM菌、河沙、三葉草種子、河沙，澆透水后放在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)；120天后將三葉草的地上部分全部剪掉，將含有真菌孢子、根外菌絲、感染的三葉草根系的河沙混合拌勻，制得菌根菌接種劑。用濕篩傾析法測(cè)定接種劑中的孢子數(shù)，測(cè)得每克接種劑中有AM真菌孢子約100個(gè)。(3)苗床制備將土用1(^GyCcTY-射線輻照滅菌；在長(zhǎng)45cm、寬27cm、高6cm的苗盤中從下往上按照"土一接種劑一土"的順序鋪設(shè)苗床，其中底土3.75公斤，接種劑175克，面層土1.25公斤。(4)移栽與管護(hù)將苗床澆透水后，移栽扦插脫毒馬鈴薯試管苗，每個(gè)苗盤200株，定植后除草，保持土壤濕度，防治病蟲害和雜草。本實(shí)施例為最佳實(shí)施例。實(shí)施例2本實(shí)施例與實(shí)施例1的不同在于苗床制備階段所用土不經(jīng)過滅菌處理。經(jīng)過試驗(yàn)調(diào)查統(tǒng)計(jì)，實(shí)施例1及實(shí)施例2比不進(jìn)行接種AM菌根真菌的對(duì)照在侵染率和產(chǎn)量上有顯著的提高，具體見表1。并且對(duì)不同大小的微型薯產(chǎn)量影響不同，其中實(shí)施例1顯著增加了4克以上較大薯的產(chǎn)量，而實(shí)施例2對(duì)個(gè)體重2-4克的中等微型薯增產(chǎn)作用最為明顯，具體見表2。表1不同處理的侵染率和產(chǎn)量<table>tableseeoriginaldocumentpage4</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>表2不同處理對(duì)不同級(jí)別微型薯產(chǎn)量的影響(克/盤)<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實(shí)施例3(1)原料準(zhǔn)備準(zhǔn)備三葉草種子、球囊霉屬叢枝菌根真菌(Glomusmosseae)菌種，將河沙過篩并用10&yCcTY-射線輻照滅菌。(2)接種劑制備以河沙為培養(yǎng)基質(zhì)，以三葉草為寄主植物，在栽培盆內(nèi)從下往上依次鋪上河沙、AM菌、河沙、三葉草種子、河沙，澆透水后放在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)；70天后將三葉草的地上部分全部剪掉，將含有真菌孢子、根外菌絲、感染的三葉草根系的河沙混合拌勻，制得菌根菌接種劑。用濕篩傾析法測(cè)定接種劑中的孢子數(shù)，測(cè)得每克接種劑中有AM真菌孢子約50個(gè)。(3)苗床制備將土用104GyCo6°Y-射線輻照滅菌；在長(zhǎng)45cm、寬27cm、高6cm的苗盤中從下往上按照"土一接種劑一土"的順序鋪設(shè)苗床。其中底土3.75公斤，接種劑300克，面層土1.25公斤。(4)移栽與管護(hù)將苗床澆透水后，移栽扦插脫毒馬鈴薯試管苗，每個(gè)苗盤200株，定植后除草，保持土壤濕度，防治病蟲害和雜草。權(quán)利要求一種AM菌根菌在脫毒馬鈴薯試管苗移栽中的應(yīng)用方法，其特征在于該方法包括以下的步驟(1)原料準(zhǔn)備準(zhǔn)備三葉草種子、球囊霉屬叢枝菌根真菌(Glomusmosseae)菌種，將河沙過篩并用104GyCo60γ-射線輻照滅菌；(2)接種劑制備以河沙為培養(yǎng)基質(zhì)，以三葉草為寄主植物，在栽培盆內(nèi)從下往上依次鋪上河沙、AM菌、河沙、三葉草種子、河沙，澆透水后放在培養(yǎng)室內(nèi)培養(yǎng)；70-120天后將三葉草的地上部分全部剪掉，將含有真菌孢子、根外菌絲、感染的三葉草根系的河沙混合拌勻，用作菌根菌接種劑；(3)苗床制備從下往上按照“土--接種劑--土”的順序鋪設(shè)苗床，其中底層與面層土的厚度比為3∶1，加入接種劑的量以其所含菌根菌孢子數(shù)確定，比例為每公斤土加入3000--3500個(gè)孢子；(4)移栽與管護(hù)將苗床澆透水后，移栽扦插脫毒馬鈴薯試管苗，定植后除草，保持土壤濕度，防治病蟲害和雜草。2.如權(quán)利要求1所述的應(yīng)用方法，其特征在于所述的接種劑制備過程培養(yǎng)時(shí)間為120天，并且苗床制備過程中加入接種劑的量為每公斤土加入3500個(gè)孢子。全文摘要一種AM菌根菌在脫毒馬鈴薯試管苗移栽中的應(yīng)用技術(shù)，首先以三葉草為寄主植物制作含有真菌孢子、根外菌絲，感染的三葉草根系及河沙混合物的接種劑，再制作移栽基質(zhì)，基質(zhì)中間層加入以每公斤土3000-5000個(gè)孢子比例的接種劑。采用如上的方法進(jìn)行移栽，脫毒馬鈴薯微型薯產(chǎn)量可增加25％以上。文檔編號(hào)A01G7/06GK101699960SQ20091022464公開日2010年5月5日申請(qǐng)日期2009年11月16日優(yōu)先權(quán)日2009年11月16日發(fā)明者馮固,孫良斌,張少民,李利民,白燈莎申請(qǐng)人:新疆農(nóng)業(yè)科學(xué)院核技術(shù)生物技術(shù)研究所;中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)資源與環(huán)境學(xué)院