專利名稱：一種抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抑制蔬菜灰霉菌(A^ytoc/"em^)植物源農(nóng)藥(暫用名)，它以紫穗 槐C4ww^;^" /n^'^W)植物為原料研制的一種低毒、高效新型生物產(chǎn)品，以葉面噴灑 的方式施藥，應(yīng)用于蔬菜、水果、花卉等作物，有效抑制蔬菜灰霉菌，無殘留污染，對 于發(fā)展有機(jī)農(nóng)業(yè)和綠色農(nóng)業(yè)具有重要作用。
背景技術(shù)：
灰霉菌屬半知菌亞門葡萄孢屬?；颐咕稚咦庸＜?xì)長，灰黑色,大小為(960 1 200) um X(16 22) Pm,不規(guī)則樹狀分支，分支頂端細(xì)胞膨大成球形,其上著生許多小梗,小 梗上著生分生孢子,形似葡萄穗狀。分生孢子單胞無色,橢圓形或卵圓形,大小為(8 14) ym X(6 9)iim,孢子集生呈灰色。菌核褐色，形狀不規(guī)貝(J,大小為(2 4)mmX(1 3) mm[l]。灰霉菌能夠侵染200多種植物,屬真菌病害，多種植物的花、果、葉、莖均可 發(fā)病。該菌核在土壤或病殘體上越冬越夏，病菌耐低溫，在7—2(TC大量產(chǎn)生孢子， 苗期棚內(nèi)溫度15—23。C。弱光，相對濕度在90%以上或幼苗表面有水膜時易發(fā)病。 花期最易感病，借氣流，灌溉及農(nóng)事操作從傷口、衰老器官侵入。目前國內(nèi)對灰霉 病防治的農(nóng)藥主要為化學(xué)產(chǎn)品，主要有乙霉威、腐霉利、異菌脲、菌核凈、嘧霉胺、 井岡霉素等。因此，研究適宜的防治灰霉病新型生物農(nóng)藥具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥，該新農(nóng)藥在生產(chǎn)和使用過程 中均無污染，產(chǎn)品易降解，無殘留污染，環(huán)保價值高，對蔬菜灰霉菌有良好抑制效 果。
本發(fā)明的另一 目的是提供該植物源農(nóng)藥在抑制蔬菜灰霉菌方面的應(yīng)用。 本發(fā)明的目的是通過以下措施來實現(xiàn)的
一種抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥，其特征在于它以紫穗槐為原料，采其鮮葉或干 葉，粉碎，放入索氏提取器中，用0.5-2倍重的乙醇提取2—4小時，將提取液濃縮至
3固狀濃縮物，回收溶劑；再用3 — 5倍固狀濃縮物重的正丁醇分別萃取2-3次，濃縮萃 取液，得到正丁醇提取的固狀物；
取正丁醇提取的固狀物，溶于為其0.5-2.0倍重量的正丁醇中，加入為固狀濃縮物 0.1-0.2倍重的乳化劑，充分?jǐn)嚢?，再加入為固狀濃縮物18-25倍重的水，即制得抑制蔬 菜灰霉菌植物源農(nóng)藥的水乳劑。
所述原料最好選用新鮮的或晾干的野生或種植的紫穗槐植物；
配制水乳劑的有機(jī)溶劑選用正丁醇(工業(yè)級)無毒害。
乳化劑選用span-20、 span-40或span-60，都是常用表面活性劑，均無毒害。 本發(fā)明的有益效果
本發(fā)明的抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥是采取從植物中提取有效成分再制成產(chǎn)品的 方法，生產(chǎn)工藝簡單，流程短；溶劑可以回收重復(fù)使用，生產(chǎn)成本低，易產(chǎn)業(yè)化，經(jīng)濟(jì) 效益高。
本發(fā)明的原料為紫穗槐(植物中富含多種殺蟲驅(qū)蟲成分)，提取物中含有多種活性 成分，并且對蔬菜多種病蟲害有一定防治作用。
本發(fā)明的溶劑為正丁醇，用正丁醇提取物制成的產(chǎn)品，對蔬菜灰霉菌有良好的抑制 效果。
本發(fā)明的抑制蔬菜灰霉菌植物源新農(nóng)藥，所用原料為紫穗槐的鮮葉和嫩莖或鮮葉和 嫩莖的晾干物。該植物為多年生灌木，根系發(fā)達(dá)，生命力極強(qiáng)，適合各種環(huán)境生長，荒 山荒坡、路旁、房前屋后等閑置地方均可種植，不需要管理， 一年可采割2-3次，原料 來源容易、廉價。
關(guān)于紫穗槐生物活性研究國內(nèi)外從40年代已經(jīng)開始，主要報道的有驅(qū)蟲、驅(qū)蚊； 在醫(yī)學(xué)上報道了紫穗槐素和紫穗槐甙有鎮(zhèn)靜和抗痙攣作用；在防治病蟲害方面報道了紫 穗槐的果實提取物有防治馬鈴薯甲蟲、蝗蟲作用，對蜜蜂安全。也報道了紫穗槐的葉莖 提取物對金龜甲、菜青蟲有活性作用，對刺激作物生長有明顯作用。但未見紫穗槐的葉 莖提取物對灰霉菌有效的報道。
紫穗槐資源豐富，為灌木植物，易采摘，且采割后可繼續(xù)生長，北方一年可以采料 2次，南方可采2-3次料，原料易得。本發(fā)明利用從紫穗槐植物中提取物制樣，利用了 植物體內(nèi)多種有效組分的功能，對灰霉菌有良好抑制作用，避開了化學(xué)合成的單一成分 作用的缺陷。本研究產(chǎn)品為生物制劑，原料可再生，產(chǎn)品在使用之后，易降解，無殘留污染，完全符合無公害新農(nóng)藥研究方向。
具體實施例方式
實施例l
原料新鮮野生或種植紫穗槐植物。有機(jī)溶劑乙醇，正丁醇(工業(yè)級)。乳化劑:
span-20。
將紫穗槐原料100kg破壞組織后放入索氏提取器中，加入50kg乙醇，加熱提取2-4 小時，將提取液濃縮至固狀濃縮物，得固狀濃縮物1.5kg;將固狀濃縮物用4. 5kg正丁 醇萃取，分別萃取3次，合并萃取液，再濃縮萃取液后得到正丁醇提取的固狀物lkg, 再加入0.6kg正丁醇，在80—95。C加熱攪拌下溶解后，加入0.1kg的span-20，充分?jǐn)?拌，再加入水至25kg，即制得4%的抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥水乳劑。 實施例2:
原料新鮮野生或種植紫穗槐植物。有機(jī)溶劑乙醇，正丁醇(工業(yè)級)。乳化劑:
span-40。
將紫穗槐葉和莖100kg放入索氏提取器中，加入100kg的乙醇，加熱提取4-6小時， 將提取液濃縮至固狀濃縮物；得固狀濃縮物1.8kg;將固狀濃縮物用7kg正丁醇萃取3 次，合并萃取液，再濃縮萃取液后得到正丁醇提取的固狀物l.lkg，再加入l.lkg正丁 醇，在80—95'C加熱攪拌下溶解后，加入0.15kg的span-40，充分?jǐn)嚢瑁偌尤胨?22kg，即制得5%的抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥水乳劑。 實施例3:
原料晾干的野生或種植紫穗槐植物。有機(jī)溶劑乙醇，正丁醇(工業(yè)級)。乳化
劑- span-60。
將紫穗槐葉和莖100kg晾干并粉碎后，放入索氏提取器中，加入200kg的乙醇，加 熱提取6-8小時，將提取液濃縮至固狀濃縮物，得固狀濃縮物2.0kg;將固狀濃縮物用 9kg正丁醇萃取3次，合并萃取液，再濃縮萃取液后得到正丁醇提取的固狀物l.Okg， 再加入2kg正丁醇，在80—95。C加熱攪拌下溶解后，加入0.18kg的span-60，充分?jǐn)?拌，再加入水至25kg，即制得4%的抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥水乳劑。 蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥的主要成分
紫穗槐為原料提取的混合物10g經(jīng)化學(xué)分離和結(jié)構(gòu)測定，抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng) 藥主要含黃酮類化合物，其中代表化合物是6a-12a-脫氫-a-灰葉酚30-50mg， 6a-12a-脫氫-魚藤素80-110mg,(土)-灰葉素140-180mg,(-)-6-羥基-6a,12a-脫氫-灰葉酚80-110mg，
總黃酮為150-250mg。
紫穗槐提取物不同濃度抑菌活性測定
菌落直徑實驗
制作一定量PDA培養(yǎng)基，滅菌冷卻至一定溫度后，分別取紫穗槐正丁醇提取物的水 乳劑(實施例1制得的產(chǎn)品)，加水制成藥液的濃度系列(IO4、 103、 102、 50.0、 10.0mg/L) 2mL與18mlPDA培養(yǎng)基混勻，注入直徑為9cm的無菌培養(yǎng)皿中，得到處理平板(濃度 均為為103、 102、 10.0、 5.0、 1.0mg/L)。晾干后在平板中央接入直徑為6mm的灰霉菌 菌塊，每種5個重復(fù)，所得數(shù)據(jù)如表l所示。用目前市面使用的效果比較好的乙霉威作 比較，結(jié)果統(tǒng)計于表2。溶劑及無菌水對照，用相同量的無菌水代替相應(yīng)量的紫穗槐提 取物與培養(yǎng)基混勻。待對照菌落布滿培養(yǎng)皿后，測量菌落直徑，記錄數(shù)據(jù)。根據(jù)下列公 式計算抑菌率；
抑菌率(％)氣對照菌落直徑一處理菌落直徑)/(對照菌落直徑一6mm)xl00M
表l不同濃度紫穗槐正丁醇提取物的抑菌直徑(灰霉菌)
濃度mg/L菌落直徑/mm平均值/mm抑菌率％
10337374337363737363737363837373737.0763.01
10254545655555654555654555554555554.8741,82
10.072717373737273717373737472737372.620.71
5.078787776767775767776767677767776.5316.04
1.087888788888787878787878787888887.333.18
CK90909090909090909090909090909090.00
表2不同濃度乙霉威的抑菌直徑
濃度mg/L 菌落直徑/mm 平均值/mm 抑菌率％
10345464444454546444545464544464645.0753.49
10257585758585859595858575758585757.8038.33
10,074747375747474757473747474757574.1318.89
5.077787878797979787877797980797978.4713.73
1.084858385848484838384838384838583.807.38
CK90909090909090909090909090909090.00
由表1 2比較得出，紫穗槐正丁醇提取物制成(濃度為1%)抑制灰霉菌率最高， 達(dá)63.01%，使用濃度為lg/L。比乙霉威抑菌率提高值為63.01%—53.49% =9.52%。本發(fā)明的優(yōu)點
一、 微毒性，無殘留。蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥來源于無毒害植物一紫穗槐中的提取 物，并配制而成，非化學(xué)合成產(chǎn)品，經(jīng)測定，大鼠急性經(jīng)口 LD5Q〉5000mg/kg，屬微 毒類農(nóng)藥，生產(chǎn)和使用過程中均無污染，產(chǎn)品易降解，無殘留污染，環(huán)保價值高。
二、 抑制蔬菜灰霉菌效果顯著。抑制蔬菜灰霉菌是主要功能，也是主要特征。試驗 表明主要表現(xiàn)在1%抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥，對灰霉菌抑制率為63.01%。
三、 調(diào)節(jié)生長、提高品質(zhì)質(zhì)量。葉面噴灑抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥。還可增加葉 綠素和植株干物質(zhì)含量，同時提高產(chǎn)量和綜合品質(zhì)5-10%。具有較高的商品價值。
四、 其它防病、防蟲功能。產(chǎn)品對蚜蟲、枯萎病、葉班病等多種害蟲有一定防治功 能，使其不易形成大面積蟲害。
五、 同類產(chǎn)品的比較
因為目前國內(nèi)沒有同類生物產(chǎn)品，只有化學(xué)合成的產(chǎn)品，無可比性，但由表1 2 比較實驗結(jié)果表明紫穗槐正丁醇提取物對灰霉菌的抑菌率63.01%,乙霉威的抑菌率 53.49%，提高9.52%。
權(quán)利要求
1、一種抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥，其特征在于它以紫穗槐為原料，采其鮮葉或干葉，粉碎，放入索氏提取器中，用0.5-2倍重的乙醇提取2-4小時，將提取液濃縮至固狀濃縮物，回收溶劑；再用3-5倍固狀濃縮物重的正丁醇分別萃取2-3次，濃縮萃取液，得到正丁醇提取的固狀物；取正丁醇提取的固狀物，溶于為其0.5-2.0倍重量的正丁醇中，加入為固狀濃縮物0.1-0.2倍重的乳化劑，充分?jǐn)嚢瑁偌尤霝楣虪顫饪s物18-25倍重的水，即制得抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥的水乳劑。
2、 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥，其特征在于所述乳化劑選用span-20、 span-40或span-60。
3、 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥，其特征在于所述原料選用野生或種植的紫穗槐植物的葉和嫩莖的鮮料或鮮料晾干物。
4、權(quán)利要求l、 2或3所述植物源農(nóng)藥在抑制蔬菜灰霉菌方面的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開一種抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥及其應(yīng)用，它以紫穗槐植物為原料，研制的一種低毒新型生物產(chǎn)品，以葉面噴灑的方式施藥，可應(yīng)用于蔬菜。本發(fā)明的抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥，它以紫穗槐為原料，用乙醇提取2-4小時，將提取液濃縮至固狀濃縮物，回收溶劑；將固狀濃縮物用用正丁醇萃取2-3次，再濃縮萃取液，得到正丁醇提取的固狀物；取正丁醇提取的固狀物，溶于為其0.5-2.0倍重量的正丁醇中，加入為固狀濃縮物0.1-0.2倍重的乳化劑，充分?jǐn)嚢?，再加入為固狀濃縮物18-25倍重的水，即制得抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥的水乳劑。該抑制蔬菜灰霉菌植物源農(nóng)藥可以有效地抑制蔬菜灰霉菌，并能增強(qiáng)農(nóng)作物抗病蟲害的能力。
文檔編號A01N65/20GK101623009SQ20091018405
公開日2010年1月13日 申請日期2009年8月12日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月12日
發(fā)明者王正梅, 陳敏東, 高桂枝 申請人:南京信息工程大學(xué)