專利名稱：一種動物飼料添加劑及其制備方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種飼料添加劑及其制備方法，尤其涉及一種以銀杏葉為主要原料發(fā)酵而成的動物飼料添加劑及其制備方法，屬于飼料領域。
背景技術：
發(fā)展中國家集約化和專業(yè)化的畜牧業(yè)才剛剛起步，配合飼料工業(yè)還在雨后春筍般地建立起來，對飼料添加劑的需求量與日俱增，加之發(fā)展中國家面臨糧食供應緊張和飼料不足的困難，更有必要大力發(fā)展飼料添加劑。我國目前的飼料添加劑的應用過于單一化，需要發(fā)展復合多維飼料添加劑，使其效益得到充分的發(fā)揮。
銀杏葉為古老的孑遺植物銀杏(Ginkgo biloba)的干葉，銀杏葉除具有一般樹葉的營養(yǎng)外，最重要的是含有黃酮類、萜內(nèi)脂類、聚戊烯醇類化合物、酚類、生物堿和多糖等多種藥用成份。動物試驗表明，黃酮類化合物具有免疫調(diào)節(jié)功能，黃酮不僅能增強機體的免疫細胞體液及非特異性免疫功能，而且能促進機體的免疫器官的發(fā)育，對巨嗜細胞有誘導增加，增強活性，進而促進細胞的吞噬機能并能促進淋巴細胞的轉化率。所以，銀杏葉提取物是一種天然的畜禽免疫調(diào)節(jié)劑，生長促進劑。目前國內(nèi)外對銀杏葉的研究利用主要集中在醫(yī)藥保健方面，尚沒有以銀杏葉為主要原料用于制備飼料添加劑的相關應用?，F(xiàn)有的飼料添加劑都不同程度的具有促進動物生長的作用，但在提高動物的免疫力方面都差強人意。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術問題是克服現(xiàn)有技術的不足，提供一種新的動物飼料添加劑，該飼料添加劑除能有效促進動物生長和提高其肉質(zhì)的作用外，尚能夠明顯提高動物的免疫力。
本發(fā)明所要解決的技術問題是通過以下技術途徑來實現(xiàn)的一種動物飼料添加劑，包括以下步驟制備而成(1)、發(fā)酵培養(yǎng)基的制備將固體培養(yǎng)基與營養(yǎng)鹽溶液混合均勻，滅菌，得發(fā)酵培養(yǎng)基；其中，所述的固體培養(yǎng)基由銀杏葉粉末(說明將銀杏葉粉碎后得到所述的銀杏葉粉末，至于粉碎到何種程度，本領域技術人員可視實際情況和設備而定，這些均不構成對本發(fā)明的實施和效果的影響)、麩皮和玉米芯組成；所述營養(yǎng)鹽溶液主要葡萄糖、尿素、硫酸銨、蛋白胨、磷酸二氫鉀和硫酸鎂組成；(2)、將步驟(1)所制備的發(fā)酵培養(yǎng)基首先接種酵母(Candida utilis)，28℃±1℃下培養(yǎng)12±1小時，接著接種黑曲霉(Aspergillus niger)，在28℃±1℃下培養(yǎng)36±1小時，按照常規(guī)發(fā)酵方法和設備進行發(fā)酵；(3)、在低于40℃條件下將完成發(fā)酵的物料干燥，粉碎，即得。
上述制備方法中，步驟(1)中，優(yōu)選將固體培養(yǎng)基與營養(yǎng)鹽溶液按照1g∶1.4-2.0ml(更優(yōu)選為1g∶1.6ml的配比比例)的配比比例混合均勻，滅菌，得發(fā)酵培養(yǎng)基；所述的固體培養(yǎng)基優(yōu)選按照以下方法配制而成將銀杏葉粉末、麩皮和玉米芯按照銀杏葉粉末∶麩皮∶玉米芯＝7-8.5∶1.0-2.0∶0.2-0.7(更優(yōu)選為8∶1.5∶0.5的重量配比比例)的重量配比混合均勻；所述的營養(yǎng)鹽溶液的配制優(yōu)選如下每100毫升營養(yǎng)鹽溶液中含有以下重量的組分葡萄糖1.5-2.5g、尿素0.75-1.25g、硫酸銨2.25-3.75g、蛋白胨0.375-0.625g、磷酸二氫鉀1.5-2.5g、硫酸鎂0.375-0.625g、余量為蒸餾水；更優(yōu)選為每100毫升營養(yǎng)鹽溶液中含有以下重量的各組分葡萄糖2g、尿素1g、硫酸銨3g、蛋白胨0.5g、磷酸二氫鉀2g、硫酸鎂0.5g、余量為蒸餾水。
步驟(2)中，優(yōu)選將步驟1所制備的發(fā)酵培養(yǎng)基分別按照10g發(fā)酵培養(yǎng)基接種1ml菌種的比例依次接種酵母和黑曲霉。
本發(fā)明中所用到的酵母和黑曲霉，均可從商業(yè)途徑購買得到(例如可以購自于中國普通微生物菌種保藏管理中心菌種庫，網(wǎng)址http//www.ctcccas.ac.cn/)。
本發(fā)明以銀杏葉為原料，運用優(yōu)良菌種，通過酶工程和微生物發(fā)酵工程，將銀杏葉中動物難以消化的大分子營養(yǎng)源降解為易消化吸收的小分子物質(zhì)，使銀杏葉中固有的活性成分能夠游離、暴露出來，更易被動物吸收。除含有黃酮類化合物、銀杏內(nèi)脂等活性物質(zhì)外，還含有大量的有益菌和高活力的復合酶同時，含有多種有益菌種，經(jīng)測定，本發(fā)明添加劑中的纖維素酶、半纖維素酶和β-葡萄糖苷酶的活性較高，能顯著提高飼料的轉化率，促進動物的吸收進而促進其生長，具有替代或部分替代抗生素的作用。實驗表明，本發(fā)明飼料添加劑能明顯提高動物的免疫能力，促進生長，提高其肉質(zhì)。
此外，本發(fā)明飼料添加劑還是一種無毒，無激素，無藥物殘留，無污染的高效天然添加劑，它還有以下優(yōu)點破壞植物原料的細胞壁，提高飼料的利用率；消除飼料中抗營養(yǎng)因子，減少此類物質(zhì)對動物消化利用的障礙作用；補充動物內(nèi)源酶的不足，提高飼料消化率；擴大飼料資源范圍，如能利用小麥，大麥部分農(nóng)林廢棄物等。
本發(fā)明飼料添加劑既含有生物活性成分，又富含益生菌或飼料復合酶，能作為促生長劑和抗生素的替代品廣泛用于豬、雞、馬、牛、魚、蝦等多種禽畜、水產(chǎn)動物中。
本發(fā)明飼料添加劑的應用方法在基礎日糧中添加0.5％-2％的本發(fā)明飼料添加劑，混合均勻，按常規(guī)飼喂方法投喂。
具體實施例方式
下面通過實施例對本發(fā)明作進一步說明。應當指出，這些實施例僅僅是本發(fā)明的例證，不應理解為對本發(fā)明的限制。
實施例11、營養(yǎng)鹽溶液的配制按葡萄糖2％(即每100ml營養(yǎng)鹽溶液中含葡萄糖2g，下同)，尿素1％，蛋白胨0.5％，磷酸二氫鉀2％，硫酸鎂0.5％，硫酸銨3％的量依次稱取并溶解于水中，配成營養(yǎng)鹽溶液；2、固體培養(yǎng)基的制備按銀杏葉粉末∶麩皮∶玉米芯＝8∶1.5∶0.5的比例稱取三者，混勻；3、按每10g固體培養(yǎng)基加16ml營養(yǎng)鹽溶液的比例將上述兩者混合，攪拌均勻，配制成發(fā)酵培養(yǎng)基；將配制好的發(fā)酵培養(yǎng)基在121℃溫度下滅菌50min，取出，冷卻；4、在接種室進行常規(guī)的無菌操作，每10g發(fā)酵培養(yǎng)基接種酵母1ml(Candidautilis)(酵母菌種購自中國普通微生物菌種保藏管理中心菌種庫，商品代號是ACCC2060；菌母的培養(yǎng)采用液體法，常規(guī)的種子液體培養(yǎng)法，28℃、150r/min下震蕩培養(yǎng))(陳金春，陳國強主編.微生物學實驗指導，北京清華大學出版社，2005；涔沛霖，蔡謹編著.工業(yè)微生物學，北京化學工業(yè)出版社，2000.139-151)，28℃下培養(yǎng)12小時，再按同樣的比例接黑曲霉(Aspergillus niger NL-1)(黑曲霉菌種購自中國普通微生物菌種保藏管理中心菌種庫，商品代號是ACCC 30005)，再在28℃下培養(yǎng)36小時左右，發(fā)酵結束；5、在不高于40℃的條件下干燥，粉碎，即得。
實施例21、營養(yǎng)鹽溶液的配制按葡萄糖1.5％(即每100ml營養(yǎng)鹽溶液中含葡萄糖2g，下同)，尿素0.75％，蛋白胨0.375％，磷酸二氫鉀1.5％，硫酸鎂0.375％，硫酸銨2.25％的量依次稱取并溶解于水中，配成營養(yǎng)鹽溶液；2、固體培養(yǎng)基的制備按銀杏葉粉末∶麩皮∶玉米芯＝7∶1.0∶0.2的比例稱取三者，混勻；3、按每10g固體培養(yǎng)基加14ml營養(yǎng)鹽溶液的比例將上述兩者混合，攪拌均勻，配制成發(fā)酵培養(yǎng)基；將配制好的發(fā)酵培養(yǎng)基在121℃溫度下滅菌50min，取出，冷卻；4、在接種室進行常規(guī)的無菌操作，每10g發(fā)酵培養(yǎng)基接種酵母(Candida utilis)(酵母菌種購自中國普通微生物菌種保藏管理中心菌種庫，商品代號是ACCC2060)1ml，28℃下培養(yǎng)12小時，再按同樣的比例接黑曲霉(黑曲霉菌種購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會菌種庫，商品代號是ACCC 30005)(Aspergillus nigerNL-1)，再在28℃下培養(yǎng)36小時左右；5、在不高于40℃的條件下干燥，粉碎，即得。
實施例31、營養(yǎng)鹽溶液的配制按葡萄糖2.5％(即每100ml營養(yǎng)鹽溶液中含葡萄糖2g，下同)，尿素1.25％，蛋白胨0.625％，磷酸二氫鉀2.5％，硫酸鎂0.625％，硫酸銨3.75％的量依次稱取并溶解于水中，配成營養(yǎng)鹽溶液；2、固體培養(yǎng)基的制備按銀杏葉粉末∶麩皮∶玉米芯＝8.5∶2.0∶0.7的比例稱取三者，混勻；3、按每10g固體培養(yǎng)基加20ml營養(yǎng)鹽溶液的比例將上述兩者混合，攪拌均勻，配制成發(fā)酵培養(yǎng)基；將配制好的發(fā)酵培養(yǎng)基在121℃溫度下滅菌50min，取出，冷卻；4、在接種室進行常規(guī)的無菌操作，每10g發(fā)酵培養(yǎng)基接種酵母(Candida utilis)(酵母菌種購自中國普通微生物菌種保藏管理中心菌種庫，商品代號是ACCC2060)1ml，28℃下培養(yǎng)12小時，再按同樣的比例接黑曲霉(Aspergillus niger NL-1)(黑曲霉菌種購自中國科學院典型培養(yǎng)物保藏委員會菌種庫，商品代號是ACCC30005)，再在28℃下培養(yǎng)36小時左右；5、在不高于40℃的條件下干燥，粉碎，即得。
試驗例1 本發(fā)明動物飼料添加劑中酶活性的測定1、檢測對象本發(fā)明實施例1、2和3所制備的動物飼料添加劑，分別編號為產(chǎn)品1、2和3。
2、檢測方法纖維素酶和半纖維素酶的測定方法。
酶的提取準確稱取固體酶制劑1g，加入一定體積的pH值為4.8的緩沖液，置于40℃水浴中浸提60min，過濾后備用；酶活的測定取0.05M檸檬酸緩沖液1.0ml、1％羧甲基纖維素(測定纖維素酶)或1％木聚糖(測定半纖維素酶)0.5ml，經(jīng)適當稀釋后的酶液0.5ml于25ml的刻度試管中，50℃下保溫30min。冷卻后分別加入3.0mlDNS，并用蒸餾水定容至25ml，混勻，在540nm條件下比色；酶活的表示方法1g固體酶制劑在50℃、pH值4.8條件下，每分鐘水解羧甲基纖維素或木聚糖產(chǎn)生1μmol葡萄糖或木糖所需的酶量定義為一個酶活單位。酶活力單位為μg/g。
3、檢測結果見表1。
表1 檢測結果

檢測結果表明，本發(fā)明添加劑中纖維素酶、半纖維素酶的活性較高，能顯著提高飼料的轉化率，促進動物吸收各種營養(yǎng)，有利于其生長。
試驗例2 本發(fā)明動物飼料添加劑促進動物生長試驗1、供試樣品本發(fā)明實施例1、2和3所制備的動物飼料添加劑，分別編號為產(chǎn)品1、2和3。
2、試驗方法選擇健康、體重接近的1日齡商品代號A×(1×L1)黃羽肉仔雞480只，采用完全隨機區(qū)組試驗設計方法，隨機分成4個處理組，每組3個重復，每個重復40只，公母各半。1組飼喂基礎日糧，2、3、4組分別飼喂基礎日糧加0.5％、1.0％、1.5％銀杏葉飼料添加劑，試驗期49天。所用實驗料均粉碎，記錄每天投料量、死亡數(shù)量，7周齡全群稱重，試驗結束抽樣屠宰，稱量胸腺、脾臟和法氏囊等免役器官的質(zhì)量。數(shù)據(jù)采用SPSS12.0軟件系統(tǒng)進行統(tǒng)計分析，均數(shù)間多重比較采用Duncan法。
3、試驗結果實驗所得數(shù)據(jù)表明，本發(fā)明飼料添加劑對肉仔增中有明顯的促進作用，添加1％和0.5％本發(fā)明飼料添加劑組的末重分別比對照組提高5.56％(P＜0.05和5.02％(P＜0.05＝，平均日增重為5.74％(P＜0.05＝和5.19％(P＜0.05＝；對肉仔雞的屠宰實驗表明，添加了本發(fā)明飼料添加劑的各組肉仔雞的免疫器官如胸腺、脾臟和法氏囊的相對質(zhì)量均在不同程度上高于對照，另外，飼喂本發(fā)明飼料添加劑的雞的屠宰性能及肉的品質(zhì)、營養(yǎng)均在一定程度上優(yōu)于對照(表2、表3、表4、表5、表6)。
表2 本發(fā)明銀杏葉飼料添加劑對肉仔雞生產(chǎn)性能的影響

表3 本發(fā)明銀杏葉飼料添加劑對肉仔雞免疫器官相對質(zhì)量的影響

表4 本發(fā)明銀杏葉飼料添加劑對肉仔雞屠宰性能的影響

表5 本發(fā)明銀杏葉飼料添加劑對肉仔雞肉品質(zhì)的影響

表6 本發(fā)明銀杏葉飼料添加劑對肉仔雞肉營養(yǎng)成分的影響

權利要求
1.一種動物飼料添加劑的制備方法，包括以下步驟(1).發(fā)酵培養(yǎng)基的制備將固體培養(yǎng)基與營養(yǎng)鹽溶液混合均勻，滅菌，得發(fā)酵培養(yǎng)基；其中，所述的固體培養(yǎng)基由銀杏葉粉末、麩皮和玉米芯組成；所述營養(yǎng)鹽溶液主要由葡萄糖、尿素、硫酸銨、蛋白胨、磷酸二氫鉀和硫酸鎂組成；(2).將步驟(1)所制備的發(fā)酵培養(yǎng)基首先接種酵母(Candida utilis)菌種，28℃±1℃下培養(yǎng)12±1小時；接著接種黑曲霉(Aspergillus niger)菌種，28℃±1℃下培養(yǎng)36±1小時；此過程按照常規(guī)發(fā)酵方法和設備進行發(fā)酵；(3).在低于40℃條件下將完成發(fā)酵的物料干燥，粉碎，即得。
2.按照權利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中固體培養(yǎng)基與營養(yǎng)鹽溶液的配比比例為1g∶1.4-2.0ml。
3.按照權利要求2的方法，其特征在于步驟(1)中固體培養(yǎng)基與營養(yǎng)鹽溶液的配比比例為1g∶1.6ml。
4.按照權利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中所述的固體培養(yǎng)基各組分的重量配比為銀杏葉粉末∶麩皮∶玉米芯＝7-8.5∶1.0-2.0∶0.2-0.7。
5.按照權利要求4的方法，其特征在于步驟(1)中所述的固體培養(yǎng)基各組分的重量配比為銀杏葉粉末∶麩皮∶玉米芯＝8∶1.5∶0.5。
6.按照權利要求1的方法，其特征在于步驟(1)中所述的營養(yǎng)鹽溶液的各組分的配比為每100毫升營養(yǎng)鹽溶液中含有以下重量的各組分葡萄糖1.5-2.5g、尿素0.75-1.25g、硫酸銨2.25-3.75g、蛋白胨0.375-0.625g、磷酸二氫鉀1.5-2.5g、硫酸鎂0.375-0.625g、余量為蒸餾水
7.按照權利要求6的方法，其特征在于步驟(1)中所述的營養(yǎng)鹽溶液的各組分的配比為每100毫升營養(yǎng)鹽溶液中含有以下重量的組分葡萄糖2g、尿素1g、硫酸銨3g、蛋白胨0.5g、磷酸二氫鉀2g、硫酸鎂0.5g、余量為蒸餾水。
8.按照權利要求1的方法，其特征在于步驟(2)中將步驟(1)所制備的發(fā)酵培養(yǎng)基分別按照10g發(fā)酵培養(yǎng)基接種1ml菌種的比例依次接種酵母和黑曲霉。
9.一種動物飼料添加劑，其特征在于由權利要求1-5中任何一項方法制備得到的產(chǎn)品。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種動物飼料添加劑及其制備方法。本發(fā)明以銀杏葉為主要原料，運用優(yōu)良菌種，通過酶工程和微生物發(fā)酵工程，將銀杏葉中動物難以消化的大分子營養(yǎng)源降解為易消化吸收的小分子物質(zhì)，使銀杏葉中固有的活性成分游離、暴露出來，更易被動物吸收。本發(fā)明飼料添加劑除含有黃酮類化合物、銀杏內(nèi)脂等活性物質(zhì)外，還含有大量的有益菌和高活力的復合酶。實驗表明，本發(fā)明飼料添加劑具有提高動物免疫力、促進動物生長、提高其肉質(zhì)等優(yōu)點。
文檔編號A23K1/165GK1919044SQ200610152230
公開日2007年2月28日 申請日期2006年9月20日 優(yōu)先權日2006年9月20日
發(fā)明者曹福亮, 趙林果 申請人:南京林業(yè)大學