專利名稱：一種板栗菌根制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種板栗菌根制劑及其制備方法。
背景技術(shù)：
板栗是我國的特色果樹之一，是出口創(chuàng)匯的傳統(tǒng)產(chǎn)品。板栗生長分布在土壤瘠薄的山地。干旱和營養(yǎng)不足是限制板栗生產(chǎn)的主要因素。
如在燕山山區(qū)和太行山區(qū)，栽植板栗是開發(fā)荒山，保持水土的有效途徑。然而這些山區(qū)自然條件相對較差土層干旱瘠薄。而板栗幼苗對肥水的吸收能力較差，愈傷能力也較弱，生產(chǎn)上一般用2年生以上大苗栽植，育苗周期長，成本高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術(shù)問題就在于克服現(xiàn)有板栗生產(chǎn)技術(shù)中的缺陷，提供一種板栗菌根制劑及其制備方法，本發(fā)明板栗菌根制劑可增強板栗根系對肥水的吸收能力，擴大吸收面積，還可分解土壤中難以分解的養(yǎng)分，土壤干旱時，苗木萎蔫推遲，增強抗旱力；同時，菌根還能分泌激素和有機酸，增進根系的生理活性。
為解決上述問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案本發(fā)明一種板栗菌根制劑，它是由須腹菌屬(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)共同培養(yǎng)制得的菌劑制劑。
本發(fā)明所述制劑可以為液體菌劑或固體菌劑。
本發(fā)明同時提供了一種制備所述的板栗菌根制劑的方法，它包括菌種的選擇、菌種的培養(yǎng)和制劑的制備步驟。
本發(fā)明所述菌種的選擇為選擇分離自懷柔渤海板栗林、與板栗共生的外生菌根真菌須腹菌屬(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletusedulis)。
本發(fā)明所述菌種培養(yǎng)的具體步驟為1)菌種活化從菌種須腹菌屬(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)上挑取少量菌絲接到PDA平板培養(yǎng)基上進行活化，活化條件25℃，暗培養(yǎng)3-5天，菌絲生長到培養(yǎng)皿直徑的1/2-1/3時即可；其中PDA培養(yǎng)基為馬鈴薯150-250g、葡萄糖15-25g、瓊脂15-20g、蒸餾水1000ml；2)液體發(fā)酵培養(yǎng)從平板培養(yǎng)基挑取少量已活化的菌絲，接種到液體培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)基為PDA或ODA，培養(yǎng)條件溫度25℃，pH5左右，振蕩培養(yǎng)5-7天，菌絲生長成為菌絲球；其中，PDA液體培養(yǎng)基為馬鈴薯150-250g、葡萄糖15-25g、瓊脂15-20g、蒸餾水1000ml；ODA液體培養(yǎng)基為甘藍80-120g、1-5％的葡萄糖、0.05％的維生素B1、蒸餾水1000ml。
本發(fā)明所述制劑的制備為將所述制劑制備成液體菌劑或固體菌劑。所述液體菌劑的制備為將液體發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲球與菌液均漿，制成液體懸浮液。所述固體菌劑的制備為將液體發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲球與菌液均漿后，加3倍重量滅菌的草炭或蛭石混勻得固體菌劑。
板栗和本發(fā)明菌根制劑共生可以促進植株生長，提高抗旱性，增加樹體營養(yǎng)水平，提高樹體抗病性。
本發(fā)明板栗菌根制劑可增強根系對肥水的吸收能力，擴大吸收面積，還可分解土壤中難以分解的養(yǎng)分，當(dāng)土壤含水量達到萎蔫系數(shù)時，菌根還能吸水，促進栗根生長；同時，菌根還能分泌激素和有機酸，增進根系的生理活性。
本發(fā)明板栗菌根制劑的應(yīng)用有兩種途徑浸種和浸根。
浸種用于播種育苗或直播造林。把菌根制劑和粘著劑放入水中，菌根制劑與水的比例為1∶50，攪拌均勻，然后將種子倒入其中攪拌，使種子表面均勻附著菌根制劑液，撈出即可播種。也可按1粒種0.5-1克菌根制劑的比例直播。
浸根把板栗苗根放入稀釋50倍的板栗菌根制劑液中浸根，使根系均勻附著菌根制劑液即可栽植。此法可用1年生苗木栽植，生長發(fā)育良好，大大縮短了育苗年限和成本。
本發(fā)明固體菌劑還可直接撒施在育苗床表面或播種溝底部；也可將液體菌根制劑或固體菌劑與種子按1∶5-10的比例混合均勻后播種；也可直接在容器袋內(nèi)穴施，每株0.5～1.0ml液體菌劑；或移苗蘸根1升液體菌根制劑+5Kg水+黃粘土成漿后蘸根。
本發(fā)明板栗菌根制劑含有與板栗有良好共生關(guān)系的高效菌，應(yīng)用本發(fā)明菌根制劑可提高苗木生長量30％以上。提高苗木抗旱性。干旱處理后萎蔫發(fā)生遲0.5-2天，且萎蔫系數(shù)小。提高干旱山地苗木定植成活率，并縮短緩苗時間。擴大根系吸收面積，提高根系吸收能力，分泌有機酸等，活化土壤中難溶性養(yǎng)分。增加植株對N、P、K及微量元素的吸收量。提高樹體營養(yǎng)水平。菌根真菌分泌抗生素類物質(zhì)，抵抗土傳真菌病害發(fā)生。菌根接種技術(shù)成熟，易于操作，可顯著提高板栗生長水平。
本發(fā)明所述須腹菌屬可選擇山西根須腹菌、紅根須腹菌、黑根須腹菌或淺黃根須腹菌。
本發(fā)明所選的美味牛肝菌(Boletus edulis)是常見于松屬和櫟屬林地上的一種大型食用菌，其基部地下菌絲體與樹木共生形成菌根。屬牛菌科(Boletaceae)牛肝菌屬。學(xué)名Boletus edulis Bull.ex Fr.，別名白牛肝、大腳菇等。子實體單生或群生，多生于朝陽山坡林下，土壤為貧瘠的酸性砂壤。每年八、九月份，氣溫20℃以上，空氣相對濕度80％左右時為盛產(chǎn)期。每100g干品含粗蛋白質(zhì)30g、脂肪1g、碳水化合物60g和多種氨基酸。
美味牛肝菌初期球狀或半球狀，菌蓋表面平滑、不粘，蓋寬8-15cm，灰白色、淡褐色、黃褐色至栗褐色；菌肉厚，白色無特殊氣味，味道平淡，受傷時不變色；柄近圓柱形，高3-23cm，直3-7cm，基部膨大，色較蓋淺，外表具凸出的網(wǎng)紋；菌管白色至淡黃色，近柄處凹陷，管口小，每毫米2-3個；孢子淡黃色，近透明，長橢圓形，11-16×4-5μ，內(nèi)含1-3個油滴。
具體實施例方式
實施例11、菌種的選擇選擇分離自懷柔渤海板栗林、與板栗共生的外生菌根真菌須腹菌屬(Rhizopogon)的山西根須腹菌和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
2、菌種培養(yǎng)1)菌種活化用滅菌的接種針從斜面培養(yǎng)的菌種山西根須腹菌和美味牛肝菌上挑取少量菌絲接到PDA平板培養(yǎng)基上進行活化。活化條件25℃，暗培養(yǎng)3天，菌絲生長到培養(yǎng)皿直徑的1/3時即可。其中PDA培養(yǎng)基為馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂18g，蒸餾水1000ml。
2)液體發(fā)酵培養(yǎng)用滅菌的接種針從平板培養(yǎng)基挑取少量已活化的菌絲，接種到液體培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)基為PDA或ODA。培養(yǎng)條件溫度25℃，pH 5左右，振蕩培養(yǎng)5天，菌絲生長成為菌絲球為宜。
PDA液體培養(yǎng)基馬鈴薯200g、葡萄糖20g、瓊脂18g、蒸餾水1000mlODA液體培養(yǎng)基甘藍100g、3％的葡萄糖、0.05％的維生素B1、蒸餾水1000ml3、制備成液體菌劑將液體發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲球與菌液均漿，制成液體懸浮液。
實施例21、菌種的選擇選擇分離自懷柔渤海板栗林、與板栗共生的外生菌根真菌須腹菌屬(Rhizopogon)的紅根須腹菌和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
2、菌種培養(yǎng)1)菌種活化用滅菌的接種針從斜面培養(yǎng)的菌種紅根須腹菌和美味牛肝菌上挑取少量菌絲接到PDA平板培養(yǎng)基上進行活化?；罨瘲l件25℃，暗培養(yǎng)5天，菌絲生長到培養(yǎng)皿直徑的1/2時即可。其中PDA培養(yǎng)基為馬鈴薯150g、葡萄糖25g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml。
2)液體發(fā)酵培養(yǎng)用滅菌的接種針從平板培養(yǎng)基挑取少量已活化的菌絲，接種到液體培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)基為PDA或ODA。培養(yǎng)條件溫度25℃，pH 5左右，振蕩培養(yǎng)7天，菌絲生長成為菌絲球為宜。
其中，PDA液體培養(yǎng)基為馬鈴薯150g、葡萄糖25g、瓊脂20g、蒸餾水1000ml；ODA液體培養(yǎng)基為甘藍80g、1％的葡萄糖、0.05％的維生素B1、蒸餾水1000ml。
3、制備成固體菌劑將液體發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲球與菌液均漿后，加3倍重量滅菌的草炭混勻得固體菌劑。
實施例31、菌種的選擇選擇分離自懷柔渤海板栗林、與板栗共生的外生菌根真菌須腹菌屬(Rhizopogon)的黑根須腹菌和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
2、菌種培養(yǎng)1)菌種活化用滅菌的接種針從斜面培養(yǎng)的菌種黑根須腹菌和美味牛肝菌上挑取少量菌絲接到PDA平板培養(yǎng)基上進行活化?；罨瘲l件25℃，暗培養(yǎng)4天，菌絲生長到培養(yǎng)皿直徑的1/3時即可。其中PDA培養(yǎng)基為馬鈴薯250g、葡萄糖15g、瓊脂15g、蒸餾水1000ml。
2)液體發(fā)酵培養(yǎng)用滅菌的接種針從平板培養(yǎng)基挑取少量已活化的菌絲，接種到液體培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)基為PDA或ODA。培養(yǎng)條件
溫度25℃，pH 5左右，振蕩培養(yǎng)6天，菌絲生長成為菌絲球為宜。
其中，PDA液體培養(yǎng)基為馬鈴薯250g、葡萄糖15g、瓊脂15g、蒸餾水1000ml；ODA液體培養(yǎng)基為甘藍120g、5％的葡萄糖、0.05％的維生素B1、蒸餾水1000ml。
3、制備成固體菌劑將液體發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲球與菌液均漿后，加3倍重量滅菌的蛭石混勻得固體菌劑。
實施例4浸種用于播種育苗或直播造林。把實施例1-3制備的任一板栗菌根制劑和粘著劑放入水中，菌根制劑與水的比例為1∶50，攪拌均勻，然后將種子倒入其中攪拌，使種子表面均勻附著菌根制劑液，撈出即可播種。也可按1粒種0.5-1克菌根制劑的比例直播。
實施例5浸根板栗苗根放入稀釋50倍的實施例1-3制備的任一板栗菌根制劑液中浸根，使根系均勻附著菌根制劑液即可栽植。此法可用1年生苗木栽植，生長發(fā)育良好，大大縮短了育苗年限和成本。
實施例6試驗例應(yīng)用本發(fā)明實施例1-3制備的板栗菌根制劑的板栗，根的生物量與對照組相比增加26％，莖葉生物量增加30％以上。
表1接種本發(fā)明實施例1-3制備的菌根制劑對板栗生物量的影響

本發(fā)明板栗菌根制劑能夠促進根系對磷元素的吸收，本發(fā)明板栗菌根制劑對促進磷吸收的貢獻率達39.3-53.7％。
表2外生菌根對板栗吸收P的影響

菌絲貢獻率(％)＝{(菌根植物吸P量-非菌根植物吸P量)/菌根植物吸P量}×100％對照組為未施加菌根制劑的非菌根組。
本發(fā)明板栗菌根制劑能夠提高苗木抗旱性。干旱處理后萎蔫發(fā)生遲0.5-2天，且萎蔫系數(shù)小。
利用聚乙二醇脫水處理板栗菌根苗和非菌根苗，8小時后對照出現(xiàn)暫時萎蔫，相對含水量為76.4％，在非菌根苗出現(xiàn)暫時萎蔫12小時后菌根苗才出現(xiàn)暫時萎蔫，且接種菌根的葉片相對含水量下降較為平緩，萎蔫時相對含水量較低，為72.0％，萎蔫系數(shù)小。
本發(fā)明板栗菌根制劑能夠提高干旱地苗木定植成活率，并縮短緩苗時間。
本發(fā)明不局限于上述最佳實施方式，任何人在本發(fā)明的啟示下得出的其他任何與本發(fā)明相同或相近似的產(chǎn)品，均落在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種板栗菌根制劑，其特征在于它是由須腹菌屬(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)共同培養(yǎng)制得的菌根制劑。
2.如權(quán)利要求1所述的板栗菌根制劑，其特征在于所述制劑為液體菌劑或固體菌劑。
3.一種制備如權(quán)利要求1所述的板栗菌根制劑的方法，其特征在于它包括菌種的選擇、菌種的培養(yǎng)和制劑的制備步驟。
4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述菌種的選擇為選擇分離自懷柔渤海板栗林、與板栗共生的外生菌根真菌須腹菌屬(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)。
5.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述菌種培養(yǎng)的具體步驟為1)菌種活化從菌種須腹菌屬(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletusedulis)上挑取少量菌絲接到PDA平板培養(yǎng)基上進行活化，活化條件25℃，暗培養(yǎng)3-5天，菌絲生長到培養(yǎng)皿直徑的1/2-1/3時即可；其中PDA培養(yǎng)基為馬鈴薯150-250g、葡萄糖15-25g、瓊脂15-20g、蒸餾水1000ml；2)液體發(fā)酵培養(yǎng)從平板培養(yǎng)基挑取少量已活化的菌絲，接種到液體培養(yǎng)瓶中，培養(yǎng)基為PDA或ODA，培養(yǎng)條件溫度25℃，pH5左右，振蕩培養(yǎng)5-7天，菌絲生長成為菌絲球；其中，PDA液體培養(yǎng)基為馬鈴薯150-250g、葡萄糖15-25g、瓊脂15-20g蒸餾水1000ml；ODA液體培養(yǎng)基為甘藍80-120g、1-5％的葡萄糖、0.05％的維生素B1、蒸餾水1000ml。
6.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述制劑的制備為將所述制劑制備成液體菌劑或固體菌劑。
7.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述液體菌劑的制備為將液體發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲球與菌液均漿，制成液體懸浮液。
8.如權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于所述固體菌劑的制備為將液體發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲球與菌液均漿后，加3倍重量滅菌的草炭或蛭石混勻得固體菌劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種板栗菌根制劑，它是由須腹菌屬(Rhizopogon)和美味牛肝菌(Boletus edulis)共同培養(yǎng)制得的菌根制劑。它可增強板栗根系對肥水的吸收能力，擴大吸收面積，還可分解土壤中難以分解的養(yǎng)分，土壤干旱時，苗木萎蔫推遲，增強抗旱力；同時，菌根還能分泌激素和有機酸，增進根系的生理活性。
文檔編號A01P21/00GK101077078SQ20061008120
公開日2007年11月28日 申請日期2006年5月25日 優(yōu)先權(quán)日2006年5月25日
發(fā)明者秦嶺 申請人:秦嶺