專利名稱：動物血液固定保存新方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種采集試驗動物血樣標本保存的方法，特別是野外采集試驗動物血液固定保存的方法，屬于分子生物學技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
分析DNA水平上的變異要求有純度好、分子量至少為約50kb的DNA樣品，往往還要求有大量的平行樣品作比較生物學分析。研究中采集的血樣必須盡可能快地放在冷環(huán)境中，否則血樣DNA可能發(fā)生破壞或原位降解。目前傳統(tǒng)的采集血樣的保存方法，是在采集的血樣中加入一定比例的抗凝劑，使血液不會凝固，然后立即離心并重懸于抽提緩沖液或運用液氮罐、干冰箱、冰壺、冰袋等設(shè)備0℃低溫保存運至實驗室備用，以保證血樣發(fā)生的破壞程度最低。動物血樣的采集通常在野外邊遠地區(qū)和山區(qū)，這些地區(qū)大多交通不便，給采集試驗動物血樣標本的保存帶來很多困難，采血地點沒有電力供應(yīng)，就無法完成離心；較大的血液樣本量不能保證低溫保存；采血地點離實驗室遠，運輸時間長，采集血液樣本不能及時運至實驗室，運輸途中冰塊融化，會導(dǎo)致血樣的破壞等。因此，要采集和及時運輸新鮮血樣供提取DNA用十分困難，傳統(tǒng)的采集血樣保存方法不能滿足實驗要求。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是要克服傳統(tǒng)的采集血樣保存方法的不足，提供一種簡易方便的，既無需電力供應(yīng)，也無需低溫保存運輸?shù)膭游镅汗潭ū４嫘路椒ā?br> 本發(fā)明的技術(shù)方案是將采集的血樣標本加入預(yù)先裝有酒精溶液的試管中混勻，保存，血樣和酒精溶液的體積比為1∶3.5-4.5。所述的酒精溶液為75％乙醇(V/V)。所述的血樣加入裝有酒精溶液的試管中混勻，是先將裝有血樣標本和酒精溶液的試管口迅速封閉，再立即進行輕輕晃動，使血樣和酒精溶液混勻。所述的保存是將裝有血樣和酒精溶液的試管口向上放入容器后密封，在常溫下存放、及時運輸至實驗室。
將采集的血樣加入裝有一定比例酒精溶液的試管中，不需進行抗凝處理和離心而直接進行固定處理，輕輕混勻后，常溫下運輸至實驗室進行DNA的提取等。主要原理是乙醇是保存核酸的最佳固定劑，乙醇保存只會引起DNA很小程度的剪切，用無水乙醇固定標本48h后直接保存，保存時間最長達2年，從這樣標本中提取的DNA對DNA-DNA雜交、RFLP、RAPD、AFLP、基因克隆以及序列分析都能成功。據(jù)此進行了試驗工作，在全血中直接加入酒精(75％乙醇)溶液進行固定，在常溫下運輸至實驗室分析。用該方法獲得的DNA的產(chǎn)率和純度均優(yōu)于傳統(tǒng)方法獲得的結(jié)果，試驗結(jié)果證明這是一種理想的血樣固定保存方法，該方法特別適用于在野外、農(nóng)村等偏僻地區(qū)進行血液采集工作，不需有液氮或干冰設(shè)備，無需電力供應(yīng)，也無需低溫運輸，簡易方便，可便利地應(yīng)用于生產(chǎn)實際，提高工作效率，降低成本。
具體實施例方式
將采集到的一定體積的血液加入預(yù)先裝有酒精(75％乙醇)溶液的試管中，血樣和酒精(75％乙醇)溶液的體積比為1∶3.5-4.5。將上述裝有血樣的試管口迅速封閉，立即輕輕晃動混勻。將所有的裝有血樣的試管口向上放入一容器后密封，在常溫下保存，及時運輸至實驗室提取DNA。
權(quán)利要求
1.一種動物血液固定保存新方法，其特征是將采集的血樣標本加入預(yù)先裝有酒精溶液的試管中混勻，保存，血樣和酒精溶液的體積比為1∶3.5-4.5。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物血液固定保存新方法，其特征是所述的酒精溶液為75％乙醇。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物血液固定保存新方法，其特征是所述的血樣加入裝有酒精溶液的試管中混勻，是先將裝有血樣標本和酒精溶液的試管口迅速封閉，再立即進行輕輕晃動，使血樣和酒精溶液混勻。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的動物血液固定保存新方法，其特征是所述的保存是將裝有血樣和酒精溶液的試管口向上放入容器后密封，在常溫下存放、及時運輸至實驗室。
全文摘要
動物血液固定保存新方法，屬于分子生物學技術(shù)領(lǐng)域。將采集血樣加入裝有酒精(75％乙醇)溶液的試管中混勻，保存，血樣和酒精溶液的體積比為1∶3.5－4.5。將裝有血樣和酒精溶液的試管口向上放入容器后密封，在常溫下存放、運輸至實驗室。本發(fā)明工藝科學先進簡單，不需進行抗凝處理和離心而直接進行固定處理，在常溫下運輸至實驗室進行DNA的提取等。有助于在偏僻地區(qū)進行血液采集工作，不需有液氮或干冰設(shè)備，無需電力供應(yīng)，也無需低溫運輸，簡易方便，可方便地應(yīng)用于生產(chǎn)實際，提高工作效率，降低成本。有很好的推廣應(yīng)用價值。
文檔編號A01N1/00GK1596636SQ20041004185
公開日2005年3月23日 申請日期2004年8月31日 優(yōu)先權(quán)日2004年8月31日
發(fā)明者陳寬維, 章雙杰, 李慧芳, 章明, 湯青萍, 屠云潔 申請人:陳寬維, 章雙杰, 李慧芳, 章明, 湯青萍, 屠云潔