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技術(shù)編號：460230

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專利摘要本發(fā)明是一種利用限制性內(nèi)切酶、T-發(fā)卡結(jié)構(gòu)(HSO-T)和巢式PCR擴增等技術(shù)，基于已知DNA序列擴增其5′或3′端側(cè)翼未知序列的方法。該方法設(shè)計一條HSO-T的寡聚核苷酸序列；用單一限制性內(nèi)切酶酶切基因組DNA并經(jīng)rTaq或Ex?Taq修飾；HSO-T接頭與修飾后基因組連接；根據(jù)HSO-T序列合成引物THSO-F，根據(jù)已知DNA序列合成2條下游引物或2條上游引物；以連接物為模板，引物THSO-F和2條下游引物進行巢式PCR擴增獲得5′端未知序列；同理，引物HSO-F和2條上游引物進行巢式PCR獲得3′端未...
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