含有以單乙?；；视突衔镒鳛橛行С煞值南念A防或者治療用組合物的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及含有以單乙酰基二?；视突衔镒鳛橛行С煞值南念A防或治 療用藥學組合物、哮喘的預防或改善用健康功能食品組合物。
【背景技術】
[0002] 伴隨工業(yè)的發(fā)展，近年來因生活環(huán)境遭受污染、飲食生活發(fā)生變化，多種多樣的過 敏性疾病正在增加，在這些過敏性疾病當中，尤其是哮喘的發(fā)病率大大增加。哮喘是以慢性 氣道炎癥及氣道過敏性為特征的肺病，哮喘是因大氣污染物質(zhì)、塵暴、過敏源等引起。據(jù)悉， 兒童的哮喘患病率高于成年人，并且隨著飲食習慣的變化及歐式化，哮喘患病率呈增長趨 勢。哮喘的發(fā)病機制有很多種，在這些機制當中因 Th2(T helper type 2)類型的免疫反應 充進，增加了白介素（interluekin)-4,5,13等的分泌，而此反應使得包括嗜酸粒細胞在內(nèi) 的很多炎癥細胞移動及擴散到肺部組織內(nèi)。而且炎癥細胞將釋放多種傳染因子及趨化因 子，使得炎癥反應更加惡化，并且增加氣道內(nèi)杯狀細胞的黏液分泌，而引發(fā)氣道過敏性。因 上述一系列的反應，哮喘患者會出現(xiàn)呼吸困難、發(fā)紺、胸痛等臨床癥狀。
[0003] 目前，用于治療哮喘的藥物有類固醇制劑、支氣管擴張劑或者抗生劑等。類固醇制 劑和抗生劑通過抑制免疫反應及炎癥反應來治療哮喘，而支氣管擴張劑當出現(xiàn)呼吸困難等 臨床癥狀時，通過抵消這些癥狀來治療哮喘。但是這些藥物有包括抑制免疫、抑制骨髓生成 等的副作用在內(nèi)的抗生劑抗藥性，而且長期使用時還會出現(xiàn)副作用，因此其作為用于治療 哮喘的治療劑非常受限。因此，一直以來，有關能夠克服上述副作用、毒性小、治療效果優(yōu)秀 的天然物或者新的化合物的研發(fā)不斷進行著。
[0004] EC-18作為單乙酰基二?；视?monoaety ldiacy Iglyceride)的一種，是從鹿鸞 分離出來的。EC-18具有造血功能，在利用盲腸結扎穿孔術（cecal-ligat ion-puncture) (CLP)的敗血癥動物模型中使動物的生存率大大增加，并且在實驗室管理規(guī)范GLP(G〇〇d Laboratory Practice)毒性試驗中也顯示沒有毒性。但是包括上述EC-18的單乙酰基二酰 基甘油化合物對過敏性哮喘有怎樣的效果至今無任何揭示。因此本發(fā)明人為了開發(fā)天然物 的衍生物或者新的化合物的哮喘治療劑而努力的結果，確認單乙?；；视突衔锟?以減輕氣道過敏性、抑制支氣管內(nèi)炎癥細胞的擴散，更好的使用在哮喘的預防或者治療中 并完成了本發(fā)明。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明要解決的技術問題
[0006] 本發(fā)明的一個目的是，提供含有以下述化學式1表示的單乙酰基二?；视突?物作為有效成分的，哮喘的預防或治療用藥學組合物、哮喘的預防或改善用健康功能食品 組合物。
[0007] [化學式1]
[0008]
[0009] 上述化學式中Rl及R2分別是碳數(shù)為14至20的脂肪酸基。
[0010] 本發(fā)明的另一個目的是，提供哮喘的預防或治療方法，包括以下步驟，將上述藥學 組合物對哮喘的發(fā)病可能性或得了哮喘的個體給藥。
[0011] 解決問題的技術方案
[0012] 作為為了達到上述目的的一種做法，本發(fā)明提供含有以下述化學式1表示的單乙 ?；；视突衔镒鳛橛行С煞值?，哮喘的預防或者治療用藥學組合物。
[0013][化學式1]
[0014]
[0015] 在上還化字
式中Rl及R2分別是碳數(shù)為14至20的脂肪酸基。本說明書中的脂肪酸基 指的是從脂肪酸的羧基中除去-OH基的剩下的部分。
[0016] 具體的，本發(fā)明的哮喘預防或者治療用藥學組合物可以包括以上述化學式1表示 的單乙?；；视突衔铩１景l(fā)明中用語"單乙?；；视突衔?是指具有1個 乙酰基和2個?；母视脱苌铮部梢苑Q作單乙?；；视?MADG)。
[0017] 以上述化學式1表示的單乙?；；视突衔镏蠷l及R2分別可以是碳數(shù)為14 至20之間的脂肪酸基，優(yōu)選地可以是，棕櫚酰（palmi toy 1)、油酰（oleoy 1)、亞油酰 (Iinoleoyl)、亞麻酰（linoIenoyl)、硬脂酰（stearoy 1 )、十四酰(myristoyl)、花生四稀酰 (arachidonoyl)等，但不僅限于此。更優(yōu)選地，上述Rl及R2的組合(R1/R2)可以是油酰/棕櫚 酰、棕櫚酰/油酰、棕櫚酰/亞油酰、棕櫚酰/亞麻酰、棕櫚酰/花生四烯酰、棕櫚酰/硬脂酰、棕 櫚酰/棕櫚酰、油酰/硬脂酰、亞油酰/棕櫚酰、亞油酰/硬脂酰、硬脂酰/亞油酰、硬脂酰/油 酰、十四酰/亞油?；蛘呤孽?油酰等，但不僅限于此。再者，上述單乙?；；视突?合物作為光學活性，可以是(R)-型、（S)-型或者外消旋體。
[0018] 上述單乙?；；视突衔?，優(yōu)選地可以是以下述化學式2表示的化合物。
[0019] [化學式2]
[0020]
[0021 ]以上述化學式2表示的化合物稱為1-棕櫚酰(palmitoyl )-2-亞油酰（Iinoleoyl)-3-乙酰甘油(acetylglycerol)，在本說明書中命名為PLAG或者EC-18。上述化合物的Rl和R2 是分別屬于棕櫚酰和亞油酰。
[0022]上述單乙?；；视突衔锟梢詮穆谷字刑崛?分離或者以公知的有機合成 法(韓國公告號為第10-0789323)制備。具體的，鹿茸以乙烷提取，再將其提取殘渣用氯仿提 取后，獲得的提取液再減壓蒸餾而獲得鹿茸中的氯仿提取物。上述提取中作為提取溶劑使 用的乙烷及氯仿的量以可以沒過各個使用的鹿茸的程度就很充分，一般對于Ikg鹿茸可以 使用各個以4~5 ?左右比例的乙烷及氯仿，但是提取溶劑的種類和使用量不限于此。用此類 方法獲得的鹿茸的氯仿提取物繼續(xù)根據(jù)一系列硅膠柱色譜法及TLC方法進一步分餾并精 煉，而獲得本發(fā)明中使用的單乙?；；视皖惢衔?。上述色譜法精煉階段的洗脫液 可以使用氯仿/甲醇、乙烷/乙酸乙酯、乙烷/乙酸乙酯/醋酸等，但并不限于此。
[0023] 一方面，將上述單乙?；；视突衔镆曰瘜W的合成方法已公開在韓國公告 號為第10-0789323中。具體的，（a)在I-R1-甘油的3號位置附上保護基，制備l-Ri-3-保護基-甘油的過程；（b)在I-R 1H2-S-保護基-甘油的2號位置導入1?2基，制備I-R1H 2-S-保護 基-甘油的過程及；（c)可以包括保護基-甘油的脫保護反應及乙?；磻瑫r 執(zhí)行的過程，根據(jù)需要精煉并且可以合成想要的單乙?；；视突衔?，作為其他方 法還可以用乙酰解(acetolysis)來獲得卵磷脂，但不僅限于此。不僅上述化學式1的化合 物，其立體異構體也可以包括在本發(fā)明的范疇內(nèi)。
[0024]根據(jù)本發(fā)明，因確認上述單乙?；；视突衔锟梢詼p少由IL-4，IL-5及IL-13當中所選擇的細胞因子或者IgE的分泌，所以確認可以有效的使用在哮喘的預防或者治 療中。
[0025] 本發(fā)明中的用語"慢性阻塞性肺病"是指肺部內(nèi)的支氣管處于過度敏感的狀態(tài)下， 支氣管時而變窄，而出現(xiàn)氣喘、烏魯烏魯?shù)拇⒑涂人詤柡Φ劝Y狀的疾病，是由于支氣管的 過敏反應而引起的過敏性疾病。哮喘的代表性癥狀是呼吸困難、咳嗽、喘鳴聲（呼吸急促） 等，把變窄的支氣管能夠在短時間內(nèi)進行緩解的癥狀緩解劑(支氣管緩解劑)或者通過抑制 支氣管的過敏性炎癥來預防哮喘的發(fā)作的疾病調(diào)節(jié)劑(抗炎劑、白三烯調(diào)節(jié)劑)等作為代表 性治療機被使用。本發(fā)明中上述哮喘包括支氣管性哮喘、過敏性哮喘、特應性哮喘、非特應 性哮喘、運動引發(fā)性哮喘、阿司匹林哮喘、心因性哮喘或者肺泡性哮喘，但并不限于此。本發(fā) 明中的用語，〃預防〃指的是通過給藥上述組合物，抑制或遲延哮喘的發(fā)病的所有行為，〃治 療〃指的是通過上述組合物使得哮喘的癥狀有所好轉或有利變更的所有行為。
[0026] Th2(helper T cell Type 2)細胞所生產(chǎn)的作為細胞因子(cytokine)的白介素-4 (IL-4)、白介素-5(IL-5)及白介素-13(IL-13)在支氣管哮喘當中氣道重要的媒介作用 (Coyle AJ.et al.1995.Am J Respir Cell Mol Biol.13( I):54-9；Nakajima H.et al.1992.Am.Rev.Respir.Dis.146(2):374-7；ffills-Karp,M.et al.1998.Sci.282(5397): 2258-61 ;Cohn et al.^OOLMedoff et al·,2008)。具體地，引發(fā)支氣管哮喘的抗原一次 地被巨噬細胞所消除，在此過程中，被活性化的肺泡的巨噬細胞刺激B細胞而生產(chǎn)IgE的話， IgE將通過把肥大細胞活性化的方法來擔當初期的哮喘反應。與此同時，暴露于引發(fā)哮喘的 抗原的B細胞將刺激CD4 T細胞并被分化為Th2細胞，其Th2細胞在肺部組織及支氣管肺泡灌 洗液(BALF)內(nèi)將促進類似IL-4、IL-5及IL-13的細胞因子的分泌，廣為認為的是，哮喘反應 就是由于這些被促進的細胞因子導致支氣管過敏性和氣道閉合而引發(fā)的。因此，能夠通過 抑制由上述IL-4、IL-5及IL-13當中所選擇的的細胞因子的分泌或者抑制IgE的分泌來抑制 哮喘反應。
[0027] 本發(fā)明的實施例中，i)小鼠 T細胞淋巴瘤(mouse T cell lymphoma)細胞