轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品抽樣模型及其建立方法
【專利摘要】轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品抽樣模型及其建立方法，所述抽樣模型對(duì)于不同轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品含量的產(chǎn)品進(jìn)行抽樣時(shí)分別設(shè)定了規(guī)則，根據(jù)抽樣時(shí)的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差的要求，在不同轉(zhuǎn)基因含量下，面對(duì)不同批質(zhì)量的樣品，確定出抽樣份樣數(shù)對(duì)RSD的影響最大，并確定了不同批質(zhì)量對(duì)應(yīng)的最小份樣量，建立了抽樣模型，并公開(kāi)其建立方法，本發(fā)明為現(xiàn)有技術(shù)提供抽樣方式的指導(dǎo)，其抽樣模型具有科學(xué)性、準(zhǔn)確性，為測(cè)定轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品含量獲得更準(zhǔn)確有效的數(shù)據(jù)提供了基礎(chǔ)。
【專利說(shuō)明】
轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品抽樣模型及其建立方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明設(shè)及轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品含量測(cè)定中樣品抽樣模型及其建立方法，屬于轉(zhuǎn)基因農(nóng) 產(chǎn)品含量測(cè)定領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 在過(guò)去30多年里，由于轉(zhuǎn)基因技術(shù)的快速發(fā)展，轉(zhuǎn)基因植物的種植面積和產(chǎn)量持 續(xù)提升。一方面，轉(zhuǎn)基因植物種植面積連續(xù)增，另一方面，轉(zhuǎn)基因植物的品種、品系不斷增 加，部分品種作物的深加工產(chǎn)品中得W較大規(guī)模應(yīng)用，每個(gè)品種的作物可能有很多個(gè)品系 的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品問(wèn)世例如已知有31個(gè)品系的轉(zhuǎn)基因玉米、17個(gè)品系的油菜、8個(gè)品系的大豆已 商品化。
[0003] 轉(zhuǎn)基因植物或食物(GMOs)對(duì)人類健康的影響尚不清楚，對(duì)環(huán)境、生態(tài)等方面的影 響更沒(méi)有確定的結(jié)論。在與轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品相關(guān)的國(guó)際貿(mào)易中經(jīng)常發(fā)生糾紛，進(jìn)而對(duì)轉(zhuǎn)基因檢 測(cè)提出了越來(lái)越高的要求，作為準(zhǔn)確檢測(cè)先決條件的抽樣越來(lái)越得到關(guān)注。轉(zhuǎn)基因成分在 農(nóng)產(chǎn)品批中的分布不均、多品系混雜、在深加工產(chǎn)品中的低含量水平都給轉(zhuǎn)基因檢測(cè)帶來(lái) 困難。如何準(zhǔn)確抽取含有轉(zhuǎn)基因成分的農(nóng)產(chǎn)品樣品，成為擺在科技工作者面前的重要課題。 自國(guó)家轉(zhuǎn)基因生物新品種培育科技重大專項(xiàng)經(jīng)費(fèi)支持的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品抽樣技術(shù)研究啟動(dòng)W 來(lái)，截至2015年，該項(xiàng)目共完成了對(duì)單一品系轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的抽樣研究、多品系混雜轉(zhuǎn)基因產(chǎn) 品的抽樣研究W及部分轉(zhuǎn)基因深加工產(chǎn)品抽樣研究工作。
[0004] 歐盟早在1990年就出臺(tái)了限制轉(zhuǎn)基因投放環(huán)境的法規(guī)，隨著歐盟轉(zhuǎn)基因法規(guī)的逐 步發(fā)展，20世紀(jì)末，轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品闊值被限定為1 %，2001年，Simon Kay等人利用了當(dāng)年仍有 效的國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)ISO 542和ISO 13690中的抽樣相關(guān)術(shù)語(yǔ)，在檢測(cè)方法的L0D = 20copies，L0Q = 100copies的前提下，推薦采用上述兩個(gè)ISO標(biāo)準(zhǔn)抽樣。2003年，歐盟在增加了 C.化oletti 等人的模擬抽樣工作內(nèi)容提交了IS0/DIS21568,按照ISO 542，IS0 664，IS0 13690和系列 統(tǒng)計(jì)抽樣基礎(chǔ)標(biāo)準(zhǔn)ISO 2859，在AQL〉= 1 %的前提下（10%，4%，2%，1%)制定了抽樣策略。 2004年，為了執(zhí)行Reg. 1830/2003，歐盟專家出臺(tái)了抽樣的技術(shù)指南(Rec. 787/2004)，2005 年，EC發(fā)布了限制沒(méi)有批準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因化10玉米產(chǎn)品的緊急措施，隨后又發(fā)布了幾個(gè)EC決議， 用W限制非批準(zhǔn)的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品。2009年，ISO 24333的新版標(biāo)準(zhǔn)發(fā)布，取代了兩個(gè)原有標(biāo)準(zhǔn) ISO 13690和IS06644。然而，它并不適用于外來(lái)的未批準(zhǔn)GM0的抽樣，因?yàn)橹敝聊悄耆詻](méi)有 實(shí)際抽樣數(shù)據(jù)。
[0005] 在中國(guó)，已經(jīng)發(fā)布實(shí)施了關(guān)于轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品的抽樣標(biāo)準(zhǔn)，既適用于批準(zhǔn)產(chǎn)品也適用 于非批準(zhǔn)GM0產(chǎn)品，該標(biāo)準(zhǔn)將會(huì)按照本技術(shù)報(bào)告修訂。另一個(gè)標(biāo)準(zhǔn)已廣泛用于中國(guó)。
[0006] 在加拿大和美國(guó)，沒(méi)有單獨(dú)的轉(zhuǎn)基因產(chǎn)品抽樣標(biāo)準(zhǔn)。他們更愿意按照為非轉(zhuǎn)基因 產(chǎn)品設(shè)計(jì)的標(biāo)準(zhǔn)或方法抽取樣品。
[0007] 目前應(yīng)用于谷物、豆類、食品、飼料等一系列相關(guān)產(chǎn)品的抽樣標(biāo)準(zhǔn)中，只有很少一 部分使用了科學(xué)的抽樣技術(shù)原理，即便運(yùn)些應(yīng)用了科學(xué)抽樣原理的抽樣方案大多采用了理 論計(jì)算、計(jì)算機(jī)模擬等方法，真正采用實(shí)際數(shù)據(jù)研究獲得的僅見(jiàn)于Kim H. Esbensen， Claudia F*aoletti,Pentti MinWdnen等人所在的KeLDA研究組的工作。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008] 本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)于轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品的抽樣缺乏有效 可靠的指導(dǎo)方法，導(dǎo)致在確定其轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品含量時(shí)存在盲目實(shí)驗(yàn)，數(shù)據(jù)缺乏可信度的問(wèn) 題，本發(fā)明提供一種樣品抽樣模型，為現(xiàn)有技術(shù)提供抽樣方式的指導(dǎo)，W便在測(cè)定轉(zhuǎn)基因農(nóng) 產(chǎn)品含量時(shí)獲得更準(zhǔn)確有效的數(shù)據(jù)。
[0009] 本發(fā)明的技術(shù)目的通過(guò)W下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0010] 首先，本發(fā)明第一方面的技術(shù)目的是提供一種轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品抽樣模 型，對(duì)于不同轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品含量的產(chǎn)品進(jìn)行抽樣時(shí)依據(jù)W下模型進(jìn)行：
[0011] ①抽樣份樣數(shù)的確定：要滿足RSD<10%的要求，所述抽樣份樣數(shù)在40~120之間， 具體地，對(duì)于大顆粒貨物批，當(dāng)份樣量在0.化gW上時(shí)，對(duì)于SOOOtW下的批，最小份樣數(shù)為 80;對(duì)于8000~24000t的批，最小份樣數(shù)為100;對(duì)于24000~SOOOOt的批，最小份樣數(shù)為 120;對(duì)于小粒貨物批，對(duì)于8000t W下的批，最小份樣數(shù)為50;對(duì)于8000~2400化的批，最小 份樣數(shù)為75;對(duì)于24000~8000化的批，最小份樣數(shù)為100;
[0012] ②抽樣方法的確定:采用系統(tǒng)抽樣方法或分層抽樣方法；
[0013]③份樣量的確定:份樣量取0.化g~化g。
[0014] 在上述本發(fā)明的抽樣模型中，所述大顆粒貨物為粒度Mmm的產(chǎn)品，包括玉米、大豆 及顆粒與其大小相近的貨物類型。所述小粒貨物為粒度<4mm的產(chǎn)品，包括大米、油菜巧及顆 粒與其大小相近的貨物類型。
[0015] 本發(fā)明第二方面的技術(shù)目的是提供上述抽樣模型的建立方法，包括W下步驟：
[0016] 制備標(biāo)準(zhǔn)品的份樣數(shù)一RSD圖：將轉(zhuǎn)基因原粒與非轉(zhuǎn)基因原粒分別凍干，采用稱重 添加法配制轉(zhuǎn)基因原粒含量為10%~0.0001%的樣品，選擇分層抽樣或系統(tǒng)抽樣方式進(jìn)行 抽樣，提取DNA，進(jìn)行PCR分析，計(jì)算RSD，得出份樣數(shù)一RSD關(guān)系，截取RSD小于20 %，15 %， 10%和5%的最小份樣數(shù)，列表，作圖，確定份樣數(shù)一RSD的規(guī)律。
[0017] 在上述本發(fā)明的建立方法中，所述所述抽樣過(guò)程中控制份樣量含0.化g。
[0018] 在上述本發(fā)明的建立方法中，所述包裝批為固定狀態(tài)的包裝批。
[0019] 作為進(jìn)一步的優(yōu)選，上述建立方法中所述的抽樣方法為系統(tǒng)抽樣。
[0020] 本發(fā)明為現(xiàn)有技術(shù)提供了一種轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品抽樣模型，在測(cè)定轉(zhuǎn)基因 農(nóng)產(chǎn)品含量時(shí)提供抽樣方式的指導(dǎo)，并提供了建立抽樣模型的方法，說(shuō)明本發(fā)明提供的抽 樣模型具有科學(xué)性、準(zhǔn)確性，為測(cè)定轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品含量獲得更準(zhǔn)確有效的數(shù)據(jù)提供了基礎(chǔ)。
【附圖說(shuō)明】
[0021] 圖1.實(shí)施例中作出的最小份樣量-RSD關(guān)系圖。
【具體實(shí)施方式】
[0022] W下結(jié)合技術(shù)方案和附圖詳細(xì)敘述本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】。
[0023] 實(shí)施例1
[0024] 本實(shí)施例中選取47批127個(gè)項(xiàng)目的玉米作為樣品，通過(guò)系統(tǒng)抽樣抽取樣品，將標(biāo)準(zhǔn) 分析樣品攤鋪在1.5mm X 1.5mm X 2.7mm(邊長(zhǎng)X邊長(zhǎng)X深）的微型試料抽取裝置中，用同一 種DNA提取試劑盒提取試料中的目標(biāo)DNA，W隨機(jī)順序分別測(cè)試添加的轉(zhuǎn)基因含量，計(jì)算其 單次相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差，作為分析樣品的總相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)差(單次分析)的度量。其中，每個(gè)試料全部用 于提取DNA，每份DNA提取液實(shí)施PCR分析1次。
[0025] 表1中列舉了RSD小于20% ,15% ,10%和5%的最小份樣數(shù)。
[0026]
[0027]
[002引
[0029]
[0030] 根據(jù)表1的結(jié)果，分別作出最小份樣量-RSD的圖，如圖1所示。
[0031] 綜合表1和圖1的結(jié)果，可W得出下列結(jié)論：
[0032] 要滿足RSD<10%的要求，所述抽樣份樣數(shù)在40~120之間，具體地，對(duì)于大顆粒貨 物批，當(dāng)份樣量在0.化gW上時(shí)，對(duì)于SOOOtW下的批，最小份樣數(shù)為80;對(duì)于8000~2400化 的批，最小份樣數(shù)為100;對(duì)于24000~8000化的批，最小份樣數(shù)為120;對(duì)于小粒貨物批，對(duì) 于8000t W下的批，最小份樣數(shù)為50;對(duì)于8000~2400化的批，最小份樣數(shù)為75;對(duì)于24000 ~8000化的批，最小份樣數(shù)為100。
[0033] 本發(fā)明實(shí)施例1的實(shí)驗(yàn)過(guò)程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果，由W上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明為現(xiàn)有技術(shù) 分別提供了一種轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品抽樣模型的建立方法和建立出的抽樣模型，在檢 測(cè)轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品的含量中，具有較高科學(xué)性和參考價(jià)值。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品包裝批樣品抽樣模型，其特征在于，對(duì)于不同轉(zhuǎn)基因農(nóng)產(chǎn)品含量的產(chǎn) 品進(jìn)行抽樣時(shí)依據(jù)以下模型進(jìn)行： ① 抽樣份樣數(shù)的確定:要滿足RSD〈10 %的要求，所述抽樣份樣數(shù)在40~120之間，具體 地，對(duì)于大顆粒貨物批，當(dāng)份樣量在0.5kg以上時(shí)，對(duì)于8000t以下的批，最小份樣數(shù)為80;對(duì) 于8000~24000t的批，最小份樣數(shù)為100;對(duì)于24000~80000t的批，最小份樣數(shù)為120;對(duì)于 小粒貨物批，對(duì)于8000t以下的批，最小份樣數(shù)為50;對(duì)于8000~24000t的批，最小份樣數(shù)為 75;對(duì)于24000~80000t的批，最小份樣數(shù)為100; ② 抽樣方法的確定:采用系統(tǒng)抽樣方法或分層抽樣方法； ③ 份樣量的確定:份樣量取〇. 5kg~5kg。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抽樣模型，其特征在于，所述大顆粒貨物為粒度>4mm的產(chǎn)品。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的抽樣模型，其特征在于，所述大顆粒貨物包括玉米、大豆及顆 粒與其大小相近的貨物類型。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的抽樣模型，其特征在于，所述小粒貨物為粒度<4mm的產(chǎn)品。5. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的抽樣模型，其特征在于，所述小粒貨物包括大米、油菜籽及顆 粒與其大小相近的貨物類型。6. 權(quán)利要求1~5任意一項(xiàng)所述的抽樣模型的建立方法，包括以下步驟： 制備標(biāo)準(zhǔn)品的份樣數(shù)一 RSD圖：將轉(zhuǎn)基因原粒與非轉(zhuǎn)基因原粒分別凍干，采用稱重添加 法配制轉(zhuǎn)基因原粒含量為10%~0.0001%的樣品，選擇分層抽樣或系統(tǒng)抽樣方式進(jìn)行抽 樣，提取DNA，進(jìn)行PCR分析，計(jì)算RSD，得出份樣數(shù)一RSD關(guān)系，截取RSD小于20 %，15 %，10 % 和5%的最小份樣數(shù)，列表，作圖，確定份樣數(shù)一RSD的規(guī)律。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述抽樣過(guò)程中控制份樣量2 0.5kg。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，所述包裝批為固定狀態(tài)的包裝批。
【文檔編號(hào)】G06F19/24GK105825079SQ201610202641
【公開(kāi)日】2016年8月3日
【申請(qǐng)日】2016年4月1日
【發(fā)明人】曹際娟, 趙禹, 張琳, 卲筠喬, 徐靜
【申請(qǐng)人】曹際娟, 趙禹, 張琳, 卲筠喬, 徐靜