專(zhuān)利名稱(chēng)：通過(guò)虛擬分析板進(jìn)行的試樣細(xì)胞分析方法
通過(guò)虛擬分析板進(jìn)行的試樣細(xì)胞分析方法本發(fā)明涉及一種放置在分析板上的組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)試樣的細(xì)胞分析方法，該方法 包括以下步驟-至少進(jìn)行第一試樣處理，所述處理被設(shè)置為允許區(qū)分試樣的健康細(xì)胞與病理細(xì) 胞，-對(duì)放置在分析板上的試樣進(jìn)行圖像獲取，以便獲得多個(gè)圖像，所述多個(gè)圖像中的 每個(gè)圖像都表示分析板的一個(gè)區(qū)域，所述圖像并排形成試樣整體的圖像。本發(fā)明尤其應(yīng)用于組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)分析方法。本發(fā)明還涉及試樣的虛擬分析板的制備方法，以便允許尤其根據(jù)上述分析方法進(jìn) 行試樣的細(xì)胞分析。例如基于通過(guò)(頸部、陰道或其它的)涂片、通過(guò)器官(心臟、甲狀腺、淋巴結(jié)或其 它)穿刺、或者通過(guò)采集(尿液、支氣管肺泡灌洗或其它)提取的細(xì)胞，將試樣分析例如用 于病理診斷，以便檢測(cè)任何類(lèi)型的病理，尤其是癌癥前期或癌癥的情況。通過(guò)專(zhuān)業(yè)觀測(cè)者來(lái)檢查試樣，這些專(zhuān)業(yè)觀測(cè)者被訓(xùn)練以檢測(cè)放置在分析板或分析 片上的試樣中可能有病的細(xì)胞。為了允許檢測(cè)可能有病的細(xì)胞，試樣經(jīng)受處理，比如使得其 中的細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)的特征能夠變得明顯的染色，以便幫助標(biāo)記和診斷病理細(xì)胞。因此，當(dāng) 觀察試樣時(shí)，與正常細(xì)胞相比，可能有病的細(xì)胞在細(xì)胞核處和細(xì)胞質(zhì)處都表現(xiàn)出在形狀和 尺寸方面的染色親和性的差異。該分析可以手動(dòng)方式進(jìn)行，而無(wú)需特殊輔助。在這種情況下，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生使多 個(gè)試樣板在顯微鏡下接連行進(jìn)，并觀察其中每個(gè)板以便檢測(cè)指示病理細(xì)胞的形態(tài)異常，這 些病理細(xì)胞例如可以對(duì)應(yīng)于癌癥前期或者癌癥的狀態(tài)。這種分析方法十分枯燥且極其消耗 時(shí)間。另外，該方法無(wú)法提供令人滿意的結(jié)果，尤其是“陰性錯(cuò)誤”(也就是說(shuō)，試樣被認(rèn)為 正常但病人體內(nèi)存在病理，尤其是癌癥前期或癌癥病理，有在錯(cuò)誤地放心的病人體內(nèi)隨后 惡化為癌癥的風(fēng)險(xiǎn))估計(jì)約為30%。為改進(jìn)分析結(jié)果，提出了改進(jìn)采樣方式，即細(xì)胞的數(shù)量、固定、染色及其在分析板 上的涂抹，還提出在分析中例如通過(guò)信息分析手段(比如圖像處理軟件及其它)來(lái)輔助專(zhuān) 業(yè)技師或醫(yī)生。為此，攝像機(jī)或拍攝裝置被用于獲取放置在分析板上的試樣的不同區(qū)域的圖像， 并向信息系統(tǒng)傳輸這些圖像的數(shù)據(jù)，信息系統(tǒng)因此工作在“虛擬”分析板上。該信息系統(tǒng)允許進(jìn)行信號(hào)處理，圖像的預(yù)處理，以及在可能的情況下對(duì)圖像與新 創(chuàng)建的或已存在的數(shù)據(jù)庫(kù)的比較分析，以便加快分析過(guò)程從而允許分析數(shù)量更大的試樣和 輔助專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生。例如自動(dòng)檢查試樣的圖像，并且如果發(fā)現(xiàn)某些區(qū)域有異常，就將對(duì)應(yīng) 的圖像傳輸給專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生，因此專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生能夠確定這些區(qū)域是否表現(xiàn)出病理細(xì) 胞。因此，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生只觀察異常區(qū)域而無(wú)需分析被信息系統(tǒng)認(rèn)為正常的區(qū)域。這樣 的方法有效地允許加快分析。然而，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生就不再有機(jī)會(huì)觀察形態(tài)改變較小的試樣或正常的試樣，這 對(duì)他們對(duì)試樣的評(píng)估不利，且尤其對(duì)他們的學(xué)習(xí)曲線甚至是保持診斷的敏銳度不利。事實(shí)上，試樣的分析基于要檢查試樣和比較正常區(qū)域與表現(xiàn)出異常的區(qū)域的專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生的 培訓(xùn)和實(shí)踐。通過(guò)計(jì)算機(jī)輔助的分析取消該實(shí)踐可能導(dǎo)致專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生技能下降從而導(dǎo) 致分析錯(cuò)誤。本發(fā)明旨在通過(guò)提出以下分析方法來(lái)克服上述缺點(diǎn)該分析方法在受到輔助以便 允許顯著的時(shí)間增益的同時(shí)還允許專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生進(jìn)行既觀察正常試樣又觀察異常試樣 的訓(xùn)練。為此，本發(fā)明涉及一種前述類(lèi)型的分析方法，所述方法還包括以下步驟-使從試樣獲取的所有圖像以預(yù)定的滾動(dòng)速度在顯示裝置上自動(dòng)滾動(dòng)，所述速度 被設(shè)置為允許觀測(cè)者分析圖像并判斷所表示的試樣區(qū)域是否包括可能有的病理細(xì)胞，_如果檢測(cè)到能夠表示存在病理細(xì)胞的至少一個(gè)異常，則停止?jié)L動(dòng)，以及其特征在于，在對(duì)圖像的自動(dòng)化分析之后自動(dòng)進(jìn)行滾動(dòng)的停止，如果在圖像 中檢測(cè)到被定義為異常的特定對(duì)象，則執(zhí)行所述停止。因此，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生既觀察試樣的異常區(qū)域也觀察試樣的正常區(qū)域，并且由于 記錄的圖像自動(dòng)滾動(dòng)所以該分析比手動(dòng)分析要快。另外，根據(jù)本發(fā)明的方法允許整體地重 構(gòu)試樣的圖像，從而無(wú)需使用顯微鏡，并且借助攝像裝置允許獲取呈現(xiàn)分析板的整個(gè)表面 的圖像，如后面描述那樣。根據(jù)該分析方法的其它特征-圖像的滾動(dòng)速度是可調(diào)節(jié)的；-該方法還包括在對(duì)試樣的具有異常的區(qū)域的分析之后滾動(dòng)的再次啟動(dòng)步驟，所 述再次啟動(dòng)步驟由觀測(cè)者控制，-該方法包括滾動(dòng)自動(dòng)停止在沒(méi)有異常的圖像上或者自動(dòng)停止在與評(píng)估試樣的代 表性所需的對(duì)象相對(duì)應(yīng)的圖像上的步驟，在確認(rèn)圖像沒(méi)有異常之后觀測(cè)者控制滾動(dòng)的再次 啟動(dòng)，-在試樣上實(shí)現(xiàn)兩種不同的處理，所述處理被設(shè)置為允許標(biāo)記試樣的細(xì)胞中的病 理細(xì)胞，執(zhí)行兩個(gè)圖像獲取步驟，每個(gè)獲取步驟都允許根據(jù)對(duì)試樣執(zhí)行的處理中的一個(gè)來(lái) 檢測(cè)異常，通過(guò)每個(gè)獲取步驟獲取的圖像的數(shù)據(jù)被疊加以使得觀測(cè)者在所述圖像滾動(dòng)時(shí)能 夠從根據(jù)一個(gè)獲取步驟獲取的區(qū)域的圖像轉(zhuǎn)換到根據(jù)另一獲取步驟獲取的同一區(qū)域的圖 像，-從根據(jù)一個(gè)獲取步驟的區(qū)域的圖像轉(zhuǎn)換到根據(jù)另一獲取步驟獲取的同一區(qū)域的 圖像是在圖像中檢測(cè)到異常時(shí)進(jìn)行的，-處理步驟是通過(guò)熒光團(tuán)(fluorophore)對(duì)試樣進(jìn)行染色或標(biāo)記的步驟，_對(duì)根據(jù)另一獲取步驟獲取的圖像的顯示伴隨著以下信息的顯示這些信息是關(guān) 于所顯示的試樣區(qū)域的信息和/或關(guān)于試樣的整體的信息和/或關(guān)于從身上提取到試樣的 病人的信息，-該方法包括放大圖像以便允許觀看所顯示的區(qū)域的細(xì)節(jié)的步驟，-放大的比例是可調(diào)節(jié)的。本發(fā)明還涉及一種為了允許試樣的細(xì)胞分析而制備試樣的虛擬分析板的方法，所 述方法包括以下步驟-制備試樣，
-對(duì)試樣進(jìn)行第一處理步驟，所述處理允許相對(duì)于其它細(xì)胞標(biāo)記病理細(xì)胞，-對(duì)試樣進(jìn)行第二處理步驟，所述處理允許以不同于第一處理步驟的方式相對(duì)于 其它細(xì)胞標(biāo)記病理細(xì)胞，-在對(duì)試樣的處理步驟之前或之后或之間，將試樣設(shè)置在分析板上。該方法還包括 以下步驟-對(duì)設(shè)置在分析板上的試樣進(jìn)行第一圖像獲取，以便獲得多個(gè)圖像，所述多個(gè)圖像 中的每個(gè)圖像都表示分析板的一個(gè)區(qū)域，所述多個(gè)圖像并排布置形成試樣的整體的圖像， 所述多個(gè)圖像允許檢測(cè)通第一處理步驟標(biāo)記的病理細(xì)胞，-對(duì)設(shè)置在分析板上的試樣進(jìn)行第二圖像獲取，以便獲得多個(gè)圖像，所述多個(gè)圖像 中的每個(gè)圖像都表示分析板的一個(gè)區(qū)域，所述多個(gè)圖像并排布置形成試樣的整體的圖像， 所述多個(gè)圖像允許檢測(cè)除通過(guò)第一處理步驟標(biāo)記的病理細(xì)胞以外的其它細(xì)胞異常，-所獲取的圖像形成虛擬分析板。這種方法允許以特別簡(jiǎn)單的方式實(shí)現(xiàn)試樣的圖像，該圖像使得能夠以兩種不同的 方式檢測(cè)可能有的病理細(xì)胞并獲得關(guān)于該試樣的大量信息，如后面描述那樣。根據(jù)該制備方法的其它特征-該方法還包括對(duì)在第一圖像獲取時(shí)獲取的圖像數(shù)據(jù)和在第二圖像獲取時(shí)獲取的 圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行疊加的步驟，-試樣的第一處理步驟是熒光標(biāo)記步驟，-第一處理步驟包括在試樣中引入基準(zhǔn)球的步驟，所述球作為用于圖像獲取的對(duì) 焦的對(duì)照物，-試樣的第二處理步驟是巴氏染色(colorationde Papanicolaou)步驟。通過(guò)上述制備方法獲得的虛擬分析板隨后被通過(guò)前述分析方法分析。通過(guò)閱讀隨后作為示例的描述并且參照附圖，將更好理解本發(fā)明的其它方面和優(yōu) 點(diǎn)，在附圖中-

圖1是根據(jù)本發(fā)明的虛擬分析板的制備方法的各個(gè)步驟的示意圖，-圖2是示出根據(jù)本發(fā)明的細(xì)胞分析方法的各個(gè)步驟的程序框圖。參照?qǐng)D1來(lái)描述制備虛擬分析板1的方法以便進(jìn)行由信息系統(tǒng)輔助的虛擬分析板 1的細(xì)胞分析?！疤摂M板” 1是指涉及試樣2的分組的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)和信息的集合。例如通過(guò)(頸部、陰道或其它的)涂片、通過(guò)器官(心臟、甲狀腺、淋巴結(jié)或其它) 穿刺、或者通過(guò)采集(尿液、支氣管肺泡灌洗或其它)獲得試樣2。在第一步驟A的過(guò)程中， 試樣懸浮在例如試樣試管或燒瓶4中。在步驟B的過(guò)程中，試樣經(jīng)受旨在相對(duì)于其它細(xì)胞標(biāo)記出病理細(xì)胞的第一處理。 根據(jù)一種實(shí)施方式，該第一處理是不僅允許標(biāo)記出病理細(xì)胞而且還允許確定多個(gè)試樣特征 的熒光標(biāo)記。實(shí)際上，該熒光標(biāo)記使細(xì)胞核或細(xì)胞質(zhì)的特定成分變得明顯并且允許彼此區(qū) 分以選擇出可能有病的細(xì)胞。當(dāng)這種標(biāo)記專(zhuān)門(mén)針對(duì)DNA時(shí)，其允許對(duì)試樣的細(xì)胞的DNA進(jìn) 行量化以用于例如染色體倍數(shù)的分析；或者，當(dāng)這種標(biāo)記專(zhuān)門(mén)針對(duì)致癌病毒或分子(比如 人類(lèi)乳突瘤病毒(Human Papilloma Virus))時(shí)，例如在子宮頸涂片的情況下，其允許確定 可能有病的細(xì)胞。例如通過(guò)配備有吸管裝置的自動(dòng)裝置4以自動(dòng)的方式實(shí)現(xiàn)熒光標(biāo)記，該吸管裝置同時(shí)用于將試樣制成溶液和對(duì)試樣與熒光分子進(jìn)行混合。根據(jù)一種實(shí)施方式，在試樣2的 溶液中放入基準(zhǔn)球。這些球被熒光分子標(biāo)記并允許便于在獲取試樣圖像時(shí)進(jìn)行自動(dòng)對(duì)焦， 如后面所述。在步驟C的過(guò)程中，標(biāo)記后的試樣2被設(shè)置于分析板6上。通過(guò)已知的方式，細(xì)胞 在板6上的沉積例如通過(guò)傾析(c^cantation)來(lái)進(jìn)行。試樣2被倒入傾析室8中，傾析室 8的底部在分析板6上有開(kāi)口。吸收裝置10允許隨著細(xì)胞沉積在分析板6上來(lái)吸收溶液。 這樣的沉積方法是已知的，在此將不詳細(xì)描述。在步驟D的過(guò)程中，試樣2經(jīng)受如傳統(tǒng)上描述的那樣且為本領(lǐng)域技術(shù)人員針對(duì)形 態(tài)分析所熟知的旨在對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色的第二處理。根據(jù)一種實(shí)施方式，該第二處理是巴氏 染色。這種染色長(zhǎng)期以來(lái)是已知的，并且在文獻(xiàn)中廣泛記載的癥狀學(xué)允許在可能的情況下 識(shí)別例如與存在癌癥前期細(xì)胞或癌癥細(xì)胞相對(duì)應(yīng)的異常。該染色還允許識(shí)別不同類(lèi)型的細(xì) 胞及其數(shù)量，以便確定試樣的代表性品質(zhì)以及例如限定試樣是否具有代表性。巴氏染色的 步驟還可以使用自動(dòng)吸管裝置來(lái)實(shí)現(xiàn)。細(xì)胞懸浮液的傾析步驟可以在上述標(biāo)記步驟和染色步驟之前、之后或之間進(jìn)行。使用于細(xì)胞分析的熒光標(biāo)記和已知的染色相關(guān)聯(lián)的上述步驟實(shí)現(xiàn)起來(lái)簡(jiǎn)單，允許 獲得易辨的試樣并提供關(guān)于試樣的重要附加信息?？梢允褂迷诂F(xiàn)有技術(shù)中使用的其它染 色，但它們都存在缺陷。因此，可想到化學(xué)計(jì)量染色，其提供與DNA數(shù)量成比例的細(xì)胞染色， 這允許對(duì)DNA進(jìn)行量化，從而允許在染色體倍數(shù)的范圍內(nèi)定位和分析病理細(xì)胞。然而，這種 特別的染色當(dāng)例如涉及福爾根(Feulgen)染色時(shí)與巴氏染色不相兼容，因此需要在薄片上 重新進(jìn)行細(xì)胞涂抹用于醫(yī)生或細(xì)胞技師的分析。某些企業(yè)家曾試圖結(jié)合化學(xué)計(jì)量染色與 巴氏染色，因此使用以下染色該染色包含有硫堇并且需要使用有毒的甲醇進(jìn)行固定，這種 染色尤其改變對(duì)巴氏染色的判讀，特別是在使用對(duì)細(xì)胞核成分的精細(xì)分析而言染色質(zhì)過(guò)于 “黑”的細(xì)胞核的情況下，因此導(dǎo)致針對(duì)癌癥前期或癌癥癥狀診斷的分析困難。例如在子宮頸涂片的情況下，可使用與用于DNA量化的標(biāo)記物不同的標(biāo)記物，比 如海棠素(hypSricine)或者增生或病原體的特定標(biāo)記物(比如人類(lèi)乳突瘤病毒類(lèi)型的致 癌病毒)O在步驟E的過(guò)程中，分析板6包括試樣，試樣包含有用于細(xì)胞形態(tài)分析的由已知染 色劑染色的一個(gè)或更多特定熒光標(biāo)記物以及允許改進(jìn)對(duì)焦管理的熒光基準(zhǔn)球，并且分析板 6—次或更多次暴露于在從紫外光到紅外光的任意光譜范圍內(nèi)的、相干或不相干的、持續(xù)或 脈沖式的熒光激發(fā)光源，該光源照射試樣以便允許通過(guò)圖像獲取設(shè)備14獲得試樣的圖像。 在熒光中獲取圖像允許通過(guò)熒光基準(zhǔn)球進(jìn)行自動(dòng)對(duì)焦，從而允許在最佳對(duì)焦的情況下獲得 最大數(shù)量的圖像。在熒光中獲得的試樣圖像的集合(可對(duì)應(yīng)于熒光激發(fā)光源的一種或多次 照射)允許區(qū)分正常細(xì)胞與病理細(xì)胞。在步驟F的過(guò)程中，分析板6包括試樣，試樣包含有用于細(xì)胞形態(tài)分析的由已知染 色劑染色的一個(gè)或更多特定熒光標(biāo)記物，分析板6經(jīng)受白光源16的照射，以便通過(guò)圖像獲 取設(shè)備14獲得試樣的圖像。在白光中獲取圖像允許獲得由巴氏染色進(jìn)行了染色并使得本 領(lǐng)域技術(shù)人員用于進(jìn)行診斷的標(biāo)準(zhǔn)診斷準(zhǔn)則變得明顯的試樣的圖像。在白光中獲取圖像之前進(jìn)行在熒光中獲取圖像，以避免圖像的白化(或“脫色”) 現(xiàn)象，如果板已預(yù)先在白光中照射過(guò)則在熒光中獲取圖像時(shí)產(chǎn)生這種現(xiàn)象，這會(huì)妨礙在熒光圖像的使用。圖像獲取設(shè)備14允許使用非常精細(xì)的分辨率“掃描”試樣2并且基于同一個(gè)板獲 得熒光圖像或白光圖像。分析板被逐行掃描。因此，所獲得的每個(gè)圖像表示分析板寬度較 小的一個(gè)帶18。這些圖像并排布置從而允許獲得試樣板6整體(因此獲得試樣2整體)的 圖像20，如圖1的步驟G中所示。這種逐行獲取圖像的方法比迄今為止使用的“逐區(qū)域”獲 取更有效率，并且允許在降低白化(或“脫色”)的風(fēng)險(xiǎn)的同時(shí)對(duì)熒光通道的多樣性進(jìn)行標(biāo) 準(zhǔn)化。因此，只使用同一個(gè)設(shè)備14以非常簡(jiǎn)單的方式獲得的圖像20是試樣的結(jié)合大量熒 光信息或白光信息的準(zhǔn)確圖示。圖像獲取裝置例如是由HAMAMATSU公司出售的“Nanozoomer”類(lèi)型。使用設(shè)備14在熒光和白光中獲得的數(shù)字?jǐn)?shù)據(jù)隨后被信息處理系統(tǒng)疊加，以便信 息處理系統(tǒng)能夠針對(duì)試樣圖像的每個(gè)帶18從在一種照射下獲得的數(shù)據(jù)轉(zhuǎn)換到在另一照射 下獲得的數(shù)據(jù)。因此，獲得由圖像20和與該圖像相關(guān)的數(shù)據(jù)形成的虛擬分析板，該虛擬分析板可 通過(guò)將要參照?qǐng)D2描述的細(xì)胞分析方法來(lái)分析。細(xì)胞分析是通過(guò)負(fù)責(zé)檢測(cè)病理細(xì)胞專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生檢查試樣2的圖像來(lái)進(jìn)行的， 用于提出在可能的情況下啟動(dòng)更深入的檢查甚至是治療的診斷結(jié)果。出于安全的原因，專(zhuān) 業(yè)技師或醫(yī)生是必須在場(chǎng)的，從而對(duì)可能有病的細(xì)胞的檢測(cè)不會(huì)完全自動(dòng)化。在步驟H的過(guò)程中，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)染色(比如巴氏染色)染色且在白光中獲得的圖像 被投射在顯示裝置(比如屏幕)上，并在專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生的注視下滾動(dòng)以便檢查。圖像的 滾動(dòng)由信息系統(tǒng)安排，因此是自動(dòng)進(jìn)行的。每個(gè)圖像均全屏顯示，而不顯示關(guān)于病人的補(bǔ)充 數(shù)據(jù)，以避免在分析(或“篩選”)時(shí)分散專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生的注意力，“在分析時(shí)”是在針對(duì) 允許專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生觀察所投射的每個(gè)圖像的整體并檢測(cè)圖像中可能有的異常而預(yù)先計(jì) 算的時(shí)間期間。每個(gè)圖像的顯示時(shí)間可由專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生根據(jù)其能力或者根據(jù)其它信息來(lái)調(diào)節(jié)。 例如，如果試樣是針對(duì)比較可能具有病理細(xì)胞的“高風(fēng)險(xiǎn)”病人身上進(jìn)行檢查的，則顯示時(shí) 間可被調(diào)節(jié)得較長(zhǎng)，以便對(duì)試樣進(jìn)行更細(xì)致的檢查。通過(guò)將關(guān)于病人的信息輸入數(shù)據(jù)庫(kù)并 與試樣(該試樣對(duì)應(yīng)于從其身上采集到該試樣的病人)的圖像20相關(guān)聯(lián)，這些信息可以與 虛擬分析板相關(guān)聯(lián)?？梢愿鶕?jù)這些信息自動(dòng)地調(diào)節(jié)顯示時(shí)間。例如，信息系統(tǒng)包括多個(gè)預(yù) 先調(diào)節(jié)好的顯示時(shí)間，每個(gè)顯示時(shí)間對(duì)應(yīng)于在病人身上檢測(cè)到異常的風(fēng)險(xiǎn)程度。這種風(fēng)險(xiǎn) 程度由執(zhí)行采樣的醫(yī)生提供并附屬于所執(zhí)行的采樣。因此，信息系統(tǒng)記錄該風(fēng)險(xiǎn)程度并由 此調(diào)節(jié)顯示時(shí)間。顯示時(shí)間還可以由專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生手動(dòng)調(diào)節(jié)。滾動(dòng)的圖像因此是通過(guò)巴氏染色獲得的圖像。這種染色下的圖像允許檢測(cè)例如與 癌癥前期或者癌癥細(xì)胞的存在相對(duì)應(yīng)的可能存在的異常，在文獻(xiàn)中廣泛記載了其長(zhǎng)期以來(lái) 已知的癥狀。另外，如前所述，巴氏染色允許例如在子宮頸涂片的范圍內(nèi)檢驗(yàn)試樣是否很好 地符合貝塞斯達(dá)(Bethesda)標(biāo)準(zhǔn)，從而檢驗(yàn)試樣是否是有效的試樣?？捎尚畔⑾到y(tǒng)通過(guò)圖 像分析軟件來(lái)自動(dòng)檢驗(yàn)Bethesda標(biāo)準(zhǔn)。該軟件可例如對(duì)圖像20上的細(xì)胞執(zhí)行計(jì)數(shù)，以便 檢驗(yàn)是否至少抽取到了 5000個(gè)細(xì)胞和是否抽取到了試樣的好質(zhì)量的某種對(duì)照物細(xì)胞，比 如子宮頸內(nèi)細(xì)胞或者結(jié)合細(xì)胞。該軟件還可以獲取關(guān)于細(xì)胞涂片的其它信息。信息系統(tǒng)將 這些信息關(guān)聯(lián)到圖像20，以使虛擬分析板完整。
在步驟I中，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生觀察在屏幕上顯示的每個(gè)圖像，并判斷是否表現(xiàn)出 異常。該檢測(cè)還可以由信息系統(tǒng)通過(guò)圖像分析軟件自動(dòng)地執(zhí)行。在專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生以及信息系統(tǒng)都未在顯示的圖像中檢測(cè)到異常的情況下，該方 法返回步驟H，并在調(diào)節(jié)的顯示時(shí)間過(guò)去之后繼續(xù)進(jìn)行下一圖像的投射。根據(jù)一種實(shí)施方式，設(shè)置步驟J，在步驟J的過(guò)程中，信息系統(tǒng)使圖像的滾動(dòng)自動(dòng) 停止在沒(méi)有檢測(cè)到任何異常的圖像上，并等待專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生確認(rèn)再次啟動(dòng)滾動(dòng)。停在這 樣的圖像上允許詳細(xì)分析所謂的基準(zhǔn)圖像，以便確認(rèn)是否將試樣認(rèn)為是標(biāo)準(zhǔn)試樣。停在這 種所謂的標(biāo)準(zhǔn)圖像上可隨機(jī)進(jìn)行或者在某一數(shù)量的圖像顯示結(jié)束時(shí)進(jìn)行，下文將結(jié)合對(duì)表 現(xiàn)出異常的圖像的分析來(lái)描述圖像的詳細(xì)分析。如果在步驟I的過(guò)程中專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生和/或信息系統(tǒng)檢測(cè)到異常，則該方法通 過(guò)中斷圖像的滾動(dòng)而繼續(xù)進(jìn)行到步驟K。在信息系統(tǒng)檢測(cè)到異常的情況下，信息系統(tǒng)自動(dòng)實(shí)現(xiàn)滾動(dòng)的中斷；或者，在希望更 詳細(xì)地觀察圖像或發(fā)現(xiàn)了異常的情況下，由專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生手動(dòng)實(shí)現(xiàn)。然后，用大放大比例來(lái)顯示圖像以便詳細(xì)顯示異常。然后，可同時(shí)顯示關(guān)于病人的 信息以便為醫(yī)生的決定提供額外的幫助。根據(jù)本發(fā)明的方法允許使圖像的滾動(dòng)自動(dòng)停止在示出可能有病的部分的圖像上。 因此，該方法允許減小陰性錯(cuò)誤的比率并由此提高病理試樣(對(duì)應(yīng)于未能引起專(zhuān)業(yè)技師或 醫(yī)生的警惕性的細(xì)胞異常)的檢測(cè)靈敏度，這是由于與專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生的第一分析只基于 白光圖像(也就是說(shuō)，通過(guò)巴氏染色被染色的試樣的圖像)不同，信息系統(tǒng)與在白光中獲得 的圖像同樣地在熒光中獲得的圖像上選擇病理細(xì)胞。在步驟L的過(guò)程中，將在巴氏染色下顯示的圖像(且針對(duì)該圖像中斷了滾動(dòng))與 在熒光中拾取的同一區(qū)域的圖像相關(guān)聯(lián)，以便在形態(tài)方面和/或光譜方面分析用熒光標(biāo)記 的試樣。該顯示允許專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生使其對(duì)顯示的細(xì)胞的分析精細(xì)化并確認(rèn)是否某些細(xì)胞 可能有病。另外，與熒光圖像的顯示一起，可同時(shí)顯示其它信息，諸如定量數(shù)據(jù)、光譜或者關(guān) 于從其身上提取了試樣的病人的信息等。與自動(dòng)停止?jié)L動(dòng)相結(jié)合的更加精細(xì)的這種分析允 許減小陰性錯(cuò)誤的數(shù)量。另外，例如在子宮頸涂片的情況下，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生對(duì)由系統(tǒng)選擇 的區(qū)域的診斷的檢查，使得在這種情況下能夠?qū)⒓?xì)胞診斷的特效性程度保持接近95%。因 此，涂片驗(yàn)出的特效性和靈敏度的標(biāo)準(zhǔn)變得更接近且更高。在該步驟過(guò)程中，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生可隨意放大所顯示的熒光圖像和白光圖像的特 別區(qū)域。專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生還可以將經(jīng)過(guò)巴氏染色的圖像切換為認(rèn)為合適的熒光圖像。在步驟M的過(guò)程中只能由專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生來(lái)控制滾動(dòng)的再次啟動(dòng)，例如對(duì)確認(rèn)按 鈕的動(dòng)作。這允許保證在滾動(dòng)被自動(dòng)中斷的情況下可能具有異常的顯示圖像已經(jīng)被專(zhuān)業(yè)技 師或醫(yī)生完全檢查了，從而允許保證作為質(zhì)量保證的主要部分的安全鏈。對(duì)于之前描述的 在步驟J過(guò)程中顯示的標(biāo)準(zhǔn)圖像而言也是如此。上述方法允許快速有效地分析試樣。通過(guò)對(duì)可能存在異常的圖像強(qiáng)制進(jìn)行深入分 析，該方法降低了 “陰性錯(cuò)誤”的風(fēng)險(xiǎn)。另外，專(zhuān)業(yè)技師或醫(yī)生的訓(xùn)練得以保持，這是因?yàn)轱@示所有的圖像(標(biāo)準(zhǔn)圖像和 有異常的圖像)。尤其通過(guò)將關(guān)于病人的信息和關(guān)于試樣的信息與所顯示的圖像的數(shù)據(jù)相 關(guān)聯(lián)，該方法還允許較大的操作可能性。
權(quán)利要求
1.一種放置在分析板(6)上的細(xì)胞試樣或組織試樣O)的細(xì)胞分析方法，包括以下步驟-實(shí)現(xiàn)所述試樣O)的至少第一處理，所述處理被設(shè)置為允許將所述試樣的病理細(xì)胞 與健康細(xì)胞區(qū)分開(kāi)，-對(duì)放置在所述分析板(6)上的所述試樣( 進(jìn)行圖像獲取，以便獲得多個(gè)圖像，所述 多個(gè)圖像中的每個(gè)圖像都表示所述分析板(6)的一個(gè)區(qū)域，所述多個(gè)圖像并排布置形成所 述試樣的整體的圖像00)，其特征在于還包括以下步驟-使從所述試樣( 獲取的所有圖像以預(yù)定的滾動(dòng)速度在顯示裝置上自動(dòng)滾動(dòng)，所述 速度被設(shè)置為允許觀測(cè)者分析所述圖像并判斷所表示的試樣區(qū)域是否包括可能有的病理 細(xì)胞，-如果檢測(cè)到能夠表示存在病理細(xì)胞的至少一個(gè)異常，則停止所述滾動(dòng)，以及，在對(duì)所述圖像的自動(dòng)化分析之后自動(dòng)進(jìn)行所述滾動(dòng)的停止，如果在所述圖像中 檢測(cè)到被定義為異常的特定對(duì)象，則執(zhí)行所述停止。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分析方法，其特征在于，所述圖像的滾動(dòng)速度是能夠調(diào)節(jié)的。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分析方法，其特征在于還包括在對(duì)所述試樣的具有異常 的區(qū)域的分析之后所述滾動(dòng)的再次啟動(dòng)步驟，所述再次啟動(dòng)步驟由所述觀測(cè)者指令。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的分析方法，其特征在于包括使所述滾動(dòng)自動(dòng)停 止在沒(méi)有異常的圖像上或者自動(dòng)停止在與評(píng)估所述試樣的代表性所需的對(duì)象相對(duì)應(yīng)的圖 像上的步驟，在確認(rèn)所述圖像沒(méi)有異常之后所述觀測(cè)者指令所述滾動(dòng)的再次啟動(dòng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4中任一項(xiàng)所述的分析方法，其特征在于，在所述試樣( 上實(shí)現(xiàn) 兩種不同的處理，所述處理被設(shè)置為允許標(biāo)記所述試樣的細(xì)胞中的病理細(xì)胞，執(zhí)行兩個(gè)圖 像獲取步驟，每個(gè)獲取步驟都允許根據(jù)對(duì)所述試樣執(zhí)行的所述處理中的一個(gè)來(lái)檢測(cè)異常， 通過(guò)每個(gè)獲取步驟獲取的圖像的數(shù)據(jù)被疊加，以使得所述觀測(cè)者在所述圖像滾動(dòng)時(shí)能夠從 根據(jù)一個(gè)獲取步驟獲取的區(qū)域的圖像轉(zhuǎn)換到根據(jù)另一獲取步驟獲取的同一區(qū)域的圖像。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分析方法，其特征在于，從根據(jù)一個(gè)獲取步驟的區(qū)域的圖像 轉(zhuǎn)換到根據(jù)另一獲取步驟獲取的同一區(qū)域的圖像是在所述圖像中檢測(cè)到異常時(shí)進(jìn)行的。
7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的分析方法，其特征在于，所述處理步驟是通過(guò)熒光團(tuán)對(duì)所 述試樣進(jìn)行染色或標(biāo)記的步驟。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的分析方法，其特征在于，對(duì)所述根據(jù)另一獲取步驟獲取的圖 像的顯示伴隨著以下信息的顯示這些信息是關(guān)于所顯示的所述試樣區(qū)域的信息和/或關(guān) 于所述試樣的整體的信息和/或關(guān)于從身上提取到所述試樣的病人的信息。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中任一項(xiàng)所述的分析方法，其特征在于包括放大圖像以便允許 觀看所顯示的區(qū)域的細(xì)節(jié)的步驟。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的分析方法，其特征在于，放大的比率是能夠調(diào)節(jié)的。
11.一種為了允許根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的分析方法對(duì)試樣( 進(jìn)行細(xì)胞 分析而制備試樣O)的虛擬分析板的方法，所述方法包括以下步驟-制備試樣⑵，-對(duì)所述試樣進(jìn)行第一處理步驟，所述處理允許相對(duì)于其它細(xì)胞標(biāo)記病理細(xì)胞，-對(duì)所述試樣進(jìn)行第二處理步驟，所述處理允許以與所述第一處理步驟不同的方式相 對(duì)于其它細(xì)胞標(biāo)記病理細(xì)胞，-在對(duì)所述試樣( 的處理步驟之前或之后或之間，將所述試樣( 設(shè)置在所述分析板 (6)上，其特征在于還包括以下步驟-對(duì)設(shè)置在所述分析板(6)上的所述試樣( 進(jìn)行第一圖像獲取，以便獲得多個(gè)圖像， 所述多個(gè)圖像中的每個(gè)圖像都表示所述分析板的一個(gè)區(qū)域，所述多個(gè)圖像并排布置形成所 述試樣的整體的圖像(20)，所述多個(gè)圖像允許檢測(cè)通過(guò)所述第一處理步驟標(biāo)記的病理細(xì) 胞，-對(duì)設(shè)置在所述分析板(6)上的所述試樣( 進(jìn)行第二圖像獲取，以便獲得多個(gè)圖像， 所述多個(gè)圖像中的每個(gè)圖像都表示所述分析板(6)的一個(gè)區(qū)域，所述多個(gè)圖像并排布置形 成所述試樣的整體的圖像(20)，所述多個(gè)圖像允許檢測(cè)除通過(guò)所述第一處理步驟標(biāo)記的病 理細(xì)胞以外的其它細(xì)胞異常，-所獲取的圖像形成虛擬分析板。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的制備方法，其特征在于，還包括對(duì)在所述第一圖像獲取時(shí) 獲取的圖像數(shù)據(jù)和在所述第二圖像獲取時(shí)獲取的圖像數(shù)據(jù)進(jìn)行疊加的步驟。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12所述的制備方法，其特征在于，所述試樣的所述第一處理步 驟是熒光標(biāo)記步驟。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的制備方法，其特征在于，所述第一處理步驟包括在所述試 樣中引入基準(zhǔn)球的步驟，所述球作為用于圖像獲取的對(duì)焦的對(duì)照物。
15.根據(jù)權(quán)利要求11至14中任一項(xiàng)所述的制備方法，其特征在于，所述試樣的所述第 二處理步驟是巴氏染色步驟。
16.根據(jù)權(quán)利要求1至10中任一項(xiàng)所述的細(xì)胞分析方法，其特征在于，所述分析在通過(guò) 根據(jù)權(quán)利要求11至15中任一項(xiàng)所述的制備方法獲得的虛擬分析板上進(jìn)行。
全文摘要
本方法包括以下步驟實(shí)現(xiàn)試樣(2)的至少第一處理，所述處理被布置為允許從試樣的細(xì)胞中標(biāo)記病理細(xì)胞；對(duì)放置在分析板(6)上的試樣(2)進(jìn)行多次圖像獲取，以便獲得多個(gè)圖像，所述多個(gè)圖像中的每個(gè)圖像都表示分析板(6)的一個(gè)區(qū)域，所述圖像并排布置形成試樣的整體的圖像(20)。該方法還包括以下步驟使從試樣(2)獲取的所有圖像以預(yù)定的滾動(dòng)速度在顯示裝置上自動(dòng)滾動(dòng)，所述速度被設(shè)置為允許觀測(cè)者分析圖像并判斷所表示的試樣區(qū)域是否包括可能有的病理細(xì)胞；如果檢測(cè)到能夠表示存在病理細(xì)胞的至少一個(gè)異常，則停止?jié)L動(dòng)。
文檔編號(hào)G06T7/00GK102084399SQ200980125631
公開(kāi)日2011年6月1日 申請(qǐng)日期2009年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2008年5月30日
發(fā)明者埃里克·佩爾蒂埃 申請(qǐng)人:諾維茨公司