用于流式細(xì)胞儀的流體混合及沖洗系統(tǒng)的制作方法【專利摘要】揭示一種可混合去離子水(144)與濃縮鞘液(146)以在流式細(xì)胞儀系統(tǒng)中提供具有所要濃度的鞘液(148)的系統(tǒng)(100)。流率是較低的，其與鞘液通過噴嘴(142)的流率實(shí)質(zhì)上匹配，使得在所述鞘液中不形成湍流及氣泡。接著，使用可用去離子水來反向沖洗及移除來自所述鞘液的樣本細(xì)胞及沉積鹽?！緦＠f明】用于流式細(xì)胞儀的流體混合及沖洗系統(tǒng)[0001]相關(guān)申請(qǐng)案的交叉參考[0002]本申請(qǐng)案是基于2012年6月22日申請(qǐng)的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的流體混合及沖洗系統(tǒng)(FluidMixingandRinsingSystemforaFlowCytometer)，，的第61/663，021號(hào)美國臨時(shí)申請(qǐng)案且主張所述申請(qǐng)案的優(yōu)先權(quán)，所述申請(qǐng)案出于所有其所揭示及教示內(nèi)容的目的以引用方式明確并入本文中。[0003]本申請(qǐng)案與以下專利申請(qǐng)案相關(guān):丹尼爾N.?？怂?DanielN.Fox)、蘇珊.亨特(SusanHunter)、南森.邁克爾.加斯基爾_?？怂?NathanMichaelGaskill-Fox)、凱文P.雷利(KevinP.Raley)及理查德Α.邁爾斯(RichardA.Miles)于2012年6月7日申請(qǐng)的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的自動(dòng)及精確下降延遲(AutomatedandAccurateDropDelayforFlowCytometry)”的第61/656，934號(hào)美國臨時(shí)專利申請(qǐng)案、丹尼爾N.?？怂?DanielN.Fox)及南森Μ.加斯基爾-?？怂?NathanM.Gaskill-Fox)于2012年6月14日申請(qǐng)的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的流率平衡、可動(dòng)態(tài)調(diào)整的鞘遞送系統(tǒng)(FlowRateBalance,DynamicallyAdjustableSheathDeliverySystemforFlowCytometry)，，的第61/659，528號(hào)美國臨時(shí)專利申請(qǐng)案、南森M.加斯基爾-?？怂?NathanM.Gaskill-Fox)、丹尼爾N.?？怂?DanielN.Fox)及羅德尼C.哈里斯(RodneyC.Harris)于與本申請(qǐng)案相同的日期申請(qǐng)的標(biāo)題為“兩站式樣本及洗滌系統(tǒng)(TwoStat1nSampleandWashingSystem)”的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)案、丹尼爾N.?？怂?DanielN.Fox)、馬提亞斯J.G.奧滕伯格(MatthiasJ.G.0ttenberg)及凱文P.雷利(KevinP.Raley)于與本申請(qǐng)案相同的日期申請(qǐng)的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的濃縮幾何形狀噴嘴(CondensedGeometryNozzleforFlowCytometry)”的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)案，及南森M.加斯基爾-?？怂?NathanΜ.Gaskill-Fox)、丹尼爾N.?？怂?DanielN.Fox)及羅德尼C.哈里斯(RodneyC.Harris)于與本申請(qǐng)案相同的日期申請(qǐng)的標(biāo)題為“流式細(xì)胞儀中具有減少的污染的多向分類(Mult1-Direct1nalSortingwithReducedContaminat1ninaFlowCytometer)，，的美國臨時(shí)專利申請(qǐng)案。所有這些申請(qǐng)案特此出于所有其所揭示及教示內(nèi)容的目的以引用方式明確并入本文中?！?br>背景技術(shù)：
】[0004]流式細(xì)胞儀為用于對(duì)流體流中的各種類型的顆粒進(jìn)行分析及分類的有用裝置。這些細(xì)胞及顆?？蔀榻?jīng)收集以用于分析及/或分離的生物或?qū)嶓w樣本。將所述樣本與鞘液混合以運(yùn)送所述顆粒通過流式細(xì)胞儀。所述顆?？砂ㄉ锛?xì)胞、校準(zhǔn)珠(calibrat1nbead)、實(shí)體樣本顆粒或其它所關(guān)注顆粒。對(duì)這些顆粒進(jìn)行分類及分析可向研宄人員及臨床醫(yī)生兩者提供有價(jià)值的信息。此外，經(jīng)分類的顆?？捎糜诟鞣N用途以實(shí)現(xiàn)多種所要結(jié)果。【
發(fā)明內(nèi)容】[0005]因此，本發(fā)明的實(shí)施例可包括一種用于混合去離子水與鞘液濃縮物的系統(tǒng)，其包括:第一容器，其供應(yīng)去離子水；第二容器，其供應(yīng)濃縮鞘液；泵，其以某一速率將去離子水及濃縮鞘液遞送到儲(chǔ)液器中，所述速率足夠緩慢使得在經(jīng)加壓儲(chǔ)液器中實(shí)質(zhì)上沒有氣泡形成；閥，其具有耦合到第一容器中的去離子水且在所述閥處于第一位置中時(shí)通過一輸出將去離子水供應(yīng)到儲(chǔ)液器的第一輸入，以及耦合到第二容器中的濃縮鞘液且通過所述輸出將去離子水供應(yīng)到儲(chǔ)液器的第二輸入；控制器，其將所述閥置于第一位置中直到預(yù)定量的去離子水被供應(yīng)到加壓容器為止，且將所述閥切換到第二位置直到預(yù)定量的濃縮鞘液被供應(yīng)到儲(chǔ)液器為止，使得預(yù)定量的去離子水及預(yù)定量的濃縮鞘液產(chǎn)生具有所要鞘液濃度的混合物。[0006]本發(fā)明的實(shí)施例可進(jìn)一步包括一種在流式細(xì)胞儀中混合去離子水與濃縮鞘液的方法，其包括:從第一容器供應(yīng)去離子水；從第二容器供應(yīng)濃縮鞘液；以某一速率將去離子水及濃縮鞘液泵送到儲(chǔ)液器中，所述速率足夠緩慢使得實(shí)質(zhì)上消除致使氣泡在儲(chǔ)液器中形成的湍流；控制在第一位置中連接到第一容器且在第二位置中連接到第二容器的第一閥，使得第一閥被安置在第一位置中直到預(yù)定量的去離子水被供應(yīng)到儲(chǔ)液器為止且第一閥被安置在第二位置中直到預(yù)定量的濃縮鞘液被供應(yīng)到儲(chǔ)液器為止，以在儲(chǔ)液器中產(chǎn)生具有預(yù)定濃度的鞘液。【專利附圖】【附圖說明】[0007]圖1為鞘液混合系統(tǒng)的實(shí)施例的示意圖。[0008]圖2為說明圖1中說明的三通閥的操作的流程圖。[0009]圖3為組合式鞘液混合系統(tǒng)及洗滌系統(tǒng)的示意說明?！揪唧w實(shí)施方式】[0010]圖1為鞘液混合系統(tǒng)100的實(shí)施例的示意說明。如圖1中所說明，來自去離子水容器104的去離子水144及濃縮鞘液容器106中的濃縮鞘液146被供應(yīng)到三通閥112。去離子水容器104可為用戶可接近的未加壓去離子水容器，使得用戶可移除所述容器且以新容器替換所述容器。類似地，用戶也可接近濃縮鞘液容器106，使得用戶可移除濃縮鞘液容器106且以新濃縮鞘液容器替換濃縮鞘液容器106。三通閥112由閥控制信號(hào)124控制，閥控制信號(hào)124由液位控制器/速率積分器122產(chǎn)生。連續(xù)泵116取決于三通閥112的位置而抽吸去離子水144或濃縮鞘液146通過三通閥112。[0011]具有8倍濃度的濃縮鞘液通常用于通過使被運(yùn)輸產(chǎn)品的大小及重量減小8倍來降低鞘液的運(yùn)輸成本及存儲(chǔ)成本。流式細(xì)胞儀的用戶接著使8倍濃縮鞘液與去離子水混合以產(chǎn)生具有適當(dāng)?shù)腎倍濃度的鞘液。然而，如果以并不緩慢的速率混合去離子水與鞘液濃縮物，那么產(chǎn)生湍流且微氣泡被引入到混合物中。這些微氣泡可在圖1中說明的鞘液混合系統(tǒng)100中積累且引起流式細(xì)胞儀的操作問題。因此，通常指示用戶在使用之前的至少一天或一天以上混合濃縮鞘液及去離子水。這通常是不切實(shí)際的解決方案且需要用戶方的額外勞動(dòng)。消除手工勞動(dòng)的系統(tǒng)的操作者可用性及過程的自動(dòng)化是有利的。[0012]因?yàn)橛脩羧菀椎玫綕饪s鞘液的供應(yīng)且濃縮鞘液的運(yùn)輸及存儲(chǔ)成本較低，所以希望提供使用濃縮鞘液的方式。此外，使用流式細(xì)胞儀的大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室具有可與濃縮鞘液混合的去離子水的源。如果沒有，那么去離子水的預(yù)封裝供應(yīng)是可用的。圖1中說明的系統(tǒng)使用三通閥112來通過使用閥控制信號(hào)124控制三通閥112來使去離子水144與濃縮鞘液146緩慢混合，使得三通閥供應(yīng)預(yù)定量的去離子水144及預(yù)定量的濃縮鞘液146以提供具有適當(dāng)(I倍)濃度的鞘液供應(yīng)。連續(xù)泵116泵送去離子水144及濃縮鞘液146通過泵管118及鞘輸入管136而到達(dá)儲(chǔ)液器102。儲(chǔ)液器102可安置在流式細(xì)胞儀中且不容易被用戶移除。相應(yīng)流體中的每一者的量較小，使得所述流體在儲(chǔ)液器102中分散以產(chǎn)生I倍的均勻濃度鞘液148。舉例來說，在一個(gè)實(shí)施例中，連續(xù)泵116最初以每分鐘8mL的速率將流體供應(yīng)到儲(chǔ)液器102。此速率經(jīng)設(shè)計(jì)以與鞘液148從儲(chǔ)液器102通過鞘遞送管140到達(dá)噴嘴142的流出速率實(shí)質(zhì)上匹配。通過以與鞘液從儲(chǔ)液器102的流出實(shí)質(zhì)上匹配的速率將流體供應(yīng)到儲(chǔ)液器102，可在儲(chǔ)液器102中維持實(shí)質(zhì)上恒定的鞘液液位147，如相對(duì)于以下專利申請(qǐng)案更詳細(xì)揭示:丹尼爾N.?？怂?DanielN.Fox)及南森Μ.加斯基爾-?？怂?NathanM.Gaskill-Fox)于2012年6月14日申請(qǐng)的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的流率平衡、可動(dòng)態(tài)調(diào)整的鞘遞送系統(tǒng)(FlowRateBalance,DynamicallyAdjustableSheathDeliverySystemforFlowCytometry)”的第61/659，528號(hào)美國專利申請(qǐng)案，所述專利申請(qǐng)案出于所有其所揭示及教示內(nèi)容的目的以引用方式明確并入本文中。[0013]為產(chǎn)生每分鐘SmL的流入量，三通閥112提供7mL的去離子水144及ImL的濃縮鞘液146。以此方式，供應(yīng)8mL的流體且濃縮鞘液146的量為流體總量的八分之一，且去離子水144為流體總量的八分之七。所供應(yīng)的8mL的總量允許濃縮鞘液146在儲(chǔ)液器102中的鞘液148的大得多的體積內(nèi)容易地分散。因?yàn)槿ルx子水144及濃縮鞘液146的注入與鞘液148通過噴嘴142的流出速率匹配，所以注入在一分鐘的周期期間發(fā)生。去離子水144及濃縮鞘液146到儲(chǔ)液器102中的非常緩慢的注入速率(一分鐘總共SmL的量)，導(dǎo)致在鞘液148中實(shí)質(zhì)上沒有湍流及氣泡產(chǎn)生。液位傳感器128感測(cè)鞘液148在儲(chǔ)液器102中的液位且產(chǎn)生被供應(yīng)到液位控制器/速率積分器122的液位傳感器信號(hào)126。如果鞘液148在儲(chǔ)液器102中的液位較低或較高，那么由液位控制器/速率積分器122使用泵速度控制器信號(hào)120調(diào)整連續(xù)泵116泵送流體的速率。這在上文引用的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的流率平衡、可動(dòng)態(tài)調(diào)整的鞘遞送系統(tǒng)(FlowRateBalance,DynamicallyAdjustableSheathDeliverySystemforFlowCytometry)”的專利申請(qǐng)案中更詳細(xì)解釋。[0014]圖1還揭示將壓縮空氣供應(yīng)到空氣調(diào)節(jié)器132的壓縮機(jī)130。在一個(gè)實(shí)施例中，在大約30psi的壓力下將經(jīng)調(diào)節(jié)空氣134的源供應(yīng)到儲(chǔ)液器102。儲(chǔ)液器102中的壓縮空氣150進(jìn)一步調(diào)節(jié)通過鞘遞送管140遞送到噴嘴142的流體流上的壓力量。希望具有流動(dòng)通過噴嘴142的鞘液148的恒定壓力以精確執(zhí)行流式細(xì)胞儀的過程。儲(chǔ)液器102中的空氣150的壓力補(bǔ)償由鞘液148的液位的變化引起的鞘遞送管140中的流體的壓力差異，如上文引用的專利申請(qǐng)案中陳述。液位控制器/速率積分器122對(duì)連續(xù)泵116的流量的調(diào)整可影響三通閥112的操作的定時(shí)。鞘液148在儲(chǔ)液器102中的液位可由于各種原因而變化。舉例來說，連續(xù)泵116可因?yàn)檩敵龉?14中的氣泡而被氣鎖(airlocked)。接著必須發(fā)生吹掃過程(purgeprocess)，且鞘液148的液位的變化量可為導(dǎo)致連續(xù)泵116以高于通常用于維持鞘液148的液位在儲(chǔ)液器102中實(shí)質(zhì)上恒定的速率的速率運(yùn)行的量。此外，去離子水容器104及濃縮鞘液容器106可與新容器熱調(diào)換，這也致使鞘液148的液位下降。再次，這相對(duì)于上文引用的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的流率平衡、可動(dòng)態(tài)調(diào)整的鞘遞送系統(tǒng)(FlowRateBalance,DynamicallyAdjustableSheathDeliverySystemforFlowCytometry)，，的申請(qǐng)案更詳細(xì)解釋。[0015]因?yàn)閼?yīng)密切維持噴嘴142中的鞘液148的壓力，所以應(yīng)以快速方式調(diào)整鞘液148在儲(chǔ)液器102中的液位的任何變化。因此，希望盡可能快地改變連續(xù)泵116的流率以補(bǔ)償鞘液148在儲(chǔ)液器102中的液位的變化。因而，液位控制器/速率積分器122跟蹤供應(yīng)到儲(chǔ)液器102的去離子水144的量直到已遞送預(yù)定量為止。接著，改變?nèi)ㄩy112以關(guān)閉用于供應(yīng)管108的口(port)且打開用于供應(yīng)管110的口以將濃縮鞘液146泵送到儲(chǔ)液器102中直到預(yù)定量的濃縮鞘液146被泵送到儲(chǔ)液器102中為止，以產(chǎn)生適當(dāng)比率及適當(dāng)濃度。舉例來說，液位控制器/速率積分器122產(chǎn)生閥控制信號(hào)124以將去離子水144泵送到儲(chǔ)液器102中。液位控制器/速率積分器122基于由液位傳感器128產(chǎn)生的液位傳感器信號(hào)126來產(chǎn)生泵速度控制信號(hào)120。如果鞘液148較低，那么液位傳感器128檢測(cè)到低液位且產(chǎn)生液位傳感器信號(hào)126，液位傳感器信號(hào)126由液位控制器/速率積分器122讀取，液位控制器/速率積分器122產(chǎn)生泵速度控制信號(hào)120以增大連續(xù)泵116的流率。[0016]圖1中說明的液位控制器/速率積分器122通過在時(shí)間上積分連續(xù)泵116的泵速度來跟蹤由連續(xù)泵116泵送到儲(chǔ)液器102中的去離子水144的量。在一個(gè)實(shí)施例中，當(dāng)確定連續(xù)泵116已泵送7mL的去離子水144時(shí)，產(chǎn)生閥控制信號(hào)124以切換到供應(yīng)管110以提供濃縮鞘液146。液位控制器/速率積分器122在時(shí)間上積分連續(xù)泵116的泵速率直到ImL的濃縮鞘液146已被連續(xù)泵116泵送為止。那時(shí)，液位控制器/速率積分器122產(chǎn)生閥控制信號(hào)124以切換三通閥，使得去離子水144正由連續(xù)泵116泵送。此過程繼續(xù)進(jìn)行。以此方式，儲(chǔ)液器102中的鞘液148的濃度不改變，這是因?yàn)檫m當(dāng)比率的流體被供應(yīng)到儲(chǔ)液器102。當(dāng)連續(xù)泵116以更高速率泵送以升高鞘液148在儲(chǔ)液器102中的液位時(shí)，減小用于切換三通閥112的時(shí)間周期。類似地，如果鞘液148在儲(chǔ)液器102中的液位高于預(yù)設(shè)液位，那么連續(xù)泵116具有減小的流率且增大用于切換三通閥112的時(shí)間周期。[0017]圖2為圖1中說明的系統(tǒng)的操作的流程圖200。在步驟202處，液位控制器/速率積分器122將三通閥112置于某一位置中使得去離子水144正被從去離子水容器104泵送。在步驟204處，在時(shí)間上積分泵流率以確定已被連續(xù)泵116泵送的去離子水的量。舉例來說，在一個(gè)實(shí)施例中，以20ns的間隔對(duì)泵速率求和。泵速率在20ns間隔上的總和指示已被連續(xù)泵116泵送的流體的量。舉例來說，以每分鐘8mL，每20ns間隔占大約160pL。如果將25，000,000個(gè)20ns間隔加到一起(這將相當(dāng)于0.5秒)，那么總和將為4mL。當(dāng)達(dá)到目標(biāo)量時(shí)，液位控制器/速率積分器122產(chǎn)生閥控制信號(hào)124以將三通閥112改變到泵送濃縮鞘液146。因此，在步驟206處，確定流體(在此情形中為去離子水144)的量是否大于或等于7mL。如果不大于或等于7mL，那么所述過程繼續(xù)在步驟204處對(duì)泵流量進(jìn)行積分。如果去離子水的量已達(dá)到7mL，那么所述過程繼續(xù)進(jìn)行到步驟208。在步驟208處，產(chǎn)生閥控制信號(hào)124以將三通閥112切換到濃縮鞘液146。所述過程接著繼續(xù)進(jìn)行到步驟210，在步驟210處，液位控制器/速率積分器122針對(duì)濃縮鞘液146對(duì)泵流量進(jìn)行積分。取樣可以20ns的速率(如上文陳述)或以任何所要速率發(fā)生。此外，可使用任何積分周期來提供由泵116遞送的濃縮鞘液的量的精確數(shù)目。在步驟212處，確定濃縮鞘液的量是否大于或等于lmL。如果不大于或等于lmL，那么所述過程返回到步驟210。如果所述量大于或等于lmL，那么在步驟214處液位控制器/速率積分器122產(chǎn)生閥控制信號(hào)124以將三通閥112切換到泵送去離子水。接著，所述過程返回到步驟204以針對(duì)去離子水對(duì)泵流量進(jìn)行積分。[0018]因此，液位控制器/速率積分器122產(chǎn)生閥控制信號(hào)124，閥控制信號(hào)124在供應(yīng)去離子水144的供應(yīng)管108與供應(yīng)濃縮鞘液146的供應(yīng)管110之間切換三通閥112。當(dāng)經(jīng)積分的流量(如由液位控制器/速率積分器122檢測(cè))達(dá)到所述流體中的每一者的預(yù)定量時(shí)，產(chǎn)生閥控制信號(hào)124。在當(dāng)前情況中，將7mL的去離子水144及ImL的濃縮鞘液146的量用作預(yù)定量以實(shí)現(xiàn)混合流體的適當(dāng)濃縮?？墒褂闷渌俊0019]圖3為組合式鞘液混合及洗滌系統(tǒng)300的示意說明。如圖3中說明，儲(chǔ)液器302含有鞘液374及壓縮空氣375。去離子水容器304提供去離子水370的供應(yīng)。濃縮鞘液容器306提供濃縮鞘液372的供應(yīng)。三通閥312連接到供應(yīng)管308(其安置在去離子水容器304中)及供應(yīng)管310(其安置在濃縮鞘液容器306中)。液位控制器/速率積分器322產(chǎn)生閥控制信號(hào)324，閥控制信號(hào)324操作三通閥312以選擇供應(yīng)管308或供應(yīng)管310。連續(xù)泵316響應(yīng)于泵控制信號(hào)320而操作以經(jīng)由泵管318及鞘輸入管336將連續(xù)鞘液流提供到儲(chǔ)液器302中。液位傳感器328感測(cè)鞘液374在儲(chǔ)液器302中的液位且產(chǎn)生施加到液位控制器/速率積分器322的液位傳感器信號(hào)326。泵控制信號(hào)320控制連續(xù)泵316以使鞘液通過泵管318的流入與鞘液374通過鞘上升管338及鞘遞送管340的流出大體上匹配。如果鞘液374的液位低于某個(gè)預(yù)定液位，那么泵速度控制信號(hào)320增大連續(xù)泵316的泵送速率，使得可在儲(chǔ)液器302中再次建立鞘液374的所要液位。類似地，如果鞘液374在儲(chǔ)液器302中的液位過高，那么減小連續(xù)泵316的泵速率。[0020]也如圖3中說明，壓縮機(jī)330向空氣調(diào)節(jié)器332提供壓縮空氣。在空氣調(diào)節(jié)器332的輸出處將經(jīng)調(diào)節(jié)空氣334施加到儲(chǔ)液器302以維持儲(chǔ)液器302中的經(jīng)加壓空氣375的供應(yīng)。還調(diào)節(jié)空氣375的氣壓以維持鞘遞送管340中的鞘液374的實(shí)質(zhì)上恒定壓力，如相對(duì)于上文引用的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的流率平衡、可動(dòng)態(tài)調(diào)整的鞘遞送系統(tǒng)(FlowRateBalance,DynamicallyAdjustableSheathDeliverySystemforFlowCytometry)，，的申請(qǐng)案更詳細(xì)描述。因?yàn)榍室?74處于壓力之下，所以鞘液流動(dòng)通過鞘上升管338及鞘遞送管340而到達(dá)三通閥348。圖3中描述的這些裝置以與圖1中說明的裝置相同的方式操作，以提供鞘液374的適當(dāng)濃度，通過憑借控制三通閥312來將適當(dāng)量的去離子水370及濃縮鞘液372泵送到儲(chǔ)液器302中來維持所述適當(dāng)濃度。再次，在短時(shí)間周期上對(duì)連續(xù)泵316的泵速率進(jìn)行積分以確定且控制從每一容器304、306遞送的流體的量。以此方式，在儲(chǔ)液器302中維持鞘液374的適當(dāng)濃度。[0021]圖3還說明利用未加壓外部去離子水容器304中的去離子水370的清洗循環(huán)。去離子水可執(zhí)行清洗已與樣本流體及鞘液接觸的內(nèi)部部件的實(shí)質(zhì)上更好的工作。為方便起見，大多數(shù)系統(tǒng)簡單地使用鞘液來清洗已接觸樣本流體的流式細(xì)胞儀的部件。如圖3中說明，可使用可在去離子水容器304中得到的去離子水370而非使用鞘液。[0022]去離子水為用于溶解已由鞘液形成的固體(例如，沉積鹽)的優(yōu)秀流體且還殺死并移除可引起對(duì)待分類的后續(xù)樣本的污染的細(xì)胞。細(xì)胞通常由于細(xì)胞過程試圖使細(xì)胞內(nèi)側(cè)的鹽濃度與其中安置所述細(xì)胞的流體環(huán)境的鹽濃度平衡而死亡。在去離子水環(huán)境中，細(xì)胞吸收水分以使細(xì)胞的鹽濃度與不含有任何鹽的去離子水的鹽濃度平衡。細(xì)胞因試圖降低鹽濃度而快速吸收水分使得細(xì)胞爆裂并死亡。出于這些原因，去離子水為優(yōu)選沖洗流體。[0023]如圖3中展示，組合式鞘液混合及清洗系統(tǒng)300提供去離子水容器304中的去離子水370的可用源。接著，可使用去離子水370來溶解可積累在接觸鞘液的系統(tǒng)部件上的來自鞘液的鹽沉積且殺死并移除可在流式細(xì)胞儀中已沉積或收集的細(xì)胞。[0024]在洗滌階段期間，激活沖洗泵344以經(jīng)由沖洗遞送管346遞送去離子水水370。將去離子水施加到三通閥348的第一輸入口。三通閥348的第二輸入口連接到鞘遞送管340，鞘遞送管340在取樣循環(huán)期間將鞘液374從鞘上升管338供應(yīng)到噴嘴供應(yīng)管356。在清洗循環(huán)期間，三通閥遞送去離子水370通過連接到噴嘴342的噴嘴腔的噴嘴供應(yīng)管356。在壓力下將去離子水插入到噴嘴342的噴嘴腔中，以產(chǎn)生流動(dòng)到廢液收集器364中的去離子水的流366。來自噴嘴342(包含噴嘴342的底部處的開口)中的鞘液的任何沉積鹽被流366溶解并沖洗。去離子水的流366流動(dòng)通過廢液收集器364，從而溶解沉積在廢液收集器364中且由廢液管362通過閥376處置并由廢液泵380泵送到廢液容器382中的任何鹽。沖洗遞送管346還將去離子水370供應(yīng)到閥350。當(dāng)打開閥350時(shí)，去離子水流動(dòng)通過沖洗管384。在樣本上升管354的外側(cè)附近噴灑去離子水以移除并殺死可能存在于樣本上升管354的外表面上的任何樣本細(xì)胞，如相對(duì)于上文引用的標(biāo)題為“用于流式細(xì)胞儀的流率平衡、可動(dòng)態(tài)調(diào)整的鞘遞送系統(tǒng)(FlowRateBalance,DynamicallyAdjustableSheathDeliverySystemforFlowCytometry)”的申請(qǐng)案更詳細(xì)揭示。[0025]也如圖3中展示，廢液泵380接著抽吸去離子水370通過廢液管386及閥378以沉積到廢液容器382中。此外，由沖洗泵344產(chǎn)生的噴嘴342中的去離子水370的壓力致使去離子水向后流動(dòng)通過注射器針352而進(jìn)入樣本管358中。留在注射器針352中的任何樣本被反沖洗通過樣本管358且后退通過樣本上升管354。保留在樣本管358或樣本上升管354中的任何樣本流體被反沖洗到清洗站368中。從取樣過程留下的任何樣本細(xì)胞被殺死且通過廢液管386、閥378排出且由廢液泵380泵送到廢液容器382中。此外，去離子水370回流通過去氣泡管360且通過閥373而到達(dá)廢液泵380，廢液泵380處置廢液容器382中的流體。[0026]因此，圖3中說明的混合系統(tǒng)允許以低流率的精確混合以將適當(dāng)濃度的鞘液供應(yīng)到儲(chǔ)液器302中。所述低流率在鞘液374中實(shí)質(zhì)上不產(chǎn)生任何湍流或氣泡?？赏ㄟ^對(duì)泵速率進(jìn)行積分以確定已從容器304、306中的每一者流動(dòng)的流體的量來建立精確濃度。通過使用濃縮鞘液，實(shí)質(zhì)上降低運(yùn)輸鞘液的成本?？稍诹魇郊?xì)胞儀的位置處容易地產(chǎn)生去離子水。在系統(tǒng)中供應(yīng)去離子水允許方便且容易的清洗以清除并殺死樣本細(xì)胞且移除在流式細(xì)胞儀系統(tǒng)的各種部分上積累的鹽?？墒褂萌ルx子水完全洗滌通常暴露于可干燥并形成沉積物的鞘液及空氣的所有路徑。去離子水沖刷沉積物且清洗系統(tǒng)以防止沉積物或晶體引起問題且殺死并消除可引起污染的樣本細(xì)胞。因?yàn)榈土髀?，以不產(chǎn)生湍流或氣泡的方式混合去離子水與濃縮鞘液。[0027]已出于說明及描述目的呈現(xiàn)本發(fā)明的以上描述。所述描述不希望為詳盡的或?qū)⒈景l(fā)明限于所揭示的精確形式，且在以上教示的背景下其它修改及變型可為可行的。選擇并描述實(shí)施例以最佳地解釋本發(fā)明的原理及其實(shí)際應(yīng)用，從而使得所屬領(lǐng)域的其它技術(shù)人員能夠在適于所預(yù)期的特定用途的各種實(shí)施例及各種修改中最佳地利用本發(fā)明。希望所附權(quán)利要求書被理解為包含除去由現(xiàn)有技術(shù)限制的范圍以外的本發(fā)明的其它替代實(shí)施例?！緳?quán)利要求】1.一種用于混合去離子水與鞘液濃縮物的系統(tǒng)，其包括:第一容器，其供應(yīng)去離子水；第二容器，其供應(yīng)濃縮鞘液；泵，其以某一速率將所述去離子水及所述濃縮鞘液供應(yīng)到儲(chǔ)液器中，所述速率足夠緩慢使得實(shí)質(zhì)上沒有氣泡在所述加壓儲(chǔ)液器中形成；閥，其具有耦合到所述第一容器中的所述去離子水且在所述閥處于第一位置中時(shí)通過一輸出將所述去離子水供應(yīng)到所述儲(chǔ)液器的第一輸入，以及耦合到所述第二容器中的所述濃縮鞘液且通過所述輸出將所述去離子水供應(yīng)到所述儲(chǔ)液器的第二輸入；控制器，其將所述閥置于所述第一位置中直到預(yù)定量的所述去離子水被供應(yīng)到所述加壓容器為止，且將所述閥切換到所述第二位置直到預(yù)定量的所述濃縮鞘液被供應(yīng)到所述儲(chǔ)液器為止，使得所述預(yù)定量的所述去離子水及所述預(yù)定量的所述濃縮鞘液產(chǎn)生具有所要鞘液濃度的混合物。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中所述控制器包括速率積分器，所述速率積分器取樣泵控制信號(hào)以產(chǎn)生經(jīng)取樣泵控制信號(hào)且對(duì)所述經(jīng)取樣泵控制信號(hào)求和，以確定何時(shí)所述預(yù)定量的去離子水已被遞送到所述加壓容器及何時(shí)所述預(yù)定量的所述濃縮鞘液已被遞送到所述加壓容器。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的系統(tǒng)，其中所述泵遞送所述去離子水及所述濃縮鞘液的所述速率為與鞘液到所述加壓儲(chǔ)液器的流出速率實(shí)質(zhì)上匹配的速率且為可建立、再次建立及維持所述加壓儲(chǔ)液器中的流體的實(shí)質(zhì)上恒定液位的速率。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的系統(tǒng)，其進(jìn)一步包括:沖洗泵，其連接到提供加壓去離子水的供應(yīng)的所述第一容器；第二閥，其連接到加壓去離子水的容器，所述加壓去離子水的容器將所述加壓去離子水供應(yīng)到所述流式細(xì)胞儀中的噴嘴以使用所述加壓去離子水沖洗所述噴嘴及廢液收集器且反沖洗注射器針、樣本管及樣本上升管以移除鞘液及樣本顆粒。5.一種在流式細(xì)胞儀中混合去離子水與濃縮鞘液的方法，其包括:從第一容器供應(yīng)去離子水；從第二容器供應(yīng)濃縮鞘液；以某一速率將所述去離子水及所述濃縮鞘液泵送到儲(chǔ)液器中，所述速率足夠緩慢以實(shí)質(zhì)上消除致使氣泡在所述儲(chǔ)液器中形成的湍流；控制在第一位置中連接到所述第一容器且在第二位置中連接到所述第二容器的第一閥，使得所述第一閥安置在所述第一位置中直到預(yù)定量的所述去離子水被供應(yīng)到所述儲(chǔ)液器為止且所述第一閥安置在所述第二位置中直到預(yù)定量的所述濃縮鞘液被供應(yīng)到所述儲(chǔ)液器為止，以在所述儲(chǔ)液器中生產(chǎn)具有預(yù)定濃度的鞘液。6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其中控制所述第一閥的所述過程包括:取樣泵控制信號(hào)以產(chǎn)生經(jīng)取樣泵控制信號(hào)；當(dāng)所述第一閥處于所述第一位置中時(shí)對(duì)所述經(jīng)取樣泵控制信號(hào)進(jìn)行求和以確定何時(shí)所述預(yù)定量的去離子水已被遞送到所述儲(chǔ)液器；當(dāng)所述第一閥處于所述第二位置中時(shí)對(duì)所述經(jīng)取樣泵控制信號(hào)求和以確定何時(shí)所述預(yù)定量的濃縮流體已被遞送到所述儲(chǔ)液器。7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的方法，其中泵送所述去離子水及所述濃縮鞘液的所述過程包括:以與鞘液到所述儲(chǔ)液器的流出速率實(shí)質(zhì)上匹配的速率且以足以建立、再次建立及維持所述儲(chǔ)液器中的所述鞘液的實(shí)質(zhì)上恒定液位的速率泵送所述去離子水及所述濃縮鞘液。8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其進(jìn)一步包括:使用沖洗泵泵送所述鞘液以提供用于清洗接觸所述流式細(xì)胞儀中的所述鞘液及樣本流體的部件的去離子水的供應(yīng)；將去離子水的所述供應(yīng)施加到所述流式細(xì)胞儀中的噴嘴使得所述去離子水從所述噴嘴流出而流入到廢液收集器中，以使用所述去離子水沖洗所述噴嘴及所述廢液收集器；將去離子水的所述供應(yīng)施加到所述噴嘴以致使所述去離子水反沖洗注射器針、樣本管及取樣上升管以移除鞘液及樣本顆粒?！疚臋n編號(hào)】G05D7/00GK104471504SQ201380032476【公開日】2015年3月25日申請(qǐng)日期:2013年6月20日優(yōu)先權(quán)日:2012年6月22日【發(fā)明者】丹尼爾·N·?？怂?內(nèi)森·邁克爾·加斯基爾-?？怂股暾?qǐng)人:生物輻射實(shí)驗(yàn)室股份有限公司