一種膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ-氨基丁酸含量的方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ?氨基丁酸含量的方法，屬于色譜分析技術(shù)領(lǐng)域，包括有如下步驟：(1)石英毛細(xì)管柱的選擇及預(yù)處理：(2)電泳分析條件：(3)繪制γ?氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線：(4)樣品衍生：(5)γ?氨基丁酸的定量分析：與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明采用了毛細(xì)管膠束電泳法膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳(MECC)，加入十二烷基磺酸(SDS)及β?環(huán)糊精作為膠束，并加入有機(jī)改性異丙醇試劑，使γ?氨基丁酸快速與其他游離氨基酸得到快速簡(jiǎn)單高效分離，并可以在30min時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出γ?氨基丁酸。
【專利說(shuō)明】
一種膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定丫 -氨基丁酸含量的方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于色譜分析技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定Y -氨 基丁酸含量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] y_氨基丁酸是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中很重要的抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，它是一種天然存在的 非蛋白組成氨基酸，具有極其重要的生理功能，它能促進(jìn)腦的活化性，健腦益智，抗癲癇，促 進(jìn)睡眠，美容潤(rùn)膚，延緩腦衰老機(jī)能，能補(bǔ)充人體抑制性神經(jīng)遞質(zhì)，具有良好的降血壓功效。 促進(jìn)腎機(jī)能改善和保護(hù)作用。抑制脂肪肝及肥胖癥，活化肝功能。每日補(bǔ)充微量的Y _氨基 丁酸有利于心腦血壓的緩解，又能促進(jìn)人體內(nèi)氨基酸代謝的平衡，調(diào)節(jié)免疫功能。
[0003] y-氨基丁酸屬?gòu)?qiáng)神經(jīng)抑制性氨基酸，具有鎮(zhèn)靜、催眠、抗驚厥、降血壓的生理作 用。它是抑制性神經(jīng)遞質(zhì)（Inhibitory Neurotransmitter)，可以抑制動(dòng)物的活動(dòng)，減少能 量的消耗。T -氨基丁酸作用于動(dòng)物細(xì)胞中的GABA受體，GABA受體是一個(gè)氯離子通道，GABA 的抑制性或興奮性是依賴于細(xì)胞膜內(nèi)外的氯離子濃度的，GABA受體被激活后，導(dǎo)致氯離子 通道開放，能增加細(xì)胞膜對(duì)氯離子通透性，使氯離子流入神經(jīng)細(xì)胞內(nèi)，引起細(xì)胞膜超極化， 抑制神經(jīng)細(xì)胞元激動(dòng)，從而減少動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)量。它是通過(guò)減少動(dòng)物的無(wú)意識(shí)運(yùn)動(dòng)，來(lái)減少能 量消耗，從而達(dá)到促生長(zhǎng)的目的。y-氨基丁酸能促進(jìn)動(dòng)物胃液和生長(zhǎng)激素的分泌，從而提 高生長(zhǎng)速度和采食量;能興奮動(dòng)物的采食中樞，從而增加采食量。
[0004] y-氨基丁酸(GABA)是一種非蛋白質(zhì)氨基酸，是哺乳動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)重要的 氨基酸類神經(jīng)遞質(zhì)，具有促進(jìn)腦細(xì)胞代謝、改善肝臟、腎臟功能、促進(jìn)乙醇代謝、降血脂和防 止肥胖等作用。y-氨基丁酸的測(cè)定方法大多采用紙層析法、比色法、高效液相色譜法 (HPLC)，但是否還有其它的定量檢測(cè)方法適用于y -氨基丁酸的定量檢測(cè)還有待研究。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的現(xiàn)狀提供一種利用膠束電動(dòng) 毛細(xì)管電泳法對(duì)Y _氨基丁酸的定量檢測(cè)方法，該方法不僅能夠使Y _氨基丁酸快速地與其 他游離氨基酸得到快速簡(jiǎn)單高效的分離而且還可以同時(shí)對(duì)其他游離氨基酸進(jìn)行定性定量。
[0006] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案為：該膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定 y -氨基丁酸含量的方法，其特征在于:包括有如下步驟：
[0007] (1)石英毛細(xì)管柱的選擇及預(yù)處理：
[0008] (2)電泳分析條件：
[0009] (3)繪制y -氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線：以y -氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度和峰面積為坐標(biāo) 繪制y-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線；
[0010] ⑷樣品衍生：
[0011] (5) y-氨基丁酸的定量分析，其特征在于:所述步驟(2)中的電泳分析條件中：緩 沖液 pH=8 ? 0~10、60~801111]1〇1/]^硼砂-40~601]11]1〇1/]^十二烷基硫酸鈉-20~301]11]1〇1/1^-環(huán) 糊精-質(zhì)量濃度為1 %~5 %的異丙醇的混合物，緩沖液預(yù)沖洗lOmin，進(jìn)樣方式為0.3~ 0.6psi壓力進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)間4~7s，正向電壓為10~25kv，毛細(xì)管柱溫20~30°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為 214nm〇
[0012] 進(jìn)一步地，所述步驟（1)中石英毛細(xì)管柱的選擇及預(yù)處理:選用未涂層的50cmX75 Mi石英毛細(xì)管柱；所述石英毛細(xì)管柱先依次用甲醇沖洗lOmin，蒸餾水沖洗5min，lmol/ LNaOH溶液沖洗30min，蒸餾水沖洗5min，最后再用運(yùn)行緩沖液沖洗10-15min;每次進(jìn)樣前， 用蒸餾水及運(yùn)行緩沖液先后沖洗2min;運(yùn)行緩沖液及樣品溶液均用0.22wii微孔針頭過(guò)濾器 過(guò)濾；所述運(yùn)行緩沖液為：pH=9.5、40mmol/L硼砂-50mmol/L十二烷基硫酸鈉-3Ommol/L0-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇的混合物。
[0013] 進(jìn)一步地，所述步驟（2)中緩沖液為60mmol/L硼砂-60mmol/L十二烷基硫酸鈉-20mmol/U3-環(huán)糊精-質(zhì)量濃度為3 %的異丙醇的混合物。
[0014]進(jìn)一步地，步驟(4)中樣品衍生的衍生劑為20mmol/L芴甲氧羰酰氯，衍生方法為取 待處理樣品lml加入等量的衍生劑，混勻，2min后加入lml正戊烷，混勻靜置，分層后取下清。 [0015] 進(jìn)一步地，步驟(5)中y-氨基丁酸的定量分析為:取待處理樣品，經(jīng)過(guò)步驟(4)的 衍化處理后，按照步驟(2)進(jìn)樣，獲氨基丁酸吸收峰面積，便可根據(jù)步驟(3)的標(biāo)準(zhǔn)曲線 得到y(tǒng) -氨基丁酸對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度，便可對(duì)樣品中的y -氨基丁酸定量。
[0016] 進(jìn)一步地，所述步驟(3)中所述y-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線是以y-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)樣品 的濃度和峰面積為坐標(biāo)繪制y -氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，為y = 41142x+214664。
[0017] 進(jìn)一步地，所述步驟(4)中衍生劑的配制方法為:準(zhǔn)確稱取芴甲氧羰酰氯0.5174g， 以乙晴為溶劑，定容至l〇〇ml。
[0018] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):本發(fā)明的有益效果:膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳 (MECC)具有以下特點(diǎn)：1、電滲流呈扁平流型，大大減小了徑向的速度梯度;2、毛細(xì)管柱的細(xì) 管徑以其極高的散熱效率減小了由高電場(chǎng)強(qiáng)度引起的熱效應(yīng);3、SDS形成的膠束為動(dòng)態(tài)結(jié) 構(gòu)，傳質(zhì)速度很快;4、MECC與其他方法相比質(zhì)量檢測(cè)限極低，樣品用量?jī)H僅為nL級(jí)，試劑消 耗也很少;5、本發(fā)明采用了毛細(xì)管膠束電泳法膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳(MECC)，加入十二烷基 磺酸(SDS)及環(huán)糊精作為膠束，并加入有機(jī)改性異丙醇試劑，使y-氨基丁酸快速與其他 游離氨基酸得到快速簡(jiǎn)單高效分離，并可以在30min時(shí)間內(nèi)檢測(cè)出Y-氨基丁酸。
【附圖說(shuō)明】
[0019] 圖1為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為40mmol/L硼砂-20mmol/L十二 烷基硫酸鈉-20_1〇1/〇3-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0020] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為40mmol/L硼砂-40mmol/L十二 烷基硫酸鈉-30_1〇1/〇3-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0021] 圖3為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為40mmol/L硼砂-60mmol/L十二 烷基硫酸鈉-4〇!11111 〇1/1^-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0022]圖4為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為60mmol/L硼砂-20mmol/L十二 烷基硫酸鈉-30_1〇1/〇3-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0023]圖5為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為60mmol/L硼砂-40mmol/L十二 烷基硫酸鈉-4〇!11111〇1/1^-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0024]圖6為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為60mmol/L硼砂-60mmol/L十二 烷基硫酸鈉-20_1〇1/〇3-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0025]圖7為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為60mmol/L硼砂-60mmol/L十二 烷基硫酸鈉-20_1〇1/〇3-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0026]圖8為本發(fā)明實(shí)施例1的毛細(xì)管電泳色譜(緩沖液為80mmol/L硼砂-40mmol/L十二 烷基硫酸鈉-20_1〇1/〇3-環(huán)糊精-體積濃度為3%的異丙醇）；
[0027] 圖9為本發(fā)明實(shí)施例2的氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線。
【具體實(shí)施方式】
[0028] 以下通過(guò)結(jié)合附圖及實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0029] 實(shí)施例1
[0030] (1)緩沖體系的選擇
[0031] 緩沖體系及濃度直接影響離子的迀移和分離。本發(fā)明考察了毛細(xì)管分離y -氨基 丁酸的各個(gè)緩沖體系的組分如表1，以確定最佳組分：
[0032] 表 1
[0035]通過(guò)結(jié)合圖1~8所示，由于8號(hào)緩沖液呈乳狀無(wú)法進(jìn)行電泳，故略去圖8,從圖1上 看，1號(hào)體系分離出來(lái)的峰雜亂，且峰值過(guò)低，無(wú)法進(jìn)行有效分離；從圖2上看，2號(hào)體系在 lOmin出現(xiàn)多峰交錯(cuò)，且在16min有兩峰無(wú)法完全分離；從圖3上看，3號(hào)體系在12.5,14及 26min出現(xiàn)多峰交錯(cuò);從圖4上看，4號(hào)體系出峰過(guò)快，導(dǎo)致目標(biāo)無(wú)法完全分離;從圖5上看，5 號(hào)體系在lOmin左右有個(gè)別難以分離的峰;從圖6上看，6號(hào)體系完全分離;從圖7上看，7號(hào)體 系基本完成分離就在?；撬岷屠i氨酸有些許交錯(cuò);從圖8上看，8號(hào)體系峰較好，較為突出， 但其出峰太少估計(jì)部分氨基酸重疊。由此可見6號(hào)為最佳分離體系，并且本體系在硼砂濃度 60mmol/L，SDS濃度為60mmol/L，糊精濃度在20mmol/L之間都可得到分離。
[0036] (2)有機(jī)溶劑的選擇
[0037]在MECC的分離中，有機(jī)溶劑的加入能改變引起電滲流的偶電層，使電滲流減小，擴(kuò) 大流出窗口，使整個(gè)峰容量增加，并影響溶質(zhì)在膠束和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)，提高分離效 率。如果不加有機(jī)溶劑，疏水溶質(zhì)將和膠束幾乎同一時(shí)間流出。我們選擇甲醇、異丙醇、乙醇 不同有機(jī)溶劑加入緩沖體系中試驗(yàn)。（a)當(dāng)不加有機(jī)溶劑時(shí)，有效成分響應(yīng)值較低，噪音較 大。（C)加入乙醇，峰前沿較嚴(yán)重，而且峰型較寬。（d)加入甲醇時(shí)，前沿現(xiàn)象仍然存在，改觀 并不明顯。(b)加入異丙醇，峰對(duì)稱性較好，而且有合適的響應(yīng)值，故選擇加入異丙醇。
[0038] (3)有機(jī)溶劑濃度的影響
[0039] 選擇異丙醇濃度分別為1%，3%、5%試驗(yàn)，當(dāng)加入異丙醇量超過(guò)5%時(shí)，檢測(cè)失??； 加入異丙醇量為3%時(shí)分離效果較好，當(dāng)加入異丙醇量為1%并為出現(xiàn)明顯改觀。
[0040] (4)pH值對(duì)迀移時(shí)間的影響
[0041] pH值能影響電動(dòng)色譜中帶電組分迀移的速度。我們選擇硼砂緩沖體系為電泳緩沖 液，綜合考慮了 pH為8.0,8.5,9.0,9.5,10檢測(cè)其分離效果，發(fā)現(xiàn)pH在9.0及9.5時(shí)分離效果 較佳，其中以9.5分離效果最好。選擇pH為5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0的磷酸-303緩沖溶液 測(cè)定樣品的迀移時(shí)間。結(jié)果表明，當(dāng)緩沖溶液的pH值較小時(shí)，分離時(shí)間較長(zhǎng);pH小于6.0時(shí)峰 型不好，前沿現(xiàn)象較嚴(yán)重；因?yàn)殡姖B受pH的限制，它的凈膠束速度與pH有關(guān)，pH=5時(shí)，凈膠 束速度接近于零；當(dāng)pH〈5時(shí)，電滲很小，如果它小于膠束泳流的速度，則凈流動(dòng)方向?qū)?huì)發(fā) 生變化，pH=5左右，組分的迀移精度極差，因此通常不采用這種模式。緩沖溶液的pH值較大 時(shí)，分離時(shí)間較短，峰又出現(xiàn)拖尾;當(dāng)緩沖溶液的pH值在9.5時(shí)，峰型較好，分離效果也較好。 因此，本發(fā)明將緩沖溶液的pH值控制在9.5。
[0042] (5)十二烷基硫酸鈉(SDS)濃度的影響
[0043]在膠束毛細(xì)管電泳中，將離子型表面活性劑SDS加入到緩沖液中，當(dāng)SDS濃度達(dá)到 一定值時(shí)，表面活性劑的單體就結(jié)合在一起，形成球體型的膠束。具有不同疏水性的中性粒 子與膠束的相互作用不同，從而達(dá)到分離。（疏水性強(qiáng)的作用力就大，留在膠束相中的時(shí)間 就長(zhǎng)，因膠束相的絕對(duì)速度很小，因此組分的保留時(shí)間就長(zhǎng)，反之，組分較多的停留在緩沖 液中按電滲的速度移動(dòng)，保留時(shí)間較短。）當(dāng)SDS濃度超過(guò)其臨界膠束濃度時(shí)，則分子締合形 成膠束，根據(jù)樣品與SDS膠束作用程度不同達(dá)到分離的目的。在分離電壓20kv，異丙醇3%， pH9.5，改變SDS濃度分別為20，40，60，80mmol/L。實(shí)驗(yàn)證明，SDS濃度在40-60mmol/l時(shí)分離 效果較佳，當(dāng)濃度達(dá)到80mm 〇l/l時(shí)其極易結(jié)晶導(dǎo)致體系不穩(wěn)定。
[0044] (6)電壓的選擇
[0045] 電壓作為分離的動(dòng)力，在分離中起著重要的作用，當(dāng)緩沖液為60mmol/L硼砂-60mmol/L十二烷基硫酸鈉-2Ommol/L0-環(huán)糊精-體積濃度為3 %的異丙醇的混合物，3 %異丙 醇，pH9.5時(shí)，考查樣品在10、15、20、25kv電壓下的分離情況，當(dāng)電壓大于25kv時(shí)，分離時(shí)間 縮短，分離度降低，且基線不穩(wěn)定。電壓低于15kv時(shí)，分離時(shí)間較長(zhǎng)，實(shí)驗(yàn)中選擇20kv最為理 想。
[0046] 實(shí)施例2
[0047] y-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制:對(duì)O.Olg/mly-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行稀釋并檢測(cè)制作 其標(biāo)準(zhǔn)曲線并檢驗(yàn)其精度與重現(xiàn)性，對(duì)濃度為0.2mg/ml連續(xù)進(jìn)樣3次測(cè)定，按毛細(xì)管電泳分 析條件的最優(yōu)進(jìn)樣條件為:75wii的進(jìn)樣柱，緩沖液為60mmol/L的硼砂，緩沖液pH為9.5，加壓 20kv的條件進(jìn)樣，以Y-氨基丁酸吸收峰面積(y)對(duì)應(yīng)質(zhì)量濃度(x)繪制得到標(biāo)準(zhǔn)曲線(如圖 9)，由實(shí)驗(yàn)得其標(biāo)準(zhǔn)曲線為y = 0.000252X，在檢測(cè)濃度為0.083~4.166ug/ml，呈線性關(guān)系， 所能檢測(cè)出的最低濃度為〇. 〇8ug/ml。
[0048] 其中還計(jì)算了峰面積和保留時(shí)間的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD，考察該本方法的重復(fù)性和 測(cè)定精確度，積分面積RSD分別為0.91% ;保留時(shí)間的RSD分別為1.1%。說(shuō)明該方法重復(fù)性 與精確度都較好。
[0049] 實(shí)施例3 [0050]樣品檢測(cè)
[0051]應(yīng)用利用內(nèi)標(biāo)法檢測(cè)三疣梭子蟹不同組織部位的GABA含量，發(fā)現(xiàn)GABA含量（如表 1)：
[0053]由上表1可以看出神經(jīng)中的GABA含量極高，遠(yuǎn)高于其他部位，GABA具有神經(jīng)調(diào)控供 能故其在神經(jīng)中的含量最高。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ -氨基丁酸含量的方法，包括有如下步驟： (1) 石英毛細(xì)管柱的選擇及預(yù)處理： (2) 電泳分析條件： (3) 繪制γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線：以γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度和峰面積為坐標(biāo)繪制 γ-氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線； (4) 樣品衍生： (5) γ-氨基丁酸的定量分析，其特征在于:所述步驟(2)中的電泳分析條件中：緩沖液 ρΗ=8 · O~10、60~80臟〇1凡硼砂-40~601111]1〇1/1^十二烷基硫酸鈉-20~301111]1〇1/1^-環(huán)糊精-質(zhì)量濃度為1 %~5 %的異丙醇的混合物，緩沖液預(yù)沖洗IOmin，進(jìn)樣方式為0.3~0.6psi壓 力進(jìn)樣，進(jìn)樣時(shí)間4~7s，正向電壓為10~25kv，毛細(xì)管柱溫20~30°C，檢測(cè)波長(zhǎng)為214nm。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征 在于所述步驟（1)中石英毛細(xì)管柱的選擇及預(yù)處理:選用未涂層的50cmX75ym石英毛細(xì)管 柱;所述石英毛細(xì)管柱先依次用甲醇沖洗IOmin，蒸餾水沖洗5min，lmol/L NaOH溶液沖洗 30min，蒸餾水沖洗5min，最后再用運(yùn)行緩沖液沖洗10-15min;每次進(jìn)樣前，用蒸餾水及運(yùn)行 緩沖液先后沖洗2min;運(yùn)行緩沖液及樣品溶液均用0.22μπι微孔針頭過(guò)濾器過(guò)濾;所述運(yùn)行 緩沖液為:pH=9.5、40mmol/L硼砂_50mmol/L十二烷基硫酸鈉-3Ommol/L0-環(huán)糊精-體積濃 度為3%的異丙醇的混合物。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征 在于所述步驟(2)中緩沖液為60mmol/L硼砂-60mmol/L十二烷基硫酸鈉-2Ommol/L0-環(huán)糊 精-質(zhì)量濃度為3%的異丙醇的混合物。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ -氨基丁酸含量的方法，其特征 在于步驟(4)中樣品衍生的衍生劑為20mmol/L芴甲氧羰酰氯，衍生方法為取待處理樣品Iml 加入等量的衍生劑，混勻，2min后加入1ml正戊烷，混勻靜置，分層后取下清。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征 在于步驟(5)中γ-氨基丁酸的定量分析為：取待處理樣品，經(jīng)過(guò)步驟(4)的衍化處理后，按 照步驟(2)進(jìn)樣，獲γ-氨基丁酸吸收峰面積，便可根據(jù)步驟(3)的標(biāo)準(zhǔn)曲線得到γ-氨基丁 酸對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度，便可對(duì)樣品中的γ -氨基丁酸定量。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ-氨基丁酸含量的方法，其特征 在于所述步驟(3)中所述γ -氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線是以γ -氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度和峰面積 為坐標(biāo)繪制γ -氨基丁酸標(biāo)準(zhǔn)曲線，為y = 41142x+214664。7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的膠束電動(dòng)毛細(xì)管電泳法測(cè)定γ -氨基丁酸含量的方法，其特征 在于所述步驟(4)中衍生劑的配制方法為:準(zhǔn)確稱取芴甲氧羰酰氯0.5174g，以乙晴為溶劑， 定容至100ml。
【文檔編號(hào)】G01N27/447GK105891347SQ201610156549
【公開日】2016年8月24日
【申請(qǐng)日】2016年3月18日
【發(fā)明人】盧少坤, 王春琳, 李榮華, 母昌考, 宋微微
【申請(qǐng)人】寧波大學(xué)