XAD-18樹脂作為吸附劑，吸附劑根據(jù)實(shí)際需要，可以選用顆粒狀XAD-4樹脂作為吸附劑，吸附劑 的粒徑為20-60目。
[0043] 本實(shí)施例的一種用于測定水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣器及其應(yīng)用的具 體采樣測定方法如下所述：
[0044] i)吸附劑的清洗：
[0045] 采樣開始前，顆粒狀XAD-18樹脂吸附劑依次用純水和甲醇清洗，然后于65°C烘箱 中烘2小時，冷卻后儲存于棕色玻璃瓶中待用。
[0046] ii)采樣過程：
[0047] 將裝有步驟i)清洗后的吸附劑裝入不銹鋼絲網(wǎng)的采樣桶中，旋緊上蓋。采樣桶固 定于一個竹制的吊籃內(nèi)，吊籃用繩索固定于在泡沫塑料的下方20-30cm，使得被動采樣器能 懸掛于水中，離水面20-30cm，泡沫塑料用繩索固定于河流橋下，離河岸超過2m，進(jìn)行采樣。 采樣時間為t(單位d)，本實(shí)施例中采樣周期為6天，采樣結(jié)束后，取出被動采樣器，密封于封 口袋中運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室，4°C下保存。
[0048] iii)吸附劑中抗生素的提取
[0049] 將步驟ii)采樣完成后，被動采樣裝置取出后，先用超純水淋洗，后放入65°C的烘 箱中烘約lh。冷卻至室溫后，將采樣桶內(nèi)的樹脂通過長頸小漏斗轉(zhuǎn)移至10mL SPE空柱內(nèi)，加 入10mL乙腈進(jìn)行洗脫，收集洗脫液于10mL氮吹管中，在40°C水浴條件下氮吹至干，后加入20 yL內(nèi)標(biāo)溶液(200ppb)，最后用甲醇定容至lmL，經(jīng)0.45μπι濾膜過濾，保存于-20 °C下待測定。 最后用進(jìn)行檢測。
[0050] iv)HPLC-MS/MS測定抗生素的含量
[00511使用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)分析步驟i i i)提取的萃取液中抗生素，其 中，液相色譜條件:Waters Xterra C18液相色譜柱(2.1 X 100mm，3.5ym)，流動相A:0.1%甲 酸水溶液，流動相B:甲醇。流速350yL/min，進(jìn)樣量5yL，柱溫35 °C。梯度洗脫程序：0~ 0.5min，保持5%Β;0·5~1.5min，5%B~30%B; 1.5~11.5min，30%B~70%B; 11.5~ 121^11，70%8~100%8;12~12.5111111，保持100%8，12.5~13111111，100%8~5%8，13~ 18mi η，保持5 % Β。樣品需過0.45μηι的PTFE濾頭方可進(jìn)樣。質(zhì)譜條件:離子源為電噴霧正電離 源(ESI+);離子源I(Ion Source Gas 1，GS1)和Π (Ion Source Gas 2，GS2)的氣體流速分 別為55mL/min和55mL/min，碰撞氣(Collision Gas，CAD)和氣簾氣(Curtain Gas，CUR)流速 分別為7mL/min和25mL/min，氣體均為N2;電離電壓（Ion Spray Voltage，IS)為4500V;輔助 加熱氣溫度(TEM)為450°C。檢測方式為多反應(yīng)選擇監(jiān)測(Multiple reaction monitoring， MRM)離子模式。5種抗生素羅紅霉素（R0X)、阿奇霉素（AZI)、克拉霉素（CLAR)、螺旋霉素 (SPM)、泰樂菌素(TLS)以及定量內(nèi)標(biāo)西瑪通的MRM離子流圖見圖3。利用保留時間和特征離 子進(jìn)行五種抗生素的定性定量分析，得到五種抗生素在吸附劑上的量M s。
[0052] v)采樣速率的測定：
[0053] 被動采樣器的采樣速率是采樣器性能的關(guān)鍵參數(shù)，采樣速率反映了所測化合物在 全部線性吸收階段的平均值，本實(shí)施例采用實(shí)驗(yàn)室模擬實(shí)驗(yàn)測定被動采樣器對水中不同大 環(huán)內(nèi)酯類抗生素的采樣速率，在兩個40L水槽內(nèi)分別倒入20L蒸餾水(平行），添加大環(huán)內(nèi)酯 類抗生素使得大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的濃度達(dá)到10ng/mL，先手動用玻璃棒攪拌lmin，后使用電 動攪拌器攪拌30min，采用蠕動栗模擬水流動，使水流緩慢流動，兩個水槽中分別同時放入 10個被動采樣器，體系在避光條件下進(jìn)行，室溫控制在20 ± 2 °C。實(shí)驗(yàn)持續(xù)時間為24h，在lh、 2h、3h、4h、5h、6h、8h、10h、12h和24h后分別依次從每個水槽中取出一個被動采樣器，并同時 取水樣檢測分析物的濃度。被動采樣器中吸附的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的含量M s按本實(shí)施例中 步驟iii)和V)進(jìn)行測定，得到Ms隨時間t變化的曲線（圖3)。在采樣時間范圍內(nèi)，被動采樣器 對水中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的富集呈線性，其斜率為k，由式一計算被動采樣器對大環(huán)內(nèi)酯類 抗生素的采樣速率：
[0054] Rs = k/Cw (式一）
[0055]其中:Rs為采樣速率，單位L/d;Cw為水中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的平均濃度，單位yg/L;
[0056] 經(jīng)過計算，五種大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的采樣速率在0.024-0.045L/d
[0057] vi)計算大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的濃度：
[0058] 水中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的加權(quán)平均濃度(^由式二計算得到
[0059] Cw=Ms/(RsXt) (式二）
[0060] 其中：Cw為水中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的平均濃度，單位yg/L;Ms為采樣時間內(nèi)采樣器 中分析物的量，單位yg;Rs為被動采樣器的采樣速率，單位L/d; t為采樣時間，單位d。
[0061 ] 實(shí)施例2
[0062] 本實(shí)施例的一種用于水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣器及其應(yīng)用的基本結(jié) 構(gòu)同實(shí)施例1，選擇另一水體進(jìn)行被動采樣，通過7天的連續(xù)采樣，根據(jù)式二計算各大環(huán)內(nèi)酯 類抗生素的平均濃度C w見表1
[0063] 表1實(shí)施例1和實(shí)施例2中河流中五種抗生素的濃度
[0064]
[0065] 綜上所述，本發(fā)明的一種用于水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣器，制作、裝配 簡單，價格低廉，且吸附劑中的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的提取只需通過簡單的溶劑淋洗完成，大 大降低了有機(jī)溶劑的使用且縮短了分析時間，適合于實(shí)施水環(huán)境中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被 動采樣和監(jiān)測，具有很好的應(yīng)用前景。
[0066] 以上示意性的對本發(fā)明及其實(shí)施方式進(jìn)行了描述，該描述沒有限制性，附圖中所 示的也只是本發(fā)明的實(shí)施方式之一，實(shí)際的結(jié)構(gòu)并不局限于此。所以，如果本領(lǐng)域的普通技 術(shù)人員受其啟示，在不脫離本發(fā)明創(chuàng)造宗旨的情況下，不經(jīng)創(chuàng)造性的設(shè)計出與該技術(shù)方案 相似的結(jié)構(gòu)方式及實(shí)施例，均應(yīng)屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種用于測定水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣器，其特征在于:包括采樣桶(包 括旋蓋)和吸附劑;所述的采樣桶(包括旋蓋）由不銹鋼絲網(wǎng)制成，所述的吸附劑充填在所述 的采樣桶內(nèi)。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于測定水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣器，其特 征在于:所述的不銹鋼絲網(wǎng)為100目不銹鋼絲網(wǎng);所述的采樣桶的內(nèi)徑為2-4cm，所述的采樣 桶的高度為2-4cm〇3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于測定水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣器，其特 征在于:所述的吸附劑為顆粒狀XAD樹脂;所述的吸附劑的粒徑為20-60目；所述的吸附劑的 用量為l_2g/桶。4. 一種用于測定水體大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的采樣測定方法，主要步驟如下： i) 吸附劑的清洗 采樣開始前，吸附劑依次用水和甲醇清洗，然后于65°C烘箱中烘干，冷卻后儲存于棕色 玻璃瓶中待用； ii) 米樣過程 將經(jīng)過步驟i)處理后的吸附劑裝入不銹鋼絲網(wǎng)的采樣桶中，旋緊旋蓋;采樣桶固定于 一個竹制的吊籃內(nèi)，吊籃用繩索固定于在泡沫塑料的下方20-30cm，使得被動采樣器能懸掛 于水中，在采樣點(diǎn)的位置，泡沫塑料用繩索固定于橋下，離河岸超過2m，進(jìn)行采樣，采樣時間 為t(單位d);采樣結(jié)束后，取出被動采樣器，密封于封口袋中運(yùn)回實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行處理； iii) 吸附劑中抗生素的提取 將步驟ii)采樣完成的被動采樣器取出后，先用超純水淋洗，后放入65°C的烘箱中烘干 1-2h;冷卻至室溫后，將采樣桶內(nèi)的樹脂通過長頸小漏斗轉(zhuǎn)移至10mL的SPE空管內(nèi)，加入乙 腈進(jìn)行洗脫，收集洗脫液于10mL氮吹管中，在40°C水浴條件下氮吹至干，然后加入20yL內(nèi)標(biāo) 溶液(200ppb)，用甲醇定容至lmL，最后用液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)進(jìn)行檢測； iv) HPLC-MS/MS測定抗生素的含量 使用HPLC-MS/MS測定i i i)提取的萃取液中的大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的含量，其中， 液相色譜條件:Waters Xterra C18液相色譜柱(2.1 X 100mm，3.5ym)，流動相Α:0· 1% 甲酸水溶液，流動相Β:甲醇；流速350yL/min，進(jìn)樣量5yL，柱溫35°C ;梯度洗脫程序：0~ 0.5min，保持5%Β;0·5~1.5min，5%B~30%B; 1.5~11.5min，30%B~70%B; 11.5~ 121^11，70%8~100%8;12~12.5111111，保持100%8，12.5~13111111，100%8~5%8，13~ 18min，保持5 % B;樣品需用0.45μπι的PTFE濾頭過濾后方可進(jìn)樣； 質(zhì)譜條件：離子源為電噴霧正電離源(ESI + );離子源I(Ion Source Gas 1，GS1)和Π (Ion Source Gas 2，GS2)的氣體流速分別為55mL/min 和55mL/min，碰撞氣（Collision Gas，CAD)和氣簾氣(Curtain Gas，QJR)流速分別為7mL/min和25mL/min，氣體均為N2;電離 電壓（Ion Spray Voltage，IS)為4500V;輔助加熱氣溫度(TEM)為450°C;檢測方式為多反應(yīng) 選擇監(jiān)測（Multiple reaction monitoring,MRM)離子模式； v) 采樣速率的測定 采樣實(shí)驗(yàn)室模擬實(shí)驗(yàn)測定被動采樣器對水中不同大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的采樣速率，在一 定時間內(nèi)，被動采樣器對水中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的富集呈線性，其斜率為k，由式一計算被 動采樣器對大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的采樣速率： Rs = k/Cw (式一) 其中：Rs為采樣速率，單位L/d; (^為水中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的平均濃度，單位yg/L; vi) 計算大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的濃度 水中抗生素的加權(quán)平均濃度Cw由式二計算得到： Cw=Ms/(RsXt)(式二） 其中：Cw為水中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的平均濃度，單位yg/L;Ms為采樣時間內(nèi)被動采樣器 中分析物的量，單位yg;Rs為被動采樣器的采樣速率，單位L/d;t為采樣時間，單位d。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于測定水體大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的采樣測定方法，其特 征于： 步驟i)中，所述的吸附劑為顆粒狀XAD樹脂。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于測定水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣器及其應(yīng)用，屬于抗生素的采樣及測定領(lǐng)域。被動采樣器包括采樣桶和吸附劑，采樣桶采用100目不銹鋼絲網(wǎng)制成，采樣桶內(nèi)充填顆粒狀XAD樹脂。采樣測定方法的主要步驟為：吸附劑的清洗；采樣過程；吸附劑中抗生素的提??；HPLC-MS/MS測定抗生素含量；采樣速率的測定；計算水體中抗生素的時間加權(quán)平均濃度Cw。本發(fā)明的被動采樣器的制作、裝配簡單，價格低廉，吸附劑中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的提取只需通過簡單的溶劑淋洗，大大降低了有機(jī)溶劑的使用量，且縮短了分析時間，適合于實(shí)際水體中大環(huán)內(nèi)酯類抗生素的被動采樣和檢測。
【IPC分類】G01N30/88, G01N1/10, G01N30/06
【公開號】CN105699566
【申請?zhí)枴緾N201610004049
【發(fā)明人】鮮啟鳴, 鄧超, 韋恩澤, 曹雨
【申請人】南京大學(xué)
【公開日】2016年6月22日
【申請日】2016年1月5日