一種當歸飲片中阿魏酸含量的測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥材質(zhì)量檢測技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種當歸飲片中阿魏酸含量的測 定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 中藥材品質(zhì)除了受到品種、產(chǎn)地、采收季節(jié)等因素的影響外，還與產(chǎn)地加工方法是 否適當有很大的關(guān)系。目前，我國中藥材產(chǎn)地加工多是"分散加工"模式，由于生產(chǎn)加工技術(shù) 的差異和缺乏規(guī)范化生產(chǎn)，部分地區(qū)甚至采用硫磺熏蒸方法，導致加工出來的飲片品質(zhì)參 差不齊，市場摻假也屢見不鮮，影響著中藥臨床療效的發(fā)揮。同時，隨著產(chǎn)區(qū)的藥材基地化、 標準化種植規(guī)模不斷擴大，產(chǎn)地原有生產(chǎn)加工方式、生產(chǎn)能力不足的缺陷日益明顯，嚴重制 約著中藥材產(chǎn)業(yè)化發(fā)展。近年來，隨著現(xiàn)代制藥技術(shù)水平的不斷發(fā)展，以及產(chǎn)區(qū)開展中藥材 生產(chǎn)加工技術(shù)創(chuàng)新研究，國內(nèi)對中藥材進行分門別類的產(chǎn)地加工可行性進行了大量的研究 報道，認為在種植基地進行集中產(chǎn)地加工，與中藥規(guī)范化種植基地相結(jié)合，能更好的保證中 藥材質(zhì)量，有助于推動中藥材生產(chǎn)的產(chǎn)業(yè)化健康穩(wěn)定發(fā)展，進一步提升商品附加值，具有重 要的戰(zhàn)略意義。
[0003] 當歸為傘形科植物當歸的干燥根，是重要的常用中藥材，在我國有著悠久的藥用 歷史。其性溫，味甘、辛；歸心、肝、脾經(jīng)。具有補血活血、調(diào)經(jīng)止痛、促進血液循環(huán)、抗炎鎮(zhèn)痛、 保肝利膽、潤腸通便等功效。近年來，在繼承傳統(tǒng)的產(chǎn)地加工技術(shù)基礎(chǔ)上，成功研制出"當歸 片"生產(chǎn)技術(shù)，對當歸產(chǎn)業(yè)的發(fā)展起到了積極的推動作用。然而，目前的中國藥典治療標準 中還沒有科學系統(tǒng)的"當歸片"質(zhì)量的均一性、穩(wěn)定性等指標達到標準制訂的技術(shù)要求。
[0004] 阿魏酸的化學名稱為4-羥基-3-甲氧基肉桂酸，是植物界普遍存在的一種酚酸，是 中藥材當歸的有效成分之一。它具有許多獨特功能，如抗氧化、抗血栓、降血脂、防治冠心 病、抗菌消炎等，且毒性低，在醫(yī)藥、食品、化妝品等領(lǐng)域的用途越來越廣泛。因而，"當歸片" 中阿魏酸含量測定十分必要。目前，有關(guān)阿魏酸含量測定方法的報道較多，如專利CN 102106986 A、CN 104267110 A、CN 102998375 A、CN 101493445 A、CN 104655742 A等，尤 其是上述專利CN 104267110 A公開的一種當歸藥材的檢測方法，披露了"包括以下步驟：1) 精密稱取阿魏酸對照品l〇mg，置棕色量瓶中，加70 %甲醇溶解并稀釋至50ml;精密量取3mL 溶液，加70 %甲醇定容至50mL，搖勻得每lmL含12yg阿魏酸的對照品溶液;2)精密稱取待測 當歸藥材粉末〇. 2g，加入70 %甲醇20mL，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷后再稱定重量，并 用70%甲醇補足減失的重量，靜置取上清液以微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液;3) 照高效液相色譜法試驗，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比17: 83的乙腈-0.085 %磷酸溶液為流動相洗脫;檢測波長為316nm;柱溫35°C;分別精密吸取對照品溶液與 供試品溶液各l〇yL，注入液相色譜儀，測定"的方法。該方法通過高效液相色譜法檢測阿魏 酸的含量，準確且簡單易行，但由于"當歸片"是趁鮮切厚片干燥所得產(chǎn)品，其與現(xiàn)有常規(guī)當 歸生產(chǎn)加工方法不同，其用當歸片制備的樣品溶液中因含有的水分及成分較為復雜，采用 常規(guī)方法測定難免存在誤差，而現(xiàn)有中國藥典又沒有"當歸片"的測定標準，因此，提供一種 "當歸片"的測定標準很有必要。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于:提供一種當歸飲片中阿魏酸含量的測定方法，為我國中藥材 加工"新產(chǎn)品" "當歸片"提供測定標準及指數(shù)標準。
[0006] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：
[0007] -種當歸飲片中阿魏酸含量的測定方法，采用以下步驟予以實施：
[0008] 1)樣品干燥:將秋末采挖的鮮當歸除去須根和泥沙，蒸餾水沖洗干凈;將其攤開鋪 于木質(zhì)板上，并用白紗布覆蓋;將攤放有鮮當歸的的木質(zhì)板轉(zhuǎn)移到干燥室內(nèi)，調(diào)節(jié)室內(nèi)溫度 為35~50°C，空氣相對濕度10~18%，間隔2~3小時向白紗布噴灑適量甲醇，持續(xù)干燥24~ 36小時取出；
[0009] 2)制備當歸飲片:將干燥的當歸切成圓形或不規(guī)則厚片，切片直徑為0.3~4cm，厚 度為0.2~0.4cm，得到鮮當歸飲片，再用白紗布覆蓋，持續(xù)干燥24~48小時，檢測水分含量 低于15%時，備用；
[0010] 3)制備樣品粉末:將步驟2)制備的當歸飲片研磨成粉，過50目篩，得樣品粉末；
[0011] 4)供試樣品溶液的制備:精密稱取樣品粉末0.2g，置于1 OOmL圓底燒瓶中，精密加 入堿水25mL，氮氣保護下，控制溫度為35~40°C，持續(xù)攪拌lh，過濾，收集濾液，濾液經(jīng)冰鹽 浴冷卻，標記為Ml;濾餅再加上述堿水25mL，氮氣保護下，控制溫度為35~40°C，持續(xù)攪拌 lh，過濾，濾液經(jīng)冰鹽浴冷卻，標記為M2;合并Ml和M2濾液，氮氣保護下，常溫攪拌混合均勻， 得濾液M3，將濾液M3水浴超聲2~3分鐘;精密量取濾液M325mL，濾液減壓濃縮至原體積6 %， 加酸調(diào)節(jié)pH = 4,再加2倍量乙醚萃取兩次，合并醚層，再用2倍量的3%碳酸鈉萃取，碳酸鈉 萃取物再用上述酸調(diào)節(jié)pH=4，收集不溶物，蒸干，殘渣加70 %甲醇溶解，并轉(zhuǎn)移至25mL容量 瓶中，加70%甲醇稀釋至刻度，搖勻，靜置，取上清液用0.45μπι微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，得 供試樣品溶液；
[0012] 5)對照樣品溶液的制備:精密稱取阿魏酸對照品適量，置棕色量瓶中，加70%甲醇 制成每lml含阿魏酸12yg的溶液，搖勻，得對照樣品溶液；
[0013] 6)測定:照高效液相色譜法試驗，以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積比為 17:83的乙腈-0.085 %磷酸溶液為流動相洗脫;檢測波長為316nm;柱溫35°C;分別精密吸取 對照品溶液與供試品溶液各l〇yL，注入液相色譜儀，測定。
[0014] 進一步，測定步驟6)中，理論板數(shù)按阿魏酸峰計算不低于5000。
[0015] 進一步，當歸飲片中測定阿魏酸含量2 0.060 %。
[0016] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：
[0017] 1)本發(fā)明采用低溫干燥鮮當歸，并用該鮮當歸制備飲片，最大限度保留了當歸的 成分，提高當歸片品質(zhì);采用白紗布覆蓋當歸，降低了當歸表皮的失水速度，而當歸內(nèi)部成 分隨水分而流動，進而保持當歸各部位成分相對均衡，使制得的樣品粉末檢測結(jié)果相對穩(wěn) 定。
[0018] 2)本發(fā)明將當歸趁鮮切成飲片，再進行后續(xù)干燥，降低了當歸中有效成分大面積 流動，避免了當歸局部成分過高和過低的現(xiàn)象，提高測定準確度，為中國藥典測定提供更準 確的數(shù)據(jù)。
[0019] 3)本發(fā)明制備樣品試液時，在氮氣保護下，先用堿水處理，將束縛在當歸內(nèi)部的阿 魏酸完全釋放出來，提高測定準確度；同時冰鹽浴進行冷卻，這樣就使得當歸內(nèi)部溫度驟 變，使釋放出的阿魏酸不能重新被束縛，進一步提高測定準確度。
[0020] 4)采用本發(fā)明測定方法測得當歸飲片中阿魏酸平均含量達到0.120%，這與中國 藥典中規(guī)定的0.050%相比，有明顯提高。
【附圖說明】
[0021] 圖1是三批當歸片樣品的分散外觀圖。
[0022]圖2是三批當歸片樣品的袋裝外觀圖。
[0023]圖3是當歸片粉末主要顯微特征圖。
[0024]圖4是當歸片薄層色譜鑒別圖。
[0025]圖5是當歸片薄層色譜鑒別圖。
【具體實施方式】
[0026]下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步說明，以便于同領(lǐng)域技術(shù)人員 的理解。
[0027] 1.當歸片的性狀檢測
[0028] 1.1當歸片基本信息
[0029] 1.1.1當歸來源和生產(chǎn)信息
[0030]當歸主產(chǎn)于甘肅，四川、云南、陜西和青海等省區(qū)亦有少量，本實施例收集甘肅產(chǎn) 地的藥材樣品進行生產(chǎn)或試驗，記錄相關(guān)信息，見表1。
[0031 ]表1-當歸藥材、當歸片產(chǎn)地來源和生產(chǎn)信息 [0032]
[0033] 黨參片質(zhì)