一種忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種忍冬藤配方顆粒的薄層色譜鑒別方法和含量測(cè)定方法，屬于中藥 質(zhì)量檢測(cè)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 忍冬藤配方顆粒為忍冬科植物忍冬Lonicerajaponica化unb.的干燥莖枝經(jīng)加 工制成的配方顆粒，氣微，味微苦，具有清熱解毒，疏風(fēng)通絡(luò)等功效，主要用于；溫病發(fā)熱，熱 毒血癡，痛腫瘡瘍，風(fēng)濕熱瘦，關(guān)節(jié)紅腫熱痛。
[0003] 中藥配方顆粒是W符合炮制規(guī)范的單味中藥飲片為原料，采用現(xiàn)代制藥工業(yè)的先 進(jìn)工藝和方法，經(jīng)提取、濃縮、干燥、制粒制成一定規(guī)格供醫(yī)療機(jī)構(gòu)臨床配方使用的制成品， 是中藥飲片的一種補(bǔ)充形式，可供臨床醫(yī)生替代中藥飲片使用，變傳統(tǒng)中藥湯劑的大包飲 片用砂鍋合煎、過(guò)濾飲服等繁雜操作為規(guī)范化工業(yè)大生產(chǎn)、小包裝、水沖即服。與傳統(tǒng)中藥 飲片相比，工業(yè)化批量生產(chǎn)的中藥配方顆粒，品質(zhì)更加均一，依據(jù)質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)的結(jié)果（數(shù) 據(jù)和圖譜）重現(xiàn)性好，既保持了原中藥飲片的藥性、藥味和藥效，又具有不需煎煮，療效確 切，使用、攜帶方便，安全等優(yōu)點(diǎn)，是傳統(tǒng)中藥飲片與時(shí)俱進(jìn)的產(chǎn)物，是"源于飲片，高于飲 片"的現(xiàn)代中藥湯劑。中藥配方顆粒不僅用于中醫(yī)臨床配方，還可用作中成藥的原料藥品、 保健食品、食品、日用化妝品、精細(xì)化工品、獸用藥品等方面。它將成為介于中藥飲片和中成 藥之間的一個(gè)新興產(chǎn)業(yè)。
[0004] 與傳統(tǒng)的中藥煎劑相比，中藥配方顆粒具有免煎易服，易儲(chǔ)存，攜帶方便等優(yōu)點(diǎn)。 但中藥配方顆粒經(jīng)過(guò)一系列工序的加工后已失去藥材的外形特征，難W靠性狀鑒別來(lái)對(duì)藥 材進(jìn)行鑒定，且在其質(zhì)量控制上也與原藥材有所不同。薄層色譜法操作簡(jiǎn)單，方便，適用于 中藥材及各種中藥制劑的定性鑒別，高效液相色譜法靈敏度高，適用于各種制劑的定量分 析。本發(fā)明采用薄層色譜法對(duì)忍冬藤配方顆粒進(jìn)行定性鑒別，同時(shí)采用高效液相色譜法對(duì) 其中的綠原酸進(jìn)行含量測(cè)定，旨在建立一種忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法可用 于忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量控制，對(duì)保證產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性及臨床用藥的有效性與安全性具 有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的在于提供忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括；（1)薄層 色譜鑒別方法測(cè)定方法和（2)高效液相色譜法含量測(cè)定方法。其中
[0006] (1)薄層鑒別；取本品粉末0. 7g，加己醇20ml，水浴回流30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮 至1ml，作為供試品溶液；另取忍冬藤對(duì)照藥材15g，加水60ml，煮沸30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸 干，殘?jiān)蛹捍?0ml，水浴回流30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至1ml，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥 典2010年版一部附錄VIB的薄層色譜法試驗(yàn)，供試品液5μ1、對(duì)照藥材溶液5μ1，分別點(diǎn) 于同一硅膠G薄層板上，W己酸了醋一甲酸一水（7:2.5:2.5)的上層液為展開劑，展開，取 出，瞭干，置紫外光燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯 相同顏色的英光斑點(diǎn)。
[0007] (2)含量測(cè)定；照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄VID)測(cè)定；
[000引色譜條件；W十八烷基娃焼鍵合硅膠為填充劑；W甲醇-己臘-0.1 %磯酸溶液 (2:15:83)為流動(dòng)相；DAD檢測(cè)器檢巧IJ，檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm;柱溫3(TC，流速；Iml/min。
[0009] 對(duì)照品溶液的制備；取綠原酸對(duì)照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每1ml含綠 原酸8μg的溶液，即得。
[0010] 供試品溶液的制備；取忍冬藤配方顆粒粉末0.Ig，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精 密加入50%甲醇25ml，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率35曲Z) 30分鐘，放冷，再稱定 重量，用50 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。
[0011] 測(cè)定法：分別精密吸取對(duì)照品溶液?〇μ1、供試品溶液?〇μ1，注入液相色譜儀，測(cè) 定，即得。
[0012] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于方法簡(jiǎn)單、準(zhǔn)確，靈敏度高，精密度、穩(wěn)定性好，采用HPLC法測(cè) 定忍冬藤配方顆粒中綠原酸的含量，峰形好，分離度高，可作為忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量控制 和考察工藝穩(wěn)定性的有效技術(shù)手段，對(duì)提高產(chǎn)品質(zhì)量具有重大意義。
【附圖說(shuō)明】
[0013] 圖1 ;忍冬藤配方顆粒TLC圖，1是忍冬藤配方顆粒對(duì)照品；2是對(duì)照藥材；3~8是 六批忍冬藤配方顆粒供試品。
[0014] 圖2 ;忍冬藤配方顆粒HPLC圖譜，A是對(duì)照品圖譜；Β是供試品1綠原酸。
【具體實(shí)施方式】
[0015] 實(shí)施例1 ;忍冬藤配方顆粒的薄層色譜鑒別
[0016] 薄層鑒別；取本品粉末0. 7g，加己醇20ml，水浴回流30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至 1ml，作為供試品溶液；另取忍冬藤對(duì)照藥材15g，加水60ml，煮沸30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干， 殘?jiān)蛹捍?0ml，水浴回流30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至1ml，作為對(duì)照品溶液；照中國(guó)藥典 2010年版一部附錄VIB的薄層色譜法試驗(yàn)，供試品液5μ1、對(duì)照藥材溶液5μ1，分別點(diǎn)于 同一硅膠G薄層板上，W己酸了醋一甲酸一水（7:2. 5:2. 5)的上層液為展開劑，展開，取出， 瞭干，置紫外光燈（365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相 同顏色的英光斑點(diǎn)。
[0017] 實(shí)施例2 ;忍冬藤配方顆粒的含量測(cè)定方法
[0018] 含量測(cè)定；照高效液相色譜法（中國(guó)藥典2010年版一部附錄VID)測(cè)定；
[0019] 1、儀器與試藥
[0020] (1)儀器；Dioex叫tiMate3000高效液相色譜儀，DAD檢測(cè)器，四元梯度泉，變色 龍數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)。
[002。似試藥；甲醇、己臘為色譜純?cè)噭┗痵her Scientific),水為雙蒸水，其它試劑 均為分析純。綠原酸對(duì)照品（批號(hào)：110753-201314)購(gòu)于中國(guó)藥品生物制品檢定所。
[00過(guò) 2、實(shí)驗(yàn)條件
[0023] (1)色譜條件；色譜柱：色譜柱；UnitaryC185um100A(4. 6mmX150mm);流動(dòng)相： 甲醇-己臘-0. 1 %磯酸溶液（2:15:83);檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm;柱溫：30。流速：1. 0血/min。
[0024] 3、方法學(xué)考察
[00巧](1)線性范圍的考察：
[0026] 精密量取綠原酸對(duì)照品溶液2. 0, 5. 0,10. 0μ1及對(duì)照品儲(chǔ)備液2. 0, 3. 0,4. 0μ1， 注入液相色譜儀進(jìn)行色譜測(cè)定，按上述色譜條件測(cè)定峰面積，并W峰面積燈）對(duì)進(jìn)樣量狂） 進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0027] 得回歸方程；Υ= 21. 0059Χ-2. 4404,r= 0. 99998 ;表明綠原酸在 0.0789-1. 5782μg范圍內(nèi)呈線性關(guān)系。結(jié)果見表1。
[0028] 表1綠原酸對(duì)照品測(cè)定結(jié)果
[0029]
[0030] (2)精密度試驗(yàn)；精密吸取對(duì)照品溶液5μ1重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)得峰面積積分值RSD < 2%，結(jié)果見表2。
[0031] 表2精密度試驗(yàn)結(jié)果
[0032]
[0033] (3)穩(wěn)定性試驗(yàn)；取同一供試品（批號(hào)：120717)溶液10μ1，按含量測(cè)定項(xiàng)下方法 測(cè)定5次，結(jié)果綠原酸峰面積積分值的RSD(η= 5) < 2%，表明8小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。結(jié)果見表 3。
[0034] 表3穩(wěn)志性試驗(yàn)結(jié)果
[0035]
[003引 （4)重復(fù)性試驗(yàn)；(4)重復(fù)性試驗(yàn)；按擬定的含量測(cè)定方法，對(duì)同一批樣品（批號(hào)： 120717)分別制備5份供試液，測(cè)得綠原酸峰面積并計(jì)算含量，RSD< 2%，結(jié)果見表4。
[0037] 表4樣品重復(fù)性試驗(yàn)（η= 2)
[0038]
[0039] (5)同收率試驗(yàn)；取已知含量的樣品（批號(hào)120717)，分別精密加入一定量的綠原 酸對(duì)照品，按供試品制備與測(cè)定方法，平行做6組，結(jié)果見表5。
[0040] 表5綠原酸回收率測(cè)定結(jié)果
[0041]
[004引 （6)樣品測(cè)定：
[0043] 取忍冬藤配方顆粒約0.Ig，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入50%甲醇25ml， 稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率35曲Z) 30分鐘，放冷，再稱定重量，用50 %甲醇補(bǔ)足 減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；分別精密吸取對(duì)照品溶液10μ1，樣品供試液各 10μ1，按上述色譜條件測(cè)定，結(jié)果見表6。
[0044] 表6樣品含量測(cè)定結(jié)果（η= 2)
[0045]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種忍冬藤配方顆粒的檢測(cè)方法，該方法包括： (1) 薄層色譜鑒別方法，和 (2) 高效液相色譜法含量測(cè)定方法。2. 權(quán)利要求1所述忍冬藤配方顆粒的檢測(cè)方法，其中所述薄層色譜鑒別方法為：（1)供 試品溶液配制：取忍冬藤配方顆粒粉末〇. 7g，加乙醇20ml，水浴回流30分鐘，濾過(guò)，濾液濃 縮至lml，作為供試品溶液；（2)對(duì)照品溶液配制：另取忍冬藤對(duì)照藥材15g，加水60ml，煮 沸30分鐘，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?0ml，水浴回流30分鐘，濾過(guò)，濾液濃縮至lml，作 為對(duì)照品溶液；(4) (3)測(cè)定法：照中國(guó)藥典2010年版一部附錄VIB的薄層色譜法試驗(yàn)，供 試品液5μ1、對(duì)照藥材溶液5μ1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸丁酯一甲酸一水 (7:2. 5:2. 5)的上層液為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365nm)下檢視，供試品色 譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。3. 權(quán)利要求1所述牡丹皮配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，其中所述高效液相色譜法：含量 測(cè)定方法為：（1)色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以甲醇-乙腈-〇. 1 %磷酸 溶液（2:15:83)為流動(dòng)相；DAD檢測(cè)器檢測(cè)，檢測(cè)波長(zhǎng)為327nm;柱溫30°C，流速：lml/min; (2)對(duì)照品溶液的制備：取綠原酸對(duì)照品適量，精密稱定，加50%甲醇制成每lml含綠原酸 8μg的溶液，即得；（3)供試品溶液的制備：取忍冬藤配方顆粒粉末0.lg，精密稱定，置具塞 錐形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率35kHz) 30分鐘， 放冷，再稱定重量，用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得（4)測(cè)定法：分 別精密吸取對(duì)照品溶液?〇μ1、供試品溶液?〇μ1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。
【專利摘要】一種忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，該方法包括薄層色譜鑒別方法和含量測(cè)定方法。采用薄層色譜法對(duì)忍冬藤配方顆粒進(jìn)行定性鑒別，同時(shí)采用高效液相色譜法對(duì)其中的綠原酸進(jìn)行含量測(cè)定，建立一種忍冬藤配方顆粒的質(zhì)量檢測(cè)方法，使產(chǎn)品質(zhì)量得到了有效控制。
【IPC分類】G01N30/90, G01N30/02
【公開號(hào)】CN105445385
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410431358
【發(fā)明人】陳鐘, 李軍山, 姜國(guó)志, 劉鐵軍, 高晗, 郝磊, 胡雪嬌
【申請(qǐng)人】神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司
【公開日】2016年3月30日
【申請(qǐng)日】2014年8月28日