技術(shù)人員能夠配制并使用本文所述的試劑、體 系和方法。附圖中，相似的附圖標記表示相同或功能相似的元素。
[0016] 圖1示出了將使用本文所述的IX濃度工作溶液的血液學試劑而得的平均紅細胞 容積（MCV)測量與使用標準CDSap地ire試劑而得的MCV測量關聯(lián)的圖。
[0017] 圖2示出了將使用本文所述的IX濃度工作溶液的血液學試劑而得的MCV測量與 使用標準CDRuby試劑而得的MCV測量關聯(lián)的圖。
[001引圖3為示出了血液學試劑的滲透壓變化對光學MCV測量的影響的圖。
[0019] 圖4為示出了血液學試劑的抑變化對光學MCV測量的影響的圖。
[0020] 圖5為示出了血液學試劑的麥芽糖巧濃度變化對光學MCV測量的影響的圖。
[00川發(fā)明詳述
[0022] 本發(fā)明的各方面包括可W用于保持血細胞形態(tài)和完整性并提供樣品完整性和光 學透明度W有助于光學分析血樣的血液學分析試劑、體系和方法。在一些實施方案中，所述 主題試劑包括非磯酸鹽有機緩沖劑和球化表面活性劑。所述試劑的抑和滲透壓可W被調(diào) 節(jié)至所需的范圍。另外，所述試劑可W在使用之前僅用去離子水復原。
[0023] 紅細胞（RBC)是最普通類型的血細胞，并且通常具有扁平的且中間下凹的雙凹碟 形。典型地使用阻抗檢測器定量血樣中的RBC，所述樣品通過小孔時所述阻抗檢測器測量所 述樣品的電阻的變化。當每個獨立RBC通過所述小孔時，相應的阻抗變化被檢測到，并且信 息被用來計數(shù)所述樣品中RBC的數(shù)目。因為阻抗測量不設及從所述細胞收集的光學數(shù)據(jù)， 所述RBC的形狀對此分析不是關鍵。
[0024] 血液學分析體系和方法通常依靠光學和電阻抗兩種測量來分析血樣并提供其中 所述細胞的示差分析。例如，很多血液學分析儀對樣品進行電阻抗測量來測定存在于所述 樣品中存在的RBC和PLT的數(shù)目，還進行光學分析來例如定量白細胞（WBC)和/或所述血 液中的其它組分，并且來提供RBC和PLT的其它光學分析。因此，大多數(shù)血液學分析儀必須 包括光學數(shù)據(jù)收集組件，W及電阻抗測量組件來提供血樣的完整分析。
[00巧]根據(jù)本公開的血液學分析試劑、體系和方法提供血樣的光學分析并避免血液學分 析儀包括電阻抗測量組件的需要。因此，主題血液學分析試劑、體系和方法能被用來僅使用 光學數(shù)據(jù)收集組件例如在不進行電阻抗測量的情況下進行血樣的完整分析。
[0026] 血液學分析試劑
[0027] 本文所提供的血液學分析試劑通常被設計來在不使用電阻抗組件的情況下有助 于血樣的完整分析。例如，本文所提供的血液學分析試劑提供有助于光學分析RBC的多種 特征，并且因此避免電阻抗測量的需要。主題血液學試劑提供了光學分析血樣所必需的光 學透明度，并且提供對RBC的球化，從而可W使用光學技術(shù)對它們進行分析。主題血液學試 劑也可W被高度濃縮，同時仍然保持它們的功能特性，該有助于試劑的可制造性、存儲和處 理得W改善。
[0028] 非磯酸鹽有機緩沖劑
[0029] 主題血液學試劑通常包括一種或多種非磯酸鹽有機緩沖劑。該些緩沖劑的使用提 供了所述試劑的其它組分（例如像作為初級滲壓劑的氯化鋼）的溶解度的增加。磯酸鹽基 緩沖劑組分，例如磯酸鹽緩沖鹽水（PBS)，通常導致在高濃度下的溶解度問題。與此相反，非 磯酸鹽有機緩沖劑對于其它試劑組分通常是惰性的，例如鹽，并因此允許配制更濃縮的試 劑，同時仍保持功能特性，例如像光學透明度。根據(jù)本發(fā)明的一些實施方案的非磯酸鹽有機 緩沖劑通常具有pH6.0和8.0之間的有效緩沖能力。合適的非磯酸鹽有機緩沖劑的實例 包括但不限于2-(N-嗎咐）己橫酸（ME巧緩沖劑、3-(N-嗎咐）丙烷橫酸（MOP巧緩沖劑、咪 挫和N- (2-哲己基）嗽嗦-N' - (2-己燒橫酸）（肥陽巧緩沖劑。
[0030] 在一些實施方案中，所述血液學試劑中的非磯酸鹽有機緩沖劑的濃度范圍為約 50、至約75、至約100、至約125、至約150、至約175、至約200、至約225或至約250、至約 275、至約300、至約325、至約350、至約375、至約400、至約425、至約450、至約475、至 約500、至約525、至約550、至約575、至約600、至約625、至約650、至約675、至約700、至 約725、至約750、至約775、至約800、至約825、至約850、至約875、至約900、至約925、至 約950、至約1000、至約1050、至約1100、至約1150、至約1200、至約1250、至約1300、至約 1350、至約1400、至約1450、至約1500mM或更高。
[0031] 在一些實施方案中，所述血液學試劑中的非磯酸鹽有機緩沖劑的濃度范圍為 約0. 5%、至約1. 0 %、至約1. 5%、至約2. 0%、至約2. 5 %、至約3. 0%、至約3. 5%、至約 4. 0 %、至約4. 5 %、至約5. 0 %、至約5. 5 %或至約6. 0 %、至約6. 5 %、至約7. 0 %、至約 7. 5 %、至約8. 0 %、至約8. 5 %、至約9. 0 %、至約9. 5 %、至約10. 0 %、至約10. 5 %、至約 11.0%、至約11.5%、至約12.0%、至約12.5%、至約13.0%、至約13.5%、至約14.0%、至 約 14. 5%、至約 15. 0%、至約 15. 5%、至約 16. 0%、至約 16. 5%、至約 17. 0%、至約 17. 5%、 至約18. 0%、至約18. 5%、至約19. 0%、至約19. 5%、至約20. 0%或更高。
[0032] 球化表面活性劑
[0033] 主題血液學試劑通常包括一種或多種球化表面活性劑，所述球化表面活性劑球化 所述血樣中的RBCW有助于它們的光學分析。使用該樣的表面活性劑維持稀釋血樣中的球 形細胞形態(tài)并有助于光學分析，例如光學平均紅細胞容積（MCV)分析。合適的球化表面活 性劑的實例包括但不限于N-十二烷基-B-D麥芽糖巧（麥芽糖巧）。
[0034] 在一些實施方案中，所述血液學試劑中的球化表面活性劑的濃度范圍為約 0. 0002 %、至約 0. 0005 %、至約 0. 001 %、至約 0. 005 %、至約 0. 01 %、至約 0. 05 %、至約 0. 1 %、至約0. 5 %、至約1. 0 %、至約1. 25 %、至約1. 5 %、至約1. 75%或至約2. 0 %或更 高。在一些實施方案中，球化表面活性劑的濃度范圍為約5、至約25、至約50、至約75、至約 100、至約200、至約300、至約400、至約500、至約600、至約700、至約800、至約900、至約 1, OOOmg/L或更高。
[00對 其它組分
[0036] 根據(jù)本發(fā)明的一些實施方案的血液學試劑可W含有其它組分，例如像馨合試劑、 鹽或滲壓劑。例如，在一些實施方案中，血液學試劑可W含有馨合試劑來例如防止血小板凝 集和/或聚集。合適的馨合試劑的實例是己二胺四己酸鹽（邸TA)或邸TA二鋼鹽。
[0037] 在一些實施方案中，馨合試劑可范圍為約0. 1 %、至約0. 2%、至約0. 3%、至 約0. 4%、至約0. 5%或更高的濃度存在于血液學試劑中。
[0038] 在一些實施方案中，血液學試劑可W含有滲透壓調(diào)節(jié)組分，例如像鹽。將一種或多 種鹽并入所述血液學試劑中用來調(diào)節(jié)所述試劑的滲透壓W達到最佳性能。鹽的合適實例包 括但不限于氯化鋼和氯化鐘。
[0039] 在一些實施方案中，滲透壓調(diào)節(jié)組分（例如，鹽）可范圍為約0.25%、至約 0. 5%、至約0. 75%、至約1 %、至約5%、至約10%、至約15%、至約20%或至約25%或更高 的濃度存在于血液學試劑中。
[0040] 根據(jù)本發(fā)明的一些實施方案的血液學試劑可W具有針對試劑的最佳性能進行調(diào) 節(jié)的抑值。例如，在一些實施方案中，血液學試劑可W具有范圍為約6. 0、至約6. 25、至約 6. 5、至約6. 75、至約7. 0、至約7. 25、至約7. 5、至約7. 75、至約8. 0抑單位的抑值。在一些 實施方案中，可W使用標準抑調(diào)節(jié)試劑（例如，濃縮的酸或堿）調(diào)節(jié)血液學試劑的pH。
[0041] 根據(jù)本發(fā)明的一些實施方案的血液學試劑可W具有針對試劑的最佳性能進行調(diào) 節(jié)的滲透壓。在其稀釋至工作濃度之前，根據(jù)本發(fā)明的一些實施方案的血液學試劑可W具 有高滲的滲透壓。在稀釋所述血液學試劑至IX工作濃度之后，在一些實施方案中所述血液 學試劑可W具有范圍為約250、至約260、至約270、至約280、至約290、至約300、至約310、 至約320、至約330、至約340、至約350m0sm或更高的滲透壓。