一種袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出及連續(xù)在線檢測(cè)裝置及檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及無煙氣煙草制品成分測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出及連續(xù)在線檢測(cè)裝置及檢測(cè)方法。
【背景技術(shù)】
[0002]口含型無煙氣煙草制品是指無需經(jīng)過燃燒過程，可以直接通過口腔使用的煙草制品。與傳統(tǒng)卷煙相比，口含型無煙氣煙草制品主要具有以下優(yōu)點(diǎn):一是不需要點(diǎn)燃，極大程度地降低了因燃燒而產(chǎn)生的焦油和其他有害成分含量，對(duì)人體危害性較?。欢遣划a(chǎn)生二手煙氣，不影響公共場(chǎng)所空氣質(zhì)量，并在一定程度上緩解了吸煙需求與公共場(chǎng)所禁煙之間的矛盾；三是不受場(chǎng)合限制，且在一定程度上滿足消費(fèi)者的生理需要。其中，袋裝口含型煙草制品是將磨碎的煙草顆粒經(jīng)過加工后裝在小袋中直接放在口腔中消費(fèi)的一種口含型無煙煙草制品；使用時(shí)，將其放在口腔嘴唇和牙齦之間，無需咀嚼，煙草成分經(jīng)唾液溶解后通過口腔粘膜吸收。目前為止，針對(duì)口含型無煙氣煙草制品的質(zhì)量檢測(cè)與控制方面的技術(shù)方法還相當(dāng)欠缺。
[0003]煙堿是煙草眾多成分中最重要的一種生物堿，也是口含型無煙氣煙草制品中最主要的生理活性物質(zhì)，其含量及釋放速率是評(píng)價(jià)各種口含型無煙氣煙草制品品質(zhì)的重要指標(biāo)，同時(shí)也是制作袋裝口含型煙草制品過程中的一項(xiàng)重要參數(shù)。目前，對(duì)煙堿釋放行為的研宄主要分為兩個(gè)體內(nèi)試驗(yàn)和體外試驗(yàn)兩個(gè)方面，二者皆是參照藥物溶出或代謝實(shí)驗(yàn)而進(jìn)行的。體內(nèi)試驗(yàn)結(jié)果易受試志愿者個(gè)體生理差異及消費(fèi)煙草制品的習(xí)慣影響，實(shí)驗(yàn)過程繁瑣、難以控制且對(duì)人體傷害較大。體外實(shí)驗(yàn)是模擬人體口腔食用袋裝口含型煙草制品的整個(gè)動(dòng)態(tài)過程，并實(shí)時(shí)收集煙堿釋放液進(jìn)行定量分析檢測(cè)，其優(yōu)點(diǎn)是簡(jiǎn)單、快速、經(jīng)濟(jì)，能用極少量的樣品在短期內(nèi)得到大量實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)。
[0004]而目前現(xiàn)有技術(shù)中針對(duì)口含型無煙氣煙草制品中煙堿釋放規(guī)律研宄所進(jìn)行的體外實(shí)驗(yàn)均為非在線測(cè)定，即收集某一時(shí)段的口含型無煙氣煙草制品釋放液再通過一些前處理手段后利用高效液相色譜儀或氣相色譜儀等對(duì)釋放液中的成分進(jìn)行定量分析；這種檢測(cè)方法整個(gè)檢測(cè)過程所需周期較長，所使用的儀器也比較昂貴。
[0005]因此本領(lǐng)域需要建立一種能夠體外模擬袋裝口含型煙草制品溶出并測(cè)定溶出液中煙堿含量的連續(xù)在線檢測(cè)裝置及檢測(cè)方法，這對(duì)無煙氣煙草制品的研發(fā)、產(chǎn)品質(zhì)量評(píng)價(jià)、產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)制定以及產(chǎn)品安全評(píng)價(jià)都具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的在于針對(duì)目前袋裝口含型無煙氣煙草制品中煙堿釋放行為檢測(cè)方法的缺失或不足，提供一種可以連續(xù)在線測(cè)定袋裝口含型煙草制品體外溶出液中煙堿含量的檢測(cè)裝置及檢測(cè)方法，即時(shí)得到溶出液中的煙堿含量以反映袋裝口含型無煙氣煙草制品中煙堿釋放行為。
[0007]本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0008]本發(fā)明第一方面涉及一種袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出及連續(xù)在線檢測(cè)裝置，其包括:顯色劑盛放裝置Rl ;溶出劑盛放裝置R2 ;位于所述顯色劑盛放裝置Rl下游并通過管路與其相連的第一蠕動(dòng)泵Pl ;位于所述溶出劑盛放裝置R2下游并通過管路依次相連的第二蠕動(dòng)泵P2、溶出池A、脫色柱B、反應(yīng)池R和分光光度計(jì)D ;其中所述反應(yīng)池R還位于所述第一蠕動(dòng)泵Pl的下游并通過管路與其相連，所述分光光度計(jì)D連接數(shù)據(jù)處理裝置C。優(yōu)選地，在所述分光光度計(jì)D下游還可以包括與其液體出口相連的廢液收集裝置I
[0009]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述脫色柱為活性炭固相萃取柱、硅膠固相萃取柱、WatersOasis HLB固相萃取小柱、石墨炭黑-氨基雙層固相萃取柱、C18固相萃取柱、石墨化炭柱或堿性氧化鋁固相萃取柱。其中，使用所述脫色柱目的在于吸附溶出液中的色素，降低色素對(duì)煙堿含量測(cè)定的影響。
[0010]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述分光光度計(jì)D為紫外分光光度計(jì)、可見光分光光度計(jì)或紫外-可見光分光光度計(jì)；獨(dú)立地，所述溶出池A中具有恒溫裝置。
[0011]本發(fā)明第二方面涉及一種袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出及連續(xù)在線檢測(cè)方法，該方法包括以下步驟:
[0012](I)將袋裝口含型煙草制品用能夠使其中的煙堿溶出的溶出劑溶出，得到第一煙堿溶出液；
[0013](2)將所述第一煙堿溶出液通過脫色柱進(jìn)行脫色，得到脫色后的第二煙堿溶出液；
[0014](3)向上述第二煙堿溶出液中加入顯色劑，得到第三煙堿溶出液；
[0015](4)將所述第三煙堿溶出液使用分光光度計(jì)進(jìn)行檢測(cè)，得到所述第三煙堿溶出液的吸光度；
[0016](5)制定不同濃度的煙堿溶液在不同波長下的吸光度標(biāo)準(zhǔn)曲線，將得到的所述第三煙堿溶出液的吸光度與標(biāo)準(zhǔn)曲線對(duì)照，得到所述第三煙堿溶出液的煙堿含量。
[0017]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述脫色柱為活性炭固相萃取柱、硅膠固相萃取柱、WatersOasis HLB固相萃取小柱、石墨炭黑-氨基雙層固相萃取柱、C18固相萃取柱、石墨化炭柱或堿性氧化鋁固相萃取柱。其中，使用所述脫色柱目的在于吸附溶出液中的色素，降低色素對(duì)煙堿含量測(cè)定的影響。
[0018]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述分光光度計(jì)為紫外分光光度計(jì)、可見光分光光度計(jì)或紫外-可見光分光光度計(jì)；獨(dú)立地，其中步驟(I)在恒溫裝置中進(jìn)行。
[0019]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述溶出劑為人工唾液或包括無機(jī)鹽類化合物和有機(jī)化合物的水溶液。本發(fā)明的溶出劑可以根據(jù)不同的檢測(cè)要求選擇不同的配方。
[0020]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)所述溶出劑為包括無機(jī)鹽類化合物和有機(jī)化合物的水溶液時(shí)，所述溶出劑中包括以下組分:0.03-0.05wt %的KCl、0.03-0.05wt %的NaCl、0.05-0.065wt % 的 CaCl2、0.06-0.082wt % 的 NaH2P04、0.0003-0.0006wt % 的 Na2S、0.085-0.12wt%的尿素；獨(dú)立地，所述溶出劑的pH為6.6?7.0。其中所述溶出劑的pH可以用鹽酸或氫氧化鈉調(diào)節(jié)。
[0021]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，當(dāng)所述溶出劑為人工唾液時(shí)，所述人工唾液中包括無機(jī)鹽類化合物和有機(jī)化合物；獨(dú)立地，所述人工唾液中還包括生物活性酶蛋白。所述人工唾液可以自行配置，也可以通過市場(chǎng)渠道購買。
[0022]在優(yōu)選的實(shí)施方案中，所述顯色劑為甲基橙溶液、溴甲酚紫溶液、改良碘化鉍鉀試劑、碘-碘化鉀試劑、濃鹽酸-硝酸溶液、7，7，8，8-四氰基對(duì)二次甲基苯醌、10%硫酸溶液或2，4- 二硝基苯酚。其中所述顯色劑的作用為與煙堿發(fā)生顯色反應(yīng)以起到對(duì)煙堿的定性作用。其中，所述7，7，8，8-四氰基對(duì)二次甲基苯醌可以溶于丙酮中得到7，7，8，8-四氰基對(duì)二次甲基苯醌丙酮溶液。
[0023]相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明取得了以下有益效果:
[0024]1、本發(fā)明的袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出和連續(xù)在線檢測(cè)裝置結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、拆開及清洗方便、省時(shí)省力。
[0025]2、本發(fā)明的袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出和連續(xù)在線檢測(cè)方法主要包括溶出-脫色-反應(yīng)-檢測(cè)四個(gè)步驟，一方面能模擬口含型煙草制品在人體口腔中化學(xué)成分的釋放情況；另一方面對(duì)收集的口含型煙草制品釋放液采用定量分析儀器能簡(jiǎn)便快速地得到各種口含型無煙氣煙草制品中主要化學(xué)成分的釋放速率、釋放趨勢(shì)和釋放程度；再一方面本發(fā)明的檢測(cè)方法簡(jiǎn)便、快速并且可以實(shí)現(xiàn)連續(xù)在線檢測(cè)。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)中通過先將煙草制品中的煙堿萃取，再將萃取液靜置分層后進(jìn)行測(cè)定的離線式、間歇式測(cè)定方法相比，具有顯著的優(yōu)勢(shì)。
[0026]3、本發(fā)明的檢測(cè)裝置和檢測(cè)方法在口含型無煙氣煙草制品的研宄和產(chǎn)品開發(fā)領(lǐng)域的應(yīng)用，將為此類產(chǎn)品的研發(fā)提供統(tǒng)一的實(shí)驗(yàn)平臺(tái)和實(shí)驗(yàn)科學(xué)數(shù)據(jù)，也可以為此類產(chǎn)品的質(zhì)量評(píng)估及安全性評(píng)估提供科學(xué)全面的分析數(shù)據(jù)，便于推廣。
[0027]4、本發(fā)明的檢測(cè)方法中使用的顯色劑顯色反應(yīng)穩(wěn)定、顯色速度快，其中的7，7，8，8-四氰基對(duì)二次甲基苯醌作為煙堿含量測(cè)定過程中的顯色劑為本發(fā)明人首創(chuàng)。現(xiàn)有技術(shù)中，在煙堿的顯色反應(yīng)所用的顯色劑中，部分顯色劑與煙堿形成的絡(luò)合物只溶于有機(jī)體系，這就不得不在反應(yīng)后萃取該絡(luò)合物再進(jìn)行煙堿含量檢測(cè)；部分顯色劑僅在乙醇體系中才能與煙堿發(fā)生反應(yīng)，使用存在限制；部分顯色劑需在堿性與加熱條件下才能將煙堿氧化成有色化合物從而實(shí)現(xiàn)檢測(cè)。故現(xiàn)有技術(shù)中的這些檢測(cè)煙堿的顯色劑均不太適合用于在線檢測(cè)裝置。而煙堿與7，7，8，8-四氰基對(duì)二次甲基苯醌在一定條件下可發(fā)生荷移反應(yīng)，在酸性條件與煙堿形成綠色配合物，該配合物的最大吸收波長為435nm，從而可以實(shí)現(xiàn)煙堿含量的連續(xù)在線檢測(cè)，使用方便。
【附圖說明】
[0028]圖1為本發(fā)明的袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出和連續(xù)在線檢測(cè)裝置示意圖。
[0029]其中各附圖標(biāo)記具有以下含義:
[0030]Rl-顯色劑盛放裝置；R2_溶出劑盛放裝置；P1-第一蠕動(dòng)泵；P2_第二蠕動(dòng)泵；A-溶出池；B-脫色柱；R-反應(yīng)池；D-分光光度計(jì)檢測(cè)器；C-數(shù)據(jù)處理裝置；W-廢液收集裝置。
【具體實(shí)施方式】
[0031]下面結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的詳細(xì)描述，但應(yīng)理解，該描述僅為示例性的而非限制性的。
[0032]實(shí)施例1
[0033]如圖1所示的袋裝口含型煙草制品中煙堿體外模擬溶出及連續(xù)在線檢測(cè)裝置，其包括:顯色劑盛放裝置Rl ;溶出劑盛放裝置R2 ;位于所述顯色劑盛放裝置Rl下游并通過管路與其相連的第一蠕動(dòng)泵Pl ;位于所述溶出劑盛放裝置R2下游并通過管路依次相連的第二蠕動(dòng)