辛夷鼻炎丸含量的測(cè)定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中醫(yī)藥領(lǐng)域，特別是涉及一種辛夷鼻炎丸含量的測(cè)定方法。
【背景技術(shù)】
[0002]辛夷鼻炎丸是一種祛風(fēng)，清熱，解毒的中藥制劑，收載于《中國(guó)藥典》2010版第一增補(bǔ)本，主要用于治療鼻炎，該產(chǎn)品由辛夷、薄荷、紫蘇葉、甘草、廣藿香、蒼耳子、鵝不食草、板藍(lán)根、山白芷、防風(fēng)、魚腥草、菊花、三叉苦十三味中藥制備而成。辛夷鼻炎丸成品中干擾成分很多，以本領(lǐng)域常見的生產(chǎn)工藝、生產(chǎn)設(shè)備，以及市場(chǎng)上采購(gòu)的原材料，生產(chǎn)的辛夷鼻炎丸成品按2010年版《中國(guó)藥典》增補(bǔ)版收載的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)，存在著以符合規(guī)定的防風(fēng)藥材投料，卻生產(chǎn)出不符合升麻素苷含量要求的成品的可能，只以升麻素苷含量為指標(biāo)，不足以評(píng)價(jià)制劑中防風(fēng)的質(zhì)量。
[0003]此外，升麻素苷色譜峰與5-0-甲基維斯阿米醇苷色譜峰在高效液相色譜等度洗脫分析條件下，兩者出峰時(shí)間相隔較長(zhǎng)，檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，本領(lǐng)域常規(guī)的升麻素苷及5-0-甲基維斯阿米醇苷的分析大多采用等度洗脫或以甲醇-水系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫。車曉彥等(車曉彥，鄧曉鴻，余曉琴，范靈靖，等.HPLC測(cè)定辛夷鼻炎丸中升麻素苷和5-0-甲基維斯阿米醇苷的總含量[J].中成藥，2010，32 (11):1917-1919.)采用甲醇-水系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫分析，單個(gè)樣品的分析時(shí)間需大約50分鐘(圖譜見圖1);丘文珍(丘文珍.HPLC法測(cè)定辛夷鼻炎丸中升麻素苷和5-0-甲基維斯阿米醇苷的含量[J].中草藥，2003，34 (5):424-424.)采用甲醇-水(40:60)等度洗脫進(jìn)行分析，結(jié)果升麻素苷色譜峰與5_0_甲基維斯阿米醇苷色譜峰出峰時(shí)間太快，兩個(gè)目標(biāo)成分的色譜峰均未能達(dá)到基線分離，不利于準(zhǔn)確地檢測(cè)分析(圖譜見圖2)。若仍采用甲醇-水等度洗脫系統(tǒng)，減少甲醇比例，使目標(biāo)成分出峰時(shí)間推遲，經(jīng)發(fā)明人研究發(fā)現(xiàn)在60分鐘內(nèi)仍無(wú)法讓兩個(gè)目標(biāo)成分完全達(dá)到基線分離。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]基于此，有必要針對(duì)上述問題，提供一種辛夷鼻炎丸含量的測(cè)定方法，該方法有利于產(chǎn)品的生產(chǎn)，更重要的是能更有效地反映辛夷鼻炎丸產(chǎn)品的質(zhì)量，以便更好地控制產(chǎn)品的質(zhì)量。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述技術(shù)目的，具體技術(shù)方案如下:
[0006]一種辛夷鼻炎丸含量的測(cè)定方法，采用高效液相色譜進(jìn)行含量測(cè)定，包括以下步驟:
[0007]A、取升麻素苷對(duì)照品和5-0-甲基維斯阿米醇苷對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇溶液制成50 μ g/ml的對(duì)照品溶液；
[0008]B、取辛夷鼻炎丸成品適量，研細(xì)，取2g,精密稱定，置燒瓶中，精密加入甲醇50ml，密塞，稱定重量，加熱回流，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液25ml，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，加在中性氧化鋁柱上，用甲醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状既芤菏谷芙?，稀釋?0ml，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得供試品溶液；
[0009]C、分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；辛夷鼻炎丸成品每Ig含防風(fēng)以升麻素苷(C22H28O11)和5-0-甲基維斯阿米醇苷(C22H28Oltl)的總量計(jì)，不得少于設(shè)定值為合格。
[0010]修訂含量測(cè)定方法其中一個(gè)關(guān)鍵是優(yōu)化前處理方法，確保目標(biāo)成分提取完全，以及盡可能除去干擾性雜質(zhì)。本發(fā)明在制備供試品溶液步驟中，采用加熱回流提取后，再過(guò)中性氧化鋁柱進(jìn)行除雜、富集目標(biāo)成分的提取方法，操作簡(jiǎn)單，并有效除去大量的干擾性雜質(zhì)，有利于目標(biāo)成分的分析檢測(cè)。
[0011]在其中一些實(shí)施例中，所述步驟B中，加熱回流的時(shí)間為0.8-1.2小時(shí)。
[0012]在其中一些實(shí)施例中，所述甲醇溶液的體積百分比濃度為75-85%。
[0013]在其中一些實(shí)施例中，所述甲醇溶液的體積百分比濃度為80%。
[0014]在其中一些實(shí)施例中，所述步驟B中的中性氧化鋁柱由100?200目的中性氧化招5g,裝入內(nèi)徑為1.5cm的分析柱內(nèi)制備而成。
[0015]在其中一些實(shí)施例中，所述液相色譜儀的條件為:
[0016]以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈為流動(dòng)相A，水為流動(dòng)相B，采用梯度洗脫方式:從0-15min，流動(dòng)相A的體積百分含量為15%，流動(dòng)相B的體積百分含量為85% ；從15-35min，流動(dòng)相A的體積百分含量由15%提高至30%，流動(dòng)相B的體積百分含量由85%降低至70% ;檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm。理論板數(shù)按升麻素苷峰計(jì)算應(yīng)不低于6000。
[0017]采用高效液相色譜法以乙腈-水系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫的分析條件，對(duì)辛夷鼻炎丸中的升麻素苷及5-0-甲基維斯阿米醇苷進(jìn)行測(cè)定，單個(gè)樣品的分析時(shí)間控制在30分鐘內(nèi)，滿足在常規(guī)分析可接受時(shí)間內(nèi)同時(shí)準(zhǔn)確檢測(cè)兩個(gè)成分的含量，上述測(cè)定方法既節(jié)省了分析的時(shí)間，又達(dá)到準(zhǔn)確檢測(cè)的目的。
[0018]在其中一些實(shí)施例中，辛夷鼻炎丸成品每Ig含防風(fēng)以升麻素苷(C22H28O11)和5-0-甲基維斯阿米醇苷(C22H28Oltl)的總量計(jì)，所述設(shè)定值為0.60mg。
[0019]本發(fā)明現(xiàn)對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)及有益效果為:
[0020]1、本發(fā)明的供試品溶液的制備采用加熱回流提取后，再過(guò)中性氧化鋁柱進(jìn)行除雜、富集目標(biāo)成分的提取方法，操作簡(jiǎn)單，并有效除去大量的干擾性雜質(zhì)，有利于目標(biāo)成分的分析檢測(cè)；
[0021]2、本發(fā)明用高效液相色譜法以乙腈-水系統(tǒng)進(jìn)行梯度洗脫的分析條件，對(duì)辛夷鼻炎丸中的升麻素苷及5-0-甲基維斯阿米醇苷進(jìn)行測(cè)定，單個(gè)樣品的分析時(shí)間控制在30分鐘內(nèi)，滿足在常規(guī)分析可接受時(shí)間內(nèi)同時(shí)準(zhǔn)確檢測(cè)兩個(gè)成分的含量。既節(jié)省了分析的時(shí)間，又達(dá)到準(zhǔn)確檢測(cè)的目的。
【附圖說(shuō)明】
[0022]圖1為現(xiàn)有技術(shù)中采用甲醇-水系統(tǒng)梯度洗脫分析辛夷鼻炎丸的HPLC色譜圖，其中A為混合對(duì)照品HPLC圖譜，B為辛夷鼻炎丸HPLC圖譜，C為陰性樣品的HPLC圖譜，I為升麻素苷，2為5-0-甲基維斯阿米醇苷；
[0023]圖2為現(xiàn)有技術(shù)中采用甲醇-水(40:60)等度洗脫分析辛夷鼻炎丸的HPLC色譜圖，其中A為對(duì)照品的HPLC圖譜，B為陰性樣品的HPLC圖譜，C為辛夷鼻炎丸的HPLC圖譜，I為升麻素苷，2為5-0-甲基維斯阿米醇苷；
[0024]圖3為本申請(qǐng)實(shí)施例1采用乙腈-水系統(tǒng)梯度分析辛夷鼻炎丸含量的HPLC色譜圖，A為對(duì)照品的HPLC色譜圖(其中升麻素苷:tK=ll.175分鐘；5_0_甲基維斯阿米醇苷:tE=26.792分鐘)，B為供試品溶液HPLC色譜圖(其中升麻素苷:tK=ll.165分鐘；5-0_甲基維斯阿米醇苷:tK=26.782分鐘)，C為缺防風(fēng)陰性HPLC色譜圖；
[0025]圖4為對(duì)比例I所采用的采用乙腈-水系統(tǒng)梯度分析按《中國(guó)藥典》2010年版第一增補(bǔ)本方法制備的辛夷鼻炎丸供試品溶液的色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0026]以下結(jié)合實(shí)施例和附圖進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明。
[0027]實(shí)施例1
[0028]取市售廣州中一藥業(yè)有限公司生產(chǎn)的辛夷鼻炎丸:
[0029]測(cè)定辛夷鼻炎丸中防風(fēng)含量，包