本發(fā)明涉及肌氨酸檢測,尤其涉及一種仿生電傳感器及其制備方法和在超靈敏檢測肌氨酸中的應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、肌氨酸(sar)是一種腫瘤代謝物,隨著前列腺疾病的惡化和轉(zhuǎn)移,sar會顯著增加,并且這種變化不受其它疾病的干擾,這使得sar成為一個(gè)有前途的前列腺疾病標(biāo)志物。其中,sar在前列腺癌患者的尿液中濃度較高,而在良性前列腺增生患者的尿液中濃度較低。因此,sar的超靈敏檢測可以幫助實(shí)現(xiàn)前列腺疾病的早期診治工作,是抑制前列腺癌發(fā)病率持續(xù)上升的關(guān)鍵。針對目前肌氨酸檢測方法仍缺乏臨床診斷應(yīng)用的快速性、便捷性、準(zhǔn)確性和特異性的不足,仿生設(shè)計(jì)和開發(fā)快速、高效、超靈敏檢測sar的新型納米傳感器是實(shí)現(xiàn)高靈敏和準(zhǔn)確測定前列腺疾病發(fā)生、發(fā)展的一種重要途徑,具有重要的意義。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題,提供一種仿生電傳感器及其制備方法和在超靈敏檢測肌氨酸中的應(yīng)用,實(shí)現(xiàn)對前列腺疾病發(fā)展過程中肌氨酸sar含量變化的超靈敏檢測。
2、為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明提供以下技術(shù)方案:
3、本發(fā)明提供了一種仿生電傳感器的制備方法,包含下列步驟:
4、(1)將紅細(xì)胞溶液和仿生活性物質(zhì)混合,進(jìn)行共孵育,得到仿生紅細(xì)胞;
5、(2)將仿生紅細(xì)胞與導(dǎo)電聚合物混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到所述的仿生電傳感器;
6、步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物包括多巴胺、吡咯、苯胺或噻吩。
7、作為優(yōu)選,步驟(1)所述紅細(xì)胞溶液包含紅細(xì)胞、氯化鈉和水,紅細(xì)胞溶液中紅細(xì)胞的體積分?jǐn)?shù)為3.5~4.5%,紅細(xì)胞溶液中氯化鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.7~1.1%;所述仿生活性物質(zhì)為核黃素;
8、所述紅細(xì)胞溶液和仿生活性物質(zhì)的質(zhì)量體積比為7~11ml:7~11mg。
9、作為優(yōu)選,步驟(1)所述共孵育的溫度為2~6℃,共孵育的時(shí)間為3~12h。
10、作為優(yōu)選,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為多巴胺時(shí),將仿生紅細(xì)胞、tris-hcl緩沖液和多巴胺混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
11、所述tris-hcl緩沖液的ph為8~9,tris-hcl緩沖液、多巴胺和步驟(1)所述仿生活性物質(zhì)的質(zhì)量體積比為40~50ml:5~50mg:7~11mg;
12、所述原位聚合反應(yīng)的溫度為-2~2℃,原位聚合反應(yīng)的時(shí)間為3~12h。
13、作為優(yōu)選,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為吡咯時(shí),將仿生紅細(xì)胞和吡咯溶液混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
14、所述吡咯溶液包含pbs緩沖液、亞鐵氰化鉀和吡咯,所述pbs緩沖液的ph值為6.5~7.5;所述吡咯溶液中磷酸根離子的濃度為0.05~0.15mol/l,吡咯溶液中亞鐵氰化鉀的質(zhì)量濃度為0.67~2mg/ml,吡咯溶液中吡咯的質(zhì)量濃度為4~5.33mg/ml;吡咯溶液和步驟(1)所述仿生活性物質(zhì)的質(zhì)量體積比為10~30ml:7~11mg;
15、所述原位聚合反應(yīng)的溫度為25~35℃,原位聚合反應(yīng)的時(shí)間為1.5~2.5h。
16、作為優(yōu)選,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為苯胺時(shí),將仿生紅細(xì)胞、苯胺溶液和氧化劑溶液混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
17、所述苯胺溶液包含苯胺、酒石酸和水,苯胺溶液中苯胺的質(zhì)量濃度為12~16mg/ml,苯胺溶液中酒石酸的質(zhì)量濃度為1.5~3.5mg/ml;所述氧化劑溶液為過硫酸銨溶液,過硫酸銨溶液的質(zhì)量濃度為1.67~5mg/ml;苯胺溶液、氧化劑溶液和步驟(1)所述仿生活性物質(zhì)的質(zhì)量體積比為4~6ml:5~7ml:7~11mg;
18、所述原位聚合反應(yīng)的溫度為-2~2℃,原位聚合反應(yīng)的時(shí)間為6~24h。
19、作為優(yōu)選,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為噻吩時(shí),將仿生紅細(xì)胞、噻吩溶液和氯化鐵混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
20、所述噻吩溶液包含水、噻吩和十二烷基硫酸鈉,所述噻吩溶液中噻吩的質(zhì)量濃度為0.833~1.25mg/ml,噻吩溶液中十二烷基硫酸鈉的質(zhì)量濃度為4.17~5mg/ml;噻吩溶液、氯化鐵和步驟(1)所述仿生活性物質(zhì)的質(zhì)量體積比為10~15ml:10~15mg:7~11mg;
21、所述原位聚合反應(yīng)的溫度為25~30℃,原位聚合反應(yīng)的時(shí)間為2~8h。
22、本發(fā)明還提供了所述的仿生電傳感器的制備方法制備得到的仿生電傳感器。
23、本發(fā)明還提供了所述的仿生電傳感器在超靈敏檢測肌氨酸中的應(yīng)用。
24、本發(fā)明的有益效果是:
25、本發(fā)明提供了一種仿生電傳感器的制備方法,包含下列步驟:將紅細(xì)胞溶液和仿生活性物質(zhì)混合,進(jìn)行共孵育,得到仿生紅細(xì)胞;將仿生紅細(xì)胞與導(dǎo)電聚合物(導(dǎo)電聚合物包括多巴胺、吡咯、苯胺或噻吩)混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器。仿生電傳感器將導(dǎo)電聚合物與天然細(xì)胞相結(jié)合,利用導(dǎo)電聚合物優(yōu)異的導(dǎo)電性能,同時(shí)基于細(xì)胞的高氧微環(huán)境,使得仿生活性物質(zhì)具有更好的電催化性,能用以sar的快速、靈敏、高效監(jiān)測。本發(fā)明制備得到的仿生電傳感器在sar的濃度不同時(shí),電化學(xué)信號強(qiáng)度的變化趨勢不同,可實(shí)現(xiàn)超靈敏檢測sar含量情況。本發(fā)明的仿生電傳感器具有反應(yīng)速度快、成本低、易于小型化、生物相容性良好,且樣品前處理簡單等優(yōu)點(diǎn),是一種很有前途的sar檢測分析工具,能夠?yàn)榍傲邢偌膊〉陌l(fā)病、發(fā)展規(guī)律提供一種新的、快速、準(zhǔn)確、穩(wěn)定的診斷工具,從而達(dá)到最終逆轉(zhuǎn)或阻止疾病進(jìn)展的目的,具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。
1.一種仿生電傳感器的制備方法,其特征在于,包含下列步驟:
2.如權(quán)利要求1所述的仿生電傳感器的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述紅細(xì)胞溶液包含紅細(xì)胞、氯化鈉和水,紅細(xì)胞溶液中紅細(xì)胞的體積分?jǐn)?shù)為3.5~4.5%,紅細(xì)胞溶液中氯化鈉的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.7~1.1%;所述仿生活性物質(zhì)為核黃素;
3.如權(quán)利要求1或2所述的仿生電傳感器的制備方法,其特征在于,步驟(1)所述共孵育的溫度為2~6℃,共孵育的時(shí)間為3~12h。
4.如權(quán)利要求3所述的仿生電傳感器的制備方法,其特征在于,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為多巴胺時(shí),將仿生紅細(xì)胞、tris-hcl緩沖液和多巴胺混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
5.如權(quán)利要求1或4所述的仿生電傳感器的制備方法,其特征在于,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為吡咯時(shí),將仿生紅細(xì)胞和吡咯溶液混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
6.如權(quán)利要求5所述的仿生電傳感器的制備方法,其特征在于,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為苯胺時(shí),將仿生紅細(xì)胞、苯胺溶液和氧化劑溶液混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
7.如權(quán)利要求6所述的仿生電傳感器的制備方法,其特征在于,步驟(2)所述導(dǎo)電聚合物為噻吩時(shí),將仿生紅細(xì)胞、噻吩溶液和氯化鐵混合,進(jìn)行原位聚合反應(yīng),得到仿生電傳感器;
8.權(quán)利要求1~7任意一項(xiàng)所述的仿生電傳感器的制備方法制備得到的仿生電傳感器。
9.權(quán)利要求8所述的仿生電傳感器在超靈敏檢測肌氨酸中的應(yīng)用。