本發(fā)明涉及藥物分析，具體涉及一種復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法。

背景技術(shù)：

1、聚山梨酯80是一種親水性非離子型的表面活性劑，是藥物制劑中常用的藥用輔料之一。是淡黃色至橙黃色的黏稠液體，易溶于水，溶于乙醇、植物油、乙酸乙酯、甲醇、甲苯，不溶于礦物油。聚山梨酯80具有多種功能和作用，其中當(dāng)添加到生物制劑中時(shí)，可以增強(qiáng)生物制劑中蛋白或抗原的穩(wěn)定性。聚山梨酯80作為藥用輔料，過(guò)量使用會(huì)導(dǎo)致過(guò)敏，溶血等不良后果，因此嚴(yán)格控制聚山梨酯80在生物制劑中用量至關(guān)重要。

2、聚山梨酯80含量測(cè)定分為光譜法和色譜法兩種，2020版《中國(guó)藥典》中對(duì)聚山梨酯80含量測(cè)定采用的是光譜比色法，該方法前處理步驟繁瑣，抗干擾能力弱。聚山梨酯80分子結(jié)構(gòu)中不含發(fā)色團(tuán)，用色譜法分析是需要先將聚山梨酯80水解為油酸。聚山梨酯80、油酸分子結(jié)構(gòu)如下：

3、

4、當(dāng)生物制劑中含有由dopc制備的脂質(zhì)體成分時(shí)，利用水解后光譜法測(cè)制劑中的聚山梨酯80含量，會(huì)由很大的干擾。因?yàn)閐opc經(jīng)堿水解后同樣可產(chǎn)生兩個(gè)油酸。dopc分子結(jié)構(gòu)如下：

5、

6、因此針對(duì)這種復(fù)雜制劑，需要開(kāi)發(fā)一種新的檢測(cè)方法，確定其中聚山梨酯80的含量。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供一種復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，以解決現(xiàn)有技術(shù)中復(fù)雜制劑特別是含有由dopc制備的脂質(zhì)體制劑中聚山梨酯80含量檢測(cè)問(wèn)題。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了以下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供的一種復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，所述復(fù)雜制劑中包含由dopc制備的脂質(zhì)體成分，包括以下步驟：

4、(1)用無(wú)水乙醇稀釋制劑樣品，離心取上清，用高效液相色譜法檢測(cè)其中dopc含量；

5、(2)用無(wú)水乙醇稀釋制劑樣品，加入強(qiáng)堿溶液，高溫水解dopc和聚山梨酯80，用高效液相色譜法檢測(cè)樣品中油酸含量；

6、(3)計(jì)算dopc水解產(chǎn)生油酸的量，計(jì)算聚山梨酯80完全水解產(chǎn)生的油酸的含量，根據(jù)聚山梨酯80完全水解產(chǎn)生的油酸的含量計(jì)算得到聚山梨酯80的含量，所述聚山梨酯80的含量為聚山梨酯80完全水解產(chǎn)生的油酸的含量的1.517倍。

7、進(jìn)一步的，所述dopc和油酸檢測(cè)用色譜柱相同，為c18柱，尺寸4.6×250mm，粒徑5μm。

8、進(jìn)一步的，所述強(qiáng)堿溶液為naoh或koh溶液，濃度為0.2m-0.5m。

9、進(jìn)一步的，所述水解時(shí)水浴溫度為50～80℃，水解時(shí)間為16～24h。

10、進(jìn)一步的，所述高效液相色譜法檢測(cè)時(shí)流動(dòng)相為乙腈-20mm磷酸二氫鉀緩沖液。

11、進(jìn)一步的，所述高效液相色譜法檢測(cè)時(shí)流速設(shè)置1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)195nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μl，運(yùn)行時(shí)間30min。

12、基于上述技術(shù)方案，本發(fā)明實(shí)施例至少可以產(chǎn)生如下技術(shù)效果：

13、本發(fā)明提供的一種復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，該方法可以排除制劑中dopc成分對(duì)聚山梨酯80含量測(cè)定的干擾，專屬性強(qiáng)，穩(wěn)定性好，可用于含有dopc干擾的復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的準(zhǔn)確測(cè)定。

技術(shù)特征：

1.一種復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，所述復(fù)雜制劑中包含由dopc制備的脂質(zhì)體成分，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，其特征在于，所述dopc和油酸檢測(cè)用色譜柱相同，為c18柱，尺寸4.6×250mm，粒徑5μm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，其特征在于，所述強(qiáng)堿溶液為naoh或koh溶液，濃度為0.2m~0.5m。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，其特征在于，所述水解時(shí)水浴溫度為50~80℃，水解時(shí)間為16~24h。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法檢測(cè)時(shí)流動(dòng)相為v/v80：20的乙腈-20mm磷酸二氫鉀緩沖液。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，其特征在于，所述高效液相色譜法檢測(cè)時(shí)流速設(shè)置1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)195nm，柱溫30℃，進(jìn)樣量20μl，運(yùn)行時(shí)間30min。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的檢測(cè)方法，所述復(fù)雜制劑中包含由DOPC制備的脂質(zhì)體成分。1、采用高效液相色譜法，確定制劑中DOPC含量；2、在制劑中加入強(qiáng)堿溶液，使DOPC和聚山梨酯80水解生成油酸，采用高效液相色譜法測(cè)定油酸的含量；3、通過(guò)DOPC計(jì)算可水解生成油酸的量，然后計(jì)算制劑中聚山梨酯80的含量。本發(fā)明可以排除制劑中DOPC成分對(duì)聚山梨酯80含量測(cè)定的干擾，專屬性強(qiáng)，穩(wěn)定性好，可用于含有DOPC干擾的復(fù)雜制劑中聚山梨酯80含量的準(zhǔn)確測(cè)定。

技術(shù)研發(fā)人員：苑榮亮,樊釩,羅先建,孫薇,仉秋實(shí),文彬,賈亞興,馬芳芳
受保護(hù)的技術(shù)使用者：成都?xì)W林生物科技股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9