本發(fā)明屬于代謝組學(xué)及生殖醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，涉及與妊娠糖尿病性巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、巨大兒是指出生體重達(dá)到或超過4000克的嬰兒，是妊娠期糖尿病(gdm，gestational?diabetes?mellitus)最常見的不良妊娠結(jié)局。據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟2021年最新統(tǒng)計，目前全球2110萬的活產(chǎn)兒在懷孕期間受到高血糖影響，其中80.3％為gdm。gdm性巨大兒多屬代謝不對稱型，表現(xiàn)為全身脂肪重量明顯增多，而其他組織/臟器體積增大并不明顯，不僅影響嬰兒的生長發(fā)育，且大大增加兒童青少年期及成年后肥胖或糖尿病的發(fā)生風(fēng)險。著名的“健康與疾病發(fā)育起源(dohad)”學(xué)說認(rèn)為，生命最初1000天的營養(yǎng)和養(yǎng)育環(huán)境(如宮內(nèi)高糖環(huán)境等)，對個體一生的健康影響至關(guān)重要。因此，早期診斷、早期干預(yù)、及時合理治療，無論對臨床控制gdm巨大兒發(fā)生，還是對減少母嬰并發(fā)癥、延緩gdm子代發(fā)展為肥胖或糖尿病，均具有十分重要的意義。

2、代謝組學(xué)(metabolomics)作為新興的組學(xué)技術(shù)，專注于研究生物體內(nèi)的代謝物，被稱為最接近表型的組學(xué)，是對基因組、蛋白組執(zhí)行結(jié)果的全面詮釋。近年來，代謝組學(xué)在疾病的早期預(yù)測中展現(xiàn)出強大的潛力，已成為篩選疾病敏感預(yù)測標(biāo)志物的重要工具。特別值得關(guān)注的是，代謝組學(xué)在妊娠期相關(guān)疾病的診斷和發(fā)病機制研究中方興未艾，成為一個熱門且富有前景的研究領(lǐng)域。代謝組學(xué)可以從全新角度揭示gdm巨大兒的機制并尋找敏感的分子診斷標(biāo)志物，這對于預(yù)防和治療這類疾病具有深遠(yuǎn)的意義。

3、然而，當(dāng)前報道中關(guān)于gdm巨大兒篩查或早期診斷的穩(wěn)定血清代謝分子標(biāo)志物相對較少。如果我們能夠篩選出gdm巨大兒特異或異常表達(dá)的代謝物質(zhì)，并將其作為分子標(biāo)志物，進(jìn)一步開發(fā)出相應(yīng)的篩查或早期診斷試劑盒，這將極大改善我國gdm巨大兒的診斷現(xiàn)狀。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的首要目的是針對上述技術(shù)問題，提出一組與gdm巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的孕期血清/血漿代謝分子標(biāo)志物。

2、本發(fā)明的另一目的是提供所述標(biāo)志物的應(yīng)用。

3、本發(fā)明的又一目的是提供一種gdm巨大兒篩查或早期診斷試劑盒。

4、本發(fā)明的目的可通過如下技術(shù)方案實現(xiàn)：

5、一種與gdm巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物，該組標(biāo)志物選自oleic?acid(油酸)、palmitic?acid(棕櫚酸)和myristic?acid(肉豆蔻酸)中的任意一種或多種。

6、作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物由oleic?acid、palmitic?acid和myristic?acid組成。

7、所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物作為檢測靶標(biāo)在制備gdm巨大兒高危孕婦輔助篩查或早期輔助診斷試劑盒中的應(yīng)用。

8、所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的檢測試劑在制備gdm巨大兒高危孕婦輔助篩查或早期輔助診斷試劑盒中的應(yīng)用。

9、一種gdm巨大兒高危孕婦輔助篩查或早期輔助診斷試劑盒，該試劑盒包含檢測本發(fā)明所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的試劑和耗材。

10、作為本發(fā)明的一種優(yōu)選，該試劑盒包括采用uplc-q?exactive?ms方法檢測所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的試劑和耗材。

11、作為本發(fā)明的進(jìn)一步優(yōu)選，所述診斷試劑盒，該試劑盒含有oleic?acid、palmiticacid和myristic?acid標(biāo)準(zhǔn)品，碳13標(biāo)記的oleic?acid、palmitic?acid和myristic?acid穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo)物、配套hypersil?gold?c18色譜柱(100mm×2.1mm，粒徑1.9um，thermoscientific，germany)、試劑a(沉淀蛋白用，含100％甲醇)、試劑b(流動相用，含0.1％的甲酸的水)、試劑c(流動相用，含0.1％的甲酸的乙腈)，試劑d(復(fù)溶用，超純水)。

12、本發(fā)明的發(fā)明點在于發(fā)現(xiàn)oleic?acid、palmitic?acid和myristic?acid中的任意一種或它們的組合可以作為gdm巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物。

13、具體地說，本發(fā)明血清/血漿代謝分子標(biāo)志物通過以下方法篩選得到：(1)采集符合標(biāo)準(zhǔn)的血液樣本，系統(tǒng)收集完整的人口學(xué)資料和臨床資料。(2)gdm巨大兒孕婦血清代謝組學(xué)分析：選擇gdm巨大兒孕婦、gdm非巨大兒的孕婦(對照)，采用代謝組學(xué)方法檢測gdm巨大兒孕婦及對照組孕婦血清中各代謝物的含量，分析gdm巨大兒孕婦和對照組孕婦血清中代謝物的共性和特性，篩選差異表達(dá)代謝物。(3)應(yīng)用uplc-q?exactive?ms方法，對已篩選的血清/血漿差異表達(dá)代謝物分子在獨立樣本人群中進(jìn)行驗證。

14、本發(fā)明的有益效果：

15、本發(fā)明提供的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物作為gdm巨大兒篩查或早期診斷標(biāo)志物的優(yōu)越性在于：

16、本發(fā)明以標(biāo)準(zhǔn)操作程序采集符合標(biāo)準(zhǔn)的血液，系統(tǒng)收集完整的人口學(xué)資料、臨床資料等，并采用代謝組學(xué)方法，通過研究gdm巨大兒孕婦和對照孕婦血清中代謝物的變化，發(fā)現(xiàn)一組與gdm巨大兒發(fā)生高度相關(guān)的高特異性和敏感性的代謝分子，多元logistic回歸分析結(jié)果表明，gdm孕婦血清中oleic?acid、palmitic?acid和myristic?acid與巨大兒發(fā)生存在著顯著關(guān)聯(lián)，其roc如附圖1所示，可為gdm巨大兒的篩查和早期輔助診斷提供實驗室支持。

17、本發(fā)明初期采用代謝組學(xué)研究的方法獲取gdm巨大兒孕婦血液中特異和異常表達(dá)的代謝物分子表達(dá)譜，并同時應(yīng)用uplc-q?exactive?ms方法在gdm巨大兒獨立樣本血清中進(jìn)行了驗證；以上方法和策略的應(yīng)用加速和保證了血清/血漿代謝分子標(biāo)志物和診斷試劑盒的應(yīng)用。

18、本發(fā)明通過控制年齡、孕中期增重等巨大兒發(fā)生的影響因素，研究血清/血漿代謝分子標(biāo)志物在gdm巨大兒篩查或早期診斷的應(yīng)用前景，闡述異常表達(dá)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物對于gdm巨大兒發(fā)生的影響，揭示其對gdm巨大兒篩查和早期診斷的價值。因此，本發(fā)明獲得了gdm巨大兒發(fā)生特異性血清/血漿代謝分子表達(dá)數(shù)據(jù)庫和特異性標(biāo)志物；通過測定血清/血漿代謝分子標(biāo)志物和診斷試劑盒的研制和應(yīng)用，可使得gdm巨大兒的篩查和早期診斷更加方便易行，為臨床醫(yī)生準(zhǔn)確預(yù)測gdm孕婦是否生產(chǎn)巨大兒，及時采取更具個性化的防治方案提供支持，從而更大限度的降低gdm巨大兒的發(fā)生率，減少不良妊娠結(jié)局。

技術(shù)特征：

1.檢測與妊娠糖尿病性巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的試劑在制備gdm巨大兒高危孕婦輔助篩查或早期輔助診斷試劑盒中的應(yīng)用，其特征在于，所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物選自oleic?acid、palmitic?acid和myristic?acid中的任意一種或多種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物由oleicacid、palmitic?acid和myristic?acid組成。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的應(yīng)用，其特征在于，所述的檢測與妊娠糖尿病性巨大兒輔助篩查或早期輔助診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的試劑為uplc-q?exactive?ms檢測所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的試劑。

4.權(quán)利要求1中所述的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物作為檢測靶標(biāo)在制備gdm巨大兒高危孕婦輔助篩查或早期輔助診斷試劑盒中的應(yīng)用。

5.一種gdm巨大兒高危孕婦輔助篩查或早期輔助診斷試劑盒，其特征在于包含uplc-qexactive?ms檢測權(quán)利要求1中所述的與妊娠糖尿病性巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的試劑。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種與妊娠糖尿病性巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物及其應(yīng)用。一種與GDM巨大兒篩查或早期診斷相關(guān)的血清/血漿代謝分子標(biāo)志物，由油酸、棕櫚酸和肉豆蔻酸組成。定量檢測GDM孕婦血清/血漿代謝分子標(biāo)志物的試劑在制備GDM巨大兒高危孕婦篩查或早期診斷試劑中的應(yīng)用。本發(fā)明為GDM巨大兒篩查或早期診斷提供實驗室支持，從而采取更具個體化的防治方案，最大限度的減少不良妊娠結(jié)局。

技術(shù)研發(fā)人員：劉巧,文娟,戴永梅,竺麗梅,苗苗,穆娟,陳誠,張悅,唐冉冉
受保護(hù)的技術(shù)使用者：江蘇省疾病預(yù)防控制中心（江蘇省預(yù)防醫(yī)學(xué)科學(xué)院）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30